甘蓝夜蛾核型多角体病毒悬浮剂防治草地贪夜蛾的应用与推广

通过田间小区试验评价了广谱甘蓝夜蛾核型多角体病毒对草地贪夜蛾的防治效果，20亿PIB/mL甘蓝夜蛾核型多角体病毒悬浮剂用于防治草地贪夜蛾，每亩用量50～60 mL，药后7 d防治效果达到85%以上。2019年在江西省、四川省和贵州省推广应用44.9万亩。     

核型多角体病毒对玉米草地贪夜蛾的控制作用研究

草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda是严重威胁我国玉米生产的入侵害虫。为科学、有效地防控草地贪夜蛾,本文应用浸卵法和浸叶法,在室内研究了几种核型多角体病毒Nucleopolyhedrovirus(NPV)对草地贪夜蛾的毒力,并利用喷雾法进行了田间控制作用研究。结果表明,几种核型多角体病毒浸卵处理10 s对草地贪夜蛾的卵孵化率无明显影响,但苜蓿银纹夜蛾NPV浸卵对草地贪夜蛾卵孵化有一定的延迟作用,24、48 h的孵化率分别为12.50%、69.17%,显著低于对照;核型多角体病毒浸卵对初孵幼虫的毒力较强,棉铃虫NPV、甜菜夜蛾NPV浸卵后初孵幼虫死亡率最高,分别达92.32%、82.49%;草地贪夜蛾3龄幼虫取食浸过核棉铃虫NPV、甜菜夜蛾NPV的玉米叶片72 h后,其死亡率分别为96.39%、92.82%,甘蓝夜蛾NPV对3龄幼虫也具有较强毒杀作用。同时核型多角体病毒对草地贪夜蛾幼虫发育有一定抑制作用,3龄幼虫取食经棉铃虫NPV、甜菜夜蛾NPV处理的叶片72 h平均虫龄分别为3.00龄和3.36龄,显著低于对照。玉米田喷施甜菜夜蛾NPV、甘蓝夜蛾NPV,药后10 d对草地贪夜蛾的防效分别达到86.03%和82.36%。研究表明,甜菜夜蛾NPV、甘蓝夜蛾NPV杀虫剂对玉米草地贪夜蛾具有较好的防控效果,可以作为其有效防控的生物农药。     

玉米草地贪夜蛾田间防治试验

为筛选对玉米草地贪夜蛾防治效果好的药剂,笔者选择球孢白僵菌等8种农药进行玉米草地贪夜蛾田间防治试验。结果表明,10亿PIB/mL苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒SC和5%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐ME对玉米草地贪夜蛾低龄幼虫有优异的防治效果,速效性和持效性俱佳;8 000 IU/μL苏云金杆菌SC、10%虱螨脲SC和10%虫螨腈SC对玉米草地贪夜蛾低龄幼虫也有较好的防治效果,都具有较好的速效性和持效性;300亿孢子/g球孢白僵菌WP速效性和持效性稍差。建议在生产中大力推广苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐、苏云金杆菌、虱螨脲、虫螨腈等农药轮换使用防治草地贪夜蛾。     

10亿PIB/mL斜纹夜蛾核型多角体病毒悬浮剂防治玉米草地贪夜蛾田间药效评价

为做到有效防控保山地区草地贪夜蛾的发生危害,同时又做到化学农药使用减量的目的,选用生物农药10亿PIB/mL斜纹夜蛾核型多角体病毒悬浮剂防治玉米草地贪夜蛾,明确不同剂量斜纹夜蛾核型多角体病毒悬浮剂对玉米安全性、对草地贪夜防效及持效期。本文开展了10亿PIB/mL斜纹夜蛾核型多角体病毒悬浮剂防治玉米草地贪夜蛾田间小区药效试验。结果表明,斜纹夜蛾核型多角体病毒悬浮剂对玉米安全、对草地贪夜蛾具有较好的防治效果,随着每公顷用量的增加,防效和持效期增加,较为突出的是斜纹夜蛾核型多角体病毒悬浮剂450倍液、600倍液,药后1 d防效分别为95.11%、94.04%,药后14 d防效分别为71.09%、63.13%,玉米受损率控制在22.49%以下,药效持续期在14 d。     

