镰形棘豆乙醇提取物对肝癌细胞增殖及凋亡的影响

采用细胞增殖试验(MTT法)、Annexin-V/PI双重染色法检测镰形棘豆提取物对体外培养的肝癌细胞增殖抑制及凋亡的影响。结果显示,镰形棘豆提取物可显著抑制人肝癌细胞的增殖活性,尤其当浓度为250μg/mL和500μg/mL时,对肝癌细胞Smmc-7721抑制率均超过了60%,并且高剂量组中处于凋亡早期癌细胞的比率显著高于对照组(P0.05)。结果表明,镰形棘豆提取物对癌细胞增殖有显著的抑制作用,其作用机制可能与其抑制癌细胞增殖活性和诱导癌细胞凋亡有关。     

甘草查尔酮A衍生物对Lewis肺癌细胞增殖及凋亡的影响

为了探讨以甘草查尔酮A衍生物(4'-甲基-2,4-羟基查尔酮)对Lewis肺癌细胞的增殖抑制作用和对细胞周期的影响,试验利用MTT、流式细胞术及蛋白免疫印迹法检测4'-甲基-2,4-羟基查尔酮对Lewis肺癌细胞增殖的抑制作用及机制。结果表明:与空白对照组比较,各剂量组(10,20,40μmol/L)的4'-甲基-2,4-羟基查尔酮能有效抑制Lewis肺癌细胞增殖(P0.05),并可显著诱导其细胞凋亡(P0.05),其作用呈时间浓度依赖性;4'-甲基-2,4-羟基查尔酮可使Lewis肺癌细胞的Bax蛋白和Caspase-3蛋白表达增高,而使Bcl-2蛋白表达降低。说明4'-甲基-2,4-羟基查尔酮能有效抑制Lewis肺癌细胞的增殖并诱导其细胞凋亡,其机制可能与其改变细胞凋亡的线粒体途径中的Bax、Bcl-2及Caspase-3蛋白的表达水平有关。     

大蒜素对人结肠癌LS-174-T细胞增殖和凋亡的影响

为了探讨大蒜素作为潜在药物的可能性,试验采用不同浓度大蒜素(Allicin)作用人结肠癌LS-174-T细胞后,通过电镜、流式细胞术和荧光定量PCR等手段,观察细胞凋亡和细胞周期的变化,检测细胞线粒体膜电位以及基因Bax/Bcl-2 mRNA及其蛋白的表达水平。结果表明:大蒜素作用LS-174-T细胞48 h后,细胞有明显凋亡现象发生,细胞周期阻滞于S期与G2期,线粒体膜电位显著降低,Bax mRNA和蛋白表达均上调,Bcl-2 mRNA和蛋白表达均下调。说明在在本试验条件下大蒜素可通过调节Bax基因和Bcl-2基因诱导LS-174-T细胞凋亡,并延缓癌细胞的进一步增长。     

乌龙茶多糖和多酚对肝癌细胞HepG2的协同抑制作用

为了探讨乌龙茶多糖、多酚对肝癌细胞HepG2细胞增殖及细胞周期的影响,以及两者联合使用对肝癌细胞HepG2协同杀伤抑制作用,通过四氮甲唑蓝(MTT)试验检测细胞的增殖抑制率,以观察乌龙茶多糖、多酚对肝癌细胞HepG2的增殖抑制作用;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果表明,乌龙茶多糖、多酚可以抑制肝癌细胞HepG2的生长、增殖;二者联合应用对肝癌细胞HepG2的杀伤作用显著强于2种药物单独使用,且经药物联合应用处理后的肝癌细胞HepG2的凋亡率要高于2种药物单独使用。说明乌龙茶多糖、多酚对肝癌细胞HepG2具有杀伤作用,乌龙茶多糖与多酚联合使用具有协同抗肿瘤的作用。     

