‘芽黄’红瑞木炭疽病病原菌的分子鉴定

‘芽黄’红瑞木炭疽病在上海普遍发生。本研究从上海迪士尼园区采集疑似炭疽病的红瑞木病叶,进行了分离培养,获得2种培养形态的炭疽菌,致病性测定证明其为致病菌。联合核糖体转录间隔区、3-磷酸甘油醛脱氢酶、钙调蛋白和β-微管蛋白2多基因序列,使用最大似然法和贝叶斯分析法分别构建了多基因系统进化树。结果显示,分离获得的2株炭疽菌菌株分别与暹罗炭疽菌Colletotrichum siamense和胶孢炭疽菌C.gloeosporioides聚集在一个分支,辅以形态学特征,鉴定引起‘芽黄’红瑞木炭疽病的病原菌为暹罗炭疽菌和胶孢炭疽菌,这是国内关于红瑞木炭疽病的首次报道。     

四川省鹅掌柴炭疽病病原菌的初步鉴定

炭疽病是鹅掌柴发生最严重的病害之一。本文从四川省成都市采集疑似为炭疽病的鹅掌柴病叶,进行了分离培养,获得培养形态完全不同的2株炭疽菌,致病性测定发现它们都为致病菌。多基因(核糖体内转录间隔区、肌动蛋白、3-磷酸甘油醛脱氢酶、几丁质合成酶、β-微管蛋白、钙调蛋白)的系统发育分析发现,分离获得的2株炭疽菌分别与暹罗炭疽菌(Colletotrichum siamense)和喀斯特炭疽菌(C.karstii)聚在一起,形成一个明显的分支,结合形态学特点,确定引起成都市鹅掌柴炭疽病的病原菌为暹罗炭疽菌和喀斯特炭疽菌,这是关于这两种病原引起鹅掌柴炭疽病的首次报道。本文还研究了不同的回接方式对致病性测定的影响,砂纸擦拭后选取中老叶片用孢子悬浮液接种是对鹅掌柴炭疽病最好的致病性测定方法。     

福建省大豆炭疽病病原菌的分离与鉴定

为明确引起福建省大豆炭疽病的病原菌种类,2018—2019年从福建省福州、三明、莆田、泉州和南平市采集具有大豆炭疽病症状的大豆豆荚,采用组织分离法分离病原菌,结合形态学特征和多基因系统发育分析对病原菌进行鉴定。结果表明,从采集的豆荚样本中共分离获得152株炭疽菌菌株,经形态学初步鉴定分属于3种类型,从3种类型的病原菌中分别选取3株代表菌株进行多基因系统发育分析,这9株代表菌株分别与Colletotrichum plurivorum、平头炭疽菌C.truncatum和胶孢炭疽菌C.gloeosporioides聚在一起。形态学和多基因系统发育分析结果表明,引起福建省大豆炭疽病的病原菌有3种,分别为C.plurivorum、平头炭疽菌和胶孢炭疽菌,其占比分别为10.53%、50.00%、39.47%。致病性测定结果表明,C.plurivorum、平头炭疽菌和胶孢炭疽菌对大豆均有致病作用,但不同的菌株致病力存在差异。表明平头炭疽菌是引起福建省大豆炭疽病的主要病原菌,而C.plurivorum为引起我国大豆炭疽病的新纪录种。     

