褪黑素对卵母细胞成熟和胚胎体外发育影响的研究进展

卵母细胞与胚胎体外培养过程中,细胞处于相对高氧环境,常常会由于抗氧化防御不足而导致氧化应激,使细胞在发育过程中积累大量的活性氧(ROS),从而降低卵母细胞及胚胎的体外发育率。褪黑素作为一种有效的抗氧化剂和自由基清除剂,能显著降低细胞内ROS水平,清除细胞内自由基,改善卵母细胞的体外成熟与胚胎的体外发育历程。本文从褪黑素对卵母细胞成熟、胚胎体外发育、胚胎质量以及褪黑素作用机制等方面进行综述,为褪黑素在体外胚胎生产中的应用提供参考。     

低氧分压通过低氧诱导因子(HIF)影响卵母细胞的体外成熟和早期胚胎的发育

卵母细胞和早期胚胎的体外培养(IVC)是哺乳动物胚胎工程的一项关键技术,是生殖生物学和转基因与克隆技术等生物技术研究的基础.影响卵母细胞和早期胚胎体外培养的因素包括培养液组成成分、离子浓度和渗透压,培养环境气相组成和温度等.最近研究表明,培养系统中的氧分压可以显著影响胚胎的发育,而这种影响主要由低氧诱导因子(hypoxia-inducible factor,HIF)进行调控.作者综述了氧分压及HIF对卵母细胞和早期胚胎体外发育的影响,并对HIF的结构及调控机制进行讨论,为研究低氧培养技术在卵母细胞和早期胚胎体外培养中的应用提供依据.     

羊卵母细胞核成熟抑制剂及其作用效果的研究进展

羊卵母细胞的体外成熟培养技术(IVM)是体外受精技术和胚胎工程的基础环节.卵母细胞体外成熟培养是指离体条件下的卵母细胞由未成熟状态发育为成熟状态.一般认为,可以把卵母细胞生发泡破裂(GVBD)作为向成熟方向发育的标志.GVBD的主要特征是染色质高度凝集,核仁消失及核膜破裂等[1].GVBD一旦发生,卵母细胞就将向着MⅠ发育并最终发育到MⅡ期、排出第一极体而达到成熟状态[2-3].IVM后卵母细胞可受精分裂成胚胎并移植获得妊娠.卵母细胞成熟优劣对随后受精、胚胎卵裂、囊胚形成均具有重要的影响,是制约体外生产囊胚率和胚胎移植受胎率的关键.生产中可通过卵巢卵母细胞体外培养成熟结合体外受精、胚胎移植等技术,得到大量廉价优质胚胎,为解决胚胎供需不足开辟了一条新的途径.     

谷氨酰胺对延边黄牛卵母细胞成熟及重组胚发育的影响

为了提高卵母细胞的成熟率及重组胚胎的发育率,在体外成熟液中添加了不同浓度的谷氨酰胺,研究谷氨酰胺对延边黄牛卵母细胞成熟的影响,并观察它对重组胚胎后续发育的影响,从中筛选出最佳的体外培养条件。结果表明,1.0 mmol/L的谷氨酰胺能够显著提高卵母细胞的成熟率,同时也能提高囊胚发育率。说明谷氨酰胺能够提高延边黄牛卵母细胞的体外成熟率,并能促进囊胚发育。     

体外卵母细胞的抗氧化作用研究进展

卵母细胞体外成熟培养是体外生产胚胎的关键步骤之一,在人工辅助生殖技术及胚胎工程中起着不可替代的作用。随着国内外对哺乳动物体外受精及胚胎体外发育研究的日益深入,这一动物生物技术也开始备受关注。研究发现,卵裂率及囊胚发育率与卵母细胞成熟水平呈正向相关,而活性氧(reactive oxygen species,ROS)是影响卵母细胞成熟水平的主要原因之一。在离体培养卵母细胞过程中,过高水平的活性氧能够引起氧化应激,破坏细胞结构,导致细胞功能失调,不利于卵母细胞维持正常生殖功能。文章对卵母细胞体外培养过程中抗氧化机制的研究进展进行了综述。     

牛体外胚胎高效生产技术优化研究

为了探讨小卵泡液、放线菌酮(CHX)对卵母细胞预成熟、囊胚滋养层细胞囊泡(TVS来源于体外受精培养14 d的滋养层细胞)、维生素对牛体外胚胎质量的影响。在B超仪下进行牛活体取卵(OPU),从牛活体卵巢采集卵母细胞,进行体外成熟、体外受精、早期胚胎体外培养。结果表明:10%小卵泡液及8%CHX的卵母细胞预成熟4 h组显著优于对照组;在体外受精及早期胚胎培养液CR1aa中添加10μg/m L维生素C组与TVS共培养组的卵裂率和囊胚发育率均高于其他试验组(P0.05);体外胚胎与TVS共移植受胎率显著高于对照组(P0.05)。说明活体采集的卵母细胞经体外预成熟处理,可以达到核质同期化的目的,早期胚胎的培育过程中加入TVS、抗氧化剂等可以克服早期胚胎的发育阻滞,提高体外胚胎的囊胚发育率。     

