烟芽夜蛾囊泡病毒3h株对草地贪夜蛾幼虫的感染特性及对其生长发育的影响

为寻找有效防控外来入侵物种草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda的技术,以烟芽夜蛾囊泡病毒3h株(Heliothis virescens ascovirus 3h,HvAV-3h)为研究对象,通过测定不同龄期草地贪夜蛾幼虫口服或针刺感染HvAV-3h后的死亡率、存活时间、取食量及体重,分析该毒株对草地贪夜蛾幼虫的感染特性及对其生长发育的影响。结果显示,草地贪夜蛾1、2龄幼虫口服HvAV-3h后的校正死亡率分别为9.22%和0,3～6龄幼虫针刺感染HvAV-3h后的校正死亡率则高达100.00%,感染HvAV-3h的幼虫均在幼虫期或蛹期死亡。3～5龄幼虫针刺感染HvAV-3h后的存活时间明显长于健康幼虫;3～6龄幼虫针刺感染HvAV-3h后其体重和取食量均受到不同程度的抑制作用,体重抑制率分别为67.79%、41.68%、16.31%和10.30%,总取食量抑制率分别为57.80%、33.90%、17.42%和41.82%;其中3龄幼虫针刺感染HvAV-3h后的体重和取食量被显著抑制,且蜕皮困难,最终在幼虫期死亡;部分4～6龄感染HvAV-3h幼虫能够完成化蛹,但是均无法羽化。表明HvAV-3h感染能够有效控制草地贪夜蛾幼虫,有望开发为草地贪夜蛾的生防制剂。     

烟芽夜蛾囊泡病毒3h株3h-122基因于棉铃虫幼虫体内的转录表达分析

本文构建了烟芽夜蛾囊泡病毒3h株(HvAV-3h)第122个基因(3h-122)的原核表达载体并制备多克隆抗体?利用蛋白免疫印迹?RT-PCR?免疫组织化学染色等技术检测3h-122的转录表达时相以及组织特异性?结果表明, 3h-122编码大小16.1 kD的结构蛋白(3H-122)?HvAV-3h感染棉铃虫幼虫后3 h开始检测到3h-122的转录并稳定持续至第168 h?3H-122在棉铃虫感毒后24 h至168 h可持续检测到其表达?此外, 3H-122主要在脂肪体组织中表达?本研究为阐明囊泡病毒结构蛋白的功能及其在囊泡病毒致病机制中的作用奠定了基础?     

北方四省区番茄褪绿病毒的分子鉴定

2015-2016年间,在山西省、内蒙古自治区、辽宁省、吉林省采集到疑似感染番茄褪绿病毒Tomato chlorosis virus(ToCV)的番茄植株。利用扩增ToCV外壳蛋白(coat protein,CP)和类热激蛋白(heat shock protein 70homolog,HSP70h)基因片段的两对特异性引物,通过RT-PCR对疑似样品进行分子检测,得到970bp和1 864bp的特异条带,经测序、比对确定为ToCV。序列分析表明,山西晋中分离物SXJZ(KX853540)的CP核苷酸序列与河南安阳分离物HNAYHX(KP264983)相似性为99.7%,内蒙古呼和浩特分离物NMHHHT(KU204709)和辽宁大连分离物LNDL(KU204707)的CP核苷酸序列与国内已报道的山东寿光分离物SDSG(KC709510)相似性分别为99.5%和99.7%,吉林长春分离物JLCC(KU306111)的CP核苷酸序列与山东聊城分离物SDLC(KC812622)的相似性为99.8%。而HSP70h核苷酸序列的相似性分析表明,山西晋中分离物SXJZ(KX853539)与日本分离物Tochigi(AB513442)相似性为99.4%,内蒙古呼和浩特分离物NMHHHT(KU204710)、辽宁大连分离物LNDL(KU204708)和吉林长春分离物JLCC(KX880384)与山东寿光分离物SDSG(KC709510)相似性分别为99.7%、99.8%和99.7%。试验结果明确了番茄褪绿病毒已蔓延传播到我国山西、内蒙古及东北地区。     

陕西杨凌番茄褪绿病毒的分子检测

近年来在陕西番茄生产区出现了一种新病害,病株表现为叶片褪绿,叶脉颜色变深及叶片增厚,果实变小发白,严重影响番茄产量及经济效益,2016年发病极为严重,部分产区甚至绝收。该病疑似由番茄褪绿病毒Tomato chlorosis virus(ToCV)引起。利用ToCV特异引物对感病番茄样品进行RT-PCR检测,结果从所采集的4份病样中均检测到ToCV预期大小的特异片段。对ToCV外壳蛋白CP基因和类热激蛋白HSP70h基因进行克隆与序列分析,ToCV-YL1 CP基因774个核苷酸序列与已报道的ToCVCP基因有较高的一致性,与山东青岛和山西晋中分离物同源性为100%。ToCV-YL1 HSP70h基因1 665个核苷酸序列与已报道的ToCV HSP70h基因有较高的同源性,与中国、韩国、日本、美国、希腊分离物同源性达到99%以上。研究表明ToCV已传播至陕西地区。     