滇黄精炭疽病菌的初步鉴定及其对3种杀菌剂的敏感性

对2019年采集自云南省3个滇黄精产区的炭疽病菌进行形态学及ITS序列分子鉴定，并采用菌丝生长速率法，测定了40株黄精炭疽病菌对氟啶胺、咪鲜胺和苯醚甲环唑的敏感性。结果表明:从滇黄精炭疽病病叶上分离得到的40株炭疽病菌可能分别属于炭疽菌属中的胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides、果生炭疽菌C. fructicola、博宁炭疽菌C. boninense和尖孢炭疽菌C. acutatum，其中果生炭疽菌29株，占总分离菌株的72.5%，为优势病原菌。3种杀菌剂对 40 株供试菌株的菌丝生长有明显的抑制作用，氟啶胺、咪鲜胺和苯醚甲环唑的EC₅₀ 值分别介于0.028~0.53 mg/L、0.018~2.69 mg/L 和 0.158~2.57 mg/L 之间，即供试菌株对氟啶胺的敏感性高于其对咪鲜胺和苯醚甲环唑的敏感性。目前，3个滇黄精产区的炭疽病菌尚未对氟啶胺、咪鲜胺和苯醚甲环唑产生抗药性。     

海南辣椒炭疽病病原菌鉴定及其对嘧菌酯的敏感性分析

2015年3月调查了海南省海口、琼海、万宁、儋州等市(县)的辣椒炭疽病的发生与病情,对采集的样本分离出的7株纯菌株进行了致病性测定及形态学观察,通过生长速率法及孢子萌发抑制法分别测定嘧菌酯对辣椒炭疽病病原菌菌丝和孢子的影响。结果表明,菌株DM4-2和DZ1-3为黑点炭疽菌(Colletotrichum capsici),菌株NP3-9、NP5-3、DZ2-7、HN5-11和HN2-6均为胶胞炭疽菌(C.gloeosporioides)。各菌株对嘧菌酯的敏感性显示,相对于菌丝,其病菌孢子对嘧菌酯的敏感性更高;相对于胶胞炭疽菌,黑点炭疽菌菌株DM4-2和DZ1-3对嘧菌酯更为敏感。     

成都市洒金珊瑚炭疽病病原鉴定及 潜在侵染源初探

为明确引起成都市洒金珊瑚炭疽病的病原菌种类和潜在侵染源, 采集疑似为炭疽病的洒金珊瑚叶片, 采用组织分离法进行分离, 单孢纯化后得到22株代表菌株?结合形态学特征和多基因系统发育树的构建, 将致病菌鉴定为暹罗炭疽菌 Colletotrichum siamense?隐秘炭疽菌 C. aenigma?喀斯特炭疽菌 C. karstii 和果生炭疽菌 C. fructicola?将成都市园林植物上分离获得的炭疽菌接种洒金珊瑚, 结果表明:供试菌株都可侵染洒金珊瑚, 表现出强弱不同的致病性, 来自其他寄主的炭疽病菌可能会成为洒金珊瑚炭疽病的潜在侵染源?     

四川省红叶石楠炭疽病病原菌鉴定及其潜在侵染源测定

为明确引起四川省红叶石楠炭疽病的病原菌及其潜在侵染源,采集疑似感染炭疽病的典型病叶进行分离获得纯化病原菌菌株,从中随机选取菌株HYSN3制成分生孢子悬浮液和菌饼,以无伤、刺伤、剪伤3种方式进行接种,筛选出效果最好的接种方式进行致病性测定,结合形态学特征与多基因序列分析将病原菌鉴定到种,并采用筛选出的接种方式将分离自其它19种寄主的23株炭疽菌接种到红叶石楠上,明确其潜在侵染源。结果表明,从红叶石楠病叶中共纯化得到14株菌株,基于形态特征和显微初步鉴定结果,从中选择8株代表菌株进行进一步鉴定。3种接种方式中,以刺伤后接种菌株HYSN3菌饼的效果最好,可用于致病性测定。基于形态学特征、致病性测定和多基因序列分析结果,将病原菌鉴定为胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides(5株)、喀斯特炭疽菌C.karstii(1株)和暹罗炭疽菌C. siamense(2株),表明四川省红叶石楠炭疽病是由多种病原菌复合侵染引起的。来自其它寄主的23株炭疽菌菌株都能侵染红叶石楠,但致病力强弱不同,附近受炭疽菌侵染的植物都有可能成为红叶石楠炭疽病的潜在侵染源,园林植物养护过程中需予以一定的重视。     

