小肽对刺参免疫酶活性及抗病力的影响

本文研究了注射不同剂量的小肽对刺参体腔液中酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)和超氧化物歧化酶(SOD)活性及抗病力的影响。各试验组(0.2 mg组、0.4 mg组、0.6 mg组)分别注射浓度为0.4、0.8、1.2 mg/mL的小肽溶液500μL/只,对照组注射等体积无菌过滤海水。在注射后第2、4和7天,检测刺参体内ACP、AKP和SOD活性。结果表明,试验组刺参体腔液中ACP(0.4 mg组)、AKP(0.4 mg组)活性及SOD(0.6 mg组)活性分别在第4、4、7天达到最高值,与对照组相比差异均显著(P<0.05),分别为对照组的2.6、2.3、1.9倍。攻毒试验结果证实,各试验组均产生了一定的免疫保护率,0.4 mg组最大,达33.3%。结果提示,小肽作为饲料添加剂能够提高刺参的非特异性免疫水平,且注射量为0.4 mg效果最好。     

豆薯多糖对大鳞副泥鳅非特异性免疫的影响

实验组大鳞副泥鳅分别体腔注射5、10、20 g/L和40 g/L豆薯多糖溶液(0.2 m L/尾),对照组注射等体积的0.8%Na Cl溶液,在实验开始后第7、14、21 d和28 d,取样测定5个处理组的红细胞总数(RBC)和白细胞总数(WBC),血清酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、溶菌酶(LSZ)活性和补体C3含量;并在实验开始后第7 d,从每个处理组中随机采取大鳞副泥鳅15尾,每尾体腔注射1×108 CFU/m L的嗜水气单胞菌悬液0.1 m L,记录接种7 d后各组鱼的累积死亡率,然后计算免疫保护率。结果显示:与对照组相比,注射适量的豆薯多糖能显著增加大鳞副泥鳅的RBC和WBC(P0.05),显著增强血清ACP、AKP、LSZ活性和补体C3含量(P0.05);明显增强大鳞副泥鳅对嗜水气单胞菌感染的抵抗力。综合考虑各因素,以体腔注射10 g/L剂量较为适宜。     

环磷酰胺对大鳞副泥鳅免疫抑制的研究

为探讨环磷酰胺(CYP)对大鳞副泥鳅(Paramisgurnus dabryanus)的免疫抑制作用,分别以100、200、300mg/kg体重的剂量对大鳞副泥鳅腹腔注射CYP,对照组注射等量的0.85%灭菌生理盐水,在注射CYP后第8天,测定泥鳅的红细胞数(RBC),白细胞数(WBC),血清一氧化氮(NO)含量,补体C3含量,溶菌酶(LSZ),酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、肝胰脏超氧化物岐化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量。结果显示:与对照组相比,300 mg/kg组的RBC、WBC、血清LSZ、ACP、AKP活性及补体C3含量分别显著降低73.5%、81.0%、52.2%、29.0%、47.9%和48.6%(P0.05);血清NO含量和肝胰脏MDA含量分别显著增加144.0%和50.8%(P0.05);肝胰脏SOD活性降低不显著(P0.05)。由此表明,CYP可抑制大鳞副泥鳅的免疫功能。     

竹笋多糖对免疫抑制中华绒螯蟹非特异性免疫的影响

为建立环磷酰胺诱导的中华绒螯蟹免疫抑制试验模型,以10 mg/kg体质量的环磷酰胺对试验组中华绒螯蟹进行体腔注射,每隔5 d注射1次,共注射3次,对照组注射等量的氯化钠注射液,试验组与对照组均投喂基础饲料。自最后一次注射环磷酰胺的次日开始,将试验组分为自然恢复组和竹笋多糖调节组2个组,分别投喂基础饲料和含2 g/kg竹笋多糖的饲料,对照组则继续投喂基础饲料。在竹笋多糖调节试验开始的第0天(最后一次注射环磷酰胺的次日)、第3天、第6天和第12天,采样测定中华绒螯蟹血清酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活性及肝胰腺总抗氧化能力(T-AOC)与丙二醛(MDA)含量,以考察竹笋多糖对免疫抑制中华绒螯蟹非特异性免疫的影响。结果表明:投喂2 g/kg饲料的竹笋多糖能显著提高环磷酰胺诱导的免疫抑制中华绒螯蟹的血清ACP、AKP、SOD和POD活性及肝胰腺的T-AOC,降低肝胰腺MDA含量(P0.05)。由此表明,竹笋多糖能增强免疫抑制中华绒螯蟹的非特异性免疫反应,可作为中华绒螯蟹的免疫增强剂和饲料添加剂。     

