金银花不同器官提取液抗鸡新城疫病毒效果研究

为了研究金银花不同器官(花、叶、茎)提取物的抗鸡新城疫病毒效果,试验制备了金银花不同器官提取液,在给SPF鸡胚接种鸡新城疫病毒前、接种后、接种同时接种金银花不同器官提取液,收取鸡胚尿囊液测定其血凝效价。结果表明:在3种不同的加药方式中,金银花不同器官提取液均能有效降低新城疫病毒感染鸡胚尿囊液的血凝效价,且作用效果与提取液浓度呈正相关。金银花不同器官提取液的抑制效果为:花茎叶。说明金银花不同器官的提取液均能够抑制新城疫病毒在鸡胚尿囊液中的增殖,其抑制效果与金银花的不同器官提取液加药方式和浓度有关。     

鱼腥草提取液在鸡胚内抗新城疫病毒试验

为证明鱼腥草抗新城疫病毒的作用效果,通过接种鸡胚方法,对病毒接种前、接种同时、接种后加药三种方式处理的鸡胚尿囊液血凝效价进行测定。结果显示,在三种不同的加药方式中,不同浓度的鱼腥草提取液都能够降低新城疫病毒感染鸡胚尿囊液的血凝效价;鱼腥草提取液和新城疫病毒同时注入鸡胚时,鱼腥草原液抗病毒效果最好;鱼腥草提取液于新城疫病毒接种后注入鸡胚时,2倍稀释液抗病毒效果最好;鱼腥草提取液先于新城疫病毒注入鸡胚时,4倍和8倍稀释液抗病毒效果最好。结果表明,鱼腥草提取液能够抑制新城疫病毒在鸡胚尿囊液中的增殖;鱼腥草提取液在鸡胚内抗新城疫病毒活性与其加药方式及浓度有关。     

中草药在鸡胚水平上抗病毒作用研究

试验对地锦草、黄连、蒲公英提取液在鸡胚水平上进行了抗猪流感病毒和新城疫病毒作用研究.猪流感病毒(或新城疫)病毒分别和地锦草、黄连、蒲公英提取液混合接种到9～11日龄鸡胚,继续孵化,记录鸡胚死亡时间和测定死亡鸡胚尿囊液血凝价.结果表明:地锦草对猪流感病毒没有作用,蒲公英对新城疫病毒没有作用;黄连和蒲公英对猪流感病毒有一定的抑制作用.地锦草和黄连对新城疫病毒有一定的抑制作用,减缓了鸡胚的死亡,降低了血凝效价,但是不能完全杀灭病毒.     

新鱼腥草素钠对新城疫病毒复制与抗体消长规律的影响

为了研究新鱼腥草素钠对新城疫病毒的作用效果及其对新城疫病毒抗体消长规律,试验采用不同浓度的新鱼腥草素钠与新城疫病毒活疫苗接种鸡胚的方法,以鸡胚尿囊液血凝效价判断新鱼腥草素钠体外对新城疫病毒复制效果,同时用新城疫病毒活疫苗(La Sota株)和新鱼腥草素钠免疫黄羽肉鸡,于免疫前及免疫后第14,21,35,42,49天分别采血检测血清中新城疫血凝抑制(HI)抗体。结果表明:不同浓度的新鱼腥草素钠能够降低新城疫病毒感染鸡胚尿囊液的血凝效价,抑制新城疫病毒在鸡胚尿囊液中的增殖,其中以200 mg/L浓度抗病毒效果最好。说明一定剂量的新鱼腥草素钠与新城疫疫苗联合使用可降低HI抗体消长规律,从HI抗体水平来看亦能保护整个肉鸡生长周期,但与其给药浓度有关。     

松乳菌多糖在鸡胚水平抗新城疫病毒研究

对松乳菌多糖(胞内多糖和胞外多糖)在鸡胚水平上进行了抗新城疫病毒研究。接种致死量的新城疫病毒和不同浓度松乳菌胞内多糖(或胞外多糖)混合液到9～11日龄鸡胚。通过测定鸡胚平均死亡时间(MDT)、死亡鸡胚尿囊液血凝效价评价多糖对病毒的抑制作用。结果表明松乳菌胞外多糖对病毒没有抑制作用,不能延长新城疫病毒对鸡胚的致死时间,也不能降低血凝效价;松乳菌胞内多糖对新城疫病毒有一定的抑制作用,减缓了鸡胚的死亡,降低了血凝效价,但是对病毒不能完全杀灭。     

