ZD制剂对马急性软组织损伤模型的作用

ZD制剂是治疗马非开放性软组织损伤的经典验方,为探索其作用机理,建立马急性软组织损伤模型,应用血清学检测、超声学方法及红外热成像技术,综合评估ZD制剂对马急性软组织损伤的治疗效果。结果表明,早期试验药物组局部温度低于阴性对照组,后期试验药物组的局部温度显著高于阴性对照组,表明ZD制剂对急性软组织损伤早期能够降低局部温度,后期能升高局部温度。ZD制剂对肌肉灰度恢复能力显著优于阳性药物组和阴性对照组,表明ZD制剂对肌肉损伤恢复有良好促进作用。ZD制剂对皮下消肿显著优于阴性对照组。     

ZD制剂对急性软组织损伤小鼠损伤处caspase-3表达的影响

为了探索ZD制剂对急性软组织损伤修复中caspase-3的表达影响,试验将360只小鼠随机分为空白对照组、阳性对照组、阴性对照组、ZD高剂量组、ZD中剂量组、ZD低剂量组,每组60只,除空白对照组外其余各组采用重物砸伤法建立急性软组织损伤模型,进行组织形态学、caspase-3活性、免疫组织化学检测,观察用药后第2小时及1,3,5,7,9,11,13,15,21天组织损伤修复的情况。结果表明:建模后除空白对照组外其余各组小鼠均出现不同程度的肌纤维断裂、肿胀、出血症状,呈现典型的急性软组织损伤的病理变化,提示建模成功;各组损伤处组织匀浆中caspase-3活性在损伤后第5天达到最大值,ZD高剂量组与阴性对照组比较,第3天差异极显著(P0.01);caspase-3大量表达于受损组织中,且ZD高剂量组在第3天、第5天和第7天均出现强阳性表达。说明ZD制剂的活血化瘀作用可能与其抑制caspase-3在损伤组织中的表达有关。     

ZD制剂对马肌肉挫伤模型的治疗

建立马肌肉挫伤模型,应用超声学方法,观察肌肉厚度、肌肉血流信号等指标,探索ZD制剂肌肉挫伤的治疗效果。将15匹蒙古马随机分为试验药物组(ZD制剂)、阳性药物组(按摩乳软膏)和阴性对照组(生理盐水),10kg重物于2m高处自由下落捶击肩部肌肉4次,制作肌肉挫伤模型。于造模后2h、1d、3d、5d、7d、10d、15d、25d、30d用超声检测造模部位肌肉厚度、肌肉回声强度、肌肉内部回声和血流信号。在15d治疗期内,ZD制剂组造模部位消肿显著优于阳性药物组和阴性对照组,其中慢性期消肿效果显著优于阳性药物组,表明ZD制剂对肌肉挫伤肿胀有着良好的治疗效果,在慢性期效果更佳;ZD制剂组造模部位的局部肌肉血流信号发展优于阳性药物组和阴性对照组,表明ZD制剂有助于损伤部位新生血管产生和血流量的增加,对肌肉挫伤的治疗有着积极作用。试验表明ZD制剂对肌肉挫伤模型损伤部位消肿、促进血液循环有着显著的促进作用。     

ZD制剂对马肌肉软组织损伤的超微结构观察

为了解ZD制剂对马损伤的肌肉软组织超微结构的影响,试验选择4匹健康蒙古马,将3匹造模后随机分为试验药物组、阳性药物组、阴性对照组,每组1匹,另1匹设为空白对照组。试验药物组马使用ZD制剂治疗,阳性药物组马使用按摩乳,阴性对照组马匹使用空白膏,药物用法用量同试验药物组,空白对照组不做任何处理。在用药后第7,14,21天用一次性取样器在各组马匹损伤处随机分3点采样进行电镜观察。结果表明:试验第7天,与正常马骨骼肌比,阴性对照组、试验药物组和阳性药物组马肌纤维断裂、排列紊乱,但与试验药物组比,阳性药物组肌纤维断裂、肿胀和排列紊乱更加明显。试验第14天,试验药物组和阳性药物组马肌纤维断裂、肿胀和排列紊乱情况得到修复,各组马线粒体数量均明显减少,但试验药物组改善明显。试验第21天,试验药物组马肌纤维形态、线粒体形态和数量基本恢复正常,与正常马骨骼肌电镜照片相似;阳性药物组马肌纤维断裂和明暗带不清晰的情况仍存在;阴性对照组马肌纤维断裂、肿胀和排列紊乱情况仍未明显改善,线粒体仍存在数量减少、肿胀、嵴消失等异常。正常马骨骼肌肌原纤维中暗带长约2.0μm,明带长约1.0μm,马骨骼肌细胞线粒体多为卵圆形颗粒状或长杆状,肌细胞核呈扁椭圆形。说明ZD制剂可促进马骨骼肌肌原纤维、线粒体、肌细胞核形态改善与组织修复,效果优于阳性药物组。     

