从盐水火腿中检出多种肠道致病菌

近期我们从一批盐水火腿中检出大肠杆菌、沙门氏杆菌、枸橼酸杆菌属和克雷伯氏菌属致病菌,现报告如下: 一、细菌分离鉴定 1.细菌分离:随机抽取一批待检盐水火腿样品10份(含复检4份),分别接种营养肉汤和亚硒酸盐煌绿(SBG)增菌液,置37℃温箱孵育24h后,再分别接种S—S琼脂板,37℃温箱24h培养,见多种色泽,形态不一的菌落。     

出口蝮蛇中三相鞭毛抗原沙门氏菌的分离鉴定

1987年10月,我们从出口的蝮蛇中检出一株具有三相鞭毛抗原的波茨坦(S.Potsdan)沙门氏菌变种,这在国内外尚未见过报道,现将分离鉴定情况报告如下: 一、分离培养 活剖蝮蛇样品,无菌采取肠道,直接投入亚硒酸盐煌绿增菌液内增菌后,划线接种SS琼脂平板,37℃培养24小时,挑取园整、光滑中等大小的可疑菌落     

从澳大利亚进口牛肉中检出伊斯坦堡沙门氏菌

1990年12月底,上海太平洋大酒店从澳大利亚进口牛胸脯肉16箱,计388.5公斤.经我所抽样检验,检出一株伊斯坦堡抄门氏菌(S.istanbul).现将检疫结果报告如下. 一、样品来源在酒店对澳大利亚进口牛肉开箱后随机取样. 二、检验步骤及结果 1、增菌培养:按常规在无菌条件下把牛肉样品剪碎放入亚硒酸盐胱氨酸增菌液(S.C).置37℃培养24小时.增菌液出现少量气泡,变为棕红色。     

从进口冷冻海贝中检出病原性大肠埃希氏菌

大肠埃希氏菌是人和动物的重要致病菌,也是主要食物中毒菌之一,能污染水源、食品、饲料,因而是食品卫生的检测对象。今年3月我省某饭店从香港转口一批日本产的冷冻海鲜品,经检验从贝肉中分离出致病性大肠埃希氏菌,现报道如下: 1 预增菌和增菌培养 1.1 以无菌操作称取试样25g,剪碎、碾磨后加入225ml缓冲蛋白胨水,置36±1℃温箱预增菌4小时。 1.2 取预增菌液10ml加入100ml亚硒酸盐胱氨酸增菌液中,36±1℃增菌24小时。 2 分离培养与菌落形态 2.1 用接种环取增菌液划线于胆疏乳琼脂平板,36±1℃培养24小时。 2.2 菌落圆形,突起,表面光滑,呈浅粉红色;     

新疆牛源大肠杆菌O157∶H7的分离鉴定及ERIC-PCR基因分型研究

为了了解牛源大肠杆菌(E.coli)O157∶H7在新疆地区的污染状况以及遗传多样性,探究不同地区分离菌株的遗传关系,为控制牛源E.coli O157∶H7的传播提供试验依据。将采集的样品在EC肉汤中进行增菌(37℃、180 r/min),接着将增菌液划线接种到SMAC平板上,37℃培养箱中过夜培养18 h左右。挑取SMAC平板上白色或无色单菌落接种MUG培养基,37℃培养18 h左右,将无荧光样品接种到SMAC平板上,37℃培养18 h左右,隔天挑取白色或无色单菌落进行PCR鉴定,具有rfbE和fliC基因条带的即为阳性菌株。将阳性菌株进行肠杆菌基因间重复共有序列扩增(ERIC-PCR)指纹图谱聚类分析,分析菌株之间的同源性关系。ERIC-PCR结果显示,相似性100%的菌株有3组。从伊犁地区分离到的菌株差异性最大,具有6种分型;其次是乌鲁木齐,具有4种分型。菌株来源多样性最多的在D簇,由此可见通过ERIC-PCR分型,可以进行溯源观察。ERIC-PCR能够区分特定采样点或物种的分离物,它能够证明从不同来源的菌株之间,存在着某些相似的ERIC特性,并聚集在同一个簇群中。该研究中筛选出的E.coli O157∶H7菌株具有广泛的遗传多样性,该方法对于检测不同物种间的细菌差异非常敏感。由此可见ERIC-PCR可以作为E.coli O157∶H7常规监测和鉴定的一个有效的工具。     

