胚胎移植时卵泡和黄体对妊娠率影响的分析

本试验探讨在受体羊的卵巢上同时存在卵泡和黄体时进行胚胎移植对移植后妊娠率的影响。经试验得出:(1)胚胎移植时受体羊卵巢上有卵泡(卵泡的直径小于3mm)和无卵泡的移植后妊娠率差异不显著(P>0.05);(2)卵巢上有功能性黄体存在时,卵泡的直径(小于2mm)对胚胎移植妊娠率的影响差异不显著(P>0.05)。同期发情处理对卵巢上的黄体和卵泡有很大影响,处理效果直接影响受体羊的利用率和胚胎移植后的妊娠率,而当卵巢上有功能性黄体存在时,卵巢上卵泡的有无及其大小(直径小于3mm)对胚胎移植后的妊娠率影响不显著(P>0.05)。     

德州驴发情周期中卵泡动力学和激素变化规律的研究

本研究旨在揭示德州母驴发情季节的卵巢卵泡波变化特点以了解其卵泡的募集、选择、优势化、闭锁或者排卵,为驴人工授精和超数排卵提供可靠依据.本研究在德州驴发情季节(5～8月份)用直肠超声探查法每日检测5头德州母驴的10个排卵间隔的卵泡发育动态.同时每日采血,用放免法(RIA)检测E2、FSH、LH和IGF-1浓度.研究结果发现:(1)驴的排卵间隔平均为(23.22±0.28)d,每个周期中存在2个卵泡波,其中有4个展示主-主卵泡波,有6个展示次-主卵泡波.(2)第1波和第2波开始出现募集的时间分别在排卵后的第1和第(10.2±1.4)天,募集的卵泡数分别为(5.2±1.2)和(4.0±0.3)个,选择的卵泡数分别是(2.3±0.5)和(2.5±0.4)个.第1和第2卵泡波开始优势化的时间分别在排卵后的第(5.8±0.6)和第(18.1±1.4)天.波峰平均出现时间分别为第(7.67±0.24)和第(23.22±0.28)天.波峰时优势卵泡平均最大直径分别为(26.44±2.37)和(40.7±2.45)mm.第1和第2波最大优势卵泡每日平均生长率分别为(2.01±0.5)和(3.15±0.6)mm·d-1.(3)黄体(CL)最大直径平均为(37.61±1.58)mm,CL平均持续时间为(17.30±1.62)d.(4)E2浓度从排卵前3d至排卵后2d的发情期内均很高,平均维持在(46.47±9.53)Pg·mL-1,在排卵前2d达到峰值(62.84±4.89)Pg·mL-1.(5)由于E2的负反馈作用,FSH浓度到优势卵泡最后阶段(即第7天闭锁或第23或24天排卵时)大幅度下降.(6)LH在排卵前几天迅速升高,在排卵后第2天达到峰值(4.69±0.43)mIU·mL-1.(7)IGF-1的升降状况与E2基本相同,在排卵前1d达到峰值(47.9±3.91)ng·mL-1.通过上述卵泡和激素动态学变化,本研究得出下述结论:驴的卵巢卵泡发育是以卵泡波形式进行的,每个发情周期中最常出现的是2个卵泡波;排卵发生于发情结束前2 d;E2和IGF-1调节驴的发情活动;FSH调节小卵泡的募集;LH增高与排卵有关.     

牦牛发情后生殖器官变化及卵巢动态发育过程

[目的]探明牦牛发情症状的主要表现形式及其发生几率。[方法]采用跟踪观察、生殖器官的临床检查和B超探查技术,对147头出现静立反射成年母牦牛的主要发情症状和卵巢发育状况进行了监测统计。[结果]发情季节初次发情的牦牛,出现外阴肿胀、潮红,阴门有粘液流出,子宫颈外口肿胀的个体比例均略低于再次发情牦牛;优势卵巢体积在发情开始时(0 d)平均为(2.41±0.31) cm,最大卵泡直径在发情第1天可达到(0.91±0.22) cm,排卵发生在优势卵巢上。发情季节再次发情的牦牛,发情第0天两侧卵巢的体积都明显大于初次发情牦牛(P0.01),最大卵泡直径在发情第1天略小于初次发情牦牛(0.88±0.21) cm,但差异不显著(P0.05),排卵多发生在小卵巢上;发情期(1.4±0.5) d略短于初次发情牦牛(1.8±0.6) d,但差异不显著(P0.05)。[结论]牦牛发情期主要发情症状并不完全出现,发情季节初次发情个体的发情表现更不充分。发情鉴定时,应根据外部症状、粘液分泌情况、卵巢发育状况来综合判断,在卵巢体积达到2.4 cm左右,卵泡直径在0.8 cm左右时就有发情的可能。     