滇黄精炭疽病病原分离鉴定及10种植物源化合物的抑菌效果评价

滇黄精是我国大宗名贵中药材之一，近年来随种植面积不断增加，炭疽病成为影响其种苗生产的一大限制因素。本研究对采集自云南省昆明市寻甸县的12份疑似炭疽病感染滇黄精种苗样品进行了病原物分离，采用形态学、多基因序列(ITS、ACT、CAL、CHS-1、GAPDH和TUB2)分析对分离物进行了鉴定，结合致病力测定，表明果生炭疽菌Colletotrichum fructicola是引起寻甸县滇黄精种苗炭疽病的主要病原菌。进一步采用平板熏蒸法或带药平板法评价了10种植物源化合物对C. fructicola的抑制活性，结果表明：α-松油醇、4-松油醇及香芹酚对C. fructicola的抑制效果显著，EC₅₀值分别为54.26、81.74和94.78μL/L。研究结果可为滇黄精种苗炭疽病的绿色防控提供理论依据。     

胶孢炭疽菌致病相关基因Plv2功能分析

胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)引起的橡胶树炭疽病是橡胶树三大叶部病害之一,严重威胁着橡胶树的生长。本研究从构建的胶孢炭疽菌RC178 T-DNA突变体库中筛选获得一株致病力明显减弱的突变菌株T1103,其T-DNA为单拷贝。采用TAIL-PCR克隆了该突变体T-DNA插入位点的侧翼序列,通过比对胶孢炭疽菌全基因组序列,发现该TDNA插入位点所在的序列包含一个5 400 bp的基因,将其命名为Plv2。Plv2基因包含3个外显子,编码一个假定的甾醇C-24甲基转移酶。敲除野生型菌株RC178中的Plv2,发现敲除突变体与T1103的致病力表现基本一致,由此推测Plv2基因为致病相关基因。     

草莓果生炭疽菌LysM效应子CfLysM2的致病功能分析

果生炭疽菌Colletotrichum fructicola侵染引起的草莓炭疽病是草莓生产中的重要病害。前期研究发现一个在果生炭疽菌侵染阶段高表达的含LysM结构域的候选效应子CfLysM2。为进一步研究CfLysM2的致病功能,运用同源重组方法构建CfLysM2缺失突变株ΔCfLysM2和回补菌株CfLysM2c。致病力测定结果表明,接种后15 d,ΔCfLysM2接种的草莓叶片病情指数显著下降。荧光定量PCR分析表明CfLysM2基因在果生炭疽菌接种草莓叶片后24 h相对表达量最高。利用转录组技术对野生型菌株(wild-type strain, WT)和ΔCfLysM2接种后24 h的草莓叶片样品进行比较分析,获得差异表达基因109个。CfLysM2的缺失导致宿主代谢途径尤其是次生代谢物生物合成通路的激活,说明CfLysM2可能在果生炭疽菌侵染草莓过程中通过靶向黄酮醇合成酶等代谢相关基因,抑制植物次生代谢产物合成及其介导的抗真菌免疫,保证其顺利侵染。该研究为揭示CfLysM2机理及对果生炭疽菌和草莓互作研究奠定了理论基础。     

