运用PCR-DGGE分析比较瘤胃中不同饲料固相粘附微生物区系

通过研究奶牛瘤胃中苜蓿、青贮玉米和羊草3种饲料固相粘附微生物菌群结构,分析比较附着于不同粗饲料微生物区系的差异。选择3头健康且体质量相近的装有永久性瘤胃瘘管的中国荷斯坦奶牛,将苜蓿、青贮玉米和羊草分别装入尼龙袋,在瘤胃中孵育24h后取出,PBS洗脱获得固相粘附微生物,提取总DNA,采用变性梯度凝胶电泳技术(DGGE)分析群落结构,选取清晰条带测序后构建系统发育树。不同样品的DGGE图谱条带的数目和条带颜色深浅有一定差异;苜蓿与青贮玉米和羊草间相比相似性较低,青贮玉米与羊草间的相似性较高;3种饲料及瘤胃内容物固相粘附微生物的Simpson多样性指数差异显著(P0.05),Shannon-Wiener多样性指数差异不显著(P0.05);3种饲料固相粘附微生物条带近源种分别归属Butyrivibrio sp.、Fibrobacter sp.、Prevotella sp.、Succiniclasticum sp.、Pseudobutyrivibrio sp.5个属。3种饲料固相粘附微生物的种群构成存在差异。     

青贮发酵对玉米秸秆品质及菌群构成的影响

本研究旨在探讨青贮发酵对玉米秸秆感官指标、发酵品质、营养成分以及门、纲、目、科和属5个水平细菌群落构成及丰度的影响。将去穗后仍青绿的蜡熟期玉米秸秆切短揉搓至1~2 cm,将水分调节至65%~70%后,取青贮前样品(3个重复)和青贮后样品(3个重复)使用聚乙烯袋真空包装,室温贮藏45 d后开启取样,运用实验室检测手段及Mi Seq高通量测序技术分析青贮前后玉米秸秆品质及菌群结构的变化。结果表明:1)青贮发酵45 d后的玉米秸秆青贮饲料呈黄绿色,质地较好,呈酸香味。青贮发酵作用能够使玉米秸秆p H迅速降低(P0.05),乳酸含量显著增加(P0.05),中性洗涤纤维(NDF)及酸性洗涤纤维(ADF)含量有下降趋势(P0.05)。2)玉米秸秆经过青贮发酵后,变形菌门(Proteobacteria)、γ-变形菌纲(Gammaproteobacteria)、肠杆菌目(Enterobacteriales)、肠杆菌科(Enterobacteriaceae)和魏斯氏菌属(Weissella)菌群数量显著降低(P0.05);青贮发酵能够显著增加厚壁菌门(Firmicutes)、芽孢杆菌纲(Bacilli)、乳杆菌目(Lactobacillales)、乳杆菌科(Lactobacillaceae)、片球菌属(Pediococcus)和乳杆菌属(Lactobacillus)菌群数量(P0.05)。综上,青贮发酵改善玉米秸秆感官指标、发酵品质以及营养成分的同时,可以有效降低有害细菌的数量,增加有益菌的数量,从而可以降低致病菌对家畜健康存在的潜在风险。通过实验室检测手段及Miseq高通量测序技术相结合,能够在分析青贮品质的同时,提供青贮前后整个菌落构成及丰度变化的信息,进而为发酵过程的调控提供依据。     

五个地区玉米青贮菌群多样性的研究

旨在研究我国5个地区全株玉米青贮中微生物种类的组成差异。试验对黑龙江、新疆、贵州、山西、山东5个地区牧场的全株青贮玉米的微生物多样性进行比较。分别用传统分离培养法和高通量测序法对全株玉米青贮乳酸菌、酵母菌、霉菌进行检测。结果表明,新疆地区乳杆菌为优势菌群,真菌种类较少;黑龙江地区醋酸菌为优势菌群,乳杆菌相对较少,真菌种类也较少。贵州牧场真菌种类最多,青霉菌为优势菌群。     