分离方法及卵巢发育状况对猪次级卵泡分离和采集的影响

试验以直径在200～300 μm的次级卵泡为研究对象,研究了不同分离方法和卵巢不同发育状况对猪次级卵泡分离和采集的影响.结果表明,显微分离法每个卵巢可采集的卵泡数极显著高于剪碎过滤法,显微分离法分离每个卵泡所用的时间极显著低于剪碎过滤法;有黄体和无黄体的卵巢对卵泡采集的影响差异不显著,但有黄体的卵巢分离的卵泡数稍多于无黄体的卵巢.     

奶牛大卵泡对前列腺素溶黄体作用的影响

在有和没有可触摸卵泡的奶牛中,我们都进行了前列腺素F_2α反应性的试验。所有试验的奶牛,卵巢触诊都有黄体,把这些奶牛分成两组:一组通过触诊,估计卵泡直径≥13mm(n=60头)另一组奶牛卵巢中无卵泡或卵泡直径小于13mm(n=133头),比较用药后出现发情的奶牛比例、发情期长短、奶中孕酮的含量,发现这两组间无显著差异。     

6月龄和成年牦牛卵巢及卵泡发育状况研究

为了研究6月龄牦牛和成年牦牛卵巢及表面卵泡发育状况,试验比较了6月龄和成年牦牛卵巢长度、宽度、厚度、重量、卵泡数量以及卵母细胞体外成熟培养效果。结果表明:成年牦牛卵巢长度(2.29±0.43)cm、宽度(1.91±1.31)cm和厚度(1.60±1.90)cm均显著大于6月龄牦牛[(1.65±0.30)cm、(1.14±0.25)cm、(0.79±0.26)cm](P<0.05),成年牦牛卵巢体积(6.92±7.00)cm3和重量(3.19±1.58)g极显著大于6月龄牦牛体积(1.63±0.93)cm3和重量(0.87±0.44)g(P<0.01)。6月龄牦牛Ⅰ级卵泡数(14.47±8.74)枚和平均总卵泡数(15.17±8.87)枚极显著高于成年牦牛Ⅰ级卵泡数(7.97±3.72)枚和平均总卵泡数(8.98±3.87)枚(P<0.01),Ⅱ级卵泡数差异不显著(P>0.05),成年牦牛平均每头含(0.02±0.15)枚Ⅲ级卵泡,而6月龄牦牛无Ⅲ级卵泡。成年牦牛有黄体卵巢重量显著大于无黄体卵巢重量(P<0.05),有黄体卵巢含(0.06±0.24)枚Ⅲ级卵泡,而无黄体卵巢不含Ⅲ级卵泡。6月龄和成年牦牛A、B级卵母细胞体外培养成熟率分别为(81.39±3.53)%、(80.44±4.50)%,差异不显著(P>0.05),而6月龄牦牛卵巢的平均卵母细胞数和平均A、B级卵母细胞数均显著高于成年牦牛(P<0.05)。     

B超检查奶牛同期发情和超数排卵期卵巢发育研究

采用AMI-900型兽用B超,观察了20头成年奶牛同期发情和超数排卵期的卵巢发育。卵巢直径在同期发情期的第2d增大到最大值,第3d恢复后缓慢增长,在第6d再次达到最大。卵巢在超数排卵期的增长速度快,第3d达到最大。其形态也由起初的多形态到最后的长圆形或类圆形。卵泡在同期发情期增长速度平稳,第5d达到最大。卵泡在超数排卵期增长速度加快,卵泡壁也在此期变薄,由4mm下降到2mm。冲胚中卵巢纵横径在63±3.2mm,52±2.3mm时的可用胚胎率最高,为76.3％,而卵巢纵横径在72±3.4mm,58±4.1mm时的黄体数和冲胚数都为最多,分别为14.5±3.2个,10.4±2.5个。因此B超技术检查奶牛同期发情和超数排卵期的卵巢发育是可行的。     

