高剂量白酒糟对山羊瘤胃发酵、菌群结构及炎性基因的影响

旨在研究饲喂高剂量(65%,75%)白酒糟对3月龄山羊瘤胃发酵、菌群结构及炎性基因的影响，试验选择15只日龄、体质量相近的健康本地山羊，随机分为对照组、65%白酒糟组和75%白酒糟组，5只/组。对照组饲喂基础饲粮，试验组分别饲喂添加65%,75%的白酒糟日粮，正试期90 d。采用气质联用法、ELISA法依次检测参试山羊瘤胃液VFA、组胺和LPS浓度，用Illumina Miseq PE300高通量测序平台进行瘤胃液16S rDNA测序，qRT-PCR法测定瘤胃组织中p65、COX2、VCAM1的表达量。结果表明：1)65%和75%白酒糟组山羊瘤胃液pH和总VFA显著低于对照组(P<0.05),75%白酒糟组山羊瘤胃液乙酸、丁酸及乙酸/丙酸比值显著低于对照组(P<0.05),75%白酒糟组山羊瘤胃液组胺和LPS浓度显著上升(P<0.01)。2)65%和75%白酒糟组山羊瘤胃微生物中的优势菌门为厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidota),且占总门类的90%以上，丰度最高的科、属为普雷沃菌，且普雷沃菌丰度会随着白酒糟饲喂量的增多呈上升趋势。3)6...     

慢性寒冷应激对绵羊体增重、血清免疫和抗氧化机能的影响

本试验旨在探究慢性寒冷应激对绵羊体增重、血清免疫和抗氧化机能的影响。选取体重为(55.50±0.80)kg、毛丛长度为(11.60±1.47)cm的3岁杜蒙杂交母羊18只,随机分为3组:舍内加热组(对照组)、舍内组和舍外组,每组6只。试验共28 d,每天记录各组试验羊的采食量,并于试验第1、14和28天称重,计算平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI);于试验第14和28天进行颈静脉采血,分离血清并收集白细胞,测定免疫、抗氧化指标及相关基因相对表达量。结果表明:与对照组相比,1)舍外组绵羊的ADG显著降低(P<0.05);2)在试验第14天,舍外组血清白细胞介素(IL)-1含量和白细胞中IL-1β、IL-2基因相对表达量显著降低(P<0.05),舍内组血清IL-1含量和白细胞中IL-1β基因相对表达量显著降低(P<0.05);在试验第28天,舍外组血清免疫球蛋白(Ig)G、IL-2含量显著下降(P<0.05),血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量和白细胞中其基因相对表达量显著升高(P<0.05),舍内组血清IL-2含量显著下降(P<0.05);3)在试验第14天,舍外组血清谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性和白细胞中GPx、超氧化物歧化酶1(SOD1)基因相对表达量显著下降(P<0.05),血清丙二醛(MDA)含量显著升高(P<0.05);在试验第28天,舍外组血清过氧化氢酶(CAT)、GPx、T-SOD活性和总抗氧化能力(T-AOC)及白细胞中GPx、超氧化物歧化酶2(SOD2)基因相对表达量显著下降(P<0.05),而白细胞中CAT、核转录因子2(Nrf2)基因相对表达量和血清MDA含量显著升高(P<0.05),舍内组血清T-AOC及CAT活性和白细胞中其基因相对表达量显著下降(P<0.05)。综上所述,慢性寒冷应激能够降低绵羊的体增重,抑制机体血清免疫和抗氧化水平,而安置供暖设备的保温圈舍可以显著缓解这种负面影响。     

