家蚕氟中毒中肠的损伤和血淋巴离子浓度的变化

家蚕氟中毒中肠的损伤和血淋巴离子浓度的变化吕顺霖，陈玉银，徐俊良（浙江农业大学蚕学系）用电子显微镜对氟中毒的家蚕中肠进行了病理组织学观察，然后用原子吸收分光光度仪测定了氟中毒引起的幼虫血淋巴中一些无机离子浓度的变化，由此从一个侧面了解家蚕氟中毒的病理...     

氟中毒家蚕幼虫血淋巴中谷胱甘肽过氧化物酶的活性

为了解家蚕氟中毒的机理 ,研究了氟中毒家蚕幼虫血淋巴中谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH—Px)的活性。正常的家蚕 5龄幼虫血淋巴中GSH—Px活性在龄中期较强 ,龄初和龄末较弱。幼虫添食 10mmol/L的氟化钠溶液后 ,GSH—Px的活性显著增强     

家蚕组织中钙的亚细胞定位研究

应用锑酸盐沉淀技术研究家蚕中肠和马氏管的亚细胞钙离子分布，其螯合试验和电镜观察证明，用本试验方法产生的锑酸盐沉淀是锑酸钙，沉淀分布有规则，超微结构保存良好，是研究蚕体组织亚细胞钙离子分布较为有效的方法。作者应用这一技术观察了家蚕５龄幼虫中肠及马氏管组织的钙离子亚细胞分布，并发现氟中毒后马氏管组织的钙离子亚细胞分布有显著的变化，认为这一技术可为家蚕氟毒理研究提供一种新方法。     

家蚕品种7532和大造在高温冲击下中肠抗氧化酶活性的变化

为了探讨家蚕抗高温冲击的生理机制,比较了高温(36℃)冲击对家蚕二化性品种7532和大造5龄幼虫死亡率和中肠抗氧化酶活性的影响。自5龄24h起,供试家蚕品种大造经高温冲击24h以后,幼虫的累计死亡率就显著升高;而7532经高温冲击48h以后,幼虫的累计死亡率才显著升高。高温冲击48～72h,7532的5龄幼虫中肠组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性较高,且随高温冲击时间延长显著增加,而大造5龄幼虫中肠组织中SOD的活性较低,且高温冲击时间延长后的变化不显著;7532的5龄幼虫中肠组织中的过氧化氢酶(CAT)活性在高温冲击48h后显著升高,而大造5龄幼虫中肠组织中的CAT活性在高温冲击24h后显著下降,直到72h后才显著升高,并且7532中肠组织中的CAT活性显著高于在大造中肠组织中的活性;2个品种5龄幼虫中肠组织中的谷胱甘肽S-转移酶(GST)活性分别在高温冲击24h和48h时达到峰值,在高温冲击48～72h期间,7532中肠组织中的GST活性显著高于大造中肠组织中的活性。上述结果提示,家蚕品种7532抗高温冲击能力较家蚕品种大造强,与其中肠组织中的抗氧化酶活性升高有关。     

氟中毒对家蚕幼虫脂肪体内脂肪酸组成的影响

氟中毒对家蚕幼虫脂肪体内脂肪酸组成的影响吕顺霖，赵德生，臧荣春（浙江农业大学）为了防治和缓解家蚕的氟中毒，许多学者对家蚕氟中毒的机理进行了研究，但尚未见有关氟中毒对家蚕体内脂质代谢影响的报道。最近笔者用气相色谱法分析了家蚕幼虫脂肪体内脂肪酸的组成，并...     

氟中毒引起的家蚕幼虫血淋巴中游离氨基酸浓度的变化

氟中毒引起的家蚕幼虫血淋巴中游离氨基酸浓度的变化吕顺霖，蒋振东（浙江农业大学蚕学系）由大气氟污染引起的家蚕氟中毒症已成为我国养蚕生产中一种毁灭性的病害，对蚕茧生产造成很大的损失。为了缓解和防治家蚕氟中毒，许多研究者进行了家蚕氟中毒的病理学研究。家蚕的...     