牦牛、黄牛卵巢卵泡发育及卵母细胞体外成熟培养的比较研究

对53头成年黄牛和44头成年牦牛卵巢形态、表面卵泡数量、黄体状况以及卵母细胞体外成熟培养等进行了比对研究,探讨牦牛和黄牛卵巢的形态学差异和卵泡卵母细胞发育变化规律。结果表明,成年黄牛卵巢的体积(11.12±5.77vs.6.92±7.0)和重量(5.85±2.98vs.3.19±1.58)显著大于成年牦牛卵巢(P0.05);成年黄牛Ⅰ级卵泡数(13.04±8.12vs.7.97±3.72)、Ⅲ级卵泡数(0.42±0.52vs.0.02±0.15)、总卵泡数(14.46±8.92vs.8.98±3.87)和卵巢黄体直径(1.54±0.44vs.1.2±0.51)显著大于牦牛(P0.05);采集卵巢卵母细胞,黄牛卵母细胞数量显著多于牦牛,经体外成熟培养A级卵母细胞培养24h第一极体的排除率显著高于B级和C级卵母细胞,同一体外成熟时间和相同分级的黄牛和牦牛卵母细胞第一极体的排除率差异不显著。     

水牛小腔卵泡分离方法的初步研究

本研究比较了不同的分离方法和酶作用的不同时间,以及不同的卵巢表面状态等因素对水牛小腔卵泡分离效果的影响,以期建立有效的水牛小腔卵泡分离体系。结果发现,采用机械与酶结合的方法分离水牛小腔卵泡时,平均每个卵巢获得5.64个小腔卵泡,显著高于机械法分离平均每个卵巢获得的3.12个小腔卵泡数(P＜0.05);当胶原蛋白酶作用12或15 min,每个卵巢平均获得的小腔卵泡数均显著高于5和10 min处理组(P＜0.05),两组之间没有显著差异(P＞0.05),但当消化时间延长到20 min时,卵泡膜被酶消化而破裂,没法分离到小腔卵泡;从表面小于2 mm卵泡且无黄体的卵巢分离获得的小腔卵泡平均数显著高于表面无可见卵泡且有黄体的卵巢组的平均数(7.50和2.25,P＜0.05)。以上结果表明,选用表面无小于2 mm卵泡且无黄体的卵巢,采用机械与酶结合的方法,酶作用时间为12~15 min分离水牛的小腔卵泡,可获得的小腔卵泡数量最多。     

青海高原牦牛妊娠早期卵巢形态的观测

本研究选择青海省天峻县怀孕早期成年母牦牛25头,对它们的卵巢形态和卵巢表面的卵泡进行了解剖学观测.结果表明,青海高原牦牛在妊娠早期其孕角侧卵巢的体积平均为2.51×2.12×1.68厘米,空角侧卵巢的体积平均为2.07×1.52×1.13厘米;孕角侧卵巢的重量平均为4.94±0.95克,空角侧平均为2.44±0.81克,两者之间有明显差异(P＜0.05);妊娠黄体的平均直径为1.26±0.35厘米;孕角侧卵巢上小卵泡(替补卵泡)数明显多于空角侧(P＜0.O1);大、中卵泡(优势卵泡、选择卵泡)数间无明显的差异(P＞0.05).     

驴发情期卵泡变化初探

采用实时B型超声显像法,初步观察了4头母驴3个发情期卵泡的发育过程,以确定其排卵和输精时间。结果表明:驴卵泡直径大约每天增加1.5~3 mm,优势卵泡平均每天增长2.1 mm,发情周期在20~24 d之间,发情一般持续5~7 d,约在发情停止前1 d排卵。体格较大的驴发情期间卵泡数比体格较小的驴卵泡数多。     

双峰驼卵巢的形态观察

在冬春季节里,通过对87个双峰驼卵巢进行观察测量,研究其形态及卵泡、黄体数量分布情况.空怀的双峰驼的卵巢上可看到许多大小不同的卵泡、红体、黄体.在整个发情期都有较多的卵泡分布,其卵泡和黄体明显突出,形状一般为球形或者半球形,边界清晰,与其它哺乳动物明显不同.单个卵巢卵泡数最多可达69个,直径最大可达3.31 cm,黄体...     

