冷冻保存对公猪精子功能的影响

试验旨在探究公猪精液冷冻保存对其精子功能的影响。取长白猪的鲜精和优质冻精,用精子分析仪检测精子的运动能力,台盼蓝染色检测精子活率,体外受精（IVF）试验检测卵裂率与囊胚率,采用不同功能检测试剂盒检测冻精和鲜精的顶体完整率、线粒体膜通道孔（MPTP）活性、线粒体膜电位（MMP）、线粒体活性、线粒体氧化应激活性氧（ROS）以及精子DNA完整性,实时荧光定量PCR检测弱精子症相关蛋白基因SMCP、TEKT3、DNAH1、TCTE3的表达。结果表明,与猪鲜精相比,猪冻精的活率及活力均显著降低（P<0.05）,冻精的顶体完整率也明显下降（P<0.05）;冻精的卵裂率和囊胚率显著低于鲜精（P<0.05）;精子线粒体功能分析结果显示,冻精的MPTP相对荧光单位值（RFU）、线粒体膜电位荧光比率以及线粒体活性光密度（OD）值均显著低于鲜精（P<0.05）;精子线粒体ROS检测发现,冻精的RFU值显著高于鲜精（P<0.05）;精子DNA完整性检测结果显示,冻精拖尾率显著高于鲜精（P<0.05）;而弱精子症相关蛋白基因的表达与鲜精相比,差异不显著（P>0.05）。综上所述,冷冻导致猪精子活率、活力、线粒体功能、DNA完整性下降,最终使得冷冻精液精子的受精能力降低。     

H2S暴露对保育猪氧化还原状态及硫化氢代谢的影响

本试验旨在研究硫化氢（H₂S）暴露对保育猪氧化还原状态及内源性H₂S代谢的影响。试验选取12头体况健康、体重相近（（11.61±1.51） kg）的35日龄大白猪,随机分为2组并分配到2个环控舱内,公母各半,每组6头猪。试验组环控舱内H₂S浓度控制为30 mg·m^-3,对照组环控舱内H₂S浓度控制为0 mg·m^-3,试验期28 d。试验结束后采集血清和肝组织样品,检测氧化还原和H₂S代谢相关指标。结果显示,与对照组相比：1）血清中ROS含量极显著增加（P<0.01）,MDA含量显著增加（P<0.05）;抗氧化酶T-SOD活性显著降低（P<0.05）,CAT和GPX活性极显著降低（P<0.01）;非酶抗氧化物GSH和GSSG含量无显著变化（P>0.05）。2）肝中T-SOD和GPX活性极显著升高（P<0.01）,·OH清除能力显著提高（P<0.05）;ROS、H₂O₂、PC、MDA、GSH、GSSG含量无显著差异（P>0.05）。3）肝中Keap1的mRNA表达量显著下调（P<0.05）,Nrf2的mRNA表达量显著上调（P<0.05）;抗氧化相关基因（SOD2、GPX1、GPX2、GPX4和GSR）的mRNA表达量显著上调（P<0.05）。4）血清和肝中H₂S含量显著降低（P<0.05）;肝内源H₂S合成酶CSE和CBS的mRNA表达量显著下调（P<0.05）,3-MST的mRNA表达量无显著变化（P>0.05）;肝H₂S分解代谢酶SQR和SUOX的mRNA表达量下调,但差异不显著（P>0.05）。结果表明,30 mg·m^-3 H₂S暴露导致保育猪血清抗氧化系统受损,而肝中Nrf2/Keap1信号通路的激活使肝免受氧化损伤;此外,H₂S暴露抑制了保育猪内源性H₂S的合成代谢。     