高精料日粮对奶山羊肝、脾炎性因子表达的影响

为探究饲喂高精料日粮对泌乳奶山羊肝、脾组织的影响及机制,将14只泌乳初期关中奶山羊随机分为对照组(6只)和试验组(8只),对照组饲喂普通(精粗比35∶65)日粮,试验组饲喂高精料(精粗比65∶35)日粮,试验期19周。于试验的0、1、4、8、12、15、16、18、19周每周采集所有羊乳汁测定乳脂率,6～18周每周日采集所有羊粪便测定pH,试验结束当日采集肝、脾组织,制作组织切片观察肝、脾组织形态变化;采用RT-qPCR检测肝、脾组织中炎性因子及TLR4通路关键蛋白的基因表达;采用Western blot技术检测TLR4通路关键蛋白的表达水平。结果显示,长期饲喂高精料日粮造成奶山羊乳脂率降低,试验的16、18和19周与对照组差异显著(P0.05);试验组奶山羊粪便pH均值从第9周开始下降,13～18周与对照组差异显著(P0.05);试验组奶山羊肝细胞颗粒变性或空泡变性,肝小叶中央静脉周围有炎性细胞浸润,脾组织无明显变化;肝组织中促炎因子IL-6和TNF-β以及TLR4与NF-κB2基因表达显著升高(P0.05);脾组织中促炎因子TNF-β和抗炎因子IL-10以及TLR4基因表达显著升高,NF-κB2基因表达显著降低(P0.05);肝组织中与TLR4通路相关的p38、JNK、ERK和p65这4种蛋白的表达变化不明显,脾组织p38、ERK和p65表达与对照组相比虽差异不显著,但都呈现下降趋势。综上所述,长期饲喂高精料日粮导致奶山羊乳脂率和粪便pH降低,通过上调NF-κB的基因表达诱导肝组织中IL-6和TNF-β基因表达升高,从而对肝造成炎性损伤,对脾组织影响不明显。     

饲粮中添加白藜芦醇对“杜×长×大”猪空肠抗氧化能力及紧密连接蛋白表达的影响

试验旨在研究饲粮中添加白藜芦醇(resveratrol,RES)对"杜×长×大"猪空肠抗氧化酶活性及抗氧化基因指标和紧密连接蛋白相关基因表达水平的影响。试验选用12头体重约为65 kg的育肥猪分为2组,每组6头。对照组育肥猪饲喂基础饲粮,试验组育肥猪饲喂在基础饲粮中添加400 mg/kg的RES的饲粮,试验期41 d。结果表明,与对照组相比,饲粮中添加400 mg/kg的RES显著提高了育肥猪空肠过氧化氢酶(CAT)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性及总抗氧化能力(T-AOC)(P<0.05),显著降低丙二醛(MDA)的含量(P<0.05);显著提高育肥猪空肠抗氧化基因铜/锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)、锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶-1 (GPx-1)和谷胱甘肽过氧化物酶-4 (GPx-4)活性(P<0.05);显著提高育肥猪空肠抗氧化酶活相关基因CAT、T-SOD和GSH-Px的表达水平(P<0.05),显著降低MDA的表达水平(P<0.05);显著提高育肥猪空肠紧密连接蛋白咬合蛋白(Occludin)、闭合蛋白-1 (Claudin-1)和链接黏附分子A (JAM-A)的表达水平(P<0.05)。研究表明,饲粮添加400 mg/kg的RES能够显著提高育肥猪空肠抗氧化能力及紧密连接蛋白的表达,改善动物肠道健康。     

日粮中添加抗菌肽对产蛋后期蛋鸡免疫功能和抗氧化能力的影响

为了研究日粮中添加抗菌肽对产蛋后期蛋鸡免疫功能和抗氧化能力影响，试验将120只海兰褐蛋鸡随机分为4组(对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组),每组6个重复，每个重复5只，对照组饲喂基础日粮，试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别饲喂添加100,200,400 mg/kg抗菌肽的试验日粮，预试期7 d,正试期56 d,于正试期第14天注射新城疫和禽流感疫苗，于正试期第14(免疫前),28,56天采血测定各组的体液免疫水平(IgA、IgG、IgM、IL-4、IL-10水平及新城疫、禽流感抗体效价)、细胞免疫水平IL-2、TNF-α、IFN-γ水平及T淋巴细胞转化率)和抗氧化能力指标(T-AOC、T-SOD、GSH-Px活性及MDA水平)。结果表明：正试期第28天，各试验组的血清IgA水平均显著高于对照组(P<0.05),试验Ⅱ、Ⅲ组的血清IgG水平显著高于对照组(P<0.05),试验Ⅱ组的血清IL-10水平显著高于对照组和试验Ⅰ、Ⅲ组(P<0.05);试验Ⅰ组的血清IL-2水平显著高于对照组和试验Ⅲ组(P<0.05),试验Ⅱ、Ⅲ组的血清IFN-γ水平显著高于对照组(P<0.05);试验Ⅱ、...     