发情牛血清对绵羊卵母细胞体外成熟及孤雌胚发育的影响

在动物卵母细胞体外成熟及胚胎体外培养体系中添加一定浓度的发情牛血清可能提高卵母细胞的成熟率及胚胎的发育率。本研究以屠宰场卵巢来源的绵羊卵母细胞为试验材料,探讨了发情牛血清对绵羊卵母细胞体外成熟及孤雌胚发育的影响。结果表明,成熟液中添加10%第1天的发情牛血清能显著提高绵羊卵母细胞的体外成熟率及孤雌胚卵裂率(P＜0.05);孤雌胚体外培养72 h后,向培养液中添加10% 第7天的发情牛血清能显著提高绵羊孤雌胚的桑囊胚率(P＜0.05)。结果表明,发情牛血清能够促进绵羊卵母细胞的体外成熟率及孤雌胚发育率。     

哺乳动物小腔卵泡的体外发育

随着胚胎工程技术和辅助生殖技术的发展,对胚胎数量、质量要求都在增加。超数排卵、卵母细胞体外成熟等增加了卵母细胞利用率,但卵巢内大腔卵泡非常有限。因此小腔卵泡作为一种巨大的卵母细胞来源越来越受到众多学者关注。研究小腔卵泡卵母细胞体外成熟和体外受精发育机制,有利于提高小腔卵泡卵母细胞的发育力。     

OPU卵母细胞体外成熟体系的优化研究进展

近年来，体外胚胎生产(in vitro embryo production, IVP)技术取得了很大进步，尤其是卵母细胞活体采卵(ovum pick-up, OPU)技术得到广泛应用。OPU是20世纪90年代发展起来的一项新型的能获得优秀种母牛卵母细胞的技术，该技术在动物胚胎生产和发育机理研究及人类辅助生育技术临床实践中有着广阔的应用前景。可以提高种母畜和珍贵野生动物的资源保护效率，提高优良母畜的遗传潜力，为奶牛生物技术发展提供必要的支撑技术。卵母细胞的质量是IVP系统取得成功的关键，卵母细胞的体外成熟(in vitro maturation, IVM)是成功受精和胚胎发育必不可少的步骤。卵母细胞IVM完成了卵母细胞的细胞质和核成熟，准备了发育至胚胎基因组激活所必需的所有必要成分。但体外成熟的卵母细胞发育能力低于体内成熟卵母细胞，卵母细胞减数分裂和细胞核质成熟不同步，氧化应激损伤等对卵母细胞成功受精和胚胎发育非常重要，因此，需要进一步提高卵母细胞体外成熟能力，以改善牛体外胚胎生产系统。本文从卵母细胞体外成熟面临的核质成熟不同步，氧化应激等问题进行概述，同时，叙述C型钠肽、褪黑素、FLI...     

对羔羊采用激素诱导的方法生产体外胚胎的研究进展

外源促性腺激素处理幼龄母畜可诱导其卵泡大量发育,并与活体采卵、卵母细胞体外成熟、体外受精技术相结合来生产早期胚胎,经移植后可产出后代,这项技术主要应用在犊牛或羔羊上。本文就生产羔羊体外胚胎过程中供体的选择、激素诱导的方法、卵母细胞采集的方式及体外发育培养的条件等进行了综述,并对影响羔羊胚胎生产的因素及存在的问题进行了分析。     

和厚朴酚对猪热应激卵母细胞体外成熟的影响

在成熟液中添加10μmol/L和厚朴酚,44 h后,检测卵母细胞中Sirt3蛋白表达、SOD2的乙酰化水平、活性氧水平、线粒体膜电位及孤雌激活胚胎的发育能力.结果 显示,在成熟液中加入和厚朴酚后,可显著提高热应激卵母细胞体外成熟率及其后续胚胎体外发育能力(P＜0.05).此外,在和厚朴酚作用下,卵母细胞中Sirt3蛋白...     

氨基酸和半胱胺对绵羊胚胎体外发育的影响

将从绵羊卵巢采集的卵母细胞成熟培养22~24h;成熟卵母细胞去除颗粒细胞,选择排出第一极体的卵母细胞,用5μmol/L A23187(5min)联合2mmol/L 6-DMAP(4h)进行孤雌激活;激活后的卵母细胞在培养液中进行培养。研究氨基酸和半胱胺对绵羊胚胎早期体外发育的影响。结果显示:(1)氨基酸能促进胚胎体外发育,0~24h培养添加抑制卵母细胞的卵裂,24h后培养添加比全过程培养添加更能促进胚胎体外发育;(2)24~72h培养添加必需氨基酸(EAA),能促进胚胎体外发育;(3)半胱胺添加量0~100μmol/L,随浓度增高各项发育指标呈增高趋势,添加100~200μmol/L,随浓度增高各项发育指标呈下降趋势。     

白藜芦醇提高动物卵母细胞体外发育质量的研究进展

白藜芦醇是一种存在于大多数植物中的天然多酚,具有抗氧化、抗衰老、抗癌、免疫调节等多种生物学功能。此外,白藜芦醇还能够促进细胞线粒体的生物发生,提高卵母细胞发育质量。文章概述了白藜芦醇在改善动物卵母细胞质量中的研究进展及相关的作用机制,为进一步探明白藜芦醇在动物卵母细胞发育中的相关信号转导通路提供参考。     