高粱刺盘孢Colletotrichum sublineola是四川地区高粱炭疽病的主要致病菌

 高粱是四川省主要经济作物,在高粱生产上普遍发生炭疽病。关于高粱炭疽病菌多数文献描述为禾生刺盘孢Colletotrichum graminicola。已有文献通过分子生物学和基因组学分析证明高粱炭疽病的病原菌是高粱刺盘孢C. sublineola,并非C. graminicola。为明确四川省和国内高粱主产区炭疽菌的种类,本研究从四川省泸州泸县等11个地区以及重庆等其他6个省市,总共采集了198份病样,经分离纯化共获得225个炭疽菌株。通过形态学观察,结合ITS和GAPDH基因序列及进化树分析,发现其中215个来源于17个地区的菌株为C. sublineola,且分生孢子形态均为月牙型。其余10个分别来源于两个地区的菌株为兰花刺盘孢C. cliviicola,其分生孢子形态均为圆柱型。通过另外3个基因(CHS、ACT和TUB2)的系统发育分析,进一步证明来自不同地区的17个代表性的炭疽菌菌株分类相同,且均属于C. sublineola。研究结果表明,分生孢子形态及ITS和GAPDH等基因序列可以作为高粱炭疽菌的主要分类依据。在常规高粱品种Hui1等3个材料上接种19个代表性菌株,发现17个C. sublineola菌株的致病能力存在差异,2个C. cliviicola菌株均不能致病。本文研究结果表明,C. sublineola是四川高粱主产区炭疽病的致病菌。另外,通过人工接种试验,证明高粱品种402B对强致病力菌株ZG-FS-1具有较强抗性,402B具有抗病育种应用潜力。     

微管骨架在辣椒-黄瓜炭疽病菌非寄主互作中的作用

 以辣椒“A11”和黄瓜炭疽病菌（Colletotrichum orbiculare）组成的非寄主互作体系为研究对象,利用组织化学方法研究了辣椒叶片微管骨架解聚后接种黄瓜炭疽病菌,对抗病反应相关的乳突、H₂O₂和过敏性坏死反应的影响以及黄瓜炭疽病菌在非寄主辣椒上的侵入状况,揭示微管骨架在辣椒-黄瓜炭疽病菌非寄主互作中的作用。结果表明,微管骨架解聚显著抑制了乳突的形成,H₂O₂的积累也明显减弱,使黄瓜炭疽病菌能成功侵入辣椒细胞,表明微管骨架参与了辣椒的非寄主抗病性反应,微管的聚合在辣椒非寄主抗病性中具有重要的作用。     

Epidemiology,histopathology and aetiology of olive anthracnose caused by Colletotrichum acutatum and C. gloeosporioides in Portugal

Anthracnose is an important disease affecting mature olive fruits, causing significant yield losses, and poor fruit and oil quality. In Portugal, high anthracnose incidence was recorded during 2003–2007 with 41% of 908 orchards surveyed displaying disease symptoms. In another 14% of the orchards, the pathogen was recorded in symptomless plants. Disease severity was on average 36%, frequently reaching 100%. In Portugal, anthracnose is endemic to neglected orchards of susceptible cultivars, but under favourable conditions it can also severely affect less susceptible cultivars. Pathogens were genetically heterogeneous, with Colletotrichum acutatum genetic group A2 as the most frequent (80%), followed by group A4 (12%) and group A5 along with C. gloeosporioides (3–4%), while groups A3 and A6 of C. acutatum were sporadic. Important geographic variations were observed in the frequencies of these populations, accompanied by year‐to‐year populational shifts. Epidemiology and histopathology studies showed the presence of the pathogens on vegetative organs year‐round, particularly on olive leaves and branches, and on weeds. These represent inoculum reservoirs where secondary conidiation occurs, and conidia are then dispersed by spring rains reaching flowers and young fruits or by autumn rains reaching pre‐mature fruits. Unripe fruits were colonized without showing symptoms up to penetration of the cuticle, but further colonization and symptom production was completed only as fruits matured. These findings challenge current control practices, particularly the timing of fungicide treatment, and contribute to improved disease management.     