锌指蛋白A20介导锌缓解鸡肠上皮细胞炎症反应的机制

本研究通过对鸡肠上皮细胞感染锌指蛋白A20基因siRNA病毒和A20基因腺病毒,探究锌与A20基因对缓解脂多糖(LPS)诱导的鸡肠上皮细胞炎症反应的作用。结果表明:LPS可显著上调鸡肠上皮细胞促炎因子白细胞介素(IL)-1β和IL-8的基因表达水平(P<0.05),作用的最佳剂量和时间分别是10 ng/mL和6 h。体外添加25μmol/L锌可显著缓解LPS诱导的鸡肠上皮细胞IL-8、IL-1β和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因表达水平和蛋白产量的提高以及Toll样受体4(TLR4)的转录激活。肠上皮细胞感染A20基因siRNA病毒后,A20的蛋白产量显著下调(P<0.05),IL-1β、IL-8和TNF-α的基因表达水平和蛋白产量显著升高(P<0.05),同时加剧LPS诱导的IL-8、IL-1β基因表达水平和IL-1β、TNF-α蛋白产量的提高(P <0. 05)。相对于对照组,加锌可促进胞浆中A20和核因子-κB(NF-κB) p65的蛋白表达,并下调磷酸化NF-κB p65的蛋白表达;在进行A20基因沉默后,导致胞浆中A20、NF-κB p65蛋白表达下调和磷酸化NF-κB p65、磷酸化核因子κB抑制蛋白α(IκBα)蛋白表达上调以及胞核中磷酸化NF-κB p65的蛋白表达升高,而加锌并不能改善。与感染空白腺病毒组相比,肠上皮细胞感染A20腺病毒可极显著提高A20的基因表达水平(P<0.01),并极显著降低IL-1β、IL-8的基因表达水平(P<0.01),且可极显著降低添加LPS导致的IL-1β、IL-8和TLR4基因表达水平的上升(P <0. 01)。锌添加可显著降低IL-1β的基因表达水平,显著提高NF-κB p65的基因表达水平(P<0.05)。综上所述,锌可通过A20-NF-κB p65信号通路缓解LPS诱导的鸡肠上皮细胞炎症反应。     

活性酵母菌对断奶仔猪生长性能、血清抗氧化能力和免疫指标的影响

试验旨在研究活性酵母菌对断奶仔猪生长性能、血清抗氧化能力及免疫力的影响。选择32日龄的断奶仔猪200头随机分成4组，每组5个重复，每个重复10头猪。对照组仔猪饲喂基础日粮，试验组1、试验组2和试验组3分别在基础日粮中添加0.25、0.50、1.00 g/kg的包被布拉迪活性酵母菌。预试期1 w，正式试验期28 d。结果显示，试验组2和试验组3仔猪的试验末重比对照组提高了6.21%、8.13%(P<0.05)，平均日增重比对照组提高了11.11%、13.68%(P<0.05)；所有包被活性酵母菌组仔猪的料重比比对照组降低了4.89%、7.61%、9.24%(P<0.05)，腹泻率比对照组降低了53.67%、69.50%、73.61%(P<0.01)。试验组2和试验组3仔猪血清的总超氧化物歧化酶（T-SOD）活性显著高于对照组（P<0.05），总抗氧化能力（T-AOC）显著高于对照组（P<0.05）。各活性酵母菌组仔猪血清白细胞介素-10 (IL-10)含量显著高于对照组（P<0.05），试验组2和试验组3血清肿瘤坏死因子-α (TNF-α)含量显...     

