PCR法检测犬常见皮肤致病真菌的试验研究

利用PCR检测方法可对犬临床疑似真菌性皮肤病样本进行诊断。笔者选用真菌通用引物,对已知标准菌株及不同微生物进行特异性检测,并对其敏感性进行检测。采用该方法对临床30份疑似为真菌性皮肤病犬病料进行检测并克隆测序,同时对30份病料进行表型分析。结果表明,3种常见皮肤致病真菌(犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌)PCR扩增条带为310 bp;特异性检测结果,该方法检测其他微生物和犬体细胞均为阴性;采用该方法进行PCR检测真菌核酸检测限可以达到100 pg/m L。采用该方法对30份临床病料进行检测,检出12份阳性,经测序7份为犬小孢子菌,4份为石膏样小孢子菌,1份为须毛癣菌。采用传统培养法检测出阳性样本10份,其中6份为犬小孢子菌,4份为石膏样小孢子菌。通用PCR方法与传统培养法相比,检出率无显著差异。与传统的培养鉴定方法相比,PCR检测方法操作简便、特异性和敏感性比较理想,符合率较高,可用于临床犬皮肤真菌病检测和流行病学调查,并具有重要的公共卫生意义。     

犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌多重PCR检测方法的建立及初步应用

宠物浅表皮肤真菌病主要由犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌感染引起。本研究根据3种真菌基因内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)区域的序列差异设计4条引物,通过优化多重PCR反应条件,建立了一种可同时快速检测这3种真菌的多重PCR,同时对其特异性、灵敏性、重复性进行分析。结果显示,建立的多重PCR方法对犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌基因组DNA均可扩增出特异性预期片段,条带大小分别为286、596、188 bp;最低检测限(灵敏性)分别为12.6、8.8、13.6pg/μL;被检测的6份人工模拟样品扩增结果准确。应用该多重PCR方法检测27份人临床皮屑样品和43份宠物犬、猫毛发样品,结果显示阳性检出率分别为74.07%(20/27)和83.72%(36/43);采用常规真菌分离培养法从阳性样品中获得10株致病性真菌,分离率为17.86%(10/56);两种检测方法的种属鉴定结果表明多重PCR法优于常规方法。本研究建立的多重PCR检测方法简便、特异、灵敏,可同时对宠物浅表真菌病原作出快速诊断与鉴别。     

浦东地区犬皮肤病原真菌PCR检测结果及分析

本文利用建立犬、猫真菌性皮肤病常见病原体PCR检测方法,对浦东地区部分诊所收集的犬真菌性皮肤病病原体进行多重PCR检测,在第一批9个样品中,2个样品(1号和6号)均扩增出犬小孢子菌目的片段290bp,3个样品(3、8号和9号)扩增出马拉色菌的目的条带580bp,经过测序验证正确。这为构建宠物皮肤病诊治技术体系提供可靠的技术支撑。     

犬猫皮肤真菌病的诊疗

皮肤真菌病是寄生于犬猫被毛及表皮、趾爪等角质化的组织中的真菌引发的皮肤病,俗称犬猫皮肤真菌病,是一种慢性接触性传染病,也是人畜共患病。犬猫皮肤真菌病常见4种真菌：犬小孢子菌、须毛癣菌、石膏样孢子菌和马拉色菌,犬小孢子菌和石膏样小孢子菌属于小孢子均属,而须毛癣菌属于毛癣菌属。作者就皮肤真菌病的临床症状、实验室检测、诊断、治疗进行逐一介绍。     

药物治疗犬真菌性皮肤病的最新研究进展

正犬真菌性皮肤病是由犬小孢子菌、石膏样小孢子菌及马拉色菌等致病性真菌黏附于犬皮肤上,侵入皮肤表皮、毛发或趾甲从而引起皮肤的一系列器质性病变,是犬临床最常见的传染性皮肤疾病之一。抗真菌药(antifungal drugs)是治疗该病的有效药物,其作用机制在于损害细胞膜、损害真菌细胞壁以及影响真菌核酸合成。传统抗真菌药     

基于RPA-CRISPR/Cas12a技术快速检测犬猫皮肤癣菌方法的建立

旨在建立重组酶聚合酶扩增技术(recombinase polymerase amplification, RPA)结合CRISPR/Cas12a技术的荧光检测方法，以快速、灵敏、可视化检测犬猫皮肤癣菌。以犬小孢子菌、石膏样小孢子菌及须毛癣菌为研究对象，针对真菌内转录间隔区，设计并合成特异性RPA引物和CRISPR RNA(crRNA),建立可同时或分别检测上述皮肤癣菌的荧光检测方法，并评价其检测灵敏度，通过检测临床样本评价本检测方法的敏感性和特异性。结果表明：RPA-CRISPR/Cas12a在37℃、总反应时间30 min的条件下，对三种皮肤癣菌的检测灵敏度可低至单拷贝。对24份临床样本进行检测，以真菌培养和菌落测序结果作为标准，使用可同时识别犬小孢子菌、石膏样小孢子菌及须毛癣菌的皮肤癣菌crRNA(dermatophyte crRNA,crRNA-DM)和可特异性识别犬小孢子菌的犬小孢子菌crRNA(Microsporum canis crRNA,crRNA-Mc)参与RPA-CRISPR/Cas12a反应时，敏感性和特异性均为100%。RPA-CRISPR/Cas12a技术可同时...     