ZD制剂对非开放性软组织损伤模型小鼠肌肉中IL-1β表达的影响

旨在评价ZD制剂对非开放性软组织损伤模型小鼠肌肉中IL-1β表达的影响。利用文献报道的方法,制备小鼠非开放性软组织损伤模型。于造模后第2天开始进行给药治疗,正常组和模型组小鼠不给予任何处理。于造模初期和治疗期间观察各组小鼠的精神活动状态及肉眼病理学变化。于造模第2天和第7天,运用免疫组化法检测各组小鼠损伤局部肌肉组织中IL-1β的表达情况。结果表明,模型组小鼠在造模初期出现精神沉郁、跛行等现象,损伤局部的肌肉组织出现肿胀和皮下淤血等现象。治疗后,小鼠肌肉组织病变明显减轻。造模第2天,模型组、阳性药物对照组、ZD制剂治疗组小鼠肌肉组织中的IL-1β表达量显著高于正常组（P〈0.05）。造模第7天,阳性药物对照组、ZD制剂治疗组小鼠肌肉组织中的IL-1β表达量显著低于正常组（P〈0.05）。综上提示,ZD制剂对小鼠的非开放性软组织损伤具有缓解作用,其作用机理可能与抑制炎性介质的表达有关。     

ZD制剂对肌肉软组织损伤模型马血液生理指标及抗氧化作用的影响

为了研究ZD制剂的作用机制,选择20匹健康蒙古马,将15匹造模后蒙古马随机分为三组,即试验药物组、阳性药物组和阴性对照组,每组5匹,另5匹设为空白对照组。试验药物组给予ZD制剂进行治疗,每天1次,连续用药15 d。阳性药物组给予按摩乳,阴性对照组给予空白膏,药物用法用量同试验药物组,空白对照组不做任何处理,治疗中分别检测各组马匹生理指标、血液生理指标和血清抗氧化指标。结果表明:ZD制剂可降低模型马炎症初期白细胞数目,对早期炎症反应具有抑制作用。ZD制剂可提升模型马机体抗氧化能力,抑制脂质过氧化反应,调节体内自由基代谢平衡。     

ZD制剂对小鼠急性软组织损伤的毛细血管通透性及血液流变影响的研究

为了观察自制外用ZD制剂对小鼠急性软组织损伤的疗效,初步探讨其作用机理,分别对小鼠采用腹腔注射醋酸溶液,观察自制外用ZD制剂对小鼠毛细血管通透性的影响;对小鼠造急性软组织损伤模型,测定应用自制外用ZD制剂后小鼠血液流变学指标,确定其对血液流变学的影响。结果 ZD制剂抑制毛细血管通透性增加(P0.01);降低血液流变学指标(P0.05或P0.01)。表明ZD制剂通过抑制毛细血管通透性和降低血液流变学的指标,对急性软组织损伤修复具有良好的促进作用。     

ZD制剂对马肢蹄软组织损伤的临床疗效观察

为观察ZD制剂治疗马匹肢蹄软组织损伤的实际疗效,试验选择马匹肢蹄急性软组织损伤病例16例,随机分成两组,即治疗组和对照组,每组8例。治疗组马匹使用ZD制剂,对照组马匹给予按摩乳,药物用法用量同治疗组一样,连续治疗15 d后对马匹疼痛、肿胀和跛行等症状评分进行计算,比较和观察两组药物的疗效。结果表明:治疗后两组马匹患处压痛、肿胀、跛行评分比较差异显著(P0.05),表明两组药物均能明显缓解马匹患处压痛、肿胀和跛行情况。治疗组马匹在患处压痛缓解、肿胀消除和跛行改善三个方面的总有效率分别为100%、87.5%、87.5%,高于对照组的75.0%、62.5%、75.0%。说明ZD制剂在改善马匹急性软组织损伤引起的患处疼痛、肿胀和跛行等方面效果优于按摩乳。     