复方中草药添加剂对仿刺参(Stichopus japonicus)幼参免疫机能的影响

试验采用不同配方和比例中草药添加剂连续饲喂仿刺参幼参,以海参体腔液细胞的抗菌能力、碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、酚氧化酶(PO)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)作为免疫学检测指标,研究中草药添加剂对仿刺参幼参的免疫增强效果。结果表明:中草药添加剂能够有效提高上述免疫相关指标的活性,并且添加剂的配方不同及添加比例不同,会产生不同的免疫增强效果。     

皮质醇对中华绒螯蟹非特异性免疫的影响

分别以0(对照)、50、100和200 mg/kg体质量的剂量将皮质醇拌入基础饲料,制成颗粒饲料投喂中华绒螯蟹7d,在试验开始后第1天、第4天和第7天,分别采样测定中华绒螯蟹血清酚氧化酶(PO)、过氧化物酶(POD)、溶菌酶(LSZ)、碱性磷酸酶(AKP)和酸性磷酸酶(ACP)活性,并在试验开始后第7天,以0.2 CFU/kg体质量的剂量,体腔注射致病性嗜水气单胞菌CL99920菌株,记录接种7d后中华绒螯蟹的累计病死率.结果表明:对中华绒螯蟹饲喂50、100和200 mg/kg体质量剂量的皮质醇7d后,3个试验组的血清AKP活性显著高于对照组;100和200 mg/kg组的血清LSZ和ACP活性显著低于对照组,3个试验组的血清PO和POD活性亦显著低于对照组;嗜水气单胞菌攻毒后,3个试验组的病死率均高于对照组,以200 mg/kg组的病死率最高,高出对照组26.67％.     

茯苓多糖对点带石斑鱼非特异性免疫力的影响

为研究口服茯苓多糖对点带石斑鱼非特异性免疫力的影响,将茯苓多糖按05、0、200、350、500 mg/kg的剂量添加到基础饵料中,饲养点带石斑鱼[(83.25±8.94)g]28 d。每7 d取样1次,测定血清中酸性磷酸酶(ACP)、溶菌酶(LZM)、补体C3、补体C4、白蛋白/球蛋白(A/G)值,以及血液白细胞数和白细胞吞噬能力。结果表明:茯苓多糖能降低点带石斑鱼血清A/G值,提高血清补体C3含量,提高血液白细胞数和白细胞吞噬率。茯苓多糖对点带石斑鱼血清中ACP活力、LZM活力和补体C4含量影响不明显,但能降低血液白细胞吞噬指数。茯苓多糖能提高点带石斑鱼非特异性免疫力,建议饲料中茯苓多糖添加量为50~200 mg/kg,连续喂食28 d。     

兽用中草药免疫增强剂对猪瘟疫苗免疫效果影响的研究

采用兽用中草药免疫增强剂联合猪瘟疫苗接种,对60头2月龄体重20kg仔猪进行免疫增强试验。结果表明,兽用中草药免疫增强剂显著提高了试验组猪血清中IgG和IgM的含量,同时T、B淋巴细胞增殖率也显著提高,T淋巴细胞亚群比例(CD3+、CD4+、CD8+、CD3+/CD8+)也明显改善。另外,兽用中草药免疫增强剂对猪红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)含量和转氨酶没有显著影响,能显著提高抗氧化酶SOD活性和嗜中性粒细胞吞噬功能。试验用中草药免疫增强剂可显著增强猪瘟疫苗的免疫效果。     