华蟾毒精对胃腺癌细胞MGC-803作用的研究

研究华蟾毒精（cinobufagin,CBG）体外对人胃腺癌细胞MGC-803的抑制作用,并初步探讨其抗肿瘤的作用机制。MTT法测定CBG对胃腺癌MGC-803细胞的生长抑制情况;采用光镜观察CBG对人胃腺癌细胞MGC-803形态的影响;流式细胞术检测CBG对MGC-803细胞的抑制作用、细胞周期及细胞早期凋亡的影响。一定浓度范围内CBG对MGC-803细胞的增殖有剂量、时间依赖性抑制作用;光镜下可见细胞形态明显发生变化,细胞变圆,分泌颗粒增多,细胞折光性下降,大部分细胞脱壁;流式细胞仪检测MGC-803细胞,G1期细胞减少,大量细胞停滞在G2/M期,凋亡细胞增多。CBG对MGC-803细胞的抑制作用与诱导其细胞阻滞及凋亡密切相关。     

连翘提取物FS-4体外诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡作用的研究

为了探讨连翘提取物FS-4体外对胃癌细胞SGC-7901的促凋亡作用,试验采用MTT比色法观察了FS-4对胃癌细胞SGC-7901增殖的抑制情况,AO/EB双荧光染色法和透射电子显微镜观察了细胞凋亡的形态学变化,并通过流式细胞术测定细胞的凋亡率。结果表明：FS-4对胃癌细胞SGC-7901增殖的抑制作用具有剂量和时间依赖性,其36 h的半数抑制浓度(IC₅₀)仅为3.23μg/mL;FS-4作用后细胞均出现典型的凋亡细胞形态;FS-4对细胞的诱导凋亡作用呈现明显的浓度依赖性。说明FS-4可抑制胃癌细胞SGC-7901的增殖并具有诱导其凋亡的作用。     

中药治疗肝癌的研究进展

<正>随着对中药深入的研究,科研人员越来越认识到中药在预防及治疗肝癌方面的突出贡献,本文将对其作用机制进行深入的阐述。中药治疗肝癌的作用机制:1)抑制肝癌细胞通过研究中药柴胡提取物柴胡皂苷(SSd)对肝癌细胞HepG-2的抑制作用发现中药柴胡提取物柴胡皂苷对肝癌细胞生长抑制明显。通过研究大黄素、苦参素、黄连素和黄芩苷中药提取物对小鼠肝癌移植瘤的作用发现大黄素、苦参素、黄连素和黄芩苷组在浓度128μg/mL     

黄芪对大鼠睾丸间质细胞凋亡相关基因表达的影响

为探讨黄芪对大鼠睾丸间质细胞凋亡的影响,本试验通过向大鼠睾丸间质细胞的体外培养体系中添加终浓度为20μg/m L的黄芪提取液,利用荧光定量PCR技术研究黄芪对大鼠睾丸间质细胞凋亡相关基因Bax、Bcl-2表达量的影响。结果:添加终浓度为20μg/m L黄芪提取液的实验组与不添加黄芪提取液的对照组相比,间质细胞内Bax基因表达量显著降低(P0.01),Bcl-2基因表达量无显著差异,Bax/Bcl-2比值显著下降(P0.05)。结论:黄芪在一定程度上能够通过抑制凋亡基因Bax的转录,抑制大鼠睾丸间质细胞凋亡。     

TDRKH基因对NIH3T3细胞凋亡的影响

使用NIH3T3细胞进行试验,利用RNAi方法抑制TDRKH的mRNA的表达水平。通过流式细胞术、RTqPCR等方法分别检测细胞凋亡情况及凋亡相关基因Bcl-2、Bax等的表达变化。结果显示:敲减TDRKH表达并不会明显导致NIH3T3细胞的凋亡,凋亡相关基因Bax、P53mRNA表达量无显著性变化,但Bcl-2、Survivin mRNA表达量显著下降,Bcl-2/Bax值显著降低。结果表明:TDRKH虽然不能直接诱导细胞凋亡,但可通过其他潜在基因调控通路影响细胞功能。     