ZD制剂对小鼠毒性试验研究

为了研究用来治疗马属动物肢蹄急性软组织损伤的复合中药制剂ZD制剂的毒性作用,试验测定了ZD制剂对小鼠的半数致死量、最大耐受剂量,并进行了皮肤刺激试验。结果表明:ZD制剂水提物灌服小鼠未能检测出药物的半数致死量、最大耐受量,提示药物进入体内是安全的,且毒性作用小;用ZD制剂刺激小鼠皮肤,试验组小鼠与对照组小鼠无显著差异,提示该制剂外敷应用安全可靠。     

ZD制剂对肌肉软组织损伤模型马血清SAA和LA含量的影响

为了研究ZD制剂的作用机制,试验选择20匹健康蒙古马,将15匹造模后随机分为三组,即试验药物组、阳性药物组和阴性对照组,每组5匹,另5匹设为空白对照组。试验药物组给予ZD制剂进行治疗,阳性药物组给予按摩乳,阴性对照组给予空白膏,药物用法用量同试验药物组,每天1次,连续用药15 d;空白对照组不做任何处理。治疗期间分别检测各组马匹血清中血清淀粉样蛋白A(SAA)和乳酸(LA)含量。结果表明:与空白对照组相比,试验药物组马匹血清中SAA含量在试验第1,3天极显著升高(P0.01);与阴性对照组相比,试验药物组马匹血清中SAA含量在试验第1,3天极显著降低(P0.01),在试验第5天显著降低(P0.05);与阳性药物组相比,试验药物组马匹血清中SAA含量在试验第3天显著降低(P0.05)。与空白对照组相比,试验药物组马匹血清中LA含量在试验第1,3天极显著升高(P0.01),在试验第5天显著升高(P0.05);与阴性对照组相比,试验药物组马匹血清中LA含量在试验第1,5,7天显著降低(P0.05),在试验第3天极显著降低(P0.01);与阳性药物组相比,试验药物组马匹血清中LA含量在试验第3,5,7天显著降低(P0.05)。说明ZD制剂可降低模型马炎症急性期血清SAA和LA的含量,减缓损伤部位的炎症反应。     

COX-2和血管内皮生长因子过表达与犬乳腺肿瘤血管生成的相关性

本研究旨在探讨环氧合酶-2(COX-2)和血管内皮生长因子(VEGF)在犬乳腺肿瘤血管生成中可能的作用。对70例肿瘤病例(28例良性和42例恶性)进行免疫组织化学分析,检测其COX-2和VEGF的表达情况;以CD31免疫标记测定微血管密度(MVD)来评估肿瘤血管生成。结果显示,在恶性病例中COX-2和VEGF的表达,MVD均显著高于良性病例(P<0.001)。在恶性组中,COX-2阳性肿瘤病例的MVD显著高于COX-2阴性肿瘤病例(P=0.026)。同样,VEGF阳性肿瘤病例的MVD也显著高于VEGF阴性肿瘤病例(P<0.001)。本研究结果提示,COX-2和VEGF的过度表达可能有助于恶性肿瘤的血管生成和侵袭。     

三氧化二砷对鸡马立克病病毒诱导鸡肝脏肿瘤中血管生长相关因子表达的影响

为了探讨三氧化二砷(As2O3)对马立克病病毒(MDV)诱导鸡肝脏肿瘤中血管生长相关因子表达的影响,构建了鸡马立克病病例模型,通过腹腔注射As2O3(3.0 mg/kg体重),于35 d,40 d与45 d观察临床症状及血管组织病理学改变,采用半定量RT-PCR法检测肝脏肿瘤中血管生长相关因子VEGF、KDR及bFGF mRNA表达水平。结果表明,MD病鸡肝脏肿瘤内VEGF、KDR及bFGF mRNA均高水平表达,As2O3能够下调肿瘤组织内VEGF、KDR与bFGF mRNA的表达水平,并呈现时间效应。揭示As2O3能够通过下调肝脏肿瘤组织中VEGF、KDR与bFGF mRNA的表达水平,减少血管的生成,进而抑制肿瘤生长,这是As2O3抗肿瘤作用机制之一。     