复方中草药对刺参免疫的影响

为探讨复方中草药对刺参免疫的影响,将由9味中草药配伍的复方中草药粉碎制剂,以质量分数分别为1％、2％、3％和4％的剂量添加于基础饲料中,连续投喂刺参24 d,以基础饲料饲喂组为对照.于投喂后第7天、第10天、第14天、第18天和第24天测定酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、一氧化氮合酶(NOS)与超氧化物歧化酶(SOD)的活性.结果显示,投喂后24 d内,各试验组ACP、AKP、NOS与SOD活性均随时间延长先升高后降低.2％复方中草药试验组的ACP活性在投喂后第14天活性最高,值为6.93 U/100 mL,与对照组具有显著性差异,投喂后第10天时AKP活性最高,2％复方中草药试验组为3.25金氏单位/100 mL,3％和4％复方中草药试验组与对照组具有显著性差异,1％和2％复方中草药试验组与对照组差异极显著;NOS和SOD活性在投喂后第18天达到最高,分别为10.78和138.05 U/mL,3％复方中草药组的NOS活性与对照组具有显著性差异,1％和2％复方中草药试验组的SOD活性与对照组间差异显著,3％复方中草药试验组与对照组间差异极显著.研究结果表明:复方中草药能提高刺参的免疫功能.     

黄芪多糖对犬免疫指标的影响

本试验将黄芪多糖应用于犬,通过对肌肉注射高、中、低不同剂量的黄芪多糖注射液,进行试验前后免疫球蛋白IgG、IgA、IgM、补体C3、补体C4、WBC、Ly、RBC含量的测定比较分析,来观察黄芪多糖对犬免疫指标的影响。试验将12只犬分为4组,对照组注射生理盐水,处理组分别注射不同剂量（低剂量0.1ml/kg、中剂量0.5ml/kg、高剂量1ml/kg）的黄芪多糖注射液来探讨其对犬免疫指标的影响。试验结果表明：适量的黄芪多糖注射液能提高犬的机体免疫球蛋白（IgG,IgM,IgA）、补体C3、C4和WBC、LY、RBC的含量,中剂量（0.5ml/kg）的黄芪多糖对犬的免疫增强效果比高剂量组和低剂量组的效果要好。     

板蓝根多糖对中华鳖组织中超氧化物歧化酶活性的影响

研究了腹腔注射板蓝根多糖(IRPS)对中华鳖肝、脑、肾、小肠组织SOD活性的影响。试验共分4组,分别每天注射1.5、36、mg/只IRPS,连续注射3 d。结果表明,IRRS注射组,4种组织SOD活性均高于对照,且6 mg/只注射组SOD活性均达到最大。但4种组织SOD活性存在着组织差异性。IRPS注射组,肾SOD活性与对照组相比,无显著性差异,小肠SOD活性显著高于对照组。1.5 mg/只和6 mg/只IR-PS注射组,脑SOD活性显著高于对照组,而肝SOD活性只在6 mg/只IRPS注射组才显著高于对照组。     

柞蚕免疫蛹粉在刺参健康养殖中的应用研究

体外诱导方法制备含有抗菌活性物质的柞蚕蛹粉,并将其以不同比例(0%、1.0%、2.0%)添加到刺参饲料中,并对照商品抗菌肽产品(0.5%添加),制成C、M1、M2和K几种等能、等氮饲料,探讨其在海参养殖中的应用可行性。结果发现,抗菌肽添加组(K)刺参的体增重率(82.06%)显著高于对照组(C)(64.77%)(P0.05),M1组比对照组提高13.4%,但差异不显著。免疫学指标测定中发现,刺参体腔细胞吞噬活性在各组间无显著差异,但各添加组体腔液超氧化物歧化酶(SOD),M2、K组溶菌酶(LSZ)和M1、M2组酸性磷酸酶(ACP)活性与对照组相比均表现出显著提高(P0.05),其中SOD活性M1、M2组和K组分别比对照组提高了40.24%、49.91%和61.49%;LSZ活性M2组和K组分别比对照组提高6.41%和5.48%;ACP活性,M1组和M2组分别比对照组提高了29.65%和37.34%。经体腔注射用灿烂弧菌(Vibrio splendidus)侵染各组健康刺参,三处理组刺参均表现出一定的对病原菌的抵抗力,但其中K组刺参的免疫保护率最高。电镜切片显示,柞蚕抗菌肽和免疫蛹粉可以提高小肠绒毛的长度,但2.0%免疫蛹粉则对小肠形态产生一定程度的破坏。综上,饲料添加1.0%柞蚕免疫蛹粉可有效促进刺参生长,并提高抗病力。     