莱菔硫烷对镉中毒雄性小鼠生殖机能保护作用的研究

本试验旨在研究莱菔硫烷(SFN)对染镉雄性小鼠生殖机能的保护作用.选择健康的清洁级雄性昆明系小鼠40只,随机分成4组,分别为对照组(H₂O)、镉组(2.3 mg/kg CdCl₂)、莱菔硫烷组(10 mg/kg SFN)、镉+莱菔硫烷组(10 mg/kg SFN+2.3 mg/kg CdCl₂),连续给药10 d,于最后一次给药2 d后脱颈处死,检测小鼠睾丸组织病理学变化、小鼠睾丸及附睾的脏器系数、精液品质及血清睾酮浓度.同时检测睾丸组织内丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量及总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性的变化.结果表明,与对照组相比,镉组小鼠的睾丸组织发生病理学损伤,睾丸及附睾的脏器系数、精液品质及血清睾酮浓度均极显著降低(P<0.01),睾丸组织T-SOD活性、GSH含量也极显著降低(P<0.01),MDA含量极显著提高(P<0.01);莱菔硫烷组T-SOD活性和GSH含量显著升高(P<0.05),MDA含量与对照组相比差异不显著(P>0.05).与镉组相比,镉+莱菔硫烷组小鼠的精子活率、精子总数极显著增加(P<0.01),睾丸与附睾的脏器系数显著增加(P<0.05),小鼠睾丸组织GSH含量、T-SOD活性极显著提高(P<0.01),MDA含量极显著降低(P<0.01).以上结果指出莱菔硫烷对镉中毒雄性小鼠的生殖机能具有保护作用.     

干扰HSD17B4基因对水牛乳腺上皮细胞乳脂和酪蛋白的影响

通过将小干扰-17β-羟基固醇脱氢酶Ⅳ（si-HSD17B4）基因转染水牛乳腺上皮细胞,检测酪蛋白、甘油三酯含量及脂肪酸相关基因的表达变化,从而揭示干扰HSD17B4基因对水牛乳腺上皮细胞中乳脂和酪蛋白的影响。采用实时荧光定量PCR检测HSD17B4 mRNA在水牛各个组织中的相对表达量。合成3条水牛HSD17B4小干扰RNA （siRNA）和1条对照si-HSD17B4-nc （si-nc）,并筛选干扰效果最佳的片段和时间。si-HSD17B4转染水牛乳腺上皮细胞后,通过酪蛋白试剂盒检测酪蛋白的表达情况,通过甘油三酯测定和油红O染色检测甘油三酯含量,通过实时荧光定量PCR检测干扰HSD17B4基因对甘油三酯、脂肪酸合成以及氧化相关基因表达的影响。结果表明,HSD17B4基因在水牛心脏和卵巢中相对高表达,且显著高于其他组织（P<0.05）。3条HSD17B4 siRNA片段均能有效地抑制HSD17B4基因的表达,其中si-HSD17B4-1干扰效果最佳,HSD17B4 mRNA表达量极显著低于对照组（P<0.01）;最佳干扰时间为24 h。酪蛋白检测结果显示,干扰HSD17B4基因对水牛乳腺上皮细胞中酪蛋白合成无影响。甘油三酯测定结果显示,干扰HSD17B4基因后细胞中甘油三酯含量上升,差异显著（P<0.05）。油红O染色结果显示,干扰HSD17B4基因后细胞中的脂滴明显增多。实时荧光定量PCR检测结果显示,干扰HSD17B4基因会使FABP3、ACSL1、DGAT1、DGAT2、PLIN2、BTN1A1基因表达量上调,分别上调9.28（P<0.01）、1.36（P<0.05）、1.17（P<0.05）、1.83（P<0.01）、1.60（P<0.01）和2.17（P<0.01）倍;同时使PPARA、SREBP1C、SCD、ACSS2、ACACA、AGPAT6、LPIN1、XDH、ABCD1、ACOX2、EHHADH、SCP2基因表达量下降,分别下调至50.55%（P>0.05）、61.15%（P<0.01）、84.91%（P<0.01）、89.34%（P<0.01）、21.88%（P<0.01）、86.48%（P<0.01）、25.35%（P<0.01）、27.24%（P<0.01）、41.74%（P<0.01）、22.17%（P<0.01）、62.70%（P<0.01）和70.33%（P<0.01）。结果表明,HSD17B4基因在水牛组织中广泛表达;si-HSD17B4高效抑制HSD17B4基因在水牛乳腺上皮细胞中的表达,未检测到干扰HSD17B4基因对乳腺上皮细胞酪蛋白的影响,干扰HSD17B4基因上调了FABP3、ACSL1、DGAT1、DGAT2基因的表达,从而促进甘油三酯的合成,同时降低ABCD1、ACOX2、EHHADH、SCP2基因的表达,减少脂肪酸β-氧化。     