家蚕氟中毒防治研究取得突破

浙江省青年学孟智启在世界上首创性的表现，使长期困扰我国乃至世界家蚕生产的氟中毒的防治研究出现曙光。他在日本九州大学学习时，通过不断观测发现，从家蚕中肠分离出的活细胞在受氟化物攻击时，其内部的钙离子明显下降，而钙离子是动物中枢神经向器官传递信号的载体，真正明确了家蚕氟中毒的机制。     

家蚕5龄幼虫农药中毒后中肠和丝腺组织中的部分金属元素含量变化

蚕体内的金属元素是细胞和组织生理活动不可或缺的基本成分,维持其平衡对家蚕的正常生长发育非常重要。为了解家蚕农药中毒后体内金属元素含量的变化规律,分别给5龄幼虫添食不同浓度的辛硫磷、溴虫腈药液后,运用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)对幼虫中肠、丝腺组织中的金属元素Ni、K、Na、Rb和Fe进行定量分析。用ICP-MS法检测各金属元素含量在一定质量浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数在0.998 0~0.999 9之间。研究结果表明,家蚕5龄幼虫添食辛硫磷和溴虫腈药液后,中肠和丝腺组织中Na、K元素平衡发生变化;由辛硫磷导致的中毒会使幼虫2个组织中的Ni元素含量降低,而溴虫腈中毒会使幼虫2个组织中的Rb元素含量降低。家蚕幼虫中肠和丝腺组织中上述4种金属元素含量的变化,对家蚕农药中毒的生理生化机制研究有重要参考价值。     

家蚕谷胱甘肽硫-转移酶的组织分布及发育期变化规律

为明确家蚕谷胱甘肽硫-转移酶(GSTs)的生物学信息,对家蚕不同发育阶段GSTs的变化规律、5龄幼虫主要组织及不同品种间的GSTs活性差异进行了研究。家蚕GSTs在中肠、脂肪体、血淋巴、表皮、头部等组织中都有分布,脂肪体中GSTs活性最高,其次是中肠,头部最低。各发育阶段中,在由一种虫态变为另一种虫态的初始期GSTs活性较高,以后逐渐降低。在幼虫主要组织中GSTs活性5龄第3天最高,以后逐渐下降,至吐丝前达到较低的水平。抗性较强的夏秋蚕品种的GSTs活性高于春用蚕品种,杂交种的GSTs活性高于原种。研究结果提示家蚕GSTs活性与其组织器官的生理功能、品种抵抗性等相关联。     

家蚕氟化物中毒后血淋巴中脂质过氧化物和抗氧化物含量及抗氧化酶活性的变化

为了探究氟化物对家蚕的毒理作用,通过给家蚕5龄期幼虫添食NaF,检测氟化物中毒家蚕幼虫血淋巴中脂质过氧化物质丙二醛(MDA)、抗氧化物质谷胱甘肽(GSH)的含量变化以及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽硫转移酶(GST)等抗氧化物酶的活性变化。正常家蚕幼虫和氟化物中毒家蚕幼虫血淋巴中的MDA含量在5龄期均逐渐下降,但氟化物中毒家蚕的MDA平均浓度比正常家蚕升高了83.77%;GSH含量变化趋势为5龄第1天和第5天较高,第3天较低,但氟化物中毒家蚕5龄期的GSH浓度平均比正常家蚕下降了47.81%;氟化物中毒家蚕5龄期的GSH-Px和GST的平均活性分别比正常家蚕升高63.49%、39.22%,5龄第3天达到最高峰,5龄第1天和第5天较弱。初步分析认为家蚕幼虫血淋巴中MDA和GSH的含量变化以及GSH-Px和GST的活性变化,与家蚕氟化物中毒后体内氧自由基含量上升和脂质过氧化作用增强密切相关,可作为诊断家蚕氟化物中毒的生化指标。     

家蚕中肠碱性磷酸酶活性变化研究

本试验以钼蓝定磷法探讨了各种因素对家蚕中肠碱性磷酸酶活性变化的影响。就家蚕的发育时期来说,酶的活性呈现出规律性的变化,每龄眠中较低,盛食期达最高峰,熟蚕期为五龄的最低值;蚕绝食处理后,中肠碱性磷酸酶活性即下降,绝食后复给桑,酶的活性可恢复到一定水平,大蚕期以不同叶质饲育,此酶活性无论是嫩叶,还是老叶均比适熟叶为低,尤其以基部老叶为最低,不同温度饲育,普通适温区中肠碱性磷酸酶明显高于高温区或低温区;氟化物添食后第二天起,蚕在外表上并无明显的中毒症状,但中肠碱性磷酸酶活性已趋下降。     