海藻硫酸多糖和中药复方对鸡胚接种H9N2亚型禽流感病毒的作用

为探讨海藻硫酸多糖(sulfated polysaccharide from algae,SPA)及中药复方提取液(compound extracts of Chinese medicine,CECM)对H9N2亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)的作用,将SPA及CECM以3种不同加药方式作用于接种了H9N2亚型AIV的10日龄SPF鸡胚中,无菌收集鸡胚尿囊液,测定血凝效价,检测2种药液对H9N2亚型AIV的预防、治疗及直接灭活作用。结果显示,SPA及CECM的最大安全浓度分别为50和200mg/mL;3种不同加药方式下,不同浓度SPA及CECM均能极显著降低鸡胚尿囊液中H9N2亚型AIV的血凝效价(P0.01),以直接灭活作用组的血凝效价降低幅度最大,预防作用组和治疗作用组次之。预防作用组,CECM高剂量组(200mg/mL)的抗病毒效果显著优于SPA各剂量组(12.5、25和50mg/mL)及CECM低、中剂量组(50和100 mg/mL)(P0.05);治疗作用组,SPA高剂量组(50 mg/mL)及CECM中、高剂量组(100和200mg/mL)抗病毒效果显著优于SPA低剂量组(12.5mg/mL)(P0.05);直接灭活作用组,SPA及CECM的抗病毒效果均佳,CECM各剂量组的抗病毒效果与SPA各剂量组差异极显著(P0.01)。结果表明,SPA和CECM对10日龄鸡胚几乎无毒副作用;SPA及CECM均能显著抑制H9N2亚型AIV在鸡胚尿囊液中的增殖,以直接灭活作用组的抗病毒效果最佳,其抗H9N2亚型AIV作用的强弱与药物浓度、用药和病毒的感染时间顺序密切相关。     

H9N2流感病毒在鸡胚中繁殖规律及血凝活性的研究

为了研究H9N2流感病毒在鸡胚中的繁殖规律及其血凝活性,试验用H9N2河南分离毒株接种鸡胚,对收获的尿囊液进行10倍系列稀释,选取不同浓度尿囊液分别接种不同日龄鸡胚,测定不同日龄鸡胚接种病毒后尿囊液产量及其血凝效价,探讨影响毒株血凝活性的因素。结果表明:10日龄鸡胚接种1×10-5病毒时收获的尿囊液产量最多且血凝效价最高;筛选分析影响H9N2病毒血凝活性因素时发现,缓冲液的p H值为3.0~5.5时发生溶血,水浴温度为70~80℃时几乎完全丧失活性。     

鸡胚接种NDV病毒后尿囊液量及血凝效价的研究

鸡胚接种ＮＤＶ病毒后尿囊液量及血凝效价的研究伍富尧，刘治西（莱阳农学院）王元彬，王洪本（临沂市畜牧局）试验Ｉ为了解不同来源的鸡胚接种ＮＤＶ后的尿囊液量及其血凝（ＨＡ）滴度的差异，进行本试验。１材料和方法１．１毒种新城疫毒种为ＬａＳｏｔａ弱毒株，由中监...     

海藻硫酸多糖和中药复方对鸡胚接种H9N2亚型禽流感病毒的作用

为探讨海藻硫酸多糖（sulfated polysaccharide from algae,SPA）及中药复方提取液（compound extracts of Chinese medicine,CECM）对H9N2亚型禽流感病毒（avian influenza virus,AIV）的作用,将SPA及CECM以3种不同加药方式作用于接种了H9N2亚型AIV的10日龄SPF鸡胚中,无菌收集鸡胚尿囊液,测定血凝效价,检测2种药液对H9N2亚型AIV的预防、治疗及直接灭活作用。结果显示,SPA及CECM的最大安全浓度分别为50和200 mg/mL;3种不同加药方式下,不同浓度SPA及CECM均能极显著降低鸡胚尿囊液中H9N2亚型AIV的血凝效价（P<0.01）,以直接灭活作用组的血凝效价降低幅度最大,预防作用组和治疗作用组次之。预防作用组,CECM高剂量组（200 mg/mL）的抗病毒效果显著优于SPA各剂量组（12.5、25和50 mg/mL）及CECM低、中剂量组（50和100 mg/mL）（P<0.05）;治疗作用组,SPA高剂量组（50 mg/mL）及CECM中、高剂量组（100和200 mg/mL）抗病毒效果显著优于SPA低剂量组（12.5 mg/mL）（P<0.05）;直接灭活作用组,SPA及CECM的抗病毒效果均佳,CECM各剂量组的抗病毒效果与SPA各剂量组差异极显著（P<0.01）。结果表明,SPA和CECM对10日龄鸡胚几乎无毒副作用;SPA及CECM均能显著抑制H9N2亚型AIV在鸡胚尿囊液中的增殖,以直接灭活作用组的抗病毒效果最佳,其抗H9N2亚型AIV作用的强弱与药物浓度、用药和病毒的感染时间顺序密切相关。     