应用B超技术监测青年母牛卵巢动态变化的研究

通过B超监测11头青年母牛的卵巢动态变化。显示在自然发情状态下，排卵当天卵巢直径的平均值为18．24mm，排卵前一天平均值为21．94mm，排卵后一天平均值为21．63mm。卵泡发育以卵泡波的形式出现，本实验观察到3—4个卵泡波，以3个卵泡波为主，占81．82％，4个卵泡波的占18．18％；青年母牛左侧卵巢优势卵泡的平均直径为11．71±0．71mm，成熟卵泡的平均直径为14．76±0．94mm；右侧卵巢优势卵泡的平均直径为13．02±1．97mm，成熟卵泡的平均直径为14．34±1．30mm.     

口服促孕散治疗前后持久黄体奶牛B超影像学的研究

为探讨促孕散治疗持久黄体的作用机理,本研究通过直肠检查结合B超直肠检查对持久黄体奶牛做出诊断后口服促孕散,应用B超每3 d对黄体直径、卵泡数量、卵巢长度、卵巢宽度、子宫角纵径和子宫颈纵径进行测量,并统计1次,与用药前进行对比。30头持久黄体奶牛口服促孕散后,治疗有效头数25头,有效率为83.3%。停药后第1天卵巢出现小卵泡和中等卵泡,停药后分别在第10和19天大卵泡数量最多,部分奶牛出现发情并排卵,与用药前卵巢相比,结果发现左、右侧卵巢长在停药后均降低,但差异不显著(P>0.05);左、右卵巢宽在停药后均降低,但差异不显著(P>0.05);子宫颈纵径和子宫角纵径均在停药后升高,但差异不显著(P>0.05)。结果表明,B超是诊断奶牛持久黄体的有效手段,中药促孕散对持久黄体奶牛卵巢和子宫形态等指标具有一定的影响,可以促进黄体的溶解。     

B超检查奶牛同期发情和超数排卵期卵巢发育研究

选取AMI-900型兽用B超,对20头成年奶牛的同期发情与超数排卵期时卵巢的发育情况进行观察。在同期发情期开始的第2d,卵巢直径增大到最大值,第3d恢复常态后缓慢增长,之后在第6d再一次达到最大。超数排卵期内,卵巢的增长速度快,并在第3d达到最大值。其形态也由开始的多形态达到最后呈长圆形或是类圆形。在同期发情期内卵泡的增长速度平稳,并在第5d达到最大。在超数排卵期内卵泡的增长速度增快,且卵泡壁也在此时逐渐变薄,从4mm减小到2mm。冲胚时卵巢纵横径分别在63±3.3mm,52±2.4mm范围内时胚胎的可用率最高,达到76.3%,但卵巢纵横径分别在72±3.5mm,58±4.2mm范围内时,黄体数与冲胚数均为最大值,分别为14.6±3.3个及10.5±2.6个。所以通过B超检测奶牛的卵巢发育是有效可行的。     

Smad1基因在敖汉细毛羊发情不同时期卵巢中的表达规律研究

为了探索Smad1 mRNA及其蛋白在敖汉细毛羊不同发情时期卵巢中表达量的变化规律,试验采用实时荧光定量PCR、免疫组化方法分析绵羊不同繁殖状态下(乏情期、发情间期、发情前期、发情期)Smad1基因在卵巢中mRNA表达量的变化规律及卵巢中该基因蛋白的表达,并进行图像分析。结果表明:发情期Smad1基因表达量最高,极显著高于其他三个时期(P0.01);发情前期Smad1基因表达量显著高于乏情期和发情间期(P0.05)。在绵羊不同发情时期Smad1蛋白主要表达于乏情期原始卵泡、次级卵泡的颗粒细胞、发情间期次级卵泡的卵泡膜细胞,在发情前期与发情期卵泡中未见表达。卵巢中Smad1基因可能促进黄体溶解,对卵泡发育、卵子的成熟以及释放起作用,与绵羊发情的启动有一定关系。     

褪黑激素埋植剂对发情期水貂卵巢形态、卵泡发育及血清主要生殖激素的影响

旨在探讨褪黑激素(MLT)埋植剂埋植239 d对发情期水貂卵巢形态和卵泡发育及血清主要生殖激素的影响。试验分为对照组和试验组(MLT埋植剂18 mg/只埋植239 d),每组水貂各4只。分别采集卵巢和血清,用游标卡尺测量长、宽、厚,计算体积并称重,制备卵巢石蜡切片,用光学显微镜测量各级卵泡和卵母细胞直径及透明带厚度,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血清主要生殖激素含量。结果表明：试验组卵巢长、宽、厚及重量均显著增大(P<0.05),体积极显著增大(P<0.01);原始卵泡及其卵母细胞的直径、三级卵泡直径显著增大(P<0.05),透明带厚度仅在三级卵泡阶段差异显著(P<0.05);血清促卵泡素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E₂)和孕酮(P₄)含量差异均不显著(P>0.05)。由此得出,水貂于7月初埋植MLT埋植剂(18 mg/只)239 d对发情期水貂卵巢的重量和体积及原始卵泡和三级卵泡的提前发育均有促进作用;对血清FSH、LH、E₂和P₄含量没有影响。     

