绵羊慢病毒北疆株自然感染新疆美利奴羊的研究

选１２只自然感染绵羊慢病毒的成年新疆美利奴羊，用琼脂凝胶免疫扩散试验连续检查血清中ＯｖＬＶ沉淀抗体，发现抗体应答的类型发生转换，即只出现对病毒核心蛋白抗原的抗体，出现对病毒包膜糖蛋白的抗体，同时出现对ｐ２５和ｐｇ１３５二者的抗体互相转换。从试验羊的多个器官中分离到３株ＯｖＬＶ，分别命名为ＯｖＬＶ ＮＸＪ－５５，ＮＸＪ－７３和ＮＸＪ－０４１８株，其ＴＣＩＤ５０／ｍＬ值诊次为１×１０＾－５．６，１×１     

狂犬病病毒糖蛋白基因在原核细胞中的表达

将狂犬病病毒糖蛋白（ＲＶｇｐ）基因ＢｇｌⅡ片段（１６７５ｂｐ）分别正向插入到原核高效表达载体ｐＥＴ－１７ｂ和ｐＥＴ－１７ｂ２（用ＳａｃⅠ－ＮｄｅⅠ缺失掉ｐＥＴ－１７ｂ６０ｂｐ含起始密码子ＡＴＧ小片段）的ＢａｍＨⅠ切点，构建重组质粒ｐＥＴ－１７ｂＲＶｇｐ和ｐＥＴ－１７ｂ２ＲＶｇｐ。将其分别转化表达受体菌Ｅ．ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）和Ｅ，ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）ｐｌｙｓＳ．ＩＰＴＧ诱导表达，菌体经超声波裂解处理后ＳＤＳ－ｐＡＧＥ，染色，在分子量约６００００处可见重组质粒表达的较宽的蛋白带，以抗ＲＶｇｐＭｃＡｂ进行Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ检测，表明该表达蛋白为ＲＶｇｐ。通过扫描显示，表达的ＲＶｇｐ占菌体总蛋白的１０％～１４％，其中ｐＥＴ－１７ｂ２ＲＶｇｐ在Ｅ。ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）中的表达量最高。     

绵羊进行性肺炎病毒与山羊关节炎一脑炎病毒的血清学交叉反应的研究

本实验用琼脂凝胶免疫扩散试验（ＡＧＩＤＴ）和免疫印迹试验（ＩＢＡ）对实验感染绵羊进行性肺炎病毒（ＯＰＰＶ）的山羊血清与山羊关节炎—脑炎病毒（ＣＡＥＶ）抗原以及实验感染ＣＡＥＶ的绵羊血清与ＯＰＰＶ抗原的交叉反应进行了研究。４只接种ＯＰＰＶ的山羊中有一只山羊的血清可与ＣＡＥＶ琼扩抗原发生交叉反应,并在免疫印迹试验中可识别ＣＡＥＶ的ｇｐ４４、ｐ３５和ｐ２８。２只接种ＣＡＥＶ的绵羊中有一只绵羊的血清可与ＯＰＰＶ琼扩抗原发生交叉反应,并在免疫印迹试验中可识别ＯＰＰＶ的ｇｐ４４和ｐ２８。以上的交叉反应结果表明ＯＰＰＶ与ＣＡＥＶ的抗原之间具有密切的相关性,这对于ＯＰＰＶ通过山羊和ＣＡＥＶ通过绵羊的传代研究是非常重要的,并对将来的免疫预防策略具有重要的指导意义。     

山羊实验感染绵羊进行性肺炎病毒的抗体应答反应

用琼脂凝胶免疫扩散试验（ＡＧＩＤＴ）和免疫印迹试验（ＩＢＡ）对山羊实验感染绵羊进行性肺炎病毒（ＯＰＰＶ）的抗体应答反应进行了研究。结果,用ＡＧＩＤＴ和ＩＢＡ都可在接毒山羊的血清中检测到ＯＰＰＶ的抗体。ＡＧＩＤＴ最早于接毒后１５ｄ检测到抗体;ＩＢＡ最早于接毒后４ｄ检测到抗ＯＰＰＶ的ｇｐ４４和ｐ２８的抗体,以后又陆续检测到抗ｐ９４、ｐ１４和ｇｐ１２５的抗体。由此看出,ＩＢＡ比ＡＧＩＤＴ更为敏感。本研究结果表明,ＯＰ－ＰＶ可在山羊体内诱生较强的体液免疫应答反应,因此用ＯＰＰＶ通过山羊体传代的方法可能会得到具有良好抗原性的ＯＰＰＶ毒株。     