氟中毒对桑蚕碱性磷酸酶活性及蚕体重的影响

本文通过添食NaF的方法，探讨了氟中毒对天体重及中肠组织ALKP酶活性的影响，蚕品种之间的耐氟性存在显著差异，氟中毒后蚕体重显著降低，NaF对中肠组织ALKP酶有明显的抑制作用，氟中毒后蚕体重变化与中肠组织ALKP酶活性的变化相关性密切，具有同步性，1％Ca^2 对氟化物抑制作用有一定的缓解作用。     

N.b和SCM6交叉感染对家蚕中肠碱性磷酸酶活性的影响

以家蚕病原性微孢子虫Nosema Bombyx和SCM6交叉感染家蚕,每种交叉感染设不同病原浓度下的同时攻毒和先后攻毒处理,每2d取样测定中肠碱性磷酸酶活性.试验结果表明,当家蚕受到不同浓度的N.b、SCM6感染及不同组合的交叉感染后,受到感染的家蚕中肠AKP活性均出现一定程度的降低,被SCM6/N.b组合感染的家蚕中肠AKP活性高于N.b/SCM6及N.b-SCM6组合.     

栗蚕幼虫酯酶同工酶酶谱多态性及应用于品种间亲缘关系的分析

栗蚕是珍稀的野蚕资源。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,测定栗蚕幼虫不同发育时期、不同组织器官的酯酶同工酶酶谱,并依据酯酶同工酶酶谱的多态性分析纯黑、纯绿2个品种的亲缘关系。检测结果表明:栗蚕幼虫中肠的酯酶同工酶活性和酶带数随龄期而增加,且同一龄期以盛食期的酶表达量最高;幼虫中肠及脂肪体中的酯酶同工酶活性较强,并且酶带数较多;2个供试品种间的酯酶同工酶酶谱明显不同。根据酶谱差异分析2个品种的遗传相似系数为0.86,表现出较近的亲缘关系。研究结果提示:栗蚕幼虫酯酶同工酶的酶活性和酶带数与生长发育和组织功能有关,幼虫酯酶同工酶酶谱可以作为分析品种间亲缘关系的依据之一。     

影响家蚕中肠碱性磷酸酶活性的若干因素

研究了影响家蚕中肠碱性磷酸酶活性的若干因素,在供试的蚕品种间,酶的活性差异显著,且与茧质成绩呈正相关;NPV与CPV对中肠碱性磷酸酶活性的影响不同,即CPV感染明显降低了此酶的活性,而NPV则无其影响;苏云金杆菌感染直接破坏中肠组织,引起酶活性的陡降;各种化学物质中以Mg2+对中肠碱性磷酸酶的激活作用最明显,体外条件下维生素C,Ca2-,柠檬酸,Cl-对酶有抑制作用。     

高浓度CO_2饲养环境对柞蚕3龄幼虫部分生理指标的影响

以柞蚕3龄幼虫为材料,在人工控制的高浓度CO2环境中进行饲养试验,调查幼虫的摄食量、生命力及血淋巴保护酶和中肠蛋白酶活力的变化,探讨高浓度CO2饲养环境对柞蚕幼虫生长发育及保护酶和蛋白酶活性的影响。结果表明,柞蚕3龄幼虫在高浓度CO2(5 000μL/L)条件下饲养,随饲养时间延长其摄食量与对照组相比呈减少趋势,死亡率呈升高趋势,摄食量在处理72 h后低于对照0.2 g/头,差异达到极显著水平;幼虫血淋巴中的过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)活性都低于对照组,其中CAT在处理24 h后与对照组的差异达到显著水平,处理72、96 h后差异均达到极显著水平,SOD在处理144 h后与对照组的差异达到显著水平;幼虫中肠中的总蛋白酶、强碱性类胰蛋白酶、弱碱性类胰蛋白酶活性都低于对照组,但没有显著性差异,类胰凝乳蛋白酶活性在处理24 h后极显著低于对照组。试验结果显示高浓度CO2饲养环境对柞蚕幼虫的生长发育及保护酶和蛋白酶活性均产生了影响。     