土曲霉对小鼠肝氧化损伤及铁死亡相关指标的影响

旨在探究土曲霉引起小鼠肝损伤的机制。将20只昆明小鼠随机分为对照组和试验组,试验组腹腔注射0.3 mL （5×10⁷ CFU·mL^-1）土曲霉MSF2菌株孢子悬液,试验周期为7 d。采集小鼠肝用丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）、谷胱甘肽过氧化酶（GSH-PX）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）试剂盒检测肝氧化损伤相关指标;铁检测试剂盒检测肝铁离子含量;制备肝石蜡切片,进行HE染色和普鲁士蓝染色,观察其病理变化及铁沉积;透射电镜观察肝细胞超微结构;qPCR检测肝铁死亡相关基因mRNA相对转录水平。结果表明：土曲霉可引起试验组小鼠肝MDA含量极显著升高（P<0.01）,GSH含量、GSH-PX活力和T-SOD活力极显著降低（P<0.01）,铁离子含量极显著升高（P<0.01）,肝细胞肿胀、坏死,炎性细胞浸润,肝细胞中可见蓝染的铁离子沉积,肝细胞线粒体萎缩、嵴减少和膜密度增加,转铁蛋白1（TFR1）、二价金属离子转运体1（DMT1）、铁蛋白重链1（FTH1）和电压依赖性阴离子通道3（VDAC3）基因mRNA相对转录水平显著升高（P<0.05）,过氧化物酶4（GPX4）和胱氨酸/谷氨酸转运受体11（SLC7A11）基因mRNA相对转录水平显著降低（P<0.05）。综上表明,土曲霉MSF2菌株致小鼠肝损伤的机制是铁死亡,为深入研究土曲霉的致病机制提供参考资料。     

聚乙烯吡咯烷酮对公猪精液冷冻的影响

试验旨在评价聚乙烯吡咯烷酮（polyvinylpyrrolidone,PVP）对公猪精液冷冻的影响。试验分为5组,分别为对照组（不添加PVP）和PVP处理组（在冷冻基础液中分别加入0.25%、0.50%、1.00%、2.00% PVP）。采用手握法采集松辽黑猪精液,用5种冷冻基础液稀释,在25 ℃平衡1 h,17 ℃平衡2 h,4 ℃平衡3 h后灌装于0.5 mL细管中,在液氮上方3 cm处熏蒸10 min,保存在液氮罐中30 d后进行检测。样本解冻后分别检测精子活力、质膜完整性、顶体完整性、线粒体活性、DNA完整性、过氧化氢酶（catalase,CAT）活性、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathioneperoxidase,GSH-Px）活性、活性氧簇（reactive oxygen species,ROS）水平及丙二醛（malondialdehyde,MDA）水平。结果显示,与对照组相比,冷冻基础液中添加0.50% PVP显著提高冻融后精子的活力、质膜完整性、顶体完整性、线粒体活性、CAT活性、SOD活性、GSH-Px活性（P<0.05）,显著降低精子ROS和MDA水平（P<0.05）;与对照组相比,添加PVP有利于提高DNA完整性,但差异不显著（P>0.05）。因此,猪精液冷冻基础液中添加PVP可改善冻融后精子质量,添加0.50%效果最佳。     

槲皮素对PEDV感染幼龄仔猪肠道形态、抗氧化功能及空肠脂质代谢基因表达的影响

【目的】 通过研究槲皮素对猪流行性腹泻病毒（PEDV）感染仔猪肠道形态、肠道抗氧化功能及空肠脂质代谢相关基因相对表达量的影响,旨在探讨槲皮素对PEDV感染仔猪肠道的保护作用。【方法】 选取18头健康的7日龄断奶仔猪,随机分为3组：对照组、PEDV组和槲皮素＋PEDV组,每组6个重复,每个重复1头猪。试验期8 d,于试验第0~7天,对槲皮素＋PEDV组仔猪每天口腔灌服10 mg/kg BW的槲皮素,其余组灌服等体积的人工奶。于试验第5天晚上给PEDV组和槲皮素＋PEDV组仔猪口腔灌服10^4.5TCID₅₀的PEDV,对照组仔猪灌服相同体积的PBS溶液。于试验第8天早上屠宰,取仔猪十二指肠、空肠、回肠及结肠组织样品进行检测。【结果】 与对照组相比,PEDV组仔猪空肠和回肠的绒毛高度以及绒毛高度与隐窝深度比值极显著降低（P<0.01）,空肠、回肠和结肠中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和总超氧化物歧化酶（T-SOD）的活力显著降低（P<0.05）,十二指肠、空肠、回肠和结肠中过氧化氢酶（CAT）的活力显著降低（P<0.05）,回肠和结肠中丙二醛（MDA）的含量显著升高（P<0.05）,空肠中载脂蛋白A1（APOA1）、载脂蛋白B （APOB）、载脂蛋白C2（APOC2）、脂肪酸结合蛋白2（FABP2）、酰基辅酶A合成酶长链家族成员3（ACSL-3）和脂肪酸合酶（FASN）基因的相对表达量极显著下调（P<0.01）。与PEDV组相比,槲皮素＋PEDV组仔猪空肠和回肠的绒毛高度以及绒毛高度与隐窝深度比值极显著提高（P<0.01）,空肠、回肠和结肠中GSH-Px和T-SOD的活力显著提高（P<0.05）,十二指肠、空肠和结肠中CAT的活力显著提高（P<0.05）,回肠和结肠中MDA的含量显著降低（P<0.05）,空肠中APOB、FABP2和FASN基因的相对表达量极显著上调（P<0.01）。【结论】 添加槲皮素可有效缓解PEDV感染导致的仔猪肠道损伤,提高仔猪肠道抗氧化能力以及空肠脂质代谢的能力。     