板蓝根和黄芪提取液对鸡新城疫病毒在鸡胚上增殖的影响

为探讨板蓝根和黄芪提取液对新城疫病毒（NDV）的作用，通过分别测定将药液和病毒感作后接种于9日龄鸡胚、先接种药液再接种病毒和先接种病毒再接种药液3种不同的方式对NDV血凝效价的影响．研究了不同浓度板蓝根和黄芪提取液对NDV在鸡胚上增殖的影响。试验结果表明：不同浓度提取液在中和作用、阻断作用、抑制作用三个方面对NDV均有一定的效果．且药液抑制NDV感染力的作用强弱与药物的浓度和药物与病毒的作用方式均有关系。     

鸡减蛋综合征灭活抗原不同保存方式的分析比较

为比较不同保存方式对鸡减蛋综合征灭活抗原的影响,采用禽腺病毒京911株(CVCC AV70)经尿囊腔接种易感鸭胚,收获感染鸭胚液,经β-丙内酯灭活后,对该抗原的保存条件及其稳定性等方面进行优化。冻干抗原与未冻干抗原在相同温度下,冻干抗原HA效价下降较慢。冻干抗原在2~8℃和-15℃以下保存,HA效价没有明显差异。因此,生产的鸡减蛋综合征灭活抗原要在冻干后保存在2~8℃最佳。保存条件的优化不仅可以减少经济损失,而且还有助于更好的控制禽腺病毒疫情的暴发。     

鸡传染性支气管炎病毒与新城疫病毒增殖作用及免疫干扰的研究

试验旨在观察鸡传染性支气管炎病毒（infectious bronchitis virus,IBV）和鸡新城疫病毒（newcastle disease virus,NDV）之间的增殖干扰现象,分析在免疫过程中两种疫苗存在的免疫干扰,为确定疫苗的免疫程序提供依据。采用完全随机试验设计,选取10日龄鸡胚尿囊腔接种不同浓度的IBV、NDV以及不同浓度混合的IBV和NDV,收集尿囊液测定其血凝效价（HA）;用不同浓度的IBV、NDV以及不同浓度混合的IBV和NDV分别免疫BALB/c小鼠及SPF雏鸡,收集血清,间接酶联免疫吸附法（ELISA）和血凝抑制（HI）试验测定IBV和NDV的抗体效价及抑制效价。结果表明,同胚培养时,无论先接种IBV后接种NDV还是先接种NDV后接种IBV或IBV和NDV同时接种,IBV对NDV均有干扰作用,而NDV对IBV没有干扰作用;接种IBV和NDV的小鼠,其产生IBV和NDV的抗体效价均低于单独免疫组,免疫的次序及免疫间隔时间对IBV和NDV的抗体效价均有影响,IBV对NDV的免疫效果具有较大的干扰作用。不同针混合免疫方式能提高IBV和NDV的抗体效价;接种IBV和NDV的雏鸡,免疫次序及免疫相隔时间对IBV和NDV的抗体效价均有影响,IBV对NDV的免疫效果具有较大的干扰作用;雏鸡和小鼠免疫血清HI试验数据表明,免疫次序及免疫间隔时间对IBV和NDV抗体的产生均有影响,但对NDV抗体的产生影响更明显,随着免疫间隔时间的增加,IBV和NDV的抗体水平呈增加趋势,雏鸡比小鼠更能敏感地反映出IBV对NDV的免疫干扰作用。混合注射时IBV和NDV的抗体水平均降低,IBV对NDV的免疫效果有干扰作用。因此,在同胚培养、小鼠及雏鸡的免疫中,IBV对NDV有干扰作用,而NDV对IBV无干扰作用。混合接种时IBV和NDV抗体效价均下降,IBV对NDV的免疫效果有干扰作用。免疫次序及免疫间隔时间对IBV和NDV抗体的产生均有影响,但随着免疫间隔的增加,IBV和NDV的抗体水平呈增加趋势。     

