不同方法测定饲料中木质素(ADL)含量的研究

本研究旨在探索一种快速测定饲料中木质素(ADL)含量的方法,同时评价聚酯网袋法测定饲料中ADL含量的准确性。本试验采用聚酯网袋法、国标法(GB/T20805-2006)和ANKOM滤袋法三种方法,分别测定了米糠粕、豆粕、甜高粱、玉米秸、大豆秸、干豆渣、大麦麸、青贮玉米、稻壳粉、麦壳、国槐、苜蓿、玉米芯共16种饲料中ADL含量,比较不同方法的测定结果,对不同方法的准确度进行分析。结果表明:(1)聚酯网袋法与国标法的测定结果一致;两种方法测定结果呈强正相关,线性回归方程为:y=1.0029x-0.0779(r=0.9997)。(2)ANKOM滤袋法测定饲料中ADL含量的结果与国标法一致,二者呈强正相关,线性回归方程为:y=0.9701x+0.2972(r=0.9975)。聚酯网袋法测定饲料中ADL含量的方法具有测定时间短、效率高、成本低、准确度高等特点。     

聚酯筛网袋法测定饲料中CF和NDF含量的精密度研究

本文采用聚酯筛网袋法测定了数百个饲料样品中的粗纤维(CF)和中性洗涤纤维(NDF)的含量,结果表明,本法测定饲料中的CF和NDF含量的精密度比较高;同时对部分样品用国标法和本法进行了同时测定,两种方法的测定结果基本一致。说明聚酯筛网袋法测定饲料中的CF和NDF含量的精密度和准确度均比较高,可以用于饲料中的CF和NDF含量的大批量快速测定。     

仿生消化系统测定鸭饲料原料代谢能的重复性与精密度检验

本试验通过采用仿生消化系统测定常用鸭饲料原料(玉米、豆粕、棉籽粕和小麦麸)干物质消化率与代谢能的变异,探讨该系统测定鸭饲料原料代谢能的重复性与精密度,为确立基于仿生消化系统定量测定饲料养分的生物学效价方法提供参考.重复性试验采用单因素完全随机设计,其中同一套仿生消化系统的重复性试验每一饲料原料设3个处理(批次),每个处理10个重复.不同套仿生消化系统间的重复性试验每一饲料原料设3个处理(仪器),每个处理10个重复.试验结束后分别测定每个重复的干物质消化率和代谢能.结果表明,同一套仿生消化系统不同批次间玉米、豆粕、棉籽粕和小麦麸干物质消化率与代谢能的批内变异系数、批间变异系数和总变异系数均小于1.40%,不同套仿生消化系统间玉米、豆粕、棉籽粕和小麦麸干物质消化率与代谢能的仪器内变异系数、仪器间变异系数和总变异系数均小于1.64%.通过对4种鸭饲料原料干物质消化率和代谢能进行正态性检验及95%置信区间分析,重复观测数据中玉米、豆粕、棉籽粕和小麦麸干物质消化率的最大绝对偏差分别控制在0.94%、1.00%、1.02%和0.88%以内,其中85%的观测数据最大绝对偏差均不高于0.75%;代谢能最大绝对偏差分别控制在0.18、0.29、0.18和0.24 MJ/kg,其中85%的观测数据最大绝对偏差均不高于0.22 MJ/kg.从本试验的重复性及精密度看,采用该仿生消化系统测定鸭饲料原料代谢能可以达到较高的定量水平.     

饲料中粗纤维和酸性洗涤纤维含量关系的研究

本文旨在探索饲料中粗纤维（crude fiber, CF）和酸性洗涤纤维（acid detergent fiber, ADF）含量的关系，阐述了饲料中的CF和ADF指标含量对于饲料质量检测和饲料营养价值评定中的作用和意义。本试验采用聚酯纤维筛网袋法测定了花生秧、次粉和小麦麸3种饲料中CF和ADF的含量，比较饲料单一或合并分析的测定结果。结果表明，（1）饲料中CF、CF+AIA含量之间的呈高度正相关，相关系数r在0.99以上；根据饲料中CF+AIA与CF含量，建立模型用CF+AIA含量指标估测出CF含量。（2）可以用饲料中ADF含量指标估测出CF含量指标，相关系数r在0.98以上；在生产中原料质量检测ADF更便捷。综上可知，饲料中CF+AIA指标可以用来估测饲料CF指标；因为CF+AIA不需要测定CF残渣中的灰分，测定时间可缩短至90 min；饲料ADF含量指标测定更快捷，可估测和替代CF指标，用来对饲料原料质量进行快速地检测。     