微卫星引物PCR快速鉴定兔皮肤病原真菌方法的建立及应用

本研究旨在借助微卫星引物PCR和聚类分析软件,建立一种快速准确鉴定兔皮肤病原真菌的分子生物学方法.本试验以寡核苷酸重复序列(GACA)4为引物,首先对3种常见兔皮肤病原真菌(须癣毛癣菌、犬小孢子菌和石膏样小孢子菌)标准菌株的DNA进行扩增,然后用NTSYS-pc2.10软件分析其DNA指纹的多态性,并根据其多态性的差异进行鉴定分析.最后,用上述方法对临床上的分离株进行鉴定分析,并与传统的形态学鉴定方法进行比较.结果表明,3种不同的兔皮肤病原真菌均呈现不同的DNA指纹,且条带差异明显;聚类分析图显示,同种病原真菌的DNA指纹有很高的相似性(90％～100％);该方法对分离株的鉴定结果与形态学鉴定结果一致.可见,通过微卫星引物PCR结合聚类分析软件可以准确、快速地鉴定兔皮肤病原真菌.     

猫癣防治

1 病原 犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌、奥杜安小孢子菌和变形小孢子菌都能引起犬猫皮肤病,其中犬小孢子菌最常见,其次是石膏样小孢子菌.感染猫的真菌有2种,即犬小孢子菌和须毛癣菌,98％发病是犬小孢子菌引起的.     

犬猫真菌性皮肤病的诊治

真菌性皮肤病又称皮肤癣病,是指真菌侵染表皮及其附属构造(毛、角、爪)的真菌疾病。现已成为侵害犬猫健康的主要疾病之一。1病因病原真菌的种类很多,但引起犬皮肤真菌病的主要是犬小孢子菌。其次是石膏样小孢子菌和须发癣菌。猫的真菌性皮肤病95%以上是由犬小孢子菌引起的。皮肤真菌对外界因素的抵抗力极强,尤其对干燥更是如此。在日光照射或于0℃以下时,可存     

健康猫被毛真菌菌相

定量检测了４０只临床健康猫的被毛真菌菌相,从３１只猫被毛上共分离出１１个属１７５株真菌,主要为交链孢霉属、芽枝孢霉属、犬小孢子菌和曲霉属等。皮肤病病原菌２个属３个种,包括犬小孢子菌、红色毛癣菌和石膏样毛癣菌。     

犬常用抗真菌药物

真菌是一类真核微生物,有细胞核和细胞器,不含叶绿素,仅少数类群为单细胞,多数为多细胞,大多数呈分支或不分支的丝状体,能进行有性和无形繁殖,一般有菌丝和孢子构成。广泛存在于自然界,已知的10余万种真菌中,文献记载能感染动物的约1400余种,可感染犬、猫的仅占几十种。引起犬感染的浅表真菌主要有犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、毛癣菌和马拉色菌,深部感染的真菌主要有念珠菌、组织胞浆菌、芽生菌和隐球菌等。     

1例犬石膏样小孢子菌性皮癣的综合诊断

对皮肤发痒、经常抓蹭的患犬进行临床症状和伍德氏灯检查,初步诊断为真菌感染;采集皮肤组织进行病理切片和过碘酸雪夫(PAS)染色,毛囊中可见真菌菌丝;皮肤病料在DERMAKIT培养基上进行真菌培养,见石膏粉末状白色真菌生长,镜检见特征性纺锤型孢子;对病变皮毛样本和真菌培养物进行PCR检测,确诊为石膏样小孢子菌感染。采用抗真菌、抗感染结合外用药物治疗,取得了良好的疗效。     

抗犬真菌性皮肤病中药的筛选

正犬皮肤真菌病是宠物门诊的常见性、多发性、人畜共患皮肤病,是由犬小孢子菌、石膏样小孢子菌及马拉色菌等致病性真菌黏附于犬皮肤上,侵入皮肤表皮、毛发或趾甲从而引起皮肤的一系列器质性病变,是犬临床最常见的传染性皮肤疾病之一~([1])。其临床特征是掉屑、脓包、红的斑点、掉毛及丘疹等,继发感染可能出现疡、糜烂。犬皮肤真菌病的顽固性强、难治愈、病期长、易反复,并可通过动物传染给人,对动物和人类的健康造成严重影响。临床治疗更多选择用抗真菌西药,而西药价格更     