4种杀虫剂对玉米上草地贪夜蛾的室内外活性

选择4种杀虫剂开展室内与玉米田间防治草地贪夜蛾试验。室内活性测定结果表明,药后24 h,60 g/L乙基多杀菌素悬浮剂1 500倍液和30亿PIB/mL甘蓝夜蛾核型多角体病毒悬浮剂800倍液处理的2龄幼虫死亡率达100%,200 g/L氯虫苯甲酰胺悬浮剂2 000倍液处理的死亡率达90%;药后72 h,氯虫苯甲酰胺处理的死亡率也达到100%。在玉米田间防治试验中,药后5 d,氯虫苯甲酰胺处理的保叶效果和杀虫效果最好,分别达到92.75%和93.13%;其次为乙基多杀菌素和甘蓝夜蛾核型多角体病毒,保叶效果为91.79%和85.51%,对幼虫的防效为90.38%和86.89%。药后10d,乙基多杀菌素处理的保叶效果和对幼虫的防效均达100%;其次为氯虫苯甲酰胺和甘蓝夜蛾核型多角体病毒处理,保叶效果为97.98%和97.18%,对幼虫的防效为95.83%和95.37%。80亿孢子/mL金龟子绿僵菌CQMa421可分散油悬浮剂500倍液无论室内还是田间对草地贪夜蛾的活性均较低。     

微生物杀虫剂联合施用对草地贪夜蛾幼虫的防治效果

为提高微生物杀虫剂对草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda的防治效果,利用球孢白僵菌Beauveria bassiana IPPB343、IPPB1237与金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae IPPM330189三种昆虫病原真菌,斜纹夜蛾核型多角体病毒（Spodoptera litura nuclear polyhedrosis viruses,SLNPV）、甘蓝夜蛾核型多角体病毒（Mamestra brassicae nuclear polyhedrosis viruses,MBNPV）2种昆虫病毒和短稳杆菌Empedobacter brevis昆虫病原细菌,设置9种联合施用药剂组合,评价6种微生物杀虫剂单独使用以及不同药剂联合施用组合对草地贪夜蛾幼虫的毒力以及田间防治效果。结果表明,与6种微生物杀虫剂单独使用相比,9种联合施用组合均能提升微生物杀虫剂对草地贪夜蛾的毒力水平与田间防治效果。施药后7 d时,金龟子绿僵菌IPPM330189+MBNPV药剂组合的防治效果最好且增效最明显,对草地贪夜蛾的田间防治效果达到88.75%,协同毒力指数为23.78。此外,金龟子绿僵菌IPPM330189+短稳杆菌悬浮剂药剂组合施药后7 d对草地贪夜蛾的田间防治效果达到87.45%,协同毒力指数也可达到21.72。表明微生物杀虫剂联合施用可显著提升其对草地贪夜蛾的防治效果。     

甜菜夜蛾核型多角体病毒青岛分离株SeMNPV-QD的毒力测定

为评价一株新的甜菜夜蛾核型多角体病毒（青岛分离株SeMNPV-QD）在害虫生物防治中的应用潜力，本文以甜菜夜蛾核型多角体病毒青岛株SeMNPV-QD与美国株SeMNPV-US1为材料，分别测定了病毒对甜菜夜蛾细胞系的感染、对甜菜夜蛾幼虫的室内生物活性以及田间防治效果。研究结果表明，SeMNPV-QD与SeMNPV-US1对甜菜夜蛾细胞系Se-3的感染率分别为92.34%和93.65%，平均每个细胞的病毒多角体产量分别为23.97和24.10 PIB，差异均不显著；SeMNPV-QD与SeMNPV-US1对初孵甜菜夜蛾幼虫的LC₅₀分别为4.43×10⁴和4.35×10⁴ PIB/mL，LT₅₀分别为4.12和4.02 d；SeMNPV-QD与SeMNPV-US1对4龄甜菜夜蛾幼虫的LC₅₀分别为9.25×10⁵和4.44×10⁵ PIB/mL，LT₅₀分别为6.20和5.50 d；SeMNPV-QD和SeMNPV-US1对大葱田甜菜夜蛾幼虫具有较好的防治作用，7 d的校正防效分别达到74.99%和79.04%。研究结果将为新病毒株的深入研究开发以及甜菜夜蛾的生物防治提供理论依据。     