饲料中钙含量测定方法的比较

研究对比了几种测定饲料中钙含量的方法,分析了各方法的特点和适用范围。结果表明:用EDTA法测鱼粉、石粉和米糠的钙含量,与国标法测定结果比较差异不显著(P>0.05),而此方法测定玉米蛋白粉、豆粕、麦麸和玉米中的钙含量,测定结果却与国标法相比差异显著(P<0.05),说明EDTA法不适于测定钙含量在0.1%~0.4%之间的饲料,对钙含量低于0.1%和高于0.4%的饲料较适用。均相沉淀法和双氧水法与国标法测定结果比较,发现以上7种饲料的测定结果差异均不显著(P>0.05),且均相沉淀法适用于石粉类钙含量高的饲料的测定。钙色素法测定玉米蛋白粉、豆粕、麦麸和鱼粉的测定结果与国标法相比差异不显著(P>0.05),而玉米、石粉和米糠钙含量的测定结果与国标法比较却差异显著(P<0.05),说明钙色素法适用于钙含量中等的饲料的测定,不适合测定石粉、玉米、米糠类钙含量较高或较低的饲料。     

饲料粗纤维、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维残渣中各成分的研究

本试验旨在研究饲料粗纤维、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维残渣中各成分。试验采用聚酯纤维筛网袋法测定了米糠、小麦麸、白三叶、枸树叶、全株玉米、全株小麦、毛苕子、兔配合饲料、高粱、燕麦秸、苜蓿、稻秸、小黑麦干草、皇竹草、芦苇、花生秧、大豆秸和稻壳粉18种饲料的粗纤维(CF)、中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)含量,测定了饲料CF残渣中半纤维素、纤维素、酸性洗涤木质素和酸不溶灰分的含量及回收率,同时测定了NDF和ADF残渣中半纤维素、纤维素、酸性洗涤木质素和酸不溶灰分的含量,研究了饲料中的CF、NDF和ADF残渣中各成分含量及CF和ADF之间的相互关系。结果表明:所测18种饲料中的纤维素在CF残渣中的回收率最高(71.28%~105.03%);饲料ADF含量(y_1)和CF含量(x_1)之间呈高度正相关:y_1=1.507 1+1.211 5x_1(r=0.979 2,RSD=1.863 4,P0.01);饲料ADF残渣中去除酸不溶灰分后的ADF含量(y_2)和CF含量(x_2)之间的相关性更高:y_2=2.406 3+1.077 0x_2(r=0.990 5,RSD=0.962 4,P0.01)。由此提出饲料中半纤维素和纤维素含量的准确测定计算方法,即半纤维素含量等于NDF含量(无酸不溶灰分)减去ADF含量(无酸不溶灰分);纤维素含量等于ADF含量(无酸不溶灰分)减去酸性洗涤木质素含量。     