不同乳酸菌组合对苜蓿青贮细菌群落结构的影响

为探讨不同乳酸菌互作对苜蓿（Medicago sativa）青贮细菌群落结构的影响，以2种植物乳杆菌、乳酸片球菌、戊糖片球菌及凝结芽孢杆菌形成的6种乳酸菌组合按1.5 mL·kg^-1的添加量制作苜蓿青贮，以等量蒸馏水替代添加剂作为对照，45 d后运用高通量测序分析细菌群落结构。结果表明，各苜蓿青贮的优势乳酸菌群均为厚壁菌门（Firmicates）的乳杆菌属（Lactobacillus）和片球菌属（Pediococcus），二者相对丰度之和为65.4%~79.0%，其中含植物乳杆菌处理高于对照和含凝结芽孢杆菌处理；与对照相比，乳酸菌组合处理提高了菌群Chao1和ACE指数但降低了Simpson和Shannon指数；6个乳酸菌组合处理中，含凝结芽孢杆菌处理组与对照相似性较高，对苜蓿青贮细菌群落影响较小；相关分析表明，苜蓿青贮菌群结构和多样性可较好地解释其营养品质的变化。综上，乳酸菌组合在一定程度上改善了苜蓿青贮的细菌群落结构，其中含植物乳杆菌的组合效果较好。     

杂交构树青贮对务川白山羊瘤胃微生物区系的影响

为研究杂交构树青贮渊Broussonetia papyrifera silage冤对务川白山羊瘤胃微生物群落结构的影响袁选择64只健康务川白山羊袁随机分为4 组袁每组16 只渊公母各半袁分开饲养冤袁粗饲料分别饲喂100%青贮玉米渊CS 组冤尧20%杂交构树青贮+80%青贮玉米渊LBP 组冤尧50%杂交构树青贮+50%青贮玉米渊MBP 组冤尧100%杂交构树青贮渊BPS 组冤袁预试期15 d袁试验期172 d袁试验结束每组随机抽取6 只山羊渊公母各3 只冤袁经口腔采集瘤胃液袁采用16S rDNA 测序分析瘤胃液菌群组成遥结果显示袁16SrDNA 基因测序共获得6861 个操作分类单元渊OTUs冤袁属于20 个门230 个属遥BPS 组的OTUs尧Observed_species 指数尧Shannon 指数和Chao1 指数分别比CS 组高20.99%尧27.23%尧9.73%和20.83%渊P 约0.05冤曰门水平上袁拟杆菌门和厚壁菌门是各组的优势菌群袁BPS 组拟杆菌门相对丰度分别比LBP 组和MBP 组低15.89%和20.17%渊P 约0.05冤曰属水平上的优势菌群为普雷沃菌属尧未分类拟杆菌属尧未分类瘤胃球菌科曰BPS 组普雷沃菌属的相对丰度分别比CS 组和MBP 组低39.86%和39.25%渊P 约0.05冤遥综上所述袁添加较高比例杂交构树青贮可显著提高务川白山羊瘤胃菌群丰富度袁添加50%杂交构树青贮时瘤胃拟杆菌门和普雷沃菌属相对丰度较高袁有利于促进瘤胃对蛋白质尧淀粉和植物纤维的降解     

添加不同生物益生菌对木薯块根青贮品质和微生物菌群多样性的影响

以华南9号鲜木薯(Manihot esculenta)块根为材料,设4个处理组,试验组分别添加微生物发酵菌剂(C1)、高效复合菌酶制剂(C2)和生物饲料发酵剂(C3),对照组(CK)添加等体积蒸馏水,充分混合后密闭发酵30?d开封测定其营养成分、发酵品质及微生物群落结构,旨在探究添加不同生物益生菌对木薯块根的青贮品质和微生物多样性的影响.结果表明,添加生物益生菌后,各处理组的干物质和乳酸含量显著提升(P??0.05);C2组粗蛋白含量显著低于CK组(P??C1?>?C2.     