葡萄糖氧化酶对断奶仔猪生长性能、血清生化指标及经济效益的影响北大核心

试验旨在研究葡萄糖氧化酶对断奶仔猪生长性能、血清生化指标及养殖经济效益的影响。选取200头断奶仔猪,随机分为4组,每组5个重复,每个重复10头断奶仔猪。对照组断奶仔猪饲喂基础日粮,试验组分别在基础日粮中添加50、100、150 mg/kg水平的葡萄糖氧化酶。试验期28 d。结果显示,100 mg/kg组、150 mg/kg组仔猪平均日增重(ADG)显著高于对照组(P<0.05),100 mg/kg组和150 mg/kg组仔猪料重比(F/G)显著低于对照组(P<0.05),各试验组仔猪腹泻率显著低于对照组(P<0.05)。100 mg/kg组仔猪血清总抗氧化能力(T-AOC)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著高于对照组(P<0.05),各试验组仔猪血清超氧化物歧化酶(SOD)活性显著高于对照组(P<0.05),100 mg/kg组仔猪血清丙二醛(MDA)含量显著低于对照组(P<0.05)。100 mg/kg组仔猪血清中免疫球蛋白G(IgG)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量显著高于对照组(P<0.05),试验组仔猪血清白细胞介素-6 (IL-6)含量均显著高于对照组(P<0.05)。100 mg/kg组、150 mg/kg组仔猪背最长肌IGF-2基因的表达量显著高于对照组(P<0.05)。试验组仔猪养殖利润分别比对照组高7.80、29.28、16.14元/头。研究表明,葡萄糖氧化酶可以提高仔猪生长性能,改善机体健康,建议在断奶仔猪日粮中添加100 mg/kg葡萄糖氧化酶。     

黄芪对雏鸭IL-2基因表达的影响

为研究黄芪对白介素2基因表达的影响，将20只雏鸭随机分成对照组和试验组，试验组雏鸭用黄芪拌料饲喂，对照组雏鸭不用黄芪拌料饲喂，15d后处死，提取脾组织总RNA，通过实时荧光定量RT—PCR测定两组雏鸭IL-2基因表达情况。结果表明，实验组雏鸭IL-2基因表达量是对照组IL-2基因表达量的7．892倍。因此，黄芪能够提高雏鸭体内IL-2基因的表达，提高机体免疫力，从而增强雏鸭的抗病能力。     

益生菌固态发酵料对羔羊断奶前、后血液免疫、抗氧化指标及粪便消化酶的影响

旨在探讨益生菌发酵料对羔羊断奶前、后血液免疫、抗氧化指标、生长激素及粪便酶活的影响。选取48只体质量相近、健康45日龄哺乳羔羊，随机分为4组，每组12只。断奶前试验羊随母哺乳+颗粒料，断奶后只饲喂颗粒料。对照组饲喂基础日粮，试验组在基础日粮上添加5%(Ⅰ组),10%(Ⅱ组),15%(Ⅲ组)发酵饲料，试验期20 d。于断奶前(0 d)和断奶后(4 d)取样。结果显示：与对照组相比，断奶前试验Ⅱ组白细胞(WBC)、嗜酸粒细胞(NEU)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和丙二醛(MDA)极显著降低(P<0.01),免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)显著提高(P<0.05);Ⅲ组白介素6(IL-6)显著提高(P<0.05);试验组总抗氧化能力(T-AOC)和胰岛素(INS)显著提高，白介素IL-1β(IL-1β)无差异(P>0.05);断奶后试验Ⅲ组IL-1β极显著下降(P<0.01),TNF-α、IgM和GSH-Px显著提高(P<0.01);Ⅱ组IL-6和MDA显著降低(P<...     