共培养系统的体细胞类型和状态对猪胚胎早期发育的影响

经体外成熟、受精和培养获得猪胚胎 ,采用体细胞共培养研究了体细胞类型和状态对胚胎早期发育的影响。取体外成熟的不同直径卵泡 (>5 m m,2～ 5 mm)卵母细胞的卵丘团 (颗粒细胞团 ) ,培养铺层后与猪受精卵共培养 ,组间受精卵的卵裂率和发育能力无显著差异 ;根据卵巢的状况对猪输卵管上皮细胞 (POECs)的状态进行分组 ,受精卵和卵巢表面布满卵泡的 POECs共培养 ,卵裂率显著低于卵巢表面有黄体和 /或红体的 POECs共培养组 (P<0 .0 5 ) ,虽然各组间 3～ 4-细胞的发育率无显著差异 ,但卵巢表面有红体和卵泡的 POECs共培养组的 >4-细胞的发育率显著高于卵巢表面布满卵泡的 POECs共培养组 (P<0 .0 5 ) ;受精卵在共培养系统和非共培养系统中的卵裂率无显著差异 ,受精卵非共培养系统中 3～ 4-细胞的发育能力显著低于颗粒细胞共培养组 (P<0 .0 5 ) ,极显著低于 POECs共培养组 (P<0 .0 1) ,无能力突破 4-细胞继续发育 ,与颗粒细胞单层、POECs单层共培养的受精卵 >4-细胞的发育率分别为 2 4.0 %、5 3.8% ,差异显著 (P<0 .0 5 )。结果表明 ,共培养系统对胚胎体外发育的作用 ,一方面与体细胞类型有关 ,另一方面也受输卵管上皮细胞状态的影响     

牛卵泡闭锁与颗粒细胞凋亡基因表达研究

颗粒细胞凋亡与卵泡闭锁是颗粒细胞功能基因及凋亡相关基因的表达结果,通过手术法获取三种不同直径的牛卵泡(小型卵泡2 mm;中型卵泡2~6 mm;大型卵泡6mm),分离卵泡颗粒细胞并提取总RNA,以研究不同直径卵泡中颗粒细胞相关基因的表达。结果表明,牛卵巢上小型卵泡颗粒细胞中Fshr的表达显著低于中型和大型卵泡(P0.05),而中型和大型两者之间差异不显著(P0.05);中型卵泡和小型卵泡颗粒细胞中CYP19的相对表达显著低于大型卵泡(P0.05);中型卵泡和小型卵泡颗粒细胞中促细胞凋亡基因BAX的表达显著低于大型卵泡(P0.05),而在中型和大型卵泡颗粒细胞中抑制细胞凋亡基因BCL2的表达显著低于小型卵泡(P0.05),且随着卵泡的增大而下调;Casapase 8与Caspase3的表达模式相同,其表达量均随着卵泡直径的增加显著上升(P0.05)。随着卵泡生长与直径增加,卵泡内部分颗粒细胞虽然在继续增殖,部分颗粒细胞已经开始凋亡,卵泡逐渐进入闭锁阶段。     

屠宰牛卵母细胞体外成熟和体外受精研究

对采集到的卵巢采取抽吸法、割破法回收卵母细胞,割破法得到的A级卵母细胞显著高于抽吸法。把有黄体和无黄体的卵巢卵母细胞进行培养比较,无黄体的卵巢卵母细胞的成熟率为84．33％,显著高于有黄体卵巢卵母细胞的74．32％。本试验中卵泡卵母细胞和深层卵母细胞体外成熟率均能达到75％以上．卵巢表面卵泡卵母细胞的卵裂率为54．76％,高于深层卵母细胞的卵裂率,但二者无显著差异。IVM时添加卵丘细胞、IVC时添加输卵管上皮细胞是比较理想的培养系统。