7种药剂对草地贪夜蛾的田间防效

草地贪夜蛾是新入侵我国的农业害虫,本试验评价了7种药剂对草地贪夜蛾的防效。结果表明:甲氨基阿维菌素苯甲酸盐、斜纹夜蛾核型多角体病毒、氯虫·噻虫嗪3种药剂防效均在95%以上,并持效期较长;粘颗·苏云菌+甲氨基阿维菌素苯甲酸盐、甲维·虫螨腈2种药剂在药后7d达到最佳效果,但有效期较短,可能与草地贪夜蛾幼虫移动范围较大有关;粘颗·苏云菌、氟铃·茚虫威、吡丙·虫螨腈3种药剂介于上述5种处理之间,且持效性较好。建议药剂交替轮换使用,以延缓抗药性的产生。     

黑点银纹夜蛾核型多角体病毒两个分离株的活性比较

黑点银纹夜蛾属鳞翅目夜蛾科,是一种分布较广,食性较杂的害虫。1979年8月至1981年6月,从泰安市城郊东关大队豆田和南关大队的甘蓝上采集的自然患病死亡的黑点银纹夜蛾幼虫尸中分离到两株核型多角体病毒。为了筛选毒力较强的毒株供病毒制剂的生产和使用,对这两株病毒进行了室内活性比较试验。国外一些研究工作者曾就同一种昆虫中分离的不同株病毒间的活性进行了某些研究,其活性差别有的高达几十倍,也有的无明显差别,国内对中国棉铃虫Heliothis armigera Hibner核型多角体病毒的不同分离株之间的活性差别进行了比较研究,其不同分离株间的活性具有明显差别。关于黑点银纹夜蛾核型多角体病毒不同分离株间活性差别的比较试验尚未见报导。现将初步试验结果报导如下。     

两种森林昆虫病毒的初步研究

细皮夜蛾Selepa celtes Moore、黛袋蛾Dappula tertia Templeton的自然死亡幼虫,经捣碎离心粗提,用扫描电镜观察多角体的形态特征,超薄切片透镜观察病毒粒子的结构。细皮夜蛾幼虫为质型多角体病毒病,黛袋蛾幼虫为核型多角体病毒病。这两种病毒为国内首次发现。     

腰带长体茧蜂对亚洲玉米螟幼虫的寄生功能反应

为评估腰带长体茧蜂Macrocentrus cingulum对亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis的控害潜能，在实验室条件下（湿度60%~80%，光周期16L：8D）研究了20、24、28、32℃下腰带长体茧蜂对亚洲玉米螟幼虫的寄生功能反应和20、24、28℃下腰带长体茧蜂的自身密度干扰效应。结果表明：在20~32℃内，腰带长体茧蜂对亚洲玉米螟的寄生功能反应均符合Holling Ⅱ型；相同温度下，随着寄主亚洲玉米螟密度的增加，腰带长体茧蜂寄生量增加，但当寄主密度增加到一定数量后，寄生量趋于稳定。24℃的寄生效能最大，20℃最小。随着寄主亚洲玉米螟密度和腰带长体茧蜂密度的增加，搜寻效应逐渐降低。采用Hessell干扰模型，发现28℃时的搜寻常数Q和干扰效应m均为最大，腰带长体茧蜂个体间的干扰效应降低了其寄生效能。     