活化Nrf2缓解热应激致肉鸡心肌细胞氧化损伤的研究

【目的】 探究活化核因子红系2相关因子2（nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2）对热应激肉鸡心肌细胞氧化损伤的缓解作用及其机制。【方法】 利用差速贴壁法结合化学纯化法制备肉鸡原代心肌细胞。将心肌细胞随机分为对照组（Control组）、热应激组（HS组）和Nrf2激活剂叔丁基对苯二酚（tert-butylhydroquinone,TBHQ）预处理热应激组（TBHQ+HS组）。对照组心肌细胞正常培养不做任何处理,HS组心肌细胞置于高温（43 ℃）培养箱处理2 h,TBHQ+HS组心肌细胞用50 μmol/L TBHQ预处理12 h,再进行热应激处理。采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定各组心肌细胞相对活力;用比色法测定超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量和细胞培养液中乳酸脱氢酶（LDH）活性;用实时荧光定量PCR检测Nrf2、血红素氧合酶-1（heme oxygenase 1,HO-1）、谷氨酰半胱氨酸连接酶（glutamate cysteine ligase catalytic,GCLC）和NAD （P） H：醌氧化还原酶1（NAD （P） H：quinone oxidoreductase 1,NQO1） mRNA表达水平;用蛋白质免疫印迹法（Western blotting）检测Nrf2总蛋白和HO-1蛋白表达量。【结果】 与对照组相比,热应激组肉鸡原代心肌细胞形态发生改变,出现空泡网状结构,心肌细胞的相对活力和SOD活性极显著降低（P<0.01）,MDA含量极显著升高（P<0.01）,细胞培养液中LDH活性极显著升高（P<0.01）,Nrf2/抗氧化反应原件（ARE）信号通路下游NQO1和GCLC mRNA表达升高,但差异不显著（P>0.05）,Nrf2和HO-1 mRNA表达显著增加（P<0.05）,但Nrf2总蛋白和HO-1蛋白表达量增加不显著（P>0.05）;与热应激组相比,TBHQ预处理热应激组心肌细胞内空泡网状结构减少,心肌细胞的相对活力显著升高（P<0.05）,SOD活性极显著升高（P<0.01）,MDA含量显著降低（P<0.05）,细胞培养液中LDH活性极显著降低（P<0.01）,Nrf2/ARE信号通路下游NQO1和GCLC基因的表达水平显著上调（P<0.05）,Nrf2基因和总蛋白表达量显著增加（P<0.05）,HO-1基因和蛋白表达量极显著增加（P<0.01）。【结论】 活化Nrf2可以上调Nrf2/ARE信号通路下游相关抗氧化基因和蛋白表达,提高热应激肉鸡心肌细胞的抗氧化能力,缓解热应激诱导的氧化损伤,提示Nrf2可能是肉鸡心肌细胞抗热应激氧化损伤的有效分子靶点。     

