链霉菌几丁质酶基因分子检测、克隆及原核表达

随着分子生物学的发展,近几年生物防治分子水平的研究也发展很快,在植物抗性基因和病原菌无毒基因的鉴定与分离、真菌酶抑制剂、抗真菌蛋白质等方面取得了很大进展。在抗真菌蛋白方面, 报道最多的是几丁质酶,它催化几丁质的水解,从而破坏植物病原真菌细胞壁的主要组分。链霉菌是一类重要的天然抗生素和几丁质酶生产菌,能分泌多种胞外酶,如纤维素酶、几丁质酶和木聚糖酶等,以分解和利用土壤环境中的多种有机质。本试验建立的PCR分子检测方法,可以从土壤细菌中直接筛选产生几丁质酶的链霉菌菌株,发掘几丁质酶资源。在此基础上克隆了一株链霉菌菌株的几丁质酶基因,并在大肠杆菌中进行了表达。     

植物几丁质酶在抗真菌病害基因工程中的应用

植物几丁质酶因能水解真菌细胞壁的主要成分几丁质 ,在抗植物真菌病害反应中发挥了重要的作用。本文对植物几丁质酶的特性、分类、基因的诱导表达及其基因在抗真菌病害基因工程中的应用等进行了阐述 ,指出植物几丁质酶在抗真菌病害基因工程中的巨大应用前景     

几丁质酶在植物保护中的研究与应用进展

随着越来越多的几丁质酶基因被克隆 ,目前几丁质酶在植物保护上的应用日益受到重视 ,利用几丁质酶基因培育抗真菌基因工程植物新品种正逐渐成为植物防御真菌病害的一种有效途径。本文概括了几丁质酶的抗菌活性、诱导表达特性及其在植物抗真菌病害中的应用等方面的研究进展     

豇豆几丁质酶纯酶液对不同真菌的作用

几丁质酶(EC 3.2.1.14)广泛存在于植物中,当受到病原菌侵染或其它诱导因子诱导时,植物体内几丁质酶活性显著提高。菜豆纯几丁质酶具抗Trichoderma viridae活性,转菜豆几丁质酶基因的烟草植株增强了对Rhizoctonia solani的抗性。作者研究了经诱导、提纯的豇豆几丁质酶对不同真菌的作用,为开展抗真菌病基因工程研究奠定了基础。 1 材料与方法     

重寄生真菌盾壳霉产生几丁质酶的条件优化

本试验采用摇瓶培养的方法研究了盾壳霉产生胞外几丁质酶的条件。结果表明：培养液组分、通气状况、表面活性剂和草酸等因子对盾壳霉产生几丁质酶均有影响。改良的马铃薯蔗糖培养液（mPSB）较合成培养基SMCS更适宜作为几丁质酶产生的基础培养基,其几丁质酶产量达到616.8U/L;以mPSB为基础培养基,供试的9种碳源和7种氮源中5g/L葡萄糖和1g/L硝酸钾可使几丁质酶的产量分别达到756U/L和672U/L,较适宜几丁质酶的产生;生长曲线试验显示20℃培养15d几丁质酶产量达到高峰。另外,两种供试表面活性剂对几丁质酶的产生均有抑制作用;一定浓度的草酸溶液（0.1-3g/L）有助于盾壳霉几丁质酶的产生。     