籽粒苋与青贮玉米混贮品质及微生物特性研究

以籽粒苋和全株玉米为原料,按不同比例10∶0(T₁)、7∶3(T₂)、5∶5(T₃)、3∶7(T₄)、0∶10(T₅)混合青贮, 60 d后,检测青贮材料的发酵品质以及青贮前、后营养成分、微生物种类、数量变化,并分析乳酸菌多样性,以明确添加玉米对改善籽粒苋青贮发酵品质和微生物特性的作用,为籽粒苋青贮饲料的开发利用提供有效途径。结果表明,籽粒苋单独青贮品质不佳,通过添加玉米可显著降低青贮材料pH和氨态氮/总氮的值,提高干物质和总有机酸含量,当玉米添加比例超过50%时,青贮品质良好。在青贮发酵乳酸菌群演替过程中优势菌群的种类和数量决定青贮饲料的乳酸/乙酸,是影响发酵品质的主要因素之一。乳酸球菌中的肠球菌、乳球菌和类肠膜明串珠菌产酸能力强,是青贮发酵的启动菌株,乳杆菌则是青贮稳定期的主要菌群。     

乳酸菌对苜蓿青贮发酵品质和细菌菌群的影响

为探究乳酸菌作为青贮添加剂对苜蓿青贮发酵品质和细菌菌群的影响,试验选取萎焉苜蓿为原料分为三个处理组,分别为无添加剂对照组(CK组)和分别添加1×106cfu/g乳酸菌YX(LPI组)、乳酸菌ZZU A341(LPA组)。结果表明:LPI或LPA组乳酸积累量显著高于CK组(P<0.05),pH和氨态氮含量显著低于CK组(P<0.05),且pH均降至5.00以下;CK组或LPI组的优势菌属为Pediococcus属(56.40%、98.63%),LPA组为Lactobacillus属(98.88%)。综上所述,乳酸菌作为青贮添加剂可通过调控青贮环境中细菌菌群的组成或相对丰度,从而提高青贮苜蓿的发酵品质。     

含1,2-丙二醇青贮玉米微生物菌群分析

为了研究袋式青贮玉米与窖式青贮玉米微生物群集的差异,同时分析与发酵产物中1,2-丙二醇相关的微生物,试验采用全株玉米进行袋式青贮以及窖式青贮。袋式青贮在3,7,14,28,56,120天开封,采样;窖式青贮选择3个500 t级别的半地上式青贮窖,贮藏120 d后每个青贮窖选择8个采样点进行采样。使用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)方法检测微生物区系并进行聚类分析。结果表明:袋式青贮玉米发酵过程中微生物区系无变化,在其中检测到类肠膜魏斯氏菌(W.paramesenteroides)、魏斯氏菌(W.confusa)、肺炎克雷伯菌(K.pneumoniae)、植物乳杆菌(L.plantarum)、短乳杆菌(L.brevis)和乳酸乳杆菌(L.lactis)。青贮窖不同位置微生物菌群具有一定差异,耐酸乳杆菌(L.acetotolerans)、植物乳杆菌(L.plantarum)和布氏乳杆菌(L.buchneri)为3个青贮窖共通菌,同时还检测到了屎肠球菌(E.faecium)、巴氏醋杆菌(A.pasteurianus)、罗伊氏乳杆菌(L.reuteri)、面包乳杆菌(L.panis)、嗜麦芽窄食单胞菌(S.maltophilia)和类肠膜魏斯氏菌(W.Paramesenteroides)。说明袋式青贮微生物菌群与窖式青贮微生物菌群具有一定差异,窖式青贮中检测到了一些在袋式青贮中不常见的乳酸菌;青贮窖中1,2-丙二醇的生成可能与耐酸乳杆菌(L.acetotolerans)、巴氏醋杆菌(A.pasteurianus)、罗伊氏乳杆菌(L.reuteri)、面包乳杆菌(L.panis)和布氏乳杆菌(L.buchneri)有关。     