益蝽对亚洲玉米螟幼虫的捕食行为及捕食功能反应

益蝽Picromerus lewisi（Scott）是一种重要的捕食性天敌昆虫,本文研究了其对亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis（Guenée）的捕食作用,为亚洲玉米螟的生物防治及益蝽的生防作用开发提供科学依据。本研究在室内（27±1）℃、光周期16L：8D条件下,采用圆盘法测定了益蝽2、3、4和5龄若虫及雌、雄成虫对亚洲玉米螟2和3龄幼虫的捕食作用与搜寻效应,利用HollingⅡ方程对捕食测定数据进行模拟,建立了益蝽对亚洲玉米螟幼虫的捕食功能反应模型。结果表明：益蝽2、3、4和5龄若虫及雌、雄成虫对亚洲玉米螟2和3龄幼虫均具有捕食作用,其捕食功能反应属于Holling II型,搜寻效应均随猎物密度的增加而降低。益蝽5龄若虫对亚洲玉米螟2龄幼虫的控害效能最强,为252.900,瞬时攻击率为1.012,实际日最大捕食量为26.40头/d;益蝽雌成虫对亚洲玉米螟3龄幼虫的控害效能最强,为202.900,瞬时攻击率为0.812,实际日最大捕食量为14.60头/d。益蝽雄成虫与益蝽5龄若虫和雌成虫之间各指数无显著性差异。综合以上结果,益蝽5龄若虫和成虫对亚洲玉米螟幼虫具有较强的捕食作用,具有良好的生防潜力。     

新疆春播玉米节肢动物群落结构及时序动态

通过探讨春播玉米节肢动物群落结构和时序动态,旨在为玉米田天敌保护利用及玉米害虫的合理防控提供基础资料。采用网捕法和目测法探明春播玉米节肢动物群落结构和时序动态。调查共获节肢动物7632头,隶属3纲12目45科66属70种,亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis（Guenée）和玉米三点斑叶蝉Zygina salina Mit为本地区害虫优势种,天敌优势种则为多异瓢虫Hippodamia Variegata（Goeze）、方斑瓢虫Propiylaea quatuordecimpunctata（Linnaeus）、黄褐新园蛛Neoscone doenitzi（Boes.et Str.）、中华草蛉Chrysopa sinica Tjeder和十三星瓢虫Hippodamia tredecimpunctata（Linnaeus）。新疆北部春播玉米田节肢动物群落中植食性亚群落结构特征指数N、H'、J'、D与总群落相近,优势种害虫亚洲玉米螟和玉米三点斑叶蝉的大量发生致使玉米田节肢动物群落特征指数出现显著变化,是影响群落稳定的主要因素。主成分分析表明,捕食性节肢动物物种数、个体数和植食性节肢动物物种数累计贡献率可达61.47%,是影响该地区玉米田节肢动物群落结构变化的主导因子。灰色系统分析则表明,优势种天敌方斑瓢虫、草蛉、黄褐新园蛛种群数量的变化与优势种害虫玉米螟和玉米三点斑叶蝉种群数量的变化关联度最高,其关联度分别为0.7719和0.8778、0.7898和0.8309、0.9637和0.8312。天敌的发生与害虫种群数量的变化具有显著的跟随效应,这为合理保护利用天敌防控玉米害虫具有重要意义。     