四磺酸盐培养基预增菌可缩短沙门菌复苏时间

美国科宝公司的工作人员在2种初级增菌培养基中定量接种沙门菌样本后,确定复苏家禽环境基质中沙门菌最有效和快速的方法。样品随机接种2种培养基,即缓冲蛋白胨水(BPW)+酵母提取物与含碘的四磺酸盐煌绿增菌液(TT)。将冷冻沙门菌培养菌解冻后,连续10倍稀释,取100μL稀释液接种到增菌液中,分别在42℃和37℃条件下孵育24h后,接种到改良半固体RV培养基(MSRV)中42℃二次孵育。经过次级增     

鸭大肠杆菌O_(78)血清型强毒株分离鉴定及其高密度发酵新工艺

依据大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)持家基因PhoA PCR检测,从临床病料中分离鉴定出11株鸭致病性E.coli。经O抗原血清型鉴定以及毒力分析,筛选出1株O_(78)血清型鸭E.coli强毒株EC-KP120427。以此菌株为基础,使用单因素法以及正交法,获得O_(78)血清型鸭E.coli强毒株新型高密度发酵培养基,配方中初糖采用甘油替代葡萄糖,无机盐仅添加磷酸氢二钾,同时补充铁、锰、铝3种微量元素,在普通摇床上37℃培养菌液D_(600 nm)可达到9.0以上。使用赛多利斯5 L发酵罐,对EC-KP120427菌株进行发酵培养试验。使用优化的新型高密度发酵培养基,按1∶10比例接种对数生长期种子菌,菌液D_(600 nm)值为1.0、控制温度37℃、pH 7.0、调节空气通气量1.5～5.0 L/min、转速100～400 r/min、发酵至对数生长期以15 mL·h~(-1)·L~(-1)流速慢速流加50%葡萄糖溶液,培养菌液D_(600 nm)值可高达30.0以上,成功实现了O_(78)血清型鸭E.coli强毒株高密度发酵。本研究为致病性E.coli高密度发酵技术标准的建立奠定基础,同时为水禽E.coli细菌疫苗的改进提供了技术支持。     

延边部分地区猪致病性大肠杆菌的分离与鉴定

本文对延边部分地区送检的病死猪、疑似大肠杆菌感染的腹泻病猪采集病料,分别接种在营养琼脂平板、麦康凯琼脂培养基、伊红美兰培养基上,进行分离培养及纯培养,对可疑菌落革兰氏染色,涂片镜检。对初步鉴定的细菌进行生化试验及血清型鉴定。结果从48份样本中,共分离出符合大肠杆菌生长特性的菌株40株。将培养后的40株大肠杆菌菌液分别接种小鼠。结果表明,其中36株为高致病性大肠杆菌、4株呈低致病性。本试验验中对分离得到的大肠杆菌菌株进行血清型分型,结果共分离出37个血清型。其中O6(4/37),O78(5/37)、O90(7/37)、O107(7/37)为优势血清型。     

鸡病原性大肠杆菌的分离与鉴定

鸡大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌引起的多种疾病的总称。为了掌握我市鸡大肠杆菌病病原性 ,笔者进行了病原性大肠杆菌的分离与鉴定。现报告如下。1　材料与方法1.1　菌株的分离 :共 4 0株 ,分别从当地鸡场病死鸡脏器中分离。取具有典型病理变化的鸡尸肝脏、心血、脾脏及淋巴结涂抹于普通琼脂平板上 ,置 37℃温箱中培养2 4 h后取出 ,观察单个菌落的生长情况。选取典型菌落接种到普通琼脂斜面上 ,置 37℃温箱中培养 2 4 h后 ,进行生化鉴定。1.2　菌株的鉴定1.2 .1　培养特性及形态染色　将上述纯培养物 ,接种于麦康凯和 S.S.琼脂平板、三糖铁…     