氨基酸和半胱胺对绵羊胚胎体外发育的影响

将从绵羊卵巢采集的卵母细胞成熟培养22-24h；成熟卵母细胞去除颗粒细胞，选择排出第一极体的卵母细胞，用5μmol／LA23187（5min）联合2mmol／L 6-DMAP（4h）进行孤雌激活；激活后的卵母细胞在培养液中进行培养。研究氨基酸和半胱胺对绵羊胚胎早期体外发育的影响。结果显示：（1）氨基酸能促进胚胎体外发育，0-24h培养添加抑制卵母细胞的卵裂，24h后培养添加比全过程培养添加更能促进胚胎体外发育；（2）24～72h培养添加必需氨基酸（EAA），能促进胚胎体外发育；（3）半胱胺添加量0～100μmol／L，随浓度增高各项发育指标呈增高趋势，添加100～200μmol／L，随浓度增高各项发育指标呈下降趋势。     

影响牛卵母细胞孤雌激活胚胎发育的因素

卵母细胞体外成熟后孤雌激活发育是一个新兴的研究方向,影响牛卵母细胞孤雌激活发育因素很多,国内此方面的报道较少,文中就牛卵母细胞体外成熟后孤雌激活胚胎发育的影响因素进行总结。旨在为研究体外孤雌胚发育和孤雌胚胎的培养提供参考。     

卵泡直径对辽宁绒山羊卵母细胞体外培养的影响

本试验以屠宰场绒山羊卵巢为材料,采用抽吸法收集不同直径卵泡卵母细胞,研究卵泡直径对卵母细胞回收效果和体外成熟、体外受精的影响。结果表明,卵泡直径直接影响卵母细胞的回收效果及随后的体外成熟、体外受精;卵母细胞的回收率和可用卵的比率及成熟率与卵泡直径呈正相关;直径2.1～5 mm卵泡的卵母细胞由于处于生长旺盛期,受精率和卵裂率分别为59.15%和42.50%,显著高于直径5 mm卵泡和≤2 mm卵泡,适合体外胚胎的生产,而直径≤2 mm卵泡的卵母细胞因未发育充分体外发育潜能最差;直径5 mm卵泡的卵母细胞可能因体外培养成熟过度而老化导致受精率和卵裂率降低,缩短其体外成熟时间可能会提高其体外发育潜能。     

不同浓度雌二醇对猪卵母细胞体外成熟和孤雌激活胚胎的影响

为了探讨雌二醇（17β-estrodiol,E2）对猪卵母细胞体外成熟及孤雌激活后胚胎早期发育的影响,在卵母细胞体外成熟培养基中添加不同浓度雌二醇,研究卵裂率和囊胚率的变化。以未添加雌二醇的基础液为对照组,比较分析各组卵母细胞核成熟效率、孤雌激活后胚胎的卵裂率、囊胚发育率。结果表明,成熟液中添加1μg／mL雌二醇（E2）对猪卵母细胞的体外成熟具有明显的促进作用,而添加100μg／mL雌二醇（E2）对猪卵母细胞体外成熟具有明显的抑制作用。     

猪卵母细胞体外成熟的影响因素

卵母细胞是胚胎工程和发育生物学的重要组成部分,它是体外受精、性别控制、克隆及转基因等技术成功与否的前提和关键。本文初步探讨猪卵母细胞体外成熟的影响因素。     

Leptin对猪卵母细胞体外成熟及孤雌激活后早期胚胎发育的影响

为了探讨瘦素(Leptin)对猪卵母细胞体外成熟及孤雌激活后胚胎早期发育的影响,研究选择在Earle's盐缓冲的TCM199中添加10IU/mLeCG,10IU/mLhCG,10ng/mLEGF配制成化学限定的基础液,以添加不同浓度Leptin设定各试验组,对猪卵母细胞进行体外成熟培养。以未添加Leptin的基础液为对照组1,而添加5%的胎牛血清(FBS)、10%猪卵泡液为对照组2。比较分析各组卵母细胞核成熟效率,孤雌激活后胚胎的卵裂率,囊胚发育率。结果表明:各添加组卵母细胞成熟率与对照组之间无显著差异(P>0.05);孤雌激活后,各组间的卵裂率和囊胚发育率也无明显差异。同时,在化学限定的猪卵母细胞体外成熟液中添加Leptin对猪卵母细胞体外成熟和孤雌激活后早期胚胎的发育无显著效果。     

cAMP调节剂对卵母细胞体外成熟效果的调节机制研究进展

卵母细胞体外成熟是家畜体外胚胎生产关键技术之一。卵母细胞的环磷酸腺苷(cAMP)水平能够通过调节核质同步成熟进程影响卵母细胞发育能力,因此,cAMP对卵母细胞体外成熟质量的影响受到广泛关注。本文针对常用的cAMP调节剂及其调节卵母细胞体外成熟的机制进行综述,以期为改善卵母细胞体外成熟效果提供依据。