鳙鱼对10种蛋白质饲料原料中营养物质的表观消化率

本试验旨在研究鳙鱼(Aristichthys nobilis)对鱼粉(国产)、干酒糟及其可溶物(DDGS)、菜籽粕、米糠、豆粕、酶解羽毛粉、棉籽粕、小麦麸、玉米蛋白粉和花生粕中干物质、粗蛋白质、粗脂肪、总能以及氨基酸的表观消化率。试验饲料按照基础饲料和待测饲料原料7∶3的比例构成,并添加0.5%的三氧化二钇(Y2O3)作为外源指示剂。挑选初体重为(290.02±2.82)g的鳙鱼,随机分成11组,每组3个重复,每个重复10尾鱼。随机选取1组作为对照组投喂基础饲料,剩余10组为试验组分别投喂试验饲料。投喂1周后通过虹吸法收集粪便。结果表明:1)10种饲料原料中干物质、粗蛋白质、粗脂肪和总能的表观消化率的范围分别为69.9%~85.7%、73.5%~88.3%、81.2%~91.1%和81.9%~86.3%。2)在10种饲料原料中,米糠总能的表观消化率最高,而鱼粉的干物质、粗蛋白质和粗脂肪的表观消化率最高;酶解羽毛粉的干物质、粗脂肪和总能的表观消化率最低,玉米蛋白粉的粗蛋白质的表观消化率最低。3)各饲料原料氨基酸的表观消化率基本维持在65.59%~99.17%,且都以小麦麸较低。由此可见,鳙鱼对鱼粉具有很好的利用效果,其次是豆粕和花生粕,而酶解羽毛粉中粗蛋白质的表观消化率最低,小麦麸各氨基酸的表观消化率均比较低。     

瘤胃非降解蛋白小肠消化率测定方法及影响因素的研究

本试验采用移动尼龙袋法、原始的三步体外法和改进的三步体外法测定了不同产地10种饲料的瘤胃非降解蛋白(R UP)小肠消化率,并对体外法测定结果与移动尼龙袋法测定结果做相关分析,旨在研究产地对不同饲料RUP小肠消化率的影响及寻找替代移动尼龙袋法测定饲料RUP小肠消化率的简便方法。试验材料选用不同产地豆粕、葵花粕、棉粕、菜粕、芝麻粕、大麦、麦麸、玉米、米糠、米糠粕。选用3头带有永久性瘤胃瘘管和十二指肠瘘管奶牛(体况良好,体重相似),瘤胃降解试验和移动尼龙袋试验均采用3×3拉丁方设计。结果表明:产地对豆粕、芝麻粕、大麦、麦麸、米糠粕、玉米RUP小肠消化率有影响。改进三步体外法与移动尼龙袋法测定结果强相关(R2=0.8089,P<0.05)。改进的三步体外法替代移动尼龙袋法测定R UP小肠消化率是可行的。     

聚酯纤维筛网袋法测定饲料纤维素与木质素含量的重复性和准确性研究

本文采用聚酯纤维筛网袋法测定了9种饲料中的纤维素及木质素含量,每种饲料做了10个平行样的重复性测定,结果表明,本法测定饲料纤维素及木质素含量的重复性变异系数均小于5%;同时又用国标法对9种饲料中的纤维素及木质素含量进行了测定,结果表明,聚酯纤维筛网袋法与国标法两种方法的测定结果基本一致。结论:聚酯纤维筛网袋法测定饲料中的纤维素及木质素含量的重复性和准确性比较高,而且测定效率大幅度提高,可以用于饲料中纤维素及木质素含量的批量快速测定。     

不同方法测定瘤胃非降解蛋白质小肠消化率及相关性分析

本试验分别采用移动尼龙袋法、改进三步体外法、原始三步体外法和酸性洗涤不溶氮(ADIN)估测法测定13种精料的瘤胃非降解蛋白质(RUP)小肠消化率,并对移动尼龙袋法与其他方法的测定结果进行相关性分析,同时对常规营养成分和RUP小肠消化率作回归分析,旨在寻找替代移动尼龙袋法测定RUP小肠消化率更简单快速的方法.试验采用单因素试验设计,选取3头装有永久瘤胃瘘管和十二指肠T型瘘管的奶牛.结果表明:移动尼龙袋法测得的豆粕、棉籽粕、菜籽粕、葵花粕、芝麻粕、玉米胚芽粕、玉米、米糠、米糠粕、米糠饼、大麦、麦麸和玉米麸质饲料的RUP小肠消化率分别为98.13％、87.37％、88.47％、82.60％、85.73％、75.40％、93.23％、69.27％、77.83％、92.10％、91.27％、72.37％和79.03％.改进三步体外法测定结果与移动尼龙袋法测定结果的相关系数为0.8383;原始三步体外法测定结果与移动尼龙袋法测定结果的相关系数为0.7899;ADIN估测法预测结果与移动尼龙袋法测定结果无显著相关(P＞0.05);饲料RUP小肠消化率与饲料常规营养成分含量显著相关(P＜0.05).改进三步体外法比原始三步体外法替代移动尼龙袋法测定饲料RUP小肠消化率效果更好.应用体外法替代移动尼龙袋法测定蛋白质饲料RUP小肠消化率比测定能量饲料RUP小肠消化率效果更好.用饲料的常规营养成分含量可较好地预测RUP小肠消化率.     