亚洲玉米螟表皮蛋白CPR9的表达纯化及与几丁质的相互作用

亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis是我国玉米最重要的害虫，了解亚洲玉米螟表皮形成的机制将有助于对其开展生物防治。表皮蛋白和几丁质是构成昆虫表皮的两种主要成分，因此研究两者的相互作用对于阐明昆虫表皮形成机制具有关键意义。CPR9是亚洲玉米螟体壁表皮转录组中相对丰度最高的表皮蛋白基因。序列分析发现CPR9属于CPR家族中RR-1亚家族的表皮蛋白，含有R&R结构域，可能是通过结合几丁质来发挥功能。为了研究CPR9与几丁质的相互作用，本研究利用pET-SUMO载体实现了SUMO-CPR9融合蛋白的可溶表达，并通过SUMO蛋白酶处理及两次金属螯合亲和层析纯化了CPR9，平均收率为5 mg/L。几丁质结合试验发现，CPR9对不同类型的几丁质的结合具有选择性。CPR9对α-几丁质结合能力很强，对胶体几丁质结合能力较强，但不与β-几丁质结合。脱乙酰几丁质（壳聚糖）结合试验发现，CPR9能与脱乙酰几丁质结合并使其发生团聚。圆二色光谱分析表明，CPR9在结合脱乙酰几丁质后，其二级结构中平行β折叠和β转角比例上升，反平行β折叠及无规卷曲比例下降。本研究发现了CPR家族表皮蛋白与不同类型几丁质的结合存在特异性，而且在结合过程中会发生结构变化，有助于进一步了解昆虫表皮的形成机制。     

新疆荒漠绿洲区越冬亚洲玉米螟病原真菌种类鉴定及多样性分析

为探明新疆荒漠绿洲区越冬亚洲玉米螟病原真菌多样性,2019-2020年采集了新疆5个地/州6个县/市185个样点的越冬玉米螟幼虫,进行病原真菌分离、鉴定。2年共获被感染越冬玉米螟幼虫534个,分离出136株昆虫病原真菌,隶属于7目7科9属14种。其中,红绶曲霉Aspergillus nomius（22.1%）、球孢白僵菌Beauveria bassiana（19.9%）、镰孢霉Fusarium sp.为优势种,相对分离频率（RDF）分别为22.1%、19.9%和13.2%;花腐镰孢菌Fusarium anthophilum（9.6%）、波兰青霉菌Penicillium polonicum（2.9%）、雷斯青霉菌Penicillium raistrickii（1.5%）、渐狭蜡蚧菌Lecanicillium attenuatum（6.6%）、木贼镰孢菌Fusarium equiseti（3.7%）、层出镰孢菌Fusarium proliferatum（2.2%）、多头被孢霉Mortierella polycephala（5.9%）、链格孢菌Alternaria alternata（5.2%）、直立枝顶孢霉Acremonium strictum（2.9%）、C. perangustum（3.68%）为常见种;腐皮镰孢菌Fusarium solani（0.7%）为稀有种。乌鲁木齐市新市区昆虫病原真菌相对多度最高（41.4%）,昌吉州昌吉市次之（21.4%）,喀什地区疏勒县（11.4%）最低;伊犁州霍尔果斯市病原真菌丰富度、多样性指数和均匀度均较高;昌吉州昌吉市与乌鲁木齐新市区、伊犁州新源县与昌吉州昌吉市及伊犁州霍尔果斯市与喀什地区疏勒县的越冬玉米螟病原真菌中等相似。2年真菌致死率最高的均为乌鲁木齐新市区,分别为28%和14.6%,2019年各采集地区间亚洲玉米螟感染优势病原真菌致死率差异性均显著,2020年各采集地区玉米螟感染白僵菌属致死率差异性显著,而曲霉属和镰刀菌属无显著差异性。本研究结果为保护与利用当地真菌资源,促进亚洲玉米螟绿色可持续控制具有重要意义。     

亚洲玉米螟和黏虫幼虫取食Cry1F蛋白后的中肠组织病理变化

为了明确Cry1F杀虫蛋白对亚洲玉米螟和黏虫两种重要玉米害虫的作用机制，本文通过透射电镜观察了亚洲玉米螟和黏虫4龄幼虫取食含Cry1F蛋白人工饲料后的中肠组织病理变化，并与其取食含Cry1Ab蛋白人工饲料后的组织病理变化进行了比较。亚洲玉米螟和黏虫4龄幼虫取食Cry1F蛋白48 h后中肠杯状细胞发生了明显的病变，主要表现为：细胞微绒毛肿胀、脱落；细胞核变形，质膜和核膜界限不清晰；染色质发生固缩、贴近核膜；线粒体拉伸变形数量减少，严重的发生空泡化；内质网肿胀与断裂、数量减少，与取食含Cry1Ab蛋白人工饲料相比，玉米螟和黏虫中肠组织发生的病变程度相似。本研究可为Cry1F作为转基因玉米重要的杀虫蛋白在未来亚洲玉米螟和黏虫防治中更好地发挥作用提供理论依据。     