恩诺沙星对中华绒螯蟹非特异性免疫的影响

分别以0(对照)、50、100和200 mg/kg体质量的剂量将恩诺沙星拌入基础饲料,制成颗粒饲料投喂中华绒螯蟹7 d,在试验开始后第1、第4和第7天,分别采样测定中华绒螯蟹血清过氧化物酶(POD)、溶菌酶(LSZ)、碱性磷酸酶(AKP)和酸性磷酸酶(ACP)活性,并在试验开始后第7天,以0.2亿CFU/kg体质量的剂量,体腔注射致病性嗜水气单胞菌CL99920菌株,记录接种7 d后中华绒鳌蟹的累计病死率。结果表明:50 mg/kg组中华绒螯蟹在大多数采样时间点的血清POD、LSZ、AKP和ACP活性显著高于对照组;100 mg/kg组中华绒螯蟹的血清POD、LSZ及ACP活性,200 mg/kg组的POD、LSZ、AKP及ACP活性均呈现先促进后抑制的转变,其中,200 mg/kg组在试验开始后第7天,上述4个免疫指标活性均显著低于对照组;嗜水气单胞菌攻毒后50 mg/kg组的病死率低于对照组,100和200 mg/kg组的病死率均高于对照组,其中,200 mg/kg组的病死率高于对照组20%。     

AB-8大孔树脂吸附、解吸中药复方多糖的研究

为了对中药复方免疫增强剂中的多糖进行纯化,试验采用苯酚硫酸法测定多糖含量,然后以AB-8大孔吸附树脂为分离材料,以乙醇为洗脱剂,系统研究上样液浓度、上样量、上样速率、洗脱剂乙醇浓度、洗脱速率、洗脱剂用量等参数对多糖吸附-解吸效果的影响。结果表明:上样液浓度为5.93 mg/mL,上样量为1倍量树脂体积(BV),上样液速率为每小时2倍树脂体积数;洗脱剂乙醇浓度为50%,洗脱速率为每小时3倍树脂体积数,洗脱剂用量为3倍量树脂体积;吸附率为74.3%,解吸率为93.6%。说明AB-8大孔树脂可用于纯化中药复方免疫增强剂中的多糖。     

竹笋多糖对免疫抑制中华绒螯蟹的免疫调节作用

为研究竹笋多糖(BSP)对免疫抑制中华绒螯蟹的免疫调节作用,试验设投喂基础饲料的对照组、免疫抑制模型组和投喂含2 g/kg竹笋多糖饲料的多糖调节组3个处理组,模型组和多糖组体腔注射10 mg/kg体重剂量的环磷酰胺,对照组注射生理盐水,每隔5 d注射1次,共3次。在竹笋多糖调节试验开始后的第0、3、6、12天,采样测定中华绒螯蟹的血细胞总数(THC)、血细胞呼吸爆发(RB)活性和血清酚氧化酶(PO)、溶菌酶(LSZ)、一氧化氮合酶(NOS)活性。结果表明,投喂2 g/kg饲料的竹笋多糖能显著提高环磷酰胺诱导的免疫抑制中华绒螯蟹的THC和血清PO、LSZ及NOS活性(P0.05),对血细胞RB活性无显著影响(P0.05)。由此可见,竹笋多糖对环磷酰胺诱导的免疫抑制中华绒螯蟹具有较好的免疫调节作用。     