拟康宁木霉Hailin产几丁质酶条件优化及其抑菌能力评价

采用透明圈法测定了拟康宁木霉(Trichoderma koningiopsis) Hailin菌株是否产几丁质酶,并通过单因素和正交试验对Hailin菌株产几丁质酶的发酵条件进行优化;用对峙培养和培养基中添加几丁质的方法检测Hailin菌株及其几丁质酶粗酶液对7种植物病原真菌的拮抗能力。结果表明,Hailin菌株在胶体几丁质的诱导下可以产生明显的透明圈,即可产生几丁质酶。Hailin菌株产几丁质酶的优化条件为葡萄糖5.0 g/L、硝酸钾10.0 g/L、Mn~(2+)0.08 mol/L、Mg~(2+)0.05 mol/L、初始pH为4、装液量为50 mL/150 mL。优化条件下,Hailin菌株产几丁质酶活性可达到0.784 U/mL,较优化前几丁质酶活性相比提高了2.57倍。Hailin菌株对7种植物病原真菌均有抑菌效果,抑菌率在44.44%～85.71%之间;Hailin菌株几丁质粗酶液对7种植物病原菌中的6种具有抑菌效果,抑菌率为5.88%～71.52%。Hailin菌株分泌的几丁质酶在Hailin菌株抑制不同病原菌过程中发挥的抑菌作用存在显著差异。     

焉耆盆地的盐渍土酶活性初步研究

早在1899年就发现有土壤过氧化氢酶存在。其后,在欧美开展脲酶和核酸酶研究。本世纪五十年代土壤酶的研究更加广泛。我国对于土壤酶的研究,开始于本世纪六十年代,现在已迅速发展,获得不少成就。研究表明:土壤酶来源于土壤微生物和土壤动物以及植物根系。土壤酶是土壤中生物活性最强的部分,它参与土壤中有机物质的分解、合成以及碳、氮、磷等养分释放的全过程。如过氧化氢酶能酶促过氧化氢分解为水和分子氧,它的作用是能破坏土壤中生化反应生     

木霉几丁质酶及其基因的研究进展

现已报道8种木霉的39个几丁质酶基因,其中22个为42kD内切酶基因.这些42kD内切酶基因的核苷酸序列及其编码的前体蛋白的氨基酸序列极为相似.42kD几丁质酶基因开放阅读框一般有3个内含子,前体蛋白一般有约22AA的信号序列,引导输出.成熟蛋白具有催化域、磷酸化域和耱基化域.基因的表达是诱导型的,受几丁质及真菌几丁质细胞壁的强诱导,受代谢物阻遏.转入植物的木霉几丁质酶基因可正确表达.本文就木霉生防菌株几丁质酶及其基因克隆、几丁质酶基因结构和功能、几丁质酶基因的表达和调控,以及木霉几亍质酶的生防应用前景等几方面进行了综述.     

白菜黑腐病拮抗菌Lysobacter enzymogenes CX03的分离鉴定及生防效果研究

从白菜根际土壤中分离到一株对白菜黑腐病菌具有显著拮抗效果的生防细菌CX03。根据生物学特征、生理生化分析、Biolog测定及多基因系统发育分析，鉴定菌株CX03为产酶溶杆菌Lysobacter enzymogenes。酶学试验结果表明，菌株CX03在代谢过程中产生纤维素酶、蛋白酶和几丁质酶。通过抑菌谱分析，证明菌株CX03具有广谱拮抗作用，对野油菜黄单胞野油菜致病变种、密执安棒杆菌密执安致病变种等5种病原细菌和尖孢镰孢菌、辣椒疫霉菌等4种病原真菌具有显著的拮抗效果。通过盆栽试验结果显示，菌株CX03处理组的白菜黑腐病症状明显减轻，防治效果达到90.4%，显著高于春雷霉素的防治效果84.1%。综上所述，本文首次报道了一株对植物病原细菌具有抗菌活性的产酶溶杆菌生防菌株CX03，其生防性状优良，在植物病害生物防治中具有一定的应用潜力，为国内生物防治研究提供了新的微生物资源。     

产几丁质酶菌的分离鉴定及其抑菌作用的初步研

从北京地区的土样、砂样和水样中分离并纯化了产生几丁质酶的菌株，其中CT14含几丁质酶活性最高，经对其细胞形态、菌落特征的观察和生化特性检测，证明该菌株是环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)。其几丁质酶粗提液能抑制多种植物病原真菌的生长，表明它对植物病原真菌的拮抗作用具有广谱性。