表皮生长因子对牦牛卵丘细胞低氧诱导因子-1α表达的影响及与凋亡的关联性分析

旨在研究EGF是否通过调控HIF-1α抑制牦牛卵丘细胞凋亡。本研究在牦牛卵丘细胞体外培养时加入不同浓度的EGF,运用qRT-PCR和免疫荧光技术检测HIF-1α、Bcl-2和Bax的表达,用一步法TUNEL检测不同处理组卵丘细胞的凋亡情况。结果表明:(1)牦牛卵丘细胞体外培养液中添加不同浓度的EGF后,卵丘细胞HIF-1α和Bax mRNA的相对表达量降低,Bcl-2 mRNA的相对表达量增加,且具有浓度依赖性;当EGF浓度为50ng·mL~(-1)时,HIF-1α和Bax mRNA的相对表达量最低,Bcl-2mRNA的相对表达量最高。(2)向其体外培养液中添加不同浓度的EGF后,卵丘细胞HIF-1α和Bax蛋白的相对表达量降低,Bcl-2蛋白的相对表达量增加,且具有浓度依赖性;当EGF浓度为50ng·mL~(-1)时,HIF-1α和Bax蛋白的相对表达量最低,Bcl-2蛋白的相对表达量最高。(3)TUNEL凋亡检测表明,对照组中卵丘细胞凋亡率最高,当EGF浓度为25ng·mL~(-1)时,细胞凋亡率显著降低(P0.05);当EGF浓度为50ng·mL~(-1)时,细胞凋亡率最低(P0.05),但随着EGF浓度的增加,卵丘细胞的凋亡率又升高。本研究结果表明,EGF可通过调控HIF-1α抑制卵丘细胞凋亡,其作用可能与线粒体介导的Bax和Bcl-2凋亡途径相关。     

花椒精油对HaCaT细胞增殖和凋亡的影响

为探究花椒精油抗人永生化表皮细胞(HaCaT)增殖活力和诱导凋亡的潜在机制,通过采用磺酰罗丹明B(sulforhodamine B,SRB)法对花椒精油的抗增殖活力进行了检测,用流式细胞仪和Western blot检测了细胞周期和细胞凋亡影响情况。研究发现,花椒精油能显著抑制HaCaT细胞增殖,作用48h花椒精油半抑制浓度(IC50)值为199.2μg/mL,其抑制作用呈时间、剂量依赖性。流式细胞仪检测结果显示,精油能使HaCaT细胞周期停滞在S期,并诱导细胞凋亡。Western blot结果显示,花椒精油处理的HaCaT细胞中剪切的Caspase-8/9/3、PARP、Bax表达量增加,同时Bcl-2表达量减少。说明花椒精油能够显著抑制HaCaT细胞增殖,并能通过内源和外源两种途径诱导细胞发生凋亡。     

不同瑞香狼毒提取物对肝癌细胞的抑制作用

通过比较不同瑞香狼毒提取物对肝癌细胞（SMMC-7721）的抑制作用,确定瑞香狼毒体外抗肝癌活性最强药用部分的提取方法。采用超声提取方法和聚酰胺柱层析方法对狼毒进行提取,并用不同浓度的各提取物处理SMMC-7721细胞株,通过MTT检测法,比较各提取物对肝癌细胞的抑制活性。结果表明,各提取物中总黄酮提取物的体外抗肿瘤活性最强;乙酸乙酯和石油醚提取物也具有较强的体外抗肿瘤活性,乙醇提取物的体外抗肿瘤活性较低;总黄酮提取物的体外抗肝癌作用在测定浓度范围内呈现出良好的剂量——时间依赖性。结论：总黄酮提取物是瑞香狼毒中体外抗肿瘤活性最强的成分。     