复方中药软膏对小鼠急性软组织损伤中炎性因子的影响

目的:通过对复方中药软膏对小鼠急性软组织损伤中炎性因子的影响研究,探讨复方中药软膏对急性软组织损伤修复的机制。方法:建立小鼠急性软组织损伤模型用ELISA法检测各模型组受损伤的软组织中COX-2、HIS炎性因子的含量。结果:复方中药软膏高、中剂量组在降低损伤局部组织中COX-2、HIS的含量方面与模型组相比有显著差异(P0.01)。结论:复方中药软膏可以降低损伤组织中COX-2、HIS的含量,以达到抗炎作用。     

VEGF在1岁牦牛肺脏的表达分布研究

目的:研究血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在牦牛肺脏组织中的表达分布。方法:选取1岁牦牛肺脏组织样本,制成石蜡切片,通过免疫组织化学染色观察牦牛肺脏组织的形态并检测VEGF在肺脏器官中的分布。结果:肺脏各级支气管上皮细胞、肺血管内皮细胞中VEGF的表达为强阳性。结论:通过分析VEGF于牦牛肺脏组织不同细胞中的表达情况,得出VEGF对其肺脏血管网的构建有着促进功能,进而推测VEGF因子对牦牛适应高原低氧环境有着重要作用。     

血管内皮生长因子在绵羊肺脏中的表达分布研究

目的研究血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）在绵羊肺脏中的表达分布特征。方法取成年绵羊肺脏组织,制备石蜡切片,利用HE染色法观察绵羊肺脏组织的形态结构,采用免疫组织化学方法检测VEGF在绵羊肺脏组织中的分布。结果肺脏的各类型细胞均可见VEGF表达,在绵羊肺脏导气部的细支气管和终末细支气管的上皮细胞,呼吸部的肺泡管和呼吸性细支气管的上皮细胞,以及肺的血管内皮细胞均可检测到VEGF的强阳性表达信号。结论VEGF广泛分布于绵羊肺脏组织中,对其形态结构和功能的维持具有重要作用。     

亚硝酸盐中毒模型小鼠组织器官中VEGF的分布特点

为探讨血管内皮生长因子(VEGF)在小鼠亚硝酸盐中毒组织损伤中的作用,将20只小鼠随机分为对照组和亚硝酸盐中毒组,分别注射0.3mL的生理盐水和50g/L亚硝酸钠。中毒组小鼠死亡后,处死对照组小鼠,采取心、肝、脾、肺、肾、脑等组织,制作石蜡切片,进行HE染色和VEGF免疫组化染色,镜下观察组织病变以及VEGF蛋白的分布特点。结果显示,亚硝酸盐中毒可引起小鼠机体产生明显的缺氧症状,心、肝、脾、肺、肾等组织都有不同程度的病理损伤,主要表现为水肿和出血;各组织均观察到VEGF阳性信号,在出血病变区域阳性信号最为明显。说明亚硝酸盐中毒可造成机体各器官不同程度的病理损伤,并引起小鼠体内VEGF表达量的增加,VEGF对器官的病理变化有明显的促进作用。     

透明质酸钠与软骨下钻孔对兔软骨损伤修复的对比试验

试验通过建立兔部分软骨损伤模型,采用外源性注射透明质酸钠和软骨下钻孔两种治疗方法,比较两种方法的修复效果及早期修复机制,为临床应用提供试验依据。试验选用36只哈白兔建立膝关节软骨损伤模型后随机均分为3组：自愈组（阴性对照）、用药组（透明质酸钠注射）、钻孔组（软骨下钻孔）。术后1、4、6、8周,采用RT-PCR方法检测修复物中Ⅱ型胶原（Col Ⅱ）、蛋白聚糖（Agg）、Ⅹ型胶原（Col Ⅹ）、Ⅰ型胶原（Col Ⅰ）及Runx2的mRNA表达量;术后8周,制作软骨切片进行HE染色、番红-固绿染色和甲苯胺蓝染色,分析3组的修复效果及修复机制。结果显示,两试验组软骨损伤都被明显修复,染色结果显示修复组织中软骨细胞增多,具有软骨典型的陷窝样结构,用药组阳性着色优于钻孔组。用药组软骨的特异性基因Agg和Col Ⅱ的mRNA表达量显著高于钻孔组（P < 0.05）,软骨细胞肥大相关基因Col Ⅹ和Runx2的表达量显著低于钻孔组（P < 0.05）。自愈组Col Ⅰ的mRNA表达量最高,钻孔组次之,用药组最低。试验结果表明,用药及钻孔对关节软骨损伤都有不同程度的治疗修复作用,自愈组修复物成分主要为纤维组织,透明质酸钠治疗后产生了较多的透明软骨成分,而钻孔修复后的表层覆盖薄层纤维软骨成分,在骨缺损短期修复中,透明质酸钠的修复效果优于钻孔疗法。     