西藏地区全株玉米与紫花苜蓿混合青贮效果研究

试验旨在探究西藏地区全株玉米和紫花苜蓿不同混合比例青贮对饲料营养成分、发酵品质及微生物多样性的影响。试验设置6组，A组、B组、C组为正常混合组，玉米和苜蓿的比例分别为2∶1、1∶1、1∶2;FA组、FB组、FC组为混合青贮组，玉米和苜蓿的比例分别为2∶1、1∶1、1∶2，每个处理3个重复，青贮60 d。结果表明，随着苜蓿比例提高，青贮饲料中粗蛋白质、粗纤维、粗灰分、氨态氮含量明显提高，粗脂肪含量明显降低。试验组中共检出22个门、46个纲、115个目、224个科、643个属的细菌，在门水平上，青贮前后的优势菌群分别为蓝藻菌门、厚壁菌门；在纲水平上，青贮前后优势菌群分别为氧发光菌纲、芽孢杆菌纲；在目水平上，青贮前后的优势菌分别为叶绿体菌目、乳杆菌目；在科水平上，青贮前后的优势菌分别为叶绿体菌科、乳杆菌科；在属水平上，青贮前后的优势菌属分别为叶绿体菌属、乳杆菌属。研究表明，全株玉米和紫花苜蓿的混合比例为1∶1时青贮饲料品质较好。     

Comparison of in vitro and in situ methods in evaluation of forage digestibility in ruminants

The objective of this study was to compare the application of different in vitro and in situ methods in empirical and mechanistic predictions of in vivo OM digestibility (OMD) and their associations to near-infrared reflectance spectroscopy spectra for a variety of forages. Apparent in vivo OMD of silages made from alfalfa (n = 2), corn (n = 9), corn stover (n = 2), grass (n = 11), whole crops of wheat and barley (n = 8) and red clover (n = 7), and fresh alfalfa (n = 1), grass hays (n = 5), and wheat straws (n = 5) had previously been determined in sheep. Concentrations of indigestible NDF (iNDF) in all forage samples were determined by a 288-h ruminal in situ incubation. Gas production of isolated forage NDF was measured by in vitro incubations for 72 h. In vitro pepsin-cellulase OM solubility (OMS) of the forages was determined by a 2-step gravimetric digestion method. Samples were also subjected to a 2-step determination of in vitro OMD based on buffered rumen fluid and pepsin. Further, rumen fluid digestible OM was determined from a single 96-h incubation at 38°C. Digestibility of OM from the in situ and the in vitro incubations was calculated according to published empirical equations, which were either forage specific or general (1 equation for all forages) within method. Indigestible NDF was also used in a mechanistic model to predict OMD. Predictions of OMD were evaluated by residual analysis using the GLM procedure in SAS. In vitro OMS in a general prediction equation of OMD did not display a significant forage-type effect on the residuals (observed - predicted OMD; P = 0.10). Predictions of OMD within forage types were consistent between iNDF and the 2-step in vitro method based on rumen fluid. Root mean square error of OMD was least (0.032) when the prediction was based on a general forage equation of OMS. However, regenerating a simple regression for iNDF by omitting alfalfa and wheat straw reduced the root mean square error of OMD to 0.025. Indigestible NDF in a general forage equation predicted OMD without any bias (P ≥ 0.16), and root mean square error of prediction was smallest among all methods when alfalfa and wheat straw samples were excluded. Our study suggests that compared with the in vitro laboratory methods, iNDF used in forage-specific equations will improve overall predictions of forage in vivo OMD. The in vitro and in situ methods performed equally well in calibrations of iNDF or OMD by near-infrared reflectance spectroscopy.     