家蚕有色茧主要色素物质在幼虫体内的代谢变化

为探讨有色茧色素物质在蚕体内的代谢机制,检测了有色茧主要色素物质的含量及其在家蚕5龄幼虫不同时期中肠、血液、丝腺组织中的消长变化,分析色素物质从中肠进入血液再转运到丝腺的时序差异。有色茧中,黄茧的色素以类胡萝卜素化合物为主,绿茧的色素以黄酮类化合物为主。黄酮类化合物、类胡萝卜素化合物在家蚕5龄幼虫中肠、血液、中部丝腺、后部丝腺中的含量均呈现龄初低、龄末高的趋势,其中,黄酮类化合物在熟蚕组织中的含量是中肠>血液>中部丝腺>后部丝腺;类胡萝卜素化合物在熟蚕组织中的含量是中部丝腺>后部丝腺>中肠>血液。2种色素物质含量变幅最大的是后部丝腺组织,结黄茧蚕和结绿茧蚕的黄酮类化合物分别增加406.55%、202.50%,类胡萝卜素化合物分别增加211.80%、250.84%。黄酮类化合物在5龄幼虫丝腺组织的绝对含量是结绿茧蚕大于结黄茧蚕,类胡萝卜素化合物在5龄幼虫丝腺组织的绝对含量是结黄茧蚕显著大于结绿茧蚕,与在不同颜色蚕茧中检测到的2种色素物质含量一致。研究结果提示:黄酮类化合物在5龄幼虫中肠组织中积累较多,类胡萝卜素化合物在丝腺组织中积累较多;丝腺组织中2种色素物质的含量与茧色密切相关;来自桑叶中的2种色素物质经中肠消化吸收后,再通过血液进入丝腺组织并产生累积效应。     

Uterine glycogen metabolism in mink during estrus,embryonic diapause and pregnancy

We have determined uterine glycogen content, metabolizing enzyme expression and activity in the mink, a species that exhibits obligatory embryonic diapause, resulting in delayed implantation. Gross uterine glycogen concentrations were highest in estrus, decreased 50% by diapause and 90% in pregnancy (P ≤ 0.05). Endometrial glycogen deposits, which localized primarily to glandular and luminal epithelia, decreased 99% between estrus and diapause (P ≤ 0.05) and were nearly undetectable in pregnancy. Glycogen synthase and phosphorylase proteins were most abundant in the glandular epithelia. Glycogen phosphorylase activity (total) in uterine homogenates was higher during estrus and diapause, than pregnancy. While glycogen phosphorylase protein was detected during estrus and diapause, glycogen synthase was almost undetectable after estrus, which probably contributed to a higher glycogenolysis / glycogenesis ratio during diapause. Uterine glucose-6-phosphatase 3 gene expression was greater during diapause, when compared to estrus (P ≤ 0.05) and supports the hypothesis that glucose-6-phosphate resulting from phosphorylase activity was dephosphorylated in preparation for export into the uterine lumen. The relatively high amount of hexokinase-1 protein detected in the luminal epithelia during estrus and diapause may have contributed to glucose trapping after endometrial glycogen reserves were depleted. Collectively, our findings suggest to us that endometrial glycogen reserves may be an important source of energy, supporting uterine and conceptus metabolism up to the diapausing blastocyst stage. As a result, the size of uterine glycogen reserves accumulated prior to mating may in part, determine the number of embryos that survive to the blastocyst stage, and ultimately litter size.     

家蚕蛾溶茧酶分泌器官及蛾吐出液的研究

家蚕蛾溶茧酶可能来源于下颚、嗉囊和中肠,嗉囊是否具有分泌溶茧酶的能力至今缺乏直接的证据。分别用光学显微镜和透射电镜观察了家蚕蛾下颚、嗉囊和中肠的组织结构,发现嗉囊不具备分泌器官的形态特征,是由薄的膜围成的囊状结构,没有观察到分泌细胞及其分泌物;而下颚和中肠具有分泌细胞,存在大量的分泌物质。对蛾吐出液进行酶活性检测,发现蛾吐出液除具有酯酶活力外,还具有纤溶酶活力。分别对下颚、嗉囊和中肠的组织蛋白作酯酶活力和纤溶酶活力测定,发现嗉囊组织蛋白不具有这两种酶活力,而下颚和中肠的组织蛋白具有较强的酯酶和纤溶酶活力。以上实验结果表明:家蚕蛾溶茧酶的来源不是嗉囊,溶茧酶可能来源于下颚和中肠。