亲代三硝基丙酸诱导的氧化应激对胎鼠的影响

试验旨在研究氧化应激对子代小鼠产生的影响。对亲代的公鼠和母鼠分别腹腔注射12.5 μg/g三硝基丙酸（3-NPA），分为正常公鼠与正常母鼠交配的对照组（C）、正常公鼠与3-NPA处理的母鼠交配组（FM）、正常母鼠与3-NPA处理的公鼠交配组（MM）、3-NPA处理的公鼠与3-NPA处理的母鼠交配组（DM）共4组，试验重复3次。通过剖出胎鼠的方法统计子代胎鼠的数量，采集子代胎鼠的心脏、肝脏、肺脏3个器官，测定超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）的活力及总抗氧化能力（T-AOC）。结果显示，与对照组相比，FM组胎鼠数量下降不明显（P>0.05），MM和DM组胎鼠数量均显著减少（P<0.05）；FM与DM组胎鼠肝脏、肺脏中CAT活力均显著增加（P<0.05）；MM组胎鼠肝脏、肺脏中CAT活力增加，但差异不显著（P>0.05）；各组心脏中CAT活力均增加，但差异均不显著（P>0.05）；除MM组肺脏中T-AOC活力增加差异不显著（P>0.05），其余各组肝脏、肺脏和心脏中T-AOC活力均显著增加（P<0.05）；DM组胎鼠肝脏中GSH-Px活力显著增加（P<0.05），FM和MM组胎鼠肝脏中GSH-Px活力增加，但差异不显著（P>0.05）；FM与DM组胎鼠肺脏中GSH-Px活力显著升高（P<0.05）；各组心脏中GSH-Px活力均差异不显著（P>0.05）；DM组胎鼠肝脏、肺脏、心脏中SOD活力均显著增加（P<0.05），FM和MM组胎鼠肝脏、肺脏、心脏中SOD活力增加，但差异均不显著（P>0.05）。因此，试验成功构建3-NPA氧化应激小鼠模型，且亲代雄性小鼠氧化应激对胎鼠影响较大。     

鸡精液稀释配方对低温保存精子活力和输精效果的影响

为了完善中国南方地区鸡场公鸡精液的保存技术、提高精液的利用率，本试验研究了在低温（4 ℃）保存的条件下，不同的保存时间（0、4、8、24 h）、不同的稀释液配方（原精液、配方Ⅰ和配方Ⅱ）对精液的精子活力变化以及人工输精繁殖效果的影响。选用33周龄黄鸡母鸡192只、公鸡42只，192只母鸡依笼号分为12组（3种处理精液×4个保存时间），每组16只母鸡，公鸡不分组。统一采精后用两种不同稀释液稀释、低温（4 ℃）保存至0、4、8、24 h后观察精子活力，并对母鸡输精，分组收集鸡蛋，对各组受精率、出雏率、健雏率进行比较分析，以原精液低温保存作为对照。结果显示，两种稀释液组的精子低温（4 ℃）保存4、8、24 h，其精子活力极显著高于原精液组（P<0.01），配方Ⅱ组精子的活力高于配方Ⅰ组（P>0.05）；两种配方稀释液组的精液低温（4 ℃）保存4 h，输精受精率高于原精液组（P<0.05）；两种配方稀释液组的精液在低温（4 ℃）保存8 h，输精受精率极显著高于原精液组（P<0.01）。表明这两种精液稀释液更有利于精液保存，经稀释后的精液可以显著提高受精率，可为中国南方鸡场种公鸡精液保存技术的完善提供有力的数据支撑。     

Analysis of Related Factors in Semen Quality of Italian Buffaloes

This study was aimed to investigate the factors affecting semen quality by analyzing the semen quality of Italian buffaloes,measuring the circumference of the testis,the level of oxidative stress in seminal plasma and the expression of genes related to sperm motility.In this study,the sperm vitality,deformity rate and semen collection of 6 Italian buffaloes were tested,and the correlation analysis was carried out after measuring scrotal circumference.The oxidative stress level of seminal plasma in Italian buffaloes was tested,including malondialdehyde (MDA),total superoxide dismutase (T-SOD) and glutathione peroxidation (GSH-Px).The expression of β-tublin-2c (TUBB2C),outer dense fibres 2 (ODF2),tektin-2 (TEKT2),tektin-4 (TEKT4) genes and their correlation with sperm in Italian buffaloes were analyzed.The results showed that the correlation between scrotal circumference and semen yield,vigor and deformity rate was found,the coefficients were 0.423 (P>0.05),0.750 (P<0.01) and -0.827 (P<0.01),which showed a significant positive correlation between scrotal circumference and sperm motility,and a significant negative correlation with the deformity rate.The oxidative stress level in seminal plasma of Italian buffaloes was tested,the correlation coefficients of MDA,T-SOD and GSH-Px with sperm motility were -0.522 (P<0.05),0.333 (P>0.05) and 0.474 (P<0.05),respectively.There was a significant negative correlation between sperm motility and MDA content,a significant positive correlation between GSH-Px activity and sperm motility,no significant correlation with T-SOD activity.The correlation coefficients between sperm motility and TUBB2C,ODF2,TEKT2 and TEKT4 genes were 0.930 (P<0.01),0.726 (P<0.01),0.924(P<0.01) and 0.839 (P<0.01),respectively.There was a significant positive correlation between sperm motility and the expression of four genes.The results provided a reference for understanding the factors affecting the semen quality of Italian buffaloes,and also provided a theoretical basis for the selection of Italian bull.     