饲料中添加活性酵母制剂对刺参生长、免疫力和抗病力的影响

本试验旨在研究饲料中添加活性酵母制剂对刺参生长、免疫力和抗病力的影响。采用单因素试验设计,通过在商品配合饲料中分别添加0(对照)、0.025%、0.050%、0.100%、0.200%和0.400%的活性酵母制剂,配制6种试验饲料,饲喂平均初始体重为(4.0±0.1)g的刺参6周。每种饲料设3个重复,每个重复放养15头刺参。6周的养殖试验结束后,每个重复选取10头刺参,每头刺参通过体壁注射灿烂弧菌(Vibrio splendidus)菌悬液0.1 m L(菌悬液浓度为1.5×109CFU/m L),观察记录灿烂弧菌攻毒14 d内的累计死亡率。结果表明:饲料中添加活性酵母制剂能显著提高刺参的特定生长率(P0.05),刺参特定生长率在添加量为0.200%时最高。饲料中添加活性酵母制剂后,刺参体腔液中过氧化氢酶(CAT)活性显著增加(P0.05);活性酵母制剂添加量为0.050%~0.400%时,刺参体腔液中溶菌酶(LZM)活性显著高于对照组(P0.05);活性酵母制剂添加量为0.200%~0.400%时,刺参体腔液中酸性磷酸酶(ACP)活性显著高于对照组(P0.05);活性酵母制剂添加量为0.400%时,刺参体腔液中超氧化物歧化酶(SOD)活性显著高于对照组(P0.05)。饲料中添加活性酵母制剂可降低攻毒14 d后刺参的累计死亡率,活性酵母制剂添加量为0.200%时,累计死亡率最低。由此可知,在本试验条件下,饲料中添加活性酵母制剂可促进刺参生长,提高免疫力和抗病力。综合分析刺参的生长、免疫力和抗病力以及实际生产情况,刺参饲料中活性酵母制剂的适宜添加量为0.200%~0.400%。     

人参多糖复合物对南美白对虾免疫增强效果的研究

以人参多糖复合物作为免疫增强剂,选取体长为(9.00±0.10)cm,体重5.00～7.00g,健康状况良好的南美白对虾为试验动物,试验组投喂添加有人参多糖复合物(0.04%)的饲料,对照组投喂基础饲料。试验期为30d,测定分析对虾肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)、血清中酚氧化酶(PO)和溶菌酶(LSZ)的活力以及肌肉中丙二醛(MDA)的含量变化。结果表明人参多糖复合物对南美白对虾具有较强的抗氧化作用,可以明显提高对虾肝脏中的SOD的活力(P<0.01),第15d和第30d采样点的SOD的活力最高为25.70和11.05U/mg*prot;而人参多糖复合物对于对虾血清中PO和LSZ的活力的调节,只作用在一定的时间段(P<0.05),最高含量为第15d采样点,达11.67和18.13U/mg*prot,作用的力度随着饲喂时间的加长而降低;至于对肌肉中的MDA的含量则有一定的下降力度(P<0.05),但也只作用在一定的时间段内(第15d采样点:6.2×10-3nmol/mg*prot),作用的力度也是随着饲喂时间的加长而降低。     