玉米赤霉烯酮对后备母猪子宫和卵巢抗氧化和炎症指标及相关基因表达的影响

试验旨在研究玉米赤霉烯酮(zearalenone, ZEA)对后备母猪子宫和卵巢抗氧化和炎症指标及相关基因表达的影响。选择胎次和体重((23.20±0.68) kg)相近的长×大二元后备母猪48头,随机分为4组,每组设12个重复,每个重复1头母猪。对照组(CON组)饲喂基础饲粮,试验组(T1、T2、T3组)饲喂在基础饲粮中分别添加200、800、1600μg·kg~(-1)ZEA的试验饲粮。预试期7 d,正试期40 d。结果如下:1)与CON组相比,T3组血清T-AOC和SOD活性显著降低(P0.05),MDA水平显著升高(P0.05)。2)与CON组相比,子宫组织中,T2和T3组T-AOC活性显著降低(P0.05),T3组SOD活性极显著降低(P0.01),卵巢组织中,T3组T-AOC活性、T2组GSH-Px和SOD活性显著降低(P0.05),T3组MDA水平显著升高(P0.05)。3)与CON组相比,T2组血清TNF-α和IL-4水平显著升高(P0.05),T1～T3组血清IL-10水平显著降低(P0.05)。4)与CON组相比,子宫组织中,T2组IL-1β水平显著升高(P0.05),T1和T3组IL-10水平显著降低(P0.05)。卵巢组织中,T2组TNF-α水平显著升高(P0.05),T1～T3组IL-4水平显著升高(P0.05)。5)子宫组织中,T3组Cu/Zn-SOD mRNA的相对表达显著低于CON组(P0.05),T2组IL-1βmRNA的相对表达显著高于CON组(P0.05)。6)卵巢组织中,T3组GSH-Px mRNA的相对表达显著低于CON组(P0.05),T2组IL-1βmRNA的相对表达显著高于CON组(P0.05)。综上所述,ZEA能通过抑制SOD和GSH-Px的表达与合成,降低后备母猪子宫和卵巢的抗氧化性能,并引起氧化应激。ZEA能通过促进TNF-α和IL-1β表达与合成引起子宫和卵巢的炎症反应,抑制IL-10的表达与合成从而抑制两组织的抗炎反应。     

IL-17介导山羊传染性胸膜肺炎小鼠模型肺部炎症反应研究

为阐明IL-17等相关炎性因子在山羊传染性胸膜肺炎(Contagious caprine pleuropneumoniae,CCPP)中的作用,将20只6周龄~8周龄SPF雌性Balb/c小鼠随机分成试验组和对照组,每组10只,建立CCPP小鼠模型,按时间点处死小鼠后采集血液和肺组织,进行组织病理学分析和肺部山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasma capricolum subsp.capripneumoniae,Mccp)载量检测鉴定模型。应用real-time PCR检测肺部IL-17及其相关细胞因子、趋化因子及其受体的mRNA水平,应用ELISA检测血清和肺组织匀浆上清液中IL-17蛋白水平,应用流式细胞术检测肺组织中中性粒细胞和巨噬细胞数量变化。结果显示,试验组小鼠精神状态不佳,肺部病理损伤严重,Mccp载量为5.9×10^4 copies/μL,与对照组相比有极显著差异(P<0.001);与对照组小鼠相比,试验组小鼠肺组织IL-17相关炎性因子mRNA表达升高,血清和肺组织匀浆上清液中IL-17蛋白水平显著升高(P<0.001,P<0.01),肺部中性粒细胞和巨噬细胞数量极显著增加(P<0.01,P<0.001)。说明成功构建了CCPP小鼠模型,在Mccp诱导小鼠肺部炎症早期,IL-17参与肺部炎症反应。     

硒对雏鸡空肠和回肠IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA表达的影响

通过复制缺硒雏鸡模型,对雏鸡空肠和回肠中主要细胞因子的变化进行不同时间点的检测,为硒调控肠黏膜免疫的机制研究奠定基础。选取120只1日龄的SPF雏鸡,随机分为对照组和试验组2组。对照组雏鸡饲喂全价饲料,试验组雏鸡饲喂缺硒饲料。分别在试验期7,14,21,28d对雏鸡进行剖杀并取其空肠与回肠,利用实时荧光定量PCR法检测IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA表达水平。结果显示,试验组与对照组相比,缺硒雏鸡空肠在试验期14,21d时,IL-1β、IL-6和TNF-α细胞因子的表达量均升高,且差异极显著(P0.01);28d时,除IL-1β的表达量降低(P0.05),其他细胞因子的相对表达量升高(P0.01)。试验组与对照组相比,缺硒雏鸡回肠在试验期14,21d时,IL-1β、IL-6和TNF-α细胞因子表达量均升高(P0.01);在28d时,IL-6和TNF-α的相对表达量升高(P0.05)。结果表明,缺硒能够上调肠黏膜炎性细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA的相对表达量,这可能与硒缺乏导致雏鸡肠黏膜中氧自由基含量升高有关。     