番茄红素对秦川牛精液冷冻保存及鲜精品质影响

旨在探究番茄红素对秦川牛精液冷冻保存和新鲜精液品质的影响,为番茄红素作为新型精液稀释液添加剂和种公畜日粮添加剂提供依据。本研究采集3头年龄3~5岁健康状况良好秦川种公牛的新鲜精液混合,用0、1、2、3、4 μmol·L^-1浓度的番茄红素稀释液冷冻保存;利用计算机辅助分析仪、低渗肿胀检测法、花生凝集素荧光标记检测法、罗丹明荧光检测法等检测精子的运动性能、顶体完整率、质膜完整性、线粒体活性和抗氧化性能;在秦川种公牛日粮中添加15 mg·kg^-1 BW番茄红素,检测饲喂前后秦川种公牛的新鲜精液品质和血清抗氧化指标。结果表明,在秦川牛精液冷冻保存过程中添加番茄红素可以显著提高冷冻-解冻后精子的活力、顶体完整率、质膜完整性和线粒体活性以及抗氧化酶CAT和GSH-Px酶活性,显著降低精子中MDA含量,且番茄红素的最适添加浓度为2 μmol·L^-1(P<0.05);饲喂15 mg·kg^-1 BW番茄红素后,与饲喂之前相比,秦川种公牛的精子活力显著提高(P<0.05),精子畸形率显著降低(P<0.05),血清中抗氧化酶SOD、CAT、GSH-Px酶活性显著增加(P<0.05),MDA含量显著降低(P<0.05)。综上所述,一定浓度的番茄红素对精子在冷冻过程中造成的精子损伤和秦川牛机体应激造成的繁殖性能降低具有良好的保护作用,这可能与番茄红素通过抗氧化作用减少精子在冷冻-解冻过程中的氧化损伤和提高动物机体的抗氧化能力有关。     

Effect of Se and VE Supplement on Semen Quality,Antioxidant Enzyme Activities and Heat Shock Protein Expression of Goat in High Temperature Season

This experiment was conducted to study the effect of selenium and vitamin E supplement on semen quality, antioxidant enzyme activities and heat shock protein expression of goat in Hainan high temperature season.16 adult Hainan Black goat with good health and approximate weight were randomly divided into 4 groups, fed with basal diet(control group), basal diet+0.5 mg/kg Se(Se group), basal diet+100 mg/kg VE(VE group), and basal diet+0.5 mg/kg Se+100 mg/kg VE(Se+VE group), respectively.The experimental period was 93 d.Semen samples were collected in the last week of the experiment on two consecutive days.The semen quality, antioxidant enzyme activities and heat shock protein expression were analyzed.The results showed that compared with control group, the ejaculate volume was not significantly affected by Se or VE supplement(P>0.05).Sperm density and sperm motility were increased significantly by Se and VE supplement(P<0.05), and the abnormal rate was decreased extremely significantly(P<0.01).The goats fed with Se and VE also had higher activities of GSH-Px(P<0.01), SOD(P<0.05), CAT(P<0.05) and T-AOC(P<0.01), and lower MDA concentration in seminal plasma(P<0.05).The relative expression levels of HSP70 and HSP90 mRNA in supplement groups were decreased extremely significantly(P<0.01).However, there were some certain differences between the Se and VE supplement groups on semen quality and heat shock protein expression.In conclusion, the supplementation of Se and VE could help to improve goat semen quality by increasing the sperm density, sperm motility, the antioxidant enzyme activities, and decreasing the abnormal rate in hot season of Hainan.Finally, Se and VE supplement had good effects on relieving the environment heat stress.     