甲氯虫酰肼·乙基多杀菌素360g/L悬浮剂对大葱甜菜夜蛾和蓟马的田间防效

甜菜夜蛾和葱蓟马是为害大葱的重要害虫,为了寻找高效、环境友好且能兼治的药剂,特进行了本研究.结果表明:甲氧虫酰肼·乙基多杀菌素360g/L悬浮剂对甜菜夜蛾的防效在施药后第1、3、7d逐渐提高,药后第10d在24.4g/667m2的剂量下,防效可达98.40％;对葱蓟马防效药后第3d最好,在24.4g/667m2的剂量下,平均防效为74.56％,药后第7、10d防效略有降低.因此,甲氧虫酰肼·乙基多杀菌素360g/L悬浮剂可作为大葱田防治甜菜夜蛾和蓟马的优良药剂.     

Characterization of a New Nepovirus Infecting Apricot in Southeastern France: Apricot Latent Ringspot Virus

A pathogen was transmitted from apricot trees showing symptoms of viral infection to GF305 peach seedlings which reacted by stunting, shortened internodes and chlorotic mottling. The agent was transmitted to cherry, apricot, peach and plum by grafting and to several herbaceous hosts by mechanical inoculation. Isometric nepovirus-like particles of 30–31 nm diameter extracted from infected Chenopodium quinoa sedimented as two peaks in sucrose gradients. These particles contained two single stranded RNAs of approximately 5.9 and 7.9 kb, and a single coat protein subunit of 53.7 kDa. No cross-reactions were observed with a number of nepoviruses infecting fruit trees. Inoculation of purified particles to herbaceous or woody hosts reproduced the same symptoms caused by the original isolate. Sequencing of a 2.2 kbp cDNA clone covering the 3 end of the small genomic RNA identified an open reading frame encoding a 317 aa N-truncated protein exhibiting significant similarities with the coat protein of nepoviruses. The 1257 nt long 3 non-coding region showed up to about 65% homology to the equivalent region of members of the subgroup C of nepoviruses. The properties of this pathogen do not match those of any previously described nepovirus. It should therefore be considered as a new member of the subgroup C of nepoviruses, for which the name of Apricot latent ringspot virus (ALRSV) is proposed.The nucleotide sequence reported in this work has been deposited in the EMBL databank under the accession number AJ278875.     

十字花科杂草种子的破眠研究

对我国农田常见的7种十字花科杂草破眠研究表明，400－600mg/kg浓度的赤霉酸溶液处理24h,能有效打破诸葛菜、风花菜、遏蓝菜、碎米蔼和Han菜种子的休眠，5种杂草的发芽率由对照的0－16％提高到36.3%－80.67%。机械破皮加赤霉酸处理，能有效打破播娘蒿种子的休眠，发芽率提高到43.97%。机械破皮后用GA3处理，种子萌发时再进行变温处理，能大幅度提高蔼菜种子的发芽率，发芽率可提高到71.67%。     

水稻转录因子OsBTF3对不同病原菌和信号分子的基因表达反应

 转录因子基因OsBTF3在水稻品种日本晴悬浮细胞中受白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)诱导表达。为了阐明OsBTF3在水稻叶组织中的表达特征,本研究利用RT-Q-PCR技术,对经3种亲和性病原菌[水稻白叶枯病菌(Xoo)、水稻条斑病菌(Xooc)和稻瘟病菌(Mg)]接种和4种信号分子[脱落酸(ABA)、水杨酸(SA)、茉莉酸甲酯(MeJA)、乙烯(ETH)]诱导处理的水稻叶片中OsBTF3的转录本进行了定量分析。结果表明,OsBTF3对Xoo、Xooc和Mg侵染的基因表达反应均显著地受到诱导,但反应速度和强度略有差异。而4种信号分子对OsBTF3表达的诱导作用差异较大,ABA诱导活性最强,MeJA和ETH次之,SA诱导作用不显著。因此,OsBTF3基因表达不仅具有病原菌Xoo、Xooc和Mg的诱导性,而且也具有信号分子MeJA、ETH和ABA的应答性。     