黄芩素对22~63日龄湘黄肉鸡生长性能、免疫功能、抗氧化能力、血脂状态及肉品质的影响

本试验旨在研究黄芩素对22~63日龄湘黄肉鸡生长性能、免疫功能、抗氧化能力、血脂状态及肉品质的影响。选择200只初始体重相近的健康22日龄湘黄肉鸡,随机分为5个组,每组5个重复,每个重复8只鸡(公母各占1/2)。对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮基础上分别添加0.10、0.20、0.30和0.40 g/kg黄芩素。试验期42 d。结果表明:1)与对照组相比,22~42日龄,0.20 g/kg黄芩素组平均日采食量(ADFI)显著降低(P<0.05),0.30 g/kg黄芩素组ADFI显著增加(P<0.05),各试验组平均日增重(ADG)、料重比(F/G)和死亡率均无显著差异(P>0.05);43~63日龄,各试验组ADFI均显著降低(P<0.05),而ADG、F/G和死亡率均无显著差异(P>0.05);22~63日龄,0.20 g/kg黄芩素组ADFI和F/G均显著降低(P<0.05),0.40 g/kg黄芩素组ADG显著降低(P<0.05),各试验组死亡率均无显著差异(P>0.05)。2)与对照组相比,0.20 g/kg黄芩素组血清免疫球蛋白A(IgA)含量显著增加(P<0.05),0.30 g/kg黄芩素组血清IgA和免疫球蛋白G(IgG)含量均显著增加(P<0.05);各试验组血清白细胞介素-2(IL-2)含量均显著增加(P<0.05),而血清免疫球蛋白M(IgM)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-4(IL-4)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量均无显著差异(P>0.05)。3)与对照组相比,0.10和0.20 g/kg黄芩素组血清总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性均显著增加(P<0.05),各试验组血清总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢(H 2O 2)和丙二醛(MDA)含量均无显著差异(P>0.05);0.20 g/kg黄芩素组肝脏T-AOC和T-SOD活性均显著增加(P<0.05),0.10 g/kg黄芩素组肝脏T-AOC显著增加(P<0.05),各试验组肝脏H 2O 2含量均显著降低(P<0.05),而肝脏GSH-Px活性、GSH和MDA含量均无显著差异(P>0.05)。4)与对照组相比,0.30 g/kg黄芩素组血清总胆固醇(TC)含量显著降低(P<0.05);各试验组血清甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量均无显著差异(P>0.05)。5)与对照组相比,0.40 g/kg黄芩素组胸肌屠宰后24 h黄度值显著降低(P<0.05);各试验组胸肌屠宰后24 h亮度值均显著降低(P<0.05),而屠宰后45 min pH与亮度、红度、黄度值以及屠宰后24 h pH、红度值、剪切力和滴水损失率均无显著差异(P>0.05)。由此可见,黄芩素可改善22~63日龄湘黄肉鸡的生长性能、免疫功能、抗氧化能力、血脂状态和肉品质,综合考虑,饲粮中黄芩素的适宜添加量为0.20~0.30 g/kg。     

高精料对泌乳奶山羊瘤胃上皮氧化应激和胆固醇代谢的影响

为了研究长期或短期饲喂高精料日粮对泌乳期奶山羊瘤胃上皮组织氧化应激和胆固醇代谢的影响,实验选用17只健康的经产泌乳中期关中奶山羊,随机分为3组:饲喂低精料组(对照组,LC,n=5);长期饲喂高精料组(HL, n=7),19周饲喂期;短期饲喂高精料组(HS,n=5),4周饲喂期。实验结束后采集瘤胃组织,用PBS反复清洗,于液氮中速冻后置于-80 ℃冰箱保存。结果显示,与对照组相比,HL和HS组山羊瘤胃上皮组织中细胞周期相关基因CDK2和CDK4 mRNA表达水平显著升高(P<0.05),且HS组p-ERK1/2蛋白表达显著升高(P<0.05),但GPR41和GPR43蛋白表达无显著变化(P>0.05);HL和HS组山羊瘤胃上皮组织促细胞凋亡基因Casepase9 mRNA表达显著升高(P<0.05),HS组抗凋亡Bcl-2/Bax mRNA表达比例呈下降趋势(0.050.05);HS组瘤胃上皮组织中胆固醇含量下降达显著水平(P<0.05),且HL组呈下降趋势(0.05+ ATPase mRNA表达显著升高(P<0.05),NHE2蛋白表达升高但未达显著差异水平(P>0.05)。与HL组相比,HS组山羊瘤胃上皮组织中总抗氧化能力T-AOC显著升高(P<0.05);且胆固醇含量显著下降(P<0.05)。以上结果说明,短期饲喂高精料日粮可加快泌乳期奶山羊瘤胃上皮组织的更新,提高组织总抗氧化能力;而长期饲喂高精料日粮未引起细胞增殖相关蛋白和总抗氧化能力的显著变化;饲喂高精料日粮可以加快瘤胃上皮组织对VFA的转运。此外,饲喂高精料日粮引起瘤胃上皮组织内胆固醇含量降低,胆固醇酰基转移酶基因表达的显著上调,提示其对瘤胃上皮组织更新的潜在影响。     