不同来源桑黄粗多糖诱导肝癌细胞HepG2 S期阻滞及凋亡的研究

通过MTT、流式细胞计数、qRT-PCR等方法,研究不同来源桑黄粗多糖对肝癌细胞HepG2的抑制作用,并探讨其作用机制。结果发现,来源于不同地区、不同寄主桑黄子实体粗多糖对肝癌细胞HepG2的增殖抑制作用差异显著,其中采自四川攀枝花紫油树(SH8)、福建未知树种(SH12)上的桑黄子实体粗多糖对HepG2有一定的促增殖作用;但大多数桑黄子实体粗多糖对HepG2有抑制作用,且随多糖浓度的增加抑制作用增强。采自新疆阿克苏桑树(SH1)桑黄子实体粗多糖(800μg/mL)/至3495%±450%,S期细胞比率从2727%±173%升高至6216%±312%,G2/M期细胞比率从1419%±088%降低至289%±197%;凋亡结果显示,SH1粗多糖(800μg/mL)作用48 h后,早期凋亡细胞比率从正常组026%±009%提高至881%±048%,晚期凋亡细胞比率从正常组026%±011%提高至5175%±282%,坏死细胞比率由正常组089%±007%提高至1701%±129%;qRT-PCR结果显示,SH1粗多糖处理后细胞内周期调控相关蛋白P21、P27、P57、Cyclin A、Cyclin B、Cyclin D、Cyclin E、CDK1、CDK3和CDK4在mRNA水平表达显著上调,CDK2表达显著下调;凋亡相关基因Bcl-XS、Bad、Bax、Bid和Bcl-2的表达水平也显著升高。结果表明,桑黄粗多糖通过调控激活Cyclin A-CDK3、Cyclin E-CDK3、CyclinD-CDK4复合物促进HepG2细胞由G1期进入S期,抑制Cyclins-CDK2复合物诱导HepG2细胞S期阻滞,同时上调促凋亡蛋白基因Bcl-XS、Bad、Bax、Bid的表达,诱导细胞凋亡。     

咖啡酸锗对小鼠U14瘤的抑制作用及细胞凋亡机制的研究

为了研究咖啡酸锗对小鼠U14瘤的抑制作用及其细胞凋亡机制,试验采用MG-P染色、透射电镜和免疫组化方法观察了U14瘤细胞的凋亡及瘤细胞中Bax和Bcl-2蛋白表达情况。结果表明:MG-P染色及透射电镜观察可见,咖啡酸锗试验组出现较多的凋亡细胞,可见典型的细胞凋亡形态特征;免疫组化试验显示,咖啡酸锗各剂量组能下调Bcl-2蛋白表达(P0.05),上调Bax蛋白表达(P0.01或P0.05)。说明咖啡酸锗能抑制小鼠U14瘤的生长,并能诱导U14瘤细胞凋亡,这可能是其发挥抗肿瘤作用的主要机制之一。     

不同炮制方法对人参皂苷含量及肝癌细胞凋亡的影响

为了探讨不同炮制方法对人参皂苷含量及肝癌细胞凋亡的影响,采用HPLC法测定人参液中单体皂苷Rg1、Re、Rb1(三者合为总皂苷)和稀有皂苷Rg3的含量;MTT法检测不同人参提取液对人肝癌细胞HepG2的抑制率,用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果表明,在人参炮制过程中,人参总皂苷含量由0.56%下降到0.13%,稀有皂苷Rg3含量由0.17%增加到0.30%;抑制率检测结果表明,浓度为28.8 g/L时3种提取液对细胞的抑制作用最强,黑参组对肝癌细胞的抑制作用高于人参组和红参组;凋亡实验发现,黑参提取液对细胞的促进凋亡作用明显,人参提取液的促凋亡作用不明显。表明红参和黑参提取液可以抑制人肝癌细胞HepG2增殖并促进其凋亡,可能与参液中的稀有皂苷Rg3含量有关。     