湖南省鸵鸟新城疫病毒的分离及生物学特性测定

湘南某鸵鸟养殖场饲养的鸵鸟发生一起疫病 ,疑似鸵鸟新城疫 ,为了准确迅速地对其进行确诊 ,用 SPF鸡胚进行病毒的分离 ,进行了HA、HI、病毒中和试验及生物学特性测定。结果最初接种的 SPF鸡胚 48～ 96h全部死亡 ,其尿囊液 HA效价为 2 3,死亡胚充血、出血 ,将尿囊液继续传代至第 3代时 ,死亡胚尿囊液 HA在收稿日期 :2 0 0 3- 0 4 - 0 9基金项目 :湖南省林业厅资助 (97- 2 4 )作者简介 :刘振湘 (1971- ) ,男 ,湖南耒阳人 ,湖南环境生物职业技术学院讲师。主要从事预防兽医学的教学与科研工作。2 5～ 2 6 ;其 ND HI试验为阳性 ;鸡胚中和试验结果接种经 ND标准阳性血清处理的病料未见死亡 ,HA效价为 2 0 ,而接种未经处理病料的鸡胚于 2 6～ 3 8h后全部死亡 ,HA效价为 2 6～ 7;其生物学特性测定结果 ICPI为 1 .62 ,IVPI为 1 .0 ,MDT为 45h,对氯仿和酸敏感 ,NHAT为慢 ,HOT为 1 5min。结果表明该分离毒为 NDV并表现出与鸡 NDV相同的特性。     

Study on the Effect of Infectious Bronchitis Virus and Newcastle Disease Virus on Proliferation and Immune Interference

This experiment aimed to investigate the proliferation interference effects of the infectious bronchitis virus (IBV) and Newcastle disease virus (NDV),analyze the immune interference of two vaccines in the immune process,and provide a basis for determining vaccine immune program.This experiment was in a complete randomized design,10-day-old allantoic cavity of the chick embryo was inoculated with different concentrations of IBV and NDV and with a mixture of different concentrations of IBV and NDV,and then the allantoic fluid was collected for determination of the titer of hemagglutination (HA).Furthermore,BALB/c mice and SPF chicken were immunized with different concentrations of IBV and NDV and also with the mixed IBV and NDV with different concentrations,the blood of mice and chicken were collected,and antibody titer and inhibitory titer of IBV and NDV were determined by indirect enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) and hemagglutination inhibition (HI) test.Experimental results showed that in the homeomorphic cultivation research,whether IBV and NDV were inoculated in a different order or inoculated at the same time,the inoculation of IBV behaved interference to the NDV,while the inoculation of NDV had no interference effects to IBV;Mice were inoculated with IBV and NDV,IBV and NDV antibody titers were lower than single immunized group,immune procedures and immune intervals often had effect on the titer of IBV and NDV antibody,IBV had interference on the immune effect of NDV,different needle mixed immunization can improve the antibody titer of IBV and NDV.In the group of SPF chicken inoculated with IBV and NDV,the order of the inoculation and the immune interval had effect on the titer of IBV and NDV antibody,IBV had a interference on the immune effect of NDV;In the immune serum inhibitory test,the data showed that the IBV and NDV antibody production were affected by the immune order of the inoculation and the interval,the effect on the NDV antibody was more obvious,but with the increase of the immune interval,the antibody level of IBV and NDV showed an increasing trend,the chicken was more sensitive than the mice to reflect the immune interference of IBV on NDV.IBVand NDV antibodies titer was also reduced in the groups that was inoculated with the mixed IBV and NDV,IBV had a interference on the immune effect of NDV.In the homeomorphic cultivation research and animal research,IBV behaved interference to the NDV,while NDV had no interference effects to IBV.IBV and NDV antibody titers decreased when mixed immunization,IBV had a interference on the immune effect of NDV.The order of the inoculation and the immune interval had effect on the antibody titer of IBV and NDV,but with the increase of the immune interval,the antibody level of IBV and NDV showed an increasing trend.     

进口法国种鸽新城疫病毒的分离和鉴定

用鸡成纤维细胞和鸡胚从30只进口法国种鸽中分离出一株病毒,细胞培养物的HA效价为3log2,尿囊液的HA效价为4log2,新城疫阳性血清能抑制这种血凝作用,HI效价均为7log2,禽流感阳性血清不能抑制这种血凝作用.通过透射电镜观察、毒力测定等最终确认,分离出的病毒为新城疫病毒.     