补饲硒和维生素E对高温季节山羊精液品质、抗氧化酶活性及热休克蛋白表达的影响

试验旨在研究在海南夏季高温饲养条件下,山羊补饲硒和维生素E对其精液品质、抗氧化酶活性及热休克蛋白表达的影响。选用16只健康状况良好、体重相近的海南黑山羊成年公羊,随机分成4组,分别饲喂基础日粮(对照组)、基础日粮+0.5mg/kg Se(Se组)、基础日粮+100mg/kg VE(VE组)和基础日粮+0.5mg/kg Se+100mg/kg VE(Se+VE组),试验期93 d。试验期结束前1周采集精液,评价精液品质、测定精浆抗氧化酶活性和精液热休克蛋白表达。结果表明,与对照组相比,补饲Se和VE对海南黑山羊射精量影响差异不显著(P>0.05);补饲Se和VE能显著提高海南黑山羊的精子密度和精子活力(P<0.05),极显著降低精子畸形率(P<0.01);极显著增加精浆谷胱甘肽过氧化物酶活性和总抗氧化能力(P<0.01),显著增加超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性(P<0.05),显著降低丙二醛浓度(P<0.05);补饲Se和VE还极显著降低了精液HSP70和HSP90mRNA的表达水平(P<0.01),但各补饲组之间对精液品质改善效果和热休克蛋白表达丰度的影响存在一定差异。综上所述,补饲Se和VE有助于提高热带地区夏季高温季节山羊精子密度、精子活力,降低畸形率,同时还能增强精浆中抗氧化酶的活性,改善精液品质,进而起到缓解环境热应激的效果。     

Protective Effect of Sulforaphane on Reproductive Function of Male Mice with Cadmium Poisoning

The study was aimed to explore the protective effect of sulforaphane (SFN) on the reproductive function of male mice with cadmium poisoning.40 healthy clean grade male Kunming mice were randomly divided into four groups:control group (H₂O),cadmium chloride group (2.3 mg/kg CdCl₂),sulforaphane group (10 mg/kg SFN),sulforaphane + cadmium chloride group (10 mg/kg SFN+2.3 mg/kg CdCl₂),and continuous administration for 10 d,all mice were executed by dislocated cervical vertebra at 2 d after the last administration,and then the pathologic changes of testicular tissues,organ coefficient of testicle and epididymis,sperm quality and concentration of testosterone were tested.Additionally,the contents of GSH and MDA,and the activities of T-SOD in testis were also detected at the same time. Compared with the control group,pathology damages were observed in cadmium chloride group,organ coefficient of testis and epididymis,sperm quality and levels of testosterone extremely significantly decreased (P<0.01),the activities of T-SOD and GSH content were extremely significantly decreased (P<0.01),and the concentration of MDA was extremely significantly enhanced (P<0.01).Compared with the control group,the activity of T-SOD and concentration of GSH in sulforaphane group were significantly increased (P<0.05),and the concentration of MDA was not significant different between the control group and sulforaphane group (P>0.05).While compared with the cadmium chloride group,the sperm motility rate and sperm total count in sulforaphane and cadmium chloride group were extremely significantly increased (P<0.01),the organ coefficient of testicle and epididymis was increased significantly (P<0.05),the concentration of GSH and activity of T-SOD in testicular tissue were extremely significantly increased (P<0.01),and the concentration of MDA was extremely significantly decreased (P<0.01).The results indicated that sulforaphane had the protection effect on reproduction function of male mice with cadmium poisoning.     

采精员和猪舍环境参数对杜洛克公猪精液品质的影响

【目的】研究采精员、猪舍温湿度、氨气浓度和光照强度对种公猪精液品质的影响,以提高猪精液品质。【方法】选取347头(580±48) d的杜洛克公猪,收集2021年11月至2022年2月共2 966条精液测定记录,采精员做好每天公猪的采精记录,猪舍温湿度、氨气浓度和光照强度参数于每天上午09:00进行测定。使用R软件对采精员记录、环境参数和精液性状进行关联分析。【结果】(1)采精员对精液品质具有显著影响(P<0.05),8号采精员采集的精液精子活力最高、精子畸形率最低。(2)猪舍环境温度为22～25℃时,精子活力显著高于18.5～22℃(P<0.05),精子畸形率显著低于18.5～22℃(P<0.05)。(3)相对湿度在70%～77%时精子活力最高、精子畸形率最低,与相对湿度在46%～60%时差异显著(P<0.05),与相对湿度在60%～70%时无显著差异(P>0.05),相对湿度在60%～70%时精子活力、精子畸形率和总精子数都处于较高水平。(4)随着氨气浓度降低,精子活力和总精子数呈现上升趋势、精子畸形率呈下降趋势,氨气浓度2～4 ppm与5～7.3 pp...     