苏云金芽胞杆菌G033A大面积防治二代区亚洲玉米螟效果评价

亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis(Guenée)是黑龙江省玉米生产上发生最重、为害最大的常发性害虫,为明确苏云金芽胞杆菌G033A(Bt G033A)对2代区亚洲玉米螟的田间防效,分别于玉米心叶期和穗期,应用Bt G033A对1代和2代亚洲玉米螟进行了防治示范,测定田间平均防治效果、挽回产量损失率及产量...     

亚洲玉米螟对Cry9Ee与Cry1Ab蛋白的交互抗性分析

Cry9Ee是近年来发现的对亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis(Guenée)等害虫具有高毒力的蛋白,具有良好的应用前景。为了明确亚洲玉米螟对Cry9Ee和Cry1Ab蛋白是否存在交互抗性,本文首先分别表达、活化、纯化了Cry9Ee和Cry1Ab蛋白,进而对敏感和Cry1Ab抗性亚洲玉米螟进行生物活性测定;随后对2种蛋白在敏感亚洲玉米螟中肠刷状缘膜囊泡(brush border membrane vesicles,简称BBMVs)上的结合进行分析比较。生物活性测定结果表明,Cry9Ee和Cry1Ab蛋白的活性片段对敏感亚洲玉米螟的LC₅₀分别为3.04和0.89 μg/g;而Cry9Ee活性片段在5.00 μg/g的浓度下,对Cry1Ab蛋白抗性亚洲玉米螟致死率高达96%,与对敏感种群活性相当。竞争结合试验表明,Cry9Ee和Cry1Ab两种蛋白间不存在竞争结合,推测它们在亚洲玉米螟中肠上存在不同的受体。综合生物活性测定及体外结合试验两方面结果得出结论：亚洲玉米螟对Cry9Ee与Cry1Ab蛋白不存在交互抗性。cry9Ee基因可以作为理想的候选基因,用于我国新一代转基因抗虫玉米的研制,为延缓和克服亚洲玉米螟对转基因抗虫玉米抗性的产生提供重要保证。     

不同Bt杀虫蛋白通过食物链对大草蛉的影响

为了明确目前转基因抗虫植物中表达的Bt蛋白对农田重要捕食性天敌大草蛉的生态安全性，采用三级营养食物链评价体系，分别以对供试Bt蛋白Cry1Ac、Cry1F和Cry2Ab具有抗性的靶标害虫或不敏感的非靶标害虫作为大草蛉的猎物，研究了供试3种蛋白对大草蛉的影响。结果表明，当大草蛉以抗性棉铃虫（抗Cry1Ac或Cry2Ab）或抗性玉米螟（抗Cry1F）为猎物时，供试3种Bt蛋白通过食物链对大草蛉幼虫（4龄幼虫重量和幼虫发育至蛹历期）、蛹（化蛹率、蛹重和蛹发育历期）及成虫（羽化率、雌虫重量、雄虫重量和单雌产卵量）的生长发育及产卵量均无显著影响；同样地，当大草蛉以对3种Bt蛋白不敏感的非靶标昆虫——绿盲蝽作为猎物时，通过食物链传递的Bt蛋白对大草蛉生长发育及繁殖也无显著影响。因此，目前转基因棉花、玉米或水稻中广泛表达的Cry1Ac、Cry1F和Cry2Ab蛋白，通过三级营养食物链，对大草蛉生长发育及繁殖均无潜在毒性。