猫真菌性皮肤病的诊治

<正>猫真菌性皮肤病是指真菌侵染猫的表皮角质、被毛、皮肤、趾爪角质蛋白组织引起的真菌性疾病。致病性真菌可以引起猫的各种皮肤症状、全身性真菌病、真菌毒素中毒以及过敏等。引起猫真菌性皮肤病的真菌主要有犬小孢子菌、石膏样小孢子菌和须毛癣菌,其中98%的猫真菌性皮肤病是由犬小孢子菌引起的,其他2种各占1%。小孢子菌为嗜动物性真菌,对人同样具有感染性,有时会引起严重的公共卫生问题。试验主要对临床上常见的猫真菌性皮肤病     

温州地区犬皮肤真菌病流行病学调查

为了研究温州地区犬皮肤真菌病的流行病学特点,选取2015年4月到2016年3月期间就诊的120例疑似皮肤真菌病患犬,采集患处被毛,接种到沙氏葡萄糖蛋白胨培养基进行培养,应用马铃薯培养基和皮肤癣菌鉴别培养基进行鉴别培养,根据菌落形态进行种属鉴定。结果:120例样本分离到真菌107株,检出率为89.26%;鉴定出3种真菌,其中犬小孢子菌检出率最高(44.86%),其次为石膏样小孢子菌(26.17%)和马拉色菌(18.69%);7-10月份发病率高(48.6%),12月龄前的幼犬发病率高于其他年龄(42.06%);发病部位以头部最多(36.45%),其次为腹部(26.17%),背部发病率最低(6.54%)。     

CDV、CPV和CPIV多重PCR检测方法的建立

为了建立一种快速诊断犬瘟热病毒、犬细小病毒和犬副流感病毒的多重PCR方法,参照GenBank中的犬瘟热病毒(CDV)、犬细小病毒(CPV)、犬副流感病毒(CPIV)基因序列,设计了3对引物分别用于特异扩增犬瘟热病毒F基因、犬细小病毒VP2基因和犬副流感病毒F基因上的目的片段.通过优化反应条件,建立同时扩增CDV(740 bp)、CPV(419 bp)和CPIV(559 bp)的多重PCR方法.结果表明特异性和敏感性良好,对CDV、CPV、CPIV3种病毒的最低核酸检测量为1 ng/μL.临床样品的多重PCR检测结果表明,建立的多重PCR方法能够对CDV、CPV、CPIV单个感染或混合感染的临床样品进行快速鉴别诊断.     

犬皮肤病综合防治

正1病因犬常见皮肤病有寄生虫性皮肤病、真菌性皮肤病、细菌性皮肤病、脂溢性皮炎等。寄生虫引起的皮肤病占临床发病率的60%以上,主要有蠕形螨病、疥螨病、耳螨病、跳蚤病、蜱感染等。真菌性皮肤病又称癣病,是由皮肤癣菌侵袭毛发、爪和皮肤等组织引起的,真菌主要是犬小孢子菌,其次是石膏样小孢子菌和须小孢子菌。细菌性皮肤病主要由葡萄球菌和酵母菌引起。     

中药对犬类真菌性皮肤病的疗效观察

真菌性皮肤病是一种传染性极强的人兽共患皮肤病,主要通过直接接触传染,但是接触被污染的美容器具、梳子、垫物等也能引起间接接触传染,幼犬、老年犬以及体质衰弱、皮肤抵抗力低下的犬易感,致病菌主要为犬小孢子菌,其次是石膏样小孢子菌和须发癣菌,主要侵袭感染犬体皮肤、被毛和爪甲等处,在犬皮肤病中占16．86％,螨和真菌混合感染性皮肤病的感染率高达43．07％。     

浅析犬猫的真菌病

感染犬猫引起皮肤病变的主要真菌有毛癣菌、犬小孢子菌和石膏样小孢子菌,其中后两种真菌在犬猫中最常见,而且可以感染人类。现将犬猫的真菌病介绍如下。1发病特点 犬猫感染真菌有明显的季节性。石膏小孢子菌感染犬猫的病例在夏秋季比较多见;毛癣菌感染一年四季都可以出现;犬小孢子菌也可以一年四季发病．但高发期是8月到次年1月份。     

1例猫癣的治疗

正猫癣又称为猫的真菌性皮肤病,是由致病性真菌如石膏样小孢子菌、须发癣菌和小孢子菌引起的猫体表皮肤损伤、增厚结痂、脱毛为主要特征的高度接触性、传染性人兽共患皮肤病。众多文献记载,小孢子菌为猫癣病的主要致病菌,而石膏样小孢子菌和须发