拱北所首次从拟进口的肉骨粉中检出沙门氏菌

1988年8月,广东省中山市某单位拟从澳门某屠宰场进口肉骨粉24吨,经产地抽样检疫,发现沙门氏菌,现将检疫结果报告如下: 一、实验步骤 1.采样:产地随机抽样4份,每份约1000克,以抽样袋密封送实验室检验。 2.分离培养:从抽样袋中称取检样,每份15克,加入亚硒酸盐增菌液中,37℃增菌     

从文蛤中分离到一株致病性嗜盐菌

1992年5月我局对经南通口岸出口的活文蛤检疫中,检出一株致病性嗜盐菌,现报告如下。 一、分离培养 用无菌方法取文蛤内容物剪碎、混匀,接种于嗜盐菌增菌液中,充分摇匀,置37℃培养24小时。以白金耳取增菌液划线接种于嗜盐菌选择性琼脂平皿,培养24小时。从平皿中挑取中等大小、圆形、边缘整齐、光滑、微隆起、灰白色半透明、无     

进口鱼粉肠道致病菌检验方法的比较试验

在对进口鱼粉进行肠道致病菌(沙门氏菌属和志贺氏菌属)的检验过程中发现,按照《动物检疫操作规程》(简称《规程》)中的进口鱼粉肠道致病菌的检验(试行)方法,在用亚硒酸盐增菌培养基进行选择性增菌时,由于鱼粉呈酸性,致使增菌液的pH值偏酸(在增菌培养基中加入被检样品后,经测     

加速沙门氏菌繁殖的增菌培养基

对于标本中数量较少的沙门氏菌的分离,一次直接作选择培养,常不易成功。特别对生长速率缓慢的沙门氏菌,如鸡白痢沙门氏菌和鸡沙门氏菌更是如此,因而常常先作增菌培养。亚硒酸盐M是常用的伤寒沙门氏菌增菌液。作者经过研究比较,将亚硒酸盐M改良而成亚硒酸盐亮绿甘露醇增菌液(SBM),效果满意,现介绍如下。     

种鸡饲养环境和死胚中沙门菌的分离及其对药物和噬菌体的敏感性测定

为了解某肉种鸡场沙门菌感染来源、类型及其对药物和噬菌体的敏感性,研究对种鸡场内外养殖环境和孵化场死胚进行了沙门菌采样检测.样品通过亚硒酸盐胱氨酸增菌液增菌培养后接种显色培养基进行沙门菌分离,并通过生化试验、PCR和血清型进一步鉴定;通过MIC测定了解沙门菌分离株对10种抗菌药物的药敏性;通过双层平板法检测了一株沙门菌噬...     

羔羊大肠杆菌的药敏试验

<正>1材料(1)供试菌株的分离鉴定与培养。从丰宁县乐拓牧业公司羊场因腹泻死亡的羔羊中取1只进行试验研究,取肝脏做细菌分离,接种于普通营养琼脂平板,37℃培养24小时,挑取表面光滑、边缘整齐、灰白色、半透明的小菌落,接种于麦康凯琼脂平板,37℃培养     

台湾地区进口鱼粉中检出黑尔沙门氏菌

按照沙门氏菌检验程序 (参照中华人民共和国国家标准 GB4789.4～ 94) ,对台湾地区进口的一批 36 0 0吨鱼粉。经抽样 ,分离培养、生化试验、噬菌体试验和血清学试验 ,鉴定为黑尔沙门氏菌 ( Li L LE)。报告如下。1　材料1.1　某公司从台湾地区进口鱼粉样品 ,报检单号为 980 0 390 3JAI1。1.2　乳糖肉汤　根据《AOAC公定分析方法》[1] 940 .36 9配制。1.3　志贺氏沙门氏菌增菌液　浙江省军区后勤部卫生防疫检验所 (批号 980 6 0 8)。1.4　亚硫酸铋琼脂及指示剂　杭州微生物试剂厂 (批号 970 313)。1.5　三糖铁琼脂斜面　浙江省军区后勤部…     