红松松子壳多糖对Hela细胞增殖的影响

利用离子交换层析技术对水提醇沉法制得的PPSP进行了分离纯化,得到2种组分PPSP1和PPSP2.设293T细胞为对照细胞,经噻唑蓝还原法(MTT法)检测不同浓度的PPSP1、PPSP2对Hela细胞增殖的抑制程度.结果发现PPSP1、PPSP2对Hela细胞的增殖均有抑制作用,且抑制程度均随着浓度的增加而增大,呈剂量依赖性,其中PPSP1对Hela细胞的增殖抑制程度最显著;但低浓度的PPSPs对于293T细胞的增殖有促进作用,高浓度下显示出了一定的抑制作用(P＜0.001).试验结果表明红松松子壳多糖在体外对Hela细胞的增殖有抑制作用.     

关于Bcl-2凋亡蛋白家族的研究进展

正常细胞变成癌细胞的过程中经历了一系列的遗传和表观遗传变化,其中B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)在众多的肿瘤细胞中都有高表达,高表达的Bcl-2能形成凋亡抵抗而使癌细胞对化疗产生耐药性,从而使化疗药失去效用。由此可见,针对这些变化的治疗手段可能对肿瘤以及耐药肿瘤有治疗效果。在过去的30年里,无数研究者通过对Bcl-2调控的凋亡通路的研究,促进了一系列拮抗Bcl-2蛋白的小分子化合物的发展。本文就对Bcl-2蛋白的发现、研究、家族情况以及在肿瘤发生发展和治疗中的作用做综述。     

紫草素对肝癌细胞增殖和凋亡的影响

为了研究紫草素对肝癌细胞增殖和凋亡的影响,试验以SMMC-7721为研究对象,利用倒置显微镜观察细胞的形态变化,通过体外细胞毒性试验(MTT)比色法和流式细胞仪检测紫草素处理前后对肝癌细胞株SMMC-7721增殖和诱导细胞凋亡的作用。结果表明:在紫草素作用下,SMMC-7721形态发生改变,细胞增殖受到抑制,细胞凋亡率为(19.00±1.31)%和(23.04±1.25)%。说明紫草素对肝癌细胞株SMMC-7721具有明显的凋亡诱导作用,为抗肿瘤药物的研究提供了理论基础。     

生长激素STH对体外培养猪COCs卵丘细胞影响的研究

试验研究了生长激素（somatotropin,STH）对猪卵丘-卵母细胞复合体（COCs）的卵丘细胞扩展、凋亡、凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达的影响。结果表明,STH能够促进卵丘细胞扩展,抑制卵丘细胞凋亡,抑制凋亡相关基因Bax在卵丘细胞上的表达。     

氯丙嗪对大鼠离体培养卵巢颗粒细胞凋亡的影响

本试验旨在通过氯丙嗪对颗粒细胞凋亡影响的研究,探讨氯丙嗪对雌性大鼠性腺毒性的作用机制。对未成熟的Wistar大鼠卵巢颗粒细胞进行原代培养,用不同浓度的氯丙嗪(0、0.1、1、10 μmol/L)染毒细胞,细胞培养24 h。染毒结束后采用MTT法检测细胞相对活力,荧光染料Hoechest 33258检测颗粒细胞的凋亡变化,RT-PCR检测凋亡调控基因Bax、Bcl-2和P53 mRNA的表达。在本试验所设置的剂量范围内,与对照组比较,氯丙嗪能极显著促进颗粒细胞凋亡(P＜0.01),呈浓度依赖关系;RT-PCR检测则显示氯丙嗪能引起Bcl-2、Bax、P53 mRNA表达水平和Bax mRNA/Bcl-2 mRNA值升高,除低剂量组的Bax mRNA表达水平和Bax mRNA/Bcl-2 mRNA值无明显改变外,其余各组与对照组相比均差异极显著(P＜0.01)。氯丙嗪可显著抑制大鼠卵巢颗粒细胞活力,诱导颗粒细胞凋亡。