云南和广东省流行性出血病病毒血清6型毒株(EHDV-6)的分离与遗传特性

【目的】分离流行于我国南方地区的流行性出血病病毒血清6型毒株(EHDV-6),掌握分离毒株的遗传特征。【方法】对设立于我国云南和广东省的哨兵动物定期采血,进行EHDV感染情况监测与病毒分离培养。通过血清中和试验确定分离EHDV的血清型,采用一步法RT-PCR对分离的EHDV-6毒株基因节段2、3、6(Seg-2、-3、-6)进行扩增与序列分析。【结果】2012—2016年,从云南省和广东省的哨兵动物中分离出25株EHDV毒株,其中,11株为EHDV-6型。中国EHDV-6型毒株的Seg-2、-3与-6均属Eastern型,核酸序列相似性分别为99.1%、98.9%和98.8%,在系统发生树上分别聚为1个独立的中国支系。在日本引起疫病暴发的EHDV-6型毒株与中国EHDV-6型毒株具有最近的亲缘关系。日本EHDV-6型毒株在系统发生树上处于中国支系内部,Seg-2、Seg-3与中国毒株的核酸序列相似性分别为98.5%和93.9%。【结论】云南和广东省流行的EHDV-6型毒株核酸与氨基酸序列高度相似;日本和中国的EHDV-6型毒株具有最近的亲缘关系,提示中日之间可能存在EHDV的流动。研究结果为进一步开展我国EHDV-6型毒株流行病学分析、致病性、病原学诊断与疫苗制备等研究提供了基础。     

血清中不同甘露(聚)糖结合凝集素浓度的绵羊感染绵羊肺炎支原体后免疫因子表达的变化

为研究中国美利奴羊不同甘露(聚)糖结合凝集素(MBL)浓度感染绵羊肺炎支原体(MO)的免疫因子水平变化,本研究选择血清中MBL高、低浓度的绵羊各6只(感染组和对照组各3只),感染组人工感染MO,分别在人工感染前和感染后不同时间,采用荧光定量PCR法检测血液中血清因子及补体表达水平。结果显示,不同MBL浓度的绵羊人工感染后MBL m RNA水平呈下降趋势,MBL高浓度促炎因子IL-2和IFN-γ的m RNA表达水平较高,抗炎因子IL-4的m RNA表达水平在感染后1 d升高,此后开始下降,而IL-4的m RNA水平在14 d后有所升高;MBL低浓度羊感染后其TNF-α的m RNA水平显著升高,随炎症的缓解,逐渐降低;补体C1和C3的m RNA在感染后表现出不同的变化,MO感染可以激活补体途径。本研究结果表明,低血清MBL浓度与绵羊支原体肺炎具有一定的相关性,MBL不同浓度组之间其IL-2、IL-4、TNF-α、IFN-γ、补体C1、C3水平存在差异,低浓度MBL的绵羊更易发生比较严重的炎症反应。     

仁用杏速成苗繁育技术

速成苗是指“当年嫁接、当年出圃”的苗木 ,也称“三当苗”。繁育速成苗可以缩短育苗周期、减少资金投入 ,尽快满足市场需求 ,获得显著的经济效益。近年来 ,随着西部大开发和“山川秀美工程”的实施 ,仁用杏生产有了快速的发展 ,仁用杏苗木曾一度出现紧缺。为了尽快育出良种成品苗木 ,从 1 997年开始 ,我们在陕西关中采用塑料小拱棚覆盖方法进行了连续多年的仁用杏速成苗繁育试验 ,总结出了一套仁用杏速成苗繁育技术。1　播种前的准备1 .1　整地选择地势平坦、灌水方便的地块作育苗地。在冬前每公顷施腐熟的农家肥 4 50 0 kg复合肥 750 kg、…     

毛乌素沙地麻黄及其栽培技术

本文报道了麻黄形态学特征、生物学特性及栽培技术要点。     

陕北毛乌素沙地樟子松容器育苗技术

为指导樟子松容器育苗工作 ,提高经济效益 ,推动生态环境建设的健康发展 ,我们在陕北定边县毛乌索沙地通过育苗试验 ,总结出了一套行之有效的樟子松容器苗育苗技术     

血清15与21型蓝舌病病毒的分离与鉴定

【目的】蓝舌病病毒是一种重要的虫媒病毒,血清型较多,为了解近年来江苏省盱眙县蓝舌病病毒流行情况及血清型分别情况。【方法】本研究于2015-2016年在盱眙县桂五镇建立了5头蓝舌病血清学阴性山羊作为监控动物群。从2015年5-10月,每周采血1次,2015年11月至2016年4月,每月采血1次,用BTV C-ELISA试剂盒进行血清学监测。用RT-PCR检测转阳前2周、1周和转阳本周的血液样品,选择阳性样品处理后接种鸡胚,收获死亡鸡胚肝脏,用PBS悬浮捣碎的鸡胚肝脏,上清接种于C6/36细胞一代、BHK-21 3代进行病毒分离。阳性样品采用RT-PCR进行血清型鉴定。【结果】6月开始部分动物血清抗体转阳性,至12月,监控动物全部转为阳性。通过鸡胚、细胞传代培养共获得5个出现细胞病变的细胞培养物,经RT-PCR检测VP7基因均扩增出1156 bp片段。进一步通过RT-PCR检测VP2基因对5个分离毒株进行血清型鉴定。结果表明2株为BTV-15、3株为BTV-21。【结论】上述结果丰富了江苏省蓝舌病的流行病学资料,为蓝舌病的防控提供科学依据。     