绵羊副结核病定性诊断

通过流行病调查、皮内变态反应试验、补体结合试验、琼脂免疫扩散试验、病原检查及病理检查等综合检验,首次在省內某羊场作出绵羊副结核病的定性诊断。相隔32周,对该羊场同一发病群进行了两次检疫,第一次在1998头绵羊中,检出皮试阳性羊188头;血清学抽检432头,其中补反阳性19头、琼扩阳性45头。第二次在1606头绵羊中,检出皮试阳性羊32头;血清学抽检288头,其中补反阳性1头,琼扩阳性5头。     

应用灭活疫苗防制牛白血病病毒感染

检测了用感染牛白血病病毒（ＢＬＶ）的ＬＫ１５细胞系（ＬＫ１５疫苗）或蝙蝠肺细胞系（Ｂａｔ疫苗）制备的苗对牛的保护作用。１２头牛间隔４周免疫接种２次，然后于第２次接苗后４周攻毒，用ＬＫ１５疫苗接种的９头牛产生了ＢＬＶ特异性糖蛋白（ｇｐ）抗体，其琼扩试验效价为１：１６～１：６４。用１００μ１（含７０～１００个合胞体）ＢＬＶ持续感染奶牛血液攻击的４头牛均获得保护。其余５头牛用５００μ１感染牛血液攻毒，仅     

山羊关节炎─脑炎的研究 3．CAEV89－GB1026毒株的人工感染试验

用ＣＡＥＶ８９─ＧＢ１０２６培养物的澄清液及其超速离心的病毒悬液，经关节—静脉、关节、脑内和口服途径接种土种山羊１９只。以琼扩检测其病毒抗体。感染羊，分别于接种后的第３、５、６和１２周发生血清阳转。４只羊的抗体持续２３周后宰杀，其他羊继续监测。感染羊血清与含犊牛血清的细胞培养液不发生沉淀反应，而与美国ＣＡＥ、国产ＯＰＰ和自制ＣＡＥ琼扩抗原发生沉淀反应。部分羊于接种后５个月出现关节肿大。被宰杀感染羊的关节滑膜、肺脏、乳腹等出现ＣＡＥ的特征性病理组织学变化，而对照羊则未见血清学和组织学变化。感染羊的关节滑液接种滑膜细胞单层，其培养液制成琼扩抗原，与感染羊血清又发生了特异性沉淀反应。     

小反刍动物瘟疫的母体免疫

为了测定小反刍动物瘟疫（ＰＰＲ）病毒母体免疫的持续时间以及妊娠对这种持续时间的影响，研究人员用抗－ＰＰＲ疫苗给１１１９只母羊（１７．５％绵羊，８２．５％山羊）接种。血清学检测结果表明，未接种羊ＰＰＲ病毒抗体总流行率为７８．４％，生于接种母羊的幼龄羊中，在０－３０日龄８８．５％证实有抗－ＰＰＲ抗体，１５０天时有４０．５％，１８０天时有７．７％。０和２个月之间接种的母羊以及５个月时接种的母羊，母体免疫的持续时间没有差异。但是，在５个月时接种的母羊产下的３－４个月龄的幼龄羊，只有６５％仍有ＰＰＲ病毒抗…     

抗鸡传染性法氏囊病病毒型特异性单克隆抗体的临床治疗试验

通过琼扩试验（ＡＧＰ）和病毒中和试验（ＶＮ）检测ＩＢＤＶ单抗Ｍ１２和Ｄ２９１，其中和效价分别为１：１２＾１４×１００和１：２＾１９×１００，琼扩抗体价分别为１：１２８０和１：１６０，常规免疫血清分别为１：２＾１０×１０（ＶＮ）和１：３２（ＡＧＰ）。将Ｍ１２和Ｄ２９１应用于临床治疗，Ｍ１２（２００只／ｍｌ）保护率为９３％；Ｄ２９１（４５０只／ｍｌ）为９４％；血清（４只／ｍｌ）为９２％，对照组成活率为     

绵羊进行性肺炎病毒对山羊的感染试验

绵羊进行性肺炎病毒（ＯＰＰＶ）感染山羊后可生产琼扩抗体．用ＯＰＰ抗体阳性山羊的肺脏、肝脏分离物在绵羊胎肺细胞上连续培养传代，可出现以多核巨细胞为特征的细胞病变．用其培养物制备的琼扩抗原与抗ＯＰＰＶ标准阳性血清呈阳性反应，与抗马传贫病毒、牛白血病病毒标准阳性血清无交叉反应．电镜观察。病毒粒子大多散在细胞外及胞浆空胞中，以出芽方式增殖，病毒呈球多，直径８０～１２０ｎｍ．用ＯＰＰＶ感染山羊的肝脏分离培养物复归山羊，２个月后４只山羊琼扩抗体全部阳转．