大庆市羊东毕吸虫病流行病学调查

对大庆市羊东毕吸虫病的流行病学进行了调查研究。结果表明，大庆有3种东毕吸虫，即程氏东毕吸虫（O.cheni)、土耳其斯坦东毕吸虫（O.turkestanica)和土耳斯坦东毕吸虫结节变种（O.turkestanican var.thuberculata)；中间宿主螺类有1种，即卵萝卜螺；东毕吸虫病在大庆分布很广，所调查的4区2县均有发生，羊东毕吸虫平均感染率分别为50．33％，平均死亡率为21．12％，大庆羊急性病例发病时间为8月上旬至10月下旬，慢性病例为11月上旬至翌年2月中旬。     

ELISA试验在防制猪伪狂犬病中的应用

猪伪狂犬病是由伪狂病病毒(Pseudorabies virus PRV)引起的急性传染病。其特征是成年猪常为隐性感染，可有流产、死胎、呼吸系统症状，新生仔猪除神经症状外还可侵害消化系统，并伴大批死亡。本病已经给全世界的养猪业造成严重的损失，我国许多地区已报道该病。为进一步探讨该病的控制、净化措施，我们对12个养猪场共856分血清采用美国嗍公司的ELISA试剂盒进行了抗体检测。     

Use of cyclocryotherapy in management of glaucoma in dogs

In 5 cases of glaucoma (2 from trauma, 2 from narrowed drainage angles, 1 secondary to lens extraction), cyclocryotherapy was used to control intraocular pressure. In all cases the intraocular pressure decreased, with the usual result being a cosmetic and painless but blind eye.     

Estimate of economic impact of fowl cholera in turkeys in Georgia in 1986

Information gathered from cases of fowl cholera (FC) in commercial turkey flocks through case records, flock records, and telephone and mail surveys was used to estimate disease costs. The cost to the Georgia commercial turkey industry in 1986 from preventive measures, treatment of outbreaks, and production losses from the disease was estimated at $634,545. The cost of FC per kg of live production was estimated to be $0.015.     

中国圈养野生动物疫苗使用调查

2005年对中国动物园协会单位中的18家动物园饲养野生动物疫苗免疫情况进行调查。受调查动物园在野生动物疫苗使用和动物种类方面具有一定的代表性。调查结果显示动物园动物现共使用18类36种疫苗,预防31种疫病。其中哺乳动物使用14类24种疫苗,预防24种疫病;禽类使用4类12种疫苗,预防7种疫病。使用范围最广的有禽流感、犬瘟热疫苗等、新城疫疫苗、猫瘟热疫苗等。共有24目58科动物接种疫苗,其中食肉动物类1目8科,食草动物类3目9科,杂食动物类2目3科,禽类18目38科。研究结果提示应加强动物园之间疫病信息交流、防疫资源的利用、疫病监测和研究,加大对动物园动物疫病的研究投入,逐步建立动物园动物统一的防疫规程。     

2016年春季山西部分种猪场乳猪暴发流行性腹泻的调查

2016年春季山西部分种猪场乳猪暴发腹泻,通过在山西太原、祁县、介休、昔阳、临汾、翼城、离石、朔州8个地市的10个临床表现腹泻症状的规模化种猪场进行调研,对乳猪病死情况进行了统计分析,并采集39份病死猪的小肠内容物进行猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)检测;同时采集109份血清和85份乳汁进行PEDV IgA抗体检测。结果显示:1—3月份10个猪场共有8 326头乳猪发生腹泻,死亡6 266头,死亡率为75.26%;病原检测PEDV阳性率为64.1%,TGEV阳性率为2.56%;血清中PEDV IgA抗体的阳性率为32.11%,乳汁中PEDV IgA抗体的阳性率为96.47%。病原检测结果表明,2016年春季山西省规模化种猪场乳猪腹泻的主要病原为PEDV,乳汁中PEDV IgA抗体水平与PEDV疫苗免疫效果或野毒感染呈正相关。