超声波辅助提取鹅肝蛋白质及其物化性质和结构

鹅肝是肉制品加工过程中一种极为普遍的副产物,由于其含有十分丰富的营养,常常会被作为食物。但是只有小部分鹅肝被人们食用,大部分鹅肝被加工处理为动物饲料或是直接丢弃,从而造成了很严重的资源浪费。以鹅肝为原料,采用三羟甲基氨基甲烷(Tris)-HCl缓冲液中为提取剂,采用超声辅助法提取鹅肝蛋白质,并与常规水浴提取作比较。通过对比二者圆二色谱、傅里叶红外光谱、凝胶电泳等结果,研究超声辅助提取对鹅肝蛋白质结构的影响。结果表明,与常规水浴提取鹅肝蛋白质相比,超声处理引起部分蛋白质水解和折叠,导致其表面疏水性显著提高,蛋白质结构发生了改变。通过对鹅肝蛋白质进行凝胶电泳的测定,结果表明,超声辅助提取鹅肝蛋白质并没有改变鹅肝蛋白质的亚基组成。同时对溶解度、起泡性和乳化性质这些物化性质进行测定,发现鹅肝蛋白质在超声辅助提取下的物化性质明显提高。通过对鹅肝蛋白质性质的研究,希望能为鹅肝蛋白质的深加工提供一定的科学依据和理论基础,进一步提高鹅肝的利用率。     

小蚯蚓来帮忙--厨余垃圾的新出路--韩国新安生态社区的启示

2014年9月，绿中原的工作人员随同第四届东亚气候论坛的中国代表团来到韩国。我们此行的主要目的，为参观访问韩国光州市的新安生态社区，向他们的“绿色公寓项目”取经。
　　9月17日，阳光明媚，碧空如洗，我们在协会分会长的带领下，走进了这一片美丽宁静的生态家园。     

1株库蠓源版纳病毒的分离与全基因组序列分析

为分析云南省虫媒病毒的种类与遗传特征,在云南省师宗县采集库蠓进行病毒的分离与鉴定;通过全长cDNA扩增与高通量测序技术获取病毒全基因组序列,进行序列比对与系统发生树构建。结果显示,从采集的库蠓样本中分离出1株可在C6/36细胞上引起细胞病变的毒株（YNSZ043）,病毒基因组为分节段双链RNA,琼脂糖凝胶电泳呈"2-4-3"的带型特征;电镜观察可见直径为70~80 nm,呈"指环状",表面具有纤维突起的病毒粒子。全基因组测序结果显示,YNSZ043毒株为版纳病毒（Banna virus,BAV）,基因组大小为20 683 bp,由Seg-1（3 762 bp）至Seg-12（861 bp）12个基因节段组成,与中国BAV毒株各基因节段的核苷酸序列相似性在64.8%~99.6%之间,氨基酸序列相似性在58.8%~100%之间,在系统发生树上YNSZ043毒株与中国分离的BAV聚为一簇,形成独立的中国进化支系。对决定BAV基因型的Seg-12分析结果显示,YNSZ043毒株属于A2基因型,该毒株的Seg-5/VP5与越南分离BAV毒株的核苷酸和氨基酸序列相似性高达97.1%和97.6%,表明该毒株的Seg-5基因节段很可能与越南毒株之间发生了基因重配。研究结果丰富了中国BAV的基因组序列,为开展云南省BAV的流行病学研究提供了参考。     

微生物营养剂对峨眉蔷薇种子萌发的影响

以峨眉蔷薇种子为材料,低温冷藏后取出,利用不同质量浓度的微生物营养剂进行暖温催芽处理,以零添加、零处理为对照,研究探讨了不同碳、氮质量浓度的微生物营养剂对种子萌发的影响,结果显示,不同质量浓度的营养剂均可不同程度地提高种子萌发率,促进种子快速萌发;较适宜营养剂,即蔗糖、酵母膏质量浓度分别为5、1.0g· L-1;质量浓度最高的组合效果最差,较低的碳源、氮源质量浓度组合表现出较好的综合促进作用,推测可能与微生物的活动周期有关,最适的营养剂质量浓度等仍有待进一步研究.