Antiviral activity of crude extracts from Commiphora swynnertonii against Newcastle disease virus in ovo

Studies were carried out to investigate the effect of crude extracts from resin, leaves, stem barks and root barks of Commiphora swynnertonii against Newcastle disease virus (NDV) using an in ovo assay. Nine-day-old embryonated chicken eggs were divided into seven groups (n?=?6) and received various treatments. Six groups were inoculated with velogenic NDV strain; five groups out of these were treated with different concentrations of the four extracts or a diluent, dimethylsulphoxide. The uninoculated and inoculated groups were left as negative and positive controls, respectively. Embryo survival was observed daily and embryo weights were measured day?5 post-inoculation; a few eggs from selected groups were left to hatch. Allantoic fluid from treated eggs and serum from hatched chicks were collected for hemagglutination and hemagglutination inhibition (HI) tests to detect NDV in the eggs and antibodies against NDV in the hatched chicks respectively. Results showed that embryo survival and mean embryo weight were significantly higher (p?<?0.001) in those groups which were treated with the crude extracts from C. swynnertonii than the positive control group. Also the extracts significantly (p?<?0.001) reduced virus titres, whereas no viruses were detected in the allantoic fluids of the resin-treated group at the highest concentration of 500???g/mL. Furthermore, the HI test results showed very low levels of antibodies against NDV in chicks hatched from resin and root bark extract-treated eggs suggesting that these plant materials were capable of destroying the NDV before stimulating the developing chick??s immunity. The current findings have clearly demonstrated that crude extracts especially that of resin from C. swynnertonii have strong antiviral activity against NDV in ovo. In vivo trials are needed to validate the use of resin from the tree in controlling Newcastle disease in chickens.     

种毒接种剂量与鸡胚尿囊液量的相关性研究

对分成3组而同机孵化的180个9日龄罗曼蛋鸡鸡胚分别尿囊腔接种NDVLasota种毒液0.1mL／个,0.15mL／个和0.20mL／个。结果：尿囊液的收集量与种毒接种量呈显著负相关,而血凝价受接种剂量的影响不显著。     

广东省新城疫病毒地方强毒株的分离鉴定

从广东省各地方分离10余株地方强毒株，对其中的五株地方强毒株进行了分离鉴定，将各毒株病肝研磨离心后取上清，绒毛尿囊腔接种9-11日龄的鸡胚，鸡胚接种后36-42h死亡，鸡胚全身出血，含病毒的尿囊液红血球凝集效价（HA）为1：9^9-1:2^15，并能被ND阳性血清特异性抑制，却不能被AIVH5亚型血清所抑制，用自己设计的特异性检测引物，对五个毒株进行了PCR鉴定，可扩增出特异性的目的条带，再结合临床症状和剖检病变，可初步判定为新城疫病毒，为以后进行广东省新城疫病毒分子流行病学研究打下了基础。     

鸡胚中新城疫强毒的分离、鉴定与生物学特性研究

将来自有产蛋下降表现的一个肉用型父母代种鸡群的种蛋在实验室内孵化,每日观察鸡胚死亡情况。在孵化的24个鸡胚中有2个在孵化后8~9 d死亡,尿囊液有血凝性。在HI试验中,NDV单因子血清呈现26的HI滴度,对H9和H5亚型AIV单因子血清不呈血凝抑制活性,由此确定为新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV),分别命名为Tengz060104和Tengz060107。对该2个NDV分离株的生物学毒力指标进行测定,Tengz060104株的MDTI、CPI和IVPI分别为56.4 h、1.88和2.67,Tengz060107株的MDTI、CPI和IVPI分别为40.8 h、1.88和2.79。在6周龄SPF鸡攻毒后产生典型的ND症状的病变。表明来自鸡胚的2个分离株属强毒力、速发型NDV毒株。交叉HI中Tengz060104和Tengz060107相互间的同源性为100%,而与经典NDV毒株F48E8的同源性比较分别是66.7%和57.7%。从鸡胚中分离到新城疫强毒株在国内尚未见报道。     

鸡胚尿囊液量与鸡种的相关性研究

选择９日龄非免疫的罗曼蛋鸡胚和淮南麻黄鸡胚各１８０个,按不同胚重各分成３组,同时接种鸡新城疫病毒,观察病毒对不同品种鸡胚尿囊液量的影响。结果表明：罗曼蛋鸡胚的尿囊液量极显著高于淮南麻黄鸡胚;罗曼蛋鸡胚的尿囊液量／胚蛋重大于淮南麻黄鸡胚。罗曼蛋鸡胚的失水率小于淮南麻黄鸡胚。罗曼蛋鸡胚和淮南麻黄鸡胚尿囊液量与胚重均呈极显著正相关。