高钙高蛋白日粮对海兰褐蛋鸡肾脏结构与功能的影响

旨在探讨高钙高蛋白日粮对海兰褐蛋鸡肾脏结构和功能的影响。将80只40日龄海兰褐蛋鸡随机均分为4组,对照组(组1)饲喂基础日粮(钙1.0%、粗蛋白17.5%),组2饲喂高钙(钙4.5%),组3饲喂高蛋白(粗蛋白27.0%),组4饲喂高钙高蛋白(钙4.5%、粗蛋白27.0%)饲料,试验期95天。第95 d各组随机抽取6羽,采集血清用全自动生化分析仪检测血清尿酸(UA)、尿素氮(BUN)和肌酐(CR)。采血后扑杀,解剖并观察肾的病理变化及组织学变化,ELISA法检测肾脏中炎性因子白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平。结果在试验第95天,组2和组3鸡的体重显著低于对照组(P0.05),血清BUN值极显著高于对照组(P0.01);组4鸡血清UA和BUN显著高于对照组(P0.05),血清CR极显著高于对照组(P0.01)。部分试验组鸡肾脏肿胀,内有白色糊状物。组织学观察发现肾小球炎性肿胀或萎缩,肾小管上皮细胞变性、坏死并脱离基底膜。3个试验组肾组织中的IL-1均极显著高于对照组(P0.01)、IL-6显著高于对照组(P0.05);组2、4肾组织中的TNF-α显著高于对照组(P0.05),组3TNF-α极显著高于对照组(P0.01)。结论:饲喂高钙高蛋白饲料会对鸡肾的结构和功能产生不同程度损伤。     

金堂黑山羊白介素10基因的克隆及表达分析

为探究山羊白介素10（interleukin 10,IL-10）基因的序列特征及在组织中的相对表达情况,试验采用PCR法扩增并克隆金堂黑山羊IL-10基因,用DNAMAN、DNAStar、ExPASy等生物信息学软件进行序列分析,运用实时荧光定量PCR法检测IL-10基因在金堂黑山羊不同组织中的表达情况。结果显示,金堂黑山羊IL-10基因序列长为379 bp,开放阅读框为276 bp,编码91个氨基酸残基。IL-10蛋白二级结构中含有α-螺旋、β-转角和无规则卷曲,分别为76.92%、2.20%和20.88%。IL-10蛋白三级结构模型与人IL-10（1ilk.1.A）基因同源性最高（86.81%）。系统进化分析结果发现,金堂黑山羊IL-10基因与挪威山羊IL-10基因亲缘关系最近。实时荧光定量PCR检测发现,在金堂黑山羊肺脏中IL-10基因表达水平显著高于脾脏、心脏、肌肉和肾脏（P<0.05）,在肾脏中IL-10基因表达水平显著高于脾脏、心脏和肌肉（P<0.05）,在脾脏、心脏和肌肉中IL-10基因表达水平较低,但差异不显著（P>0.05）。本试验结果揭示了IL-10基因具有高度的保守性,可能参与调控山羊的免疫应答反应。     