VEGF在绵羊卵巢中的表达分布研究

目的:研究血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)在绵羊卵巢组织中的免疫定位。方法:选取绵羊的卵巢组织作为研究样本,制成切片,通过HE染色来观察其卵巢的形态结构,采用免疫组织化学SP法检测绵羊卵巢中VEGF的表达分布。结果:VEGF在绵羊卵巢各级卵泡中均有表达,在初级卵泡和次级卵泡的颗粒细胞及卵泡膜细胞中可检测到VEGF强阳性表达信号。结论:VEGF广泛表达于各级卵泡中,主要集中定位于颗粒细胞及卵泡膜细胞的胞质中,进而推测出颗粒细胞和膜细胞分泌的VEGF可能促进了膜细胞层血管内皮细胞的增殖。     

透明质酸钠与软骨下钻孔对兔软骨损伤修复的对比试验

试验通过建立兔部分软骨损伤模型,采用外源性注射透明质酸钠和软骨下钻孔两种治疗方法,比较两种方法的修复效果及早期修复机制,为临床应用提供试验依据。试验选用36只哈白兔建立膝关节软骨损伤模型后随机均分为3组:自愈组(阴性对照)、用药组(透明质酸钠注射)、钻孔组(软骨下钻孔)。术后1、4、6、8周,采用RTPCR方法检测修复物中Ⅱ型胶原(ColⅡ)、蛋白聚糖(Agg)、Ⅹ型胶原(ColⅩ)、Ⅰ型胶原(ColⅠ)及Runx2的mRNA表达量;术后8周,制作软骨切片进行HE染色、番红—固绿染色和甲苯胺蓝染色,分析3组的修复效果及修复机制。结果显示,两试验组软骨损伤都被明显修复,染色结果显示修复组织中软骨细胞增多,具有软骨典型的陷窝样结构,用药组阳性着色优于钻孔组。用药组软骨的特异性基因Agg和ColⅡ的mRNA表达量显著高于钻孔组(P0.05),软骨细胞肥大相关基因ColⅩ和Runx2的表达量显著低于钻孔组(P0.05)。自愈组ColⅠ的mRNA表达量最高,钻孔组次之,用药组最低。试验结果表明,用药及钻孔对关节软骨损伤都有不同程度的治疗修复作用,自愈组修复物成分主要为纤维组织,透明质酸钠治疗后产生了较多的透明软骨成分,而钻孔修复后的表层覆盖薄层纤维软骨成分,在骨缺损短期修复中,透明质酸钠的修复效果优于钻孔疗法。     

重组人骨形态发生蛋白2复合物对犬胫骨骨折愈合中4种相关细胞因子的作用

研究重组人骨形态发生蛋白2(rhBMP-2)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、纤维蛋白凝胶(FG)与妥布霉素复合物加速骨折愈合。bFGF与rhBMP-2和妥布霉素以纤维蛋白胶为载体复合,将具有抗生素缓释系统的复合物注入犬胫骨骨折处,并做内固定,于术后第2周,采集犬胫骨骨折处样品,每隔2周采集1次,共采集4次,将每次采集的样品制成组织切片,采用免疫组织化学的方法检测4种因子,并对组织切片进行分析,用多功能真彩色细胞图象分析管理系统,分析所得数据用SPSS18.0版统计软件进行统计学分析。血管内皮细胞生长因子(VEGF)在试验组第2周表达强阳性,而对照组阳性表达较弱;前4周,试验组血小板源性生长因子(PDGF)阳性率呈上升趋势,强于对照组;前8周,试验组胰岛素样生长因子(IGF)和转化生长因子-β1(TGF-β1)阳性率均高于对照组。说明bFGF与rhBMP-2和妥布霉素以纤维蛋白胶为载体的复合物在骨折愈合具有中促进细胞增殖、黏附、趋化、分化,以及骨折末端血管生长和形成的作用。