芪板青颗粒对雏鸡免疫功能的作用研究

用芪板青颗粒对疫苗免疫后的鸡进行试验,以分析其功能作用。结果表明,芪板青颗粒药物高、中剂量组、散剂对照组和药物对照组在多数时间点的血清ND和IBD抗体效价、淋巴细胞增殖、血清IFN-γ和IL-2含量及免疫器官指数高于或显著高于免疫对照组和药物低剂量组(P 0.05),药物高、中剂量组和散剂对照组的增重效果显著优于免疫对照组、药物对照组和药物低剂量组(P 0.05)。表明芪板青颗粒高、中剂量具有较好增强免疫作用。     

饲粮碘添加水平对獭兔氮代谢、血液成分及内脏器官发育的影响

为研究饲粮碘添加水平对獭兔氮代谢、血液成分及内脏器官发育的影响,试验选用体重相近的3月龄獭兔200只,随机分为5组(每组40个重复,每个重复1只试验兔),分别饲喂在基础饲粮中添加0、0.2、0.4、0.8、1.6 mg/kg碘(碘的添加形式为碘化钾)的试验饲粮。预试期7 d,正试期53 d。结果表明:饲粮不同碘水平对獭兔的沉积氮(RN)有显著影响(P < 0.05),并且添加水平为0.8 mg/kg时达到最大值。饲粮碘的添加水平对獭兔血液中促甲状腺激素(TSH)、四碘甲腺原氨酸(T4)、游离态的四碘甲腺原氨酸(FT4)、三碘甲腺原氨酸(T3)有显著的影响(P < 0.05),并分别在添加水平为0.4、0.8、0.8 mg/kg和0.8 mg/kg时达到最大值。另外,饲粮不同碘水平对獭兔的内脏器官发育和脂肪沉积无显著影响(P> 0.05)。综合本试验测定指标,3~5月龄生长獭兔饲粮适宜的碘添加水平为0.8 mg/kg(饲粮中碘的实测值为0.92 mg/kg)。     

银杏叶多糖对传染性法氏囊超强毒灭活疫苗的免疫调节作用

用改进水提醇沉法提取银杏叶多糖。用灭活的传染性法氏囊超强毒(vvIBDV)GX8/99细胞适应株分别制备不同质量浓度(40,20,10 g/L)银杏叶多糖佐剂疫苗、弗氏不完全佐剂疫苗和无佐剂疫苗。360只SPF公雏鸡随机均分为6组,其中5组SPF鸡分别免疫上述5种疫苗,另外1组SPF鸡不免疫作为阴性对照。检测IL-2和IFN-γ分泌量、血清抗体、外周血淋巴细胞转化率、外周血CD4^+和CD8^+T淋巴细胞数量等用来评价疫苗的免疫效果。38日龄进行攻毒试验,评价疫苗的保护效果。结果显示,银杏叶多糖佐剂疫苗组各免疫指标均显著高于弗氏佐剂和无佐剂疫苗组(P<0.05);40 g/L银杏叶多糖佐剂疫苗组免疫效果最好,但与20 g/L银杏叶多糖佐剂疫苗组差异不明显,并且2组攻毒保护率无显著性差异。结果表明,银杏叶多糖作为vvIBDV疫苗佐剂具有良好的免疫促进作用,且20 g/L的银杏叶多糖即可达到最佳效果。     