应用RAPD技术快速鉴定蔬菜上的弯孢类炭疽菌

 应用筛选的14个随机引物,对分离自广州不同蔬菜上的12个弯孢炭疽菌菌株进行RAPD扩增。所有引物对分离自辣椒、香葱等蔬菜上的11个菌株都产生非常相似甚至一致的扩增带型,仅来自姜上的菌株的带型显著不同;UPGMA聚类分析将12个菌株聚为2群,其中11个菌株(Cap₁~Cap₁₁)以很高的Dice相似系数(>82%)组成一群,姜上的菌株(Cap₁₂)为另一群。根据这些结果,将上述来自辣椒等蔬菜上的11个菌株鉴定为同一个种——辣椒炭疽菌(Colletotrichum capsici);而姜上的炭疽菌可能是另一个种。结果不支持将来自葱属植物的3个菌株鉴定为葱炭疽菌(C.circinans)。     

云南通海小菜蛾种群抗药性监测及田间药效评价

为掌握云南蔬菜主产区通海县小菜蛾种群对常用杀虫剂的敏感性及其田间防治效果,采用浸叶法和田间小区试验对常用杀虫剂进行室内毒力测定和田间药效试验。结果表明:通海县小菜蛾种群对丁醚脲和Bt的敏感性最高,仍处于敏感水平,对茚虫威属低抗水平,对虫螨腈和多杀菌素的抗性倍数分别为24.28和31.68倍,属中抗水平,对氯虫苯甲酰胺抗性倍数为44.62倍,到高抗水平,对阿维菌素的敏感性最差,抗性倍数829.90倍,达极高抗水平。抗性水平和田间药效呈一定相关性,氯虫苯甲酰胺和阿维菌素药后7d对小菜蛾的防治效果均低于50%,茚虫威、多杀菌素和丁醚脲的田间防效较好。通海县小菜蛾可选择的防治药剂包括茚虫威、多杀菌素和丁醚脲,注意不同药剂之间的轮换和交替使用。     

云南西双版纳地区橡胶炭疽病病原鉴定

对来自西双版纳11个橡胶炭疽病菌菌株进行了鉴定。结果表明,引起西双版纳橡胶炭疽病的病原有2种,分别为:胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)和尖孢炭疽菌(C.acutatum)。2个种的区别主要在于分生孢子的形态,菌落正反面的颜色,菌落的生长速度及对农药的敏感性等。     

116株芒果炭疽病菌对咪鲜胺的敏感性测定

研究芒果炭疽病菌对咪鲜胺的敏感性, 以期为该病的综合防治提供参考。从国内及国外芒果产区采集病样, 分离、纯化芒果炭疽菌菌株, 采用生长速率法测定芒果炭疽病菌对咪鲜胺的敏感性。结果表明, 分离获得的116株芒果炭疽病菌菌株对咪鲜胺的EC50值为0.000 8～0.073 9 μg/mL, 平均值为0.012 4 μg/mL, EC50最大值是最小值的92.4倍。不同采集地区和采集部位菌株对咪鲜胺的敏感性不同, 美国夏威夷的菌株敏感性最低, 广东的最高; 分离自叶片的菌株敏感性最高, 果实的最低。芒果炭疽病菌对咪鲜胺具有较高的敏感性, 生产上仍具有较高的使用价值, 但不同菌株的敏感性之间具有一定差异性, 存在潜在的抗性风险。     

Required number of location-years for estimating functional lower developmental thresholds and required thermal summations of insects: The first emergence of adult Apthona nigriscutis Foudras as an example

Sampling theory was combined with resampling techniques to determine the number of location-years needed for estimating an insect's required thermal summation and lower developmental threshold from field-based studies. This was done by analysing 19 location-years of field observations on the first emergence of Apthona nigriscutis Foudras, an important biological control agent of the noxious weed, leafy spurge (Euphorbia esula L.). Results indicated that 5 - 7 location-years were needed to estimate that insect's mean required thermal summation and mean lower developmental threshold for predicting first adult emergence. However, if the wish was to estimate the median required thermal summation and median lower developmental threshold for that purpose, then 8 - 11 location-years were needed to obtain acceptable estimates of those parameters. The implications of these and other findings are discussed.