小肠结肠炎耶氏菌增菌方法的研究

小肠结肠炎耶氏菌(以下简称耶氏菌)一般检查标本含有菌数少,直接培养阳性率不高,多要求增菌后分离培养。到目前曾经使用过的增菌培养基有普通的磷酸盐缓冲盐水、亚硒酸盐增菌液、硫代羟乙酸盐肉汤、胰胨黄豆肉汤、葡萄糖肉汤、普通胨水或生理盐水等,其中使用较多的是磷酸盐缓冲盐水和亚硒酸盐增菌液,但究竟那一种方法好,     

家兔子宫内膜细胞和平滑肌细胞的分离培养

本试验旨在体外分离培养兔子宫内膜细胞(腺上皮细胞和基质细胞)和平滑肌细胞,并且探讨纯化子宫内膜上皮细胞和基质细胞的方法。用差速离心法和差速贴壁法获得纯化的子宫内膜上皮细胞和基质细胞,用滤网法分离得到子宫平滑肌细胞,分别在添加20%胎牛血清(FBS)、100μg/mL牛胰岛素、63.5 nmol/L雌二醇(E2)、7.14nmol/L孕酮(P4)的DMEM/F12(1∶1)培养液和37℃5%CO2的饱和湿度条件下培养;用免疫组化和免疫荧光法鉴定细胞并检测分离的细胞纯度。结果表明用该方法成功地分离培养了兔子宫内膜上皮细胞和基质细胞,且2种细胞纯度都达98%左右,基质细胞出现蜕膜化;子宫平滑肌细胞的纯度为97%左右,而且出现横纹状的生长。本研究表明子宫内膜细胞和平滑肌细胞能够在体外成功培养;在含20?S、100μg/mL牛胰岛素、63.5 nmol/L E2、7.14 nmol/L P4的DMEM/F12(1∶1)培养液和37℃5%CO2饱和湿度的培养条件下最有利于体外培养的子宫内膜细胞和平滑肌细胞的生长。     

重庆市及三峡库区家畜中大肠杆菌O157带菌的流行病学调查

采集重庆市及三峡库区6个区县家畜粪便样品1 473份,接种mEC＋n增菌肉汤37℃振摇孵育6 h,取增菌液接种CT-SMAC平板,37℃培养18 h,挑取可疑菌落,经血清学检验、PCR扩增和微量生化实验确认,最后用药敏试纸测试其对常用抗生素的敏感性。结果表明,在1 473份粪便样品中共检出11株O157,其中7株O157：H7,4株O157：H？;对分离菌株做药物敏感性试验,发现它们对青霉素、氨苄西林、杆菌肽、头孢呋肟、红霉素、庆大霉素、四环素等存在不同程度的耐药。这次调查为重庆市及三峡库区该病的预防提供了依据。     

某蛋鸡场金黄色葡萄球菌和沙门菌的分离鉴定及药物敏感性分析

为了解某蛋鸡场金黄色葡萄球菌和沙门菌对抗菌药物的耐药情况,采集重庆市某蛋鸡场48份羽毛样品、123份肛拭子样品,将羽毛样品经MH高盐培养液增菌后划线接种于MH高盐平板,将肛拭子样品经沙门菌增菌液增菌后划线接种于S.S.平板。将疑似菌落接种LB液体培养基培养后提取基因组,PCR扩增金黄色葡萄球菌特异性nuc基因和沙门菌特异性invA基因片段。对分离鉴定的金黄色葡萄球菌和沙门菌进行药物敏感性试验。最终共分离鉴定出9株金黄色葡萄球菌、6株沙门菌。药敏试验结果表明,分离的金黄色葡萄球菌和沙门菌耐药严重,且存在多重耐药。本研究基本摸清了该蛋鸡场金黄色葡萄球菌和沙门菌对常见抗菌药物的敏感性,为该蛋鸡场的临床用药提供了参考。