Effect of L-lysine Added in Diluent on the Fresh Semen Quality of Dorper Sheep

In order to explore the effect of different L-lysine levels added in semen dilution on the fresh Dorper sheep quality stored at liquid state,3 health Dorper ram were used to collect semen which were equal-packaged and added to solution containing different levels (0,0.1,0.2,0.3,0.4 and 0.5 g) L-lysine in 120 mL diluent and at 0,6,24,30,48,54,72 and 78 h,the sperm motility,membrane integrity and acrosome integrity were detected.The results showed that the sperm motility in groups added 0,0.1 and 0.2 g L-lysine were higher than other groups,and that in 0.4 and 0.5 g L-lysine groups decreased faster than other groups;The sperm motility in 0.5 g L-lysine group reduced to 0 at 30 h,and it reduced to 0 at 48 h in the group added 0.4 g L-lysine;The effective survival time and survival index in the group added 0.1 g L-lysine was higher than other groups (P< 0.05);The membrane integrity of 0.1 g group was the highest,that had no significant difference with control group from 0 to 54 h (P >0.05),while after 72 h the two groups had significant differences (P< 0.05).The membrane integrity in 0.4 and 0.5 g groups were the worst,and that was significant different with other groups (P< 0.05);The acrosome integrity of 0.1 g group was the highest which had no significant difference with control group (P >0.05),0.4 and 0.5 g groups were the worst,the difference between them was not significant (P >0.05),while was extremely significant difference with other groups except for 0 and 6 h (P< 0.01).The results suggested that dilution added a high concentration of L-lysine could inhibit sperm quality,when the count of L-lysine was more than 0.2 g,sperm quality was significantly decreased,adding 0.1 g L-lysine could improve Dorper sheep fresh sperm quality stored at liquid state.     

解冻稀释液中添加精浆对冻融猪精子品质的影响

【目的】 探究冷冻前添加热休克蛋白A8(heat shock protein A8, HSPA8)和解冻后添加不同浓度精浆(seminal plasma, SP)对冻融猪精子的影响。【方法】 采用手握法采集长白猪精液, 添加0.5 μg/mL HSPA8到猪精液冷冻保护剂中进行细管分装, 投入液氮中保存3周后进行解冻, 解冻后添加不同浓度精浆(0、10%、30%和50%), 对冻融后长白猪精子的运动能力、质膜完整性、顶体完整性、细胞凋亡、线粒体膜电位、鱼精蛋白缺乏及体外获能水平等进行评估。【结果】 与对照组相比(无HSPA8和精浆), 添加0.5 μg/mL HSPA8处理组(无精浆)的精子直线速度(VSL)、曲线速度(VCL)、平均路径速度(VAP)和前向性运动(STR)均显著提升(P<0.05), 精子直线性运动(LIN)和运动的摆动性(WOB)均无显著差异(P>0.05);精子质量参数中活力、质膜完整性和顶体完整性均显著升高(P<0.05), 细胞凋亡水平与线粒体膜电位均显著降低(P<0.05);精子鱼精蛋白缺失率显著降低(P<0.05);精子蛋白酪氨酸磷酸化水平显著提高(P<0.05)。之后在解冻液中添加不同浓度的精浆, 与添加0.5 μg/mL HSPA8处理组(无精浆)相比, 精浆添加量达到50%时, 精子VSL、VCL、VAP、LIN、STR和WOB均显著提升(P<0.05);精子活力、质膜完整性、顶体完整性和线粒体膜电位均显著提高(P<0.05), 细胞凋亡水平显著降低(P<0.05);精子鱼精蛋白缺失率显著降低(P<0.05);精子蛋白酪氨酸磷酸化水平显著提高(P<0.05)。【结论】 在冷冻基础液中添加0.5 μg/mL HSPA8和解冻稀释液中添加50%精浆联合使用可以有效改善冻融精子质量, 将会对猪精液的冷冻保存及商业化生产提供一定的参考。