宠物用贝那普利的研究进展

随着宠物高血压、心脏病等疾病的发病率逐年上升,抗高血压、心脏病药物的研究在不断的探索与实践中得到发展。然而,我国宠物高血压、心脏疾病的控制率、治疗率却有待提高。本文将近些年来国内外血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)中贝那普利的理化性质、合成方法、药理学、药代学研究及临床应用进行了概述,并对用药所产生的不良反应情况作了安全的分析与评价,从而进一步指导兽医临床用药,以期贝那普利在宠物临床中更安全、更有效地使用。     

犬的病料中检测到猪圆环病毒3型

为进一步弄清我国犬是否感染猪圆环病毒3型(porcine circovirus 3,PCV3),本试验对山东省青岛市某宠物医院采集发病犬的48份样品进行PCV3荧光PCR检测,发现7份病料呈现明显阳性,对这7株阳性样品继续用普通PCR扩增,有3份可以扩增出228 bp的特异性条带。这些条带测序后与圆环病毒的其他参考序列进行同源性分析,结果显示这3份样品的病毒序列与其他PCV3参考序列处于同一个进化分支,与PCV3的同源性为93.3%～99.5%,表明我国犬确实存在PCV3感染。     

2017年山东16株H9N2亚型禽流感病毒的分离鉴定及其HA基因序列分析

为了解山东省H9N2亚型禽流感的流行情况, 2017年从山东省不同地区分离并鉴定16株H9N2亚型禽流感病毒(AIV)株,并对其血凝素(HA)基因进行扩增、克隆和测序,将所得序列进行同源性和遗传进化分析。结果显示,2017年分离的16株病毒之间HA基因的核苷酸序列同源性为91.2%~99.8%,氨基酸同源性为93.6%~100.0%。系统进化树显示,16株病毒均属于H9.4.2.5分支,表明H9.4.2.5分支毒株仍是山东省H9N2亚型AIV主要流行株。重要氨基酸位点研究显示,16株病毒的HA蛋白的裂解位点仍是K/RSSR↓GLF,符合低致病性AIV的特征;16株病毒的234受体结合位点多为L,除198位受体结合位点存在变异外,其他受体结合位点均保守;16株病毒的潜在糖基化位点有7个~8个,其中7个位点较保守,而218位糖基化位点均缺失,其中3株病毒分别在145位、206位和285位新增糖基化位点。总之,山东省分离的H9N2亚型AIV在分子生物学上发生了部分新的遗传进化,但与临床上病毒的致病性与流行规律的关系还有待于进一步研究。     

超高效液相色谱-串联质谱法检测扶正解毒散剂中非法添加物喹乙醇、乙酰甲喹

建立了扶正解毒散中非法添加喹乙醇、乙酰甲喹检测的UPLC-MS/MS方法。样品经60%乙腈提取稀释后,采用ACQUITYUPLCRBEHC18色谱柱为分离柱,质谱正离子扫描分析测定。结果显示,喹乙醇、乙酰甲喹在5~200ng/mL的范围内线性关系良好(R2=0.9984,R2=0.9995);样品检出限为25μg/mL,定量限为50μg/mL。在80、100、120μg/mL添加水平的回收率为90%~103%,批内批间变异系数均小于10%。本方法灵敏、快速、重现性好,适用于扶正解毒散中非法添加喹乙醇、乙酰甲喹的检测。     