丹参多糖对免疫性肝损伤小鼠肝脏过氧化指标、炎症细胞因子和ICAM-1的影响

将SPF级雄性昆明小鼠随机分成正常对照组,LPS模型组,丹参多糖低、中、高剂量组和阳性药物对照组。灌胃相应药物12 d后,腹腔注射LPS和D-GalN建立小鼠免疫性肝损伤模型。检测各组小鼠肝组织中SOD、MDA、GSH-Px水平,比较造模1,3 h后各组小鼠肝组织中IL-1β、IL-6、TNF-α的含量变化以及测定肝组织ICAM-1蛋白的表达水平。结果显示,与正常对照组比较,LPS模型组小鼠肝组织中MDA含量显著升高,SOD、GSH-Px活性显著降低, IL-1β、IL-6、TNF-α含量以及ICAM-1蛋白表达水平均显著升高(P<0.01);与LPS模型组相比,丹参多糖各剂量组和阳性药物对照组小鼠肝组织中MDA含量显著降低,SOD、GSH-Px活性显著升高,IL-1β、IL-6、TNF-α含量以及ICAM-1蛋白表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01);各用药组之间相比较,丹参多糖中、高剂量组和阳性药物对照组调控过氧化指标、炎症细胞因子和ICAM-1效果最显著(P<0.05或P<0.01)。结果表明,丹参多糖具有明显缓解小鼠免疫性肝损伤的作用,其机制可能与拮抗肝脏脂质过氧化反应,降低肝组织中炎症细胞因子含量及ICAM-1蛋白表达有关。     

黄芩苷对自噬介导H6N6禽流感病毒致病损伤的作用

探究黄芩苷对H6N6亚型禽流感病毒诱导小鼠肺脏致病损伤的作用。选用40只昆明小鼠随机分为4组，即对照组、模型组、黄芩苷治疗组、3-MA抑制剂组。通过HE染色观察肺组织病理形态学变化，ELISA法检测血清中IL-1β、IL-2、IL-6及TNF-α的含量，透射电镜检测小鼠肺脏中自噬体的水平，Western blot检测肺组织LC3、Beclin-1及ATG7蛋白表达水平，免疫荧光法检测肺组织LC3蛋白表达水平，免疫组化法检测肺组织LC3、Beclin-1及ATG5蛋白表达水平，RT-qPCR检测肺组织自噬关键基因LC3、Beclin-1、ATG3、ATG5、ATG7及ATG12 mRNA转录水平。结果显示，经黄芩苷治疗后能显著缓解H6N6亚型禽流感病毒对小鼠肺组织的损伤，血清中IL-1β、IL-2、IL-6及TNF-α含量显著下降(P<0.01),肺组织中自噬体数量减少，LC3、Beclin-1、ATG5及ATG7蛋白表达水平显著下降(P<0.01),肺组织中LC3、Beclin-1、ATG3、ATG5、ATG7及ATG12 mRNA转录水平显著下降(P<0.01)。结...     

鳗弧菌免疫诱导牙鲆IL-1β、IFN-γ和TNF-α基因表达变化

黏膜免疫是鱼类免疫系统的重要组成部分。多聚免疫球蛋白受体(p Ig R)能够介导黏膜抗体的转运和分泌,而细胞因子IL-1β、IFN-γ和TNF-α对p Ig R表达具有调节作用。本研究利用实时荧光定量PCR技术(q PCR)测定了牙鲆(Paralichthys olivaceus)组织中TNF-α、IL-1β和IFN-γ基因的表达动态。结果显示:浸泡和腹腔注射两种免疫方式皆可诱导3种基因发生显著上调表达;3种基因的上调表达在96 h内先上升,后降低到对照组水平,其中IL-1β和IFN-γ的上调幅度高于TNF-α,免疫后在牙鲆组织内的表达量分别比对照组高10~60倍和6~30倍,而TNF-α仅比对照组高2~4倍;不同免疫方式诱导的牙鲆各组织中3种基因的应答表达存在差异,浸泡免疫对黏膜免疫组织皮肤和鳃中的基因表达影响较大,显著上调达到峰值的时间短且峰值高,而注射免疫对系统免疫组织脾、头肾以及肝脏中的基因表达影响较大,其中在脾和头肾中注射免疫引起的IL-1β和IFN-γ的变化分别比对照组高50~60倍和30倍,浸泡组比对照组分别高15倍和10倍;前肠、中肠和后肠中,两种免疫方式诱导的3种细胞因子的上调表达量相近或浸泡组稍低。这些结果为进一步研究鱼类细胞因子IL-1β、IFN-γ和TNF-α对p Ig R的表达调节提供了资料。