鱼诺卡氏菌全肽聚糖对乌鳢非特异性免疫力的影响

为了解鱼诺卡氏菌全肽聚糖(WPG)对鱼类的免疫效应,应用1%鱼诺卡氏菌WPG溶液对乌鳢进行腹腔注射,在注射后第0、1、2、3、4、5、6、7、8天对乌鳢血液、黏液、肝脏、头肾组织进行取样,测定血细胞吞噬指数(PI)、血清替代途径补体活力(ACH50)以及组织中酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、超氧化物歧化酶(SOD)、溶菌酶(LSZ)活力等非特异性免疫相关指标。同法等量注射0.7%灭菌生理盐水作为对照。此外,通过攻毒试验测定鱼诺卡氏菌WPG对感染鱼诺卡氏菌乌鳢的免疫保护效应。结果表明:与对照组相比,试验组红细胞和白细胞PI及血清ACH50在注射后第1天就显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),并分别在注射后第2天、第2天和第1天达到峰值,峰值分别为2.45%、3.64%和306.67 unit/mL。试验组血清中LSZ和AKP活力分别从注射后第3天和第4天开始显著或极显著高于对照组(P<0.05或P<0.01),而血清中ACP和SOD活力则在注射后第1～7天均显著或极显著高于对照组(P<0.05或P<0.01)。注射鱼诺卡氏菌WPG后,黏液、肝脏、头肾中ACP活力均有升高现象,达峰值时间分别为第2天、第4天、第7天;黏液和头肾中AKP活力在各时间点均无显著变化(P>0.05),肝脏中AKP活力仅在第3天、第4天出现显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01);肝脏和头肾中SOD活力在各时间点均无显著变化(P>0.05),而黏液中SOD活力在各时间点均显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01);黏液和肝脏中LSZ活力在第1天就显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),在第2天均达峰值,而头肾LSZ活力呈现逐渐升高再降低的变化趋势,仅在第5天表现出显著升高(P<0.05)。鱼诺卡氏菌攻毒试验结果显示,鱼诺卡氏菌WPG腹腔注射免疫7、21、35 d后对乌鳢的保护率分别为35%、55%、60%。以上结果说明,鱼诺卡氏菌WPG对乌鳢血细胞PI、血清ACH50及组织中ACP、AKP、SOD、LSZ活力具有明显的调节作用,但调节作用的强弱存在组织差异性;鱼诺卡氏菌WPG腹腔注射免疫21 d以上对乌鳢诺卡氏菌病有明显的保护作用。     

复方中草药添加剂对刺参免疫酶活性的影响

将6种中草药及维生素C配伍后混合粉碎,按1%、2%、3%和4%的比例添加于基础饲料中,连续饲喂刺参24 d,以基础饲料组为对照。于投喂后第7、10、14、18、24天测内脏组织的一氧化氮合酶(NOS)、碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、超氧化物歧化酶(SOD)的活力。结果表明:投喂期内,随时间的延长,各试验组免疫酶活力均呈先升高后降低的趋势。各试验组NOS、SOD活性在投喂后第10、14、18、24天均显著高于对照组(P<0.05);各试验组AKP、ACP活性在投喂后第10、14、18天均显著高于对照组(P<0.05)。结合添加量及饲喂时间综合考虑,饲料中添加2%～3%中草药复方添加剂,投喂14～18 d可使刺参免疫相关酶的活力得到较大提高。     

海藻酸钠对中华绒螯蟹免疫功能及抗病力的影响

以每千克体重10、30和90mg的剂量对中华绒螯蟹(Eriocheirsinensis)体腔(即在第3或第4步足基节膜处)注射海藻酸钠,对照组注射等量的0.85%生理盐水,在注射开始之前(第0d)和注射后的第1、3、5、8d采集血淋巴液,测定中华绒螯蟹的血细胞总量(THC)、不同血细胞数量(DHC)、吞噬活性、呼吸暴发(超氧阴离子的释放)、酚氧化酶(PO)及溶菌酶(LSZ)活性;在注射海藻酸钠后第3d,按每千克体重1.2×107cfu的剂量,体腔注射接种中华绒螯蟹致病性嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophi-la)CL99920菌株,记录接种7d后中华绒螯蟹的累积死亡率。结果显示,3个试验组的THC、大颗粒细胞(GC)数量、血细胞吞噬活性、呼吸暴发活性、PO活性和LSZ活性均显著地高于对照组(P<0.05);30mg/kg剂量组的透明细胞(HC)和小颗粒细胞(SGC)数量与对照组也有显著差异(P<0.05);海藻酸钠处理组的蟹对嗜水气单胞菌的抵抗力明显增强。因此,体腔注射适量的海藻酸钠可增强中华绒螯蟹的免疫力和抗病力。