饲粮粗蛋白质水平对断奶驴驹营养物质消化代谢及血清生化指标的影响

本试验旨在研究饲粮粗蛋白质(CP)水平对断奶驴驹营养物质消化代谢及血清生化指标的影响。选取体况良好的5~6月龄公驴驹30匹,体重(88.21±5.79)kg,随机分为3组,每组10匹,分别饲喂消化能一致而CP水平分别为12.10%(Ⅰ组)、13.95%(Ⅱ组)和15.87%(Ⅲ组)的试验饲粮。试验期70 d,预试期10 d,正试期60 d;其中前31天为试验前期,后29天为试验后期。结果表明:1)Ⅰ组的粗脂肪(EE)和碳水化合物(CHO)的表观消化率有高于Ⅱ、Ⅲ组的趋势(P=0.083、P=0.077)。2)Ⅰ组的钙、磷摄入量极显著高于Ⅱ、Ⅲ组(P<0.01),Ⅲ组的粗纤维(CF)、酸性洗涤纤维(ADF)摄入量极显著高于Ⅰ、Ⅱ组(P<0.01)。Ⅰ、Ⅱ组的粪中磷含量显著高于Ⅲ组(P<0.05),Ⅲ组的粪中ADF含量显著高于Ⅰ组(P<0.05)。Ⅰ、Ⅱ组的尿中钙含量显著高于Ⅲ组(P<0.05),Ⅱ组的尿中磷含量显著高于Ⅰ、Ⅲ组(P<0.05)。3)Ⅲ组的食入氮极显著高于Ⅰ、Ⅱ组(P<0.01),Ⅲ组的粪氮和沉积氮显著高于Ⅰ、Ⅱ组(P<0.05),Ⅲ组的尿氮显著高于Ⅰ组(P<0.05),Ⅰ组的氮的生物学价值显著高于Ⅱ、Ⅲ组(P<0.05),Ⅲ组的尿能极显著高于Ⅰ、Ⅱ组(P<0.01)。4)试验前期,Ⅱ、Ⅲ组的血清总氨基酸含量显著高于Ⅰ组(P<0.05),Ⅰ组的血清免疫球蛋白M(IgM)含量显著高于Ⅱ组(P<0.05),Ⅲ组的血清补体3(C3)含量显著高于Ⅱ组(P<0.05)。试验后期,Ⅱ、Ⅲ组的血清总氨基酸含量显著高于Ⅰ组(P<0.05)。由此可见,饲粮CP水平的提高增加了CF、ADF摄入量及氮的摄入量、沉积量,提高了血清总氨基酸含量,降低了钙、磷的摄入量及EE、CHO的消化率和氮的生物学价值,同时降低了能量利用率,对钙、磷、CF、中性洗涤纤维(NDF)、ADF的消化代谢无影响。本试验条件下,驴驹饲粮的适宜CP水平为12.10%。     

气相色谱法测定禽蛋中有机氯农药和多氯联苯残留量

建立了同时测定禽蛋中14种有机氯农药(OCPs)和7种多氯联苯(PCBs)的气相色谱法。样品用乙腈超声提取,浓硫酸净化,气相色谱法测定,外标法定量。21种待测化合物在5～200μg/L时线性关系良好,方法定量限为0.3～0.7μg/kg,在5、20、100μg/kg三个加标水平下,鸡蛋空白样品的平均加标回收率为75.1%～103.8%,相对标准偏差为1.41%～6.64%。本法简便、快速、准确、成本低廉,适用于禽蛋中多种有机氯农药和多氯联苯的快速筛查。     

单侧肾切除联合链脲佐菌素诱导糖尿病肾病大鼠建模方法改进与评价

优化单侧肾切除联合链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病肾病(DKD)大鼠建模方法,研究该模型大鼠的肾脏病变特点,为药物药效学评价和临床基础研究提供稳定平台。选取健康雄性大鼠12只,随机分为单侧肾切组(UNX组)和糖尿病肾病组(DKD组)。采用背侧横行切口配合皮内缝合的方法切除右肾,术后大鼠腹腔一次性注射STZ 40mg/kg诱导糖尿病,UNX组大鼠给予相同剂量柠檬酸缓冲液。动态检测两组大鼠体重、血糖、24h尿蛋白变化,并于第12周末观察大鼠肾脏病变。采用该手术方式,大鼠术后成活率可达100%。与UNX组相比,DKD组大鼠体重增长缓慢或负增长(P<0.01),24h尿蛋白明显增多(P<0.01),血糖维持在28mmol/L^32mmol/L。肾脏病变符合早期DKD表现。背侧横行切口配合皮内缝合右肾摘除术,联合腹腔注射STZ诱导的DKD大鼠造模方法成模率高。该模型与人类糖尿病肾病早期临床症状、病理变化相似,适用于DKD的机制研究及药物研发。