灌溉条件下包气带黄土层中NO-3-N的深部运移

通过渭北黄土塬地区NO3--N的原位运移试验,测定了10 m范围内黄土超根层中NO3--N浓度随时间的变化,对NO3--N和土壤含水量的运移通量及运移速率进行了定量分析。结果表明:微孔隙渗流的水分运移速率为44~65 mm/d,优先流的运移速率可达450 mm/d以上;NO3--N在施肥灌溉及作物吸收等因素的综合影响下形成积累峰值带,并向下运移,其平均运移速率为56.3 mm/d;在作物生长缓慢的冬季大定额灌溉条件下,施入农田的尿素并不能被作物完全吸收,上层土壤吸附的NO3--N会被大量淋洗,50%以上的NO3--N随入渗水流运移到作物根层以下,成为深层土壤和地下水的NO3--N污染来源。     

GA3和NAA对苣荬菜芽根再生的影响

盆栽苣荬菜,分别用GA3、NAA处理,通过新复极差法分析GA3、NAA对苣荬菜越冬后地上发生株数、芽生长、芽根长、芽根重的影响。结果表明,不同浓度GA3、NAA的综合效应存在显著差异,GA3能显著抑制根芽再生以及地上发生株数,以GA350mg／L处理的抑制效应最好,GA310、100mg／L仅能延缓生长。NAA100mg／L能有效抑制苣荬菜越冬后芽根的再生能力,NAA10、50mg／L处理则促进了地上株数的增加。各浓度处理芽根重、芽根长都受到明显的抑制作用。     

3-芳氧基-6-氯(或氟)哒嗪类化合物的合成及除草活性研究

从3,6-二氯哒嗪( Ⅰ) 出发,通过氟代得到3,6-二氟哒嗪( Ⅱ )。将 Ⅰ,Ⅱ 分别与取代苯酚缩合,得到了18个3-芳氧基-6-氯哒嗪( Ⅲ )和12个3-芳氧基-6-氟哒嗪( Ⅳ )。所有目标化合物( Ⅲ,Ⅳ )的结构都经过 1H NMR和元素分析确证,部分化合物经IR确证。初步的生物测定结果表明,目标化合物具有不同程度的除草活性,其中化合物 Ⅲ3、Ⅲ8和Ⅳ2 在100 μg/mL的浓度下对稗草Echinochtoa crus-galli的抑制率分别达到95.7%、96.1%和91.2%。     

Chemical and environmental factors driving germination of Solanum americanum seeds

Solanum americanum Mill. is a weed that occurs with a number of crops, and it is known for its high seed production and its staggered germination. The objective of this work was to evaluate the germination behavior of S. americanum seeds under the influence of chemical and environmental factors. In the laboratory, we tested the effect on germination of (i) constant and alternating temperatures, (ii) seed washing, (iii) exposure time and concentration of chemical treatments and (iv) seeding depth and soil covered with plant residue on seedling emergence. The variables analyzed were germination percentage, germination rate index, seedling emergence and length of the seedlings. The results indicated that alternating temperatures are the main way to promote germination of S. americanum; however, chemical treatments can help to increase the germination percentage and rate index. There was no increase in germination with seed washing, with the exception of KNO₃ application. A GA₃ concentration of 0.84 g L^?1 and an exposure time of 21.22 h in 0.2% of KNO₃ promoted the highest germination of S. americanum. Germination occurs when seeds remain on the soil surface and are not covered by crop residue.     

七氟甲醚菊酯原药的气相色谱分析方法研究

本文采用气相色谱法,HP-5弱极性毛细管柱,以邻苯二甲酸二丙酯为内标物,用FID检测器对七氟甲醚菊酯原药进行定性定量分析。该方法的线性相关系数为0.999 9,标准偏差为0.132 7,变异系数为0.143 1%,平均回收率为100.31%。此外,用强极性毛细管柱,FID检测器对其顺式Z/E异构体进行分离。     

水稻条纹病毒山东济宁分离物RSV-SD-JN2分子变异分析

为从分子水平探讨强致病性水稻条纹病毒山东济宁分离物RSV-SD-JN2的变异及其致病性,采用RT-PCR技术,克隆RSV-SD-JN2的RNA3、RNA4区段cDNA。结果显示,RSV-SD-JN2的RNA3和RNA4核苷酸序列长度分别为2487、2157bp;RNA3中,NS3基因长为636bp,基因间隔区(IR)为725bp,CP基因为969bp;RNA4中,SP基因长为537bp,基因间隔区(IR)为654bp,NSvc4基因为861bp。不同时期、不同区域和不同致病性的RSV分离物的序列比较发现,RNA3、RNA4序列5′和3′末端非编码区具有高度保守性,仅存在个别碱基的差异;基因编码区保守性较高,核苷酸和氨基酸序列同源性分别在93%和97%以上,且大部分碱基变异为无意义变异;基因间隔区(IR)易于变异。RSV的分子变异与其地理分布具有密切的关系。RNA4的IR的变异导致RNA二级结构——发夹结构的稳定性提高是病毒致病性增强的重要原因。     

双生病毒复制增强蛋白C3/AC3的研究进展

双生病毒作为全球范围内引起作物严重病害的单链DNA病毒，编码多种多功能蛋白，其帮助自身完成复制、转录、组装、移动和致病等生命过程，其中双生病毒的复制增强蛋白C3/AC3在病毒侵染初期可促进病毒复制，提高病毒积累水平以帮助其快速建立侵染。为深入解析C3/AC3蛋白的功能和双生病毒致病机制，该文概述双生病毒C3/AC3蛋白的基本生物学特性及其在病毒侵染过程中的功能，重点阐述C3/AC3蛋白与其他蛋白及寄主因子互作以促进病毒复制的分子机制，同时针对双生病毒复制机制和C3/AC3蛋白的功能解析进行展望。     

7种检疫性植物病原黄单胞菌III型分泌系统和效应蛋白编码基因的差异性分析

 γ-变形菌纲(γ-Proteobacteria)的黄单胞菌属(Xanthomonas)的大多数种类可引起植物病害,多数是我国检疫对象。与其他革兰氏阴性植物病原细菌一样,植物病原黄单胞菌可通过高度保守的III型分泌系统(type-III secretion system, T3SS)分泌效应蛋白(T3SS-secreted effectors, T3SEs)进入植物细胞,在非寄主植物和抗病寄主植物上产生过敏反应(hypersensitive response, HR)以及在感病寄主植物上具有致病性。尚不清楚哪些种类的黄单胞菌具有T3SS和缺少哪些T3SE是否可作为检疫的依据。搜集7种检疫性植物病原黄单胞菌,通过PCR和Southern杂交试验结果发现:香蕉细菌性青枯病菌(X. campestris pv. musacearum)的ICMP287和ATCC49084菌株、甘蔗流胶病菌(X. axonopodis pv. vasculorum)ATCC13901菌株、洋葱细菌性叶枯病菌(X. axonopodis pv. allii)的LMG576和LMG578菌株中不含有tale基因,并且ATCC13901菌株既不含有T3SS基因也不含有hpa1和xopQ基因;菜豆细菌性疫病菌(X. campestris pv. phaseoli)ATCC49119菌株不含有hpa1基因。相应地,推测含有2~12个tale基因的黄单胞菌有:大豆斑疹病菌(X. axonopodis pv. glycines)ICMP5732和ATCC43911菌株、豌豆细菌性疫病菌(X. axonopodis pv. vignicola)ATCC11648菌株、棉花细菌性角斑病菌(X. campestris pv. malvacearum)ATCC12131和(X. campestris pv. phaseoli)ATCC49119菌株。大豆细菌性斑疹病菌ATCC43911菌株尽管含有hpa1、xopQ和hrcC基因,但在非寄主烟草上不能激发HR反应;而甘蔗流胶病菌ATCC13901菌株不含有hpa1、xopQ和hrcC基因,却激发烟草产生HR反应。这些结果对于分析比较不同植物病原黄单胞菌的致病性因子和设计特定的植物检疫靶点提供了科学线索。     

Phytogrowth- and photosynthesis-inhibiting properties of nostoclide analogues

Six nostoclide analogues were synthesised from 3-benzyl-2(5H)-furanone in one step, with yields ranging from 10 to 71%, and subjected to several biological assays. The two most active of these, 5d and 5e, were shown to be phytogrowth inhibitors of the radicle of Lolium multiflorum Lam, while enhancing the root growth of Physalis ixocarpa Brot. Both compounds inhibited electron flow (basal, phosphorylating and uncoupled) from water to methylviologen (MV); both acted as Hill reaction inhibitors, since the synthesis of ATP was prevented. The uncoupled electron transport from photosystem II (PSII) (water to 2,6-dichlorophenol-indophenol (DPIP)) and photosystem I (PSI) (2,6-dichlorophenol-indophenol reduced (DPIPred) to MV) was inhibited with 500 microM of 5d by 22 and 14% respectively. In addition, 400 microM of 5d inhibited PSI (from tetramethyl-p-benzohydroquinone (TMQH(2)) to MV) by 40%. Thus 5d inhibited electron transport at the b(6)f complex. Finally, 500 microM of 5e inhibited electron flow (basal and phosphorylating) by 25%, and 300 microM of 5e enhanced light-activated membrane-bound Mg(2+)-ATPase by 66%. Thus 5e behaved as a weak Hill reaction inhibitor and an uncoupler. In general, the phytotoxicity of the synthetic lactones was only weakly related to inhibition of photosynthesis.