黄果枸杞愈伤组织诱导及快繁技术研究

以黄果枸杞无菌苗的叶片和茎段为外植体,研究不同激素配比的培养基对外植体愈伤组织的诱导、丛生芽的分化及生根培养的影响,获得再生植株,筛选出适宜各阶段培养的最佳培养基配方,从而建立黄果枸杞组织培养和快繁技术新体系。结果表明:适合嫩茎段腋芽诱导与生长的培养基为MS;叶片和茎段都适合黄果枸杞愈伤组织的诱导,愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA 0.4-0.6mg/L+NAA1.0mg/L,诱导率为90.23%和89.14%;诱导愈伤组织分化培养基为MS+6-BA 0.6mg/L+IBA 0.15mg/L,分化率90.12%;诱导丛生芽生根适宜培养基为1/2MS+NAA0.4mg/L+IBA0.6mg/L,生根率为90.33%;诱导生根的组培苗在实验室内打开瓶口炼苗7d,在温室内移栽到适宜的营养钵中,营养钵中的基质为森林土、河沙及蛭石的比例为2:1:1,移栽成活率达93%。     

樟子松组织培养的初步研究

以樟子松成熟胚为外植体,研究不同的激素组合对樟子松愈伤组织诱导及植株再生的影响。结果表明:诱导愈伤组织的最佳培养基组合为MS+1.5mg/L 2,4-D+0.5mg/L 6-BA;愈伤组织分化的最佳培养基组合为MS+0.2mg/L IAA+1.5mg/L 6-BA;樟子松不定芽伸长生长的适宜基本培养基为1/2MS+0.1%活性炭,诱导生根的最佳培养基组合为1/4MS+0.5mg/L NAA+0.2mg/L IBA。     

荒漠区药用植物黑果枸杞(Lycium ruthencium)的组织培养

试验以荒漠区药用植物黑果枸杞无菌苗的子叶、茎段、胚轴为外植体材料,研究不同激素配比的培养基对不同外植体愈伤组织培养、丛生芽增殖及生根培养的影响,并筛选适宜各个阶段培养的最佳培养基配方.结果表明:子叶是诱导黑果枸杞愈伤组织的最好外植体,在6-BA为0.3mg/L,2,4-D为1.0mg/L时,其愈伤组织诱导率达到最大值95.1％;较高浓度的细胞分裂6-BA对丛生芽增殖具有明显的促进作用,在6-BA为3.0mg/L、KT 0.3mg/L、NAA 0.5mg/L时丛生芽增殖率达到最大值90.2％,且丛生芽数量多、茎干健壮、生长旺盛;在以1/2MS为基本培养基,减少无机盐的浓度时对黑果枸杞丛生芽生根培养具有促进作用,减少MgSO4一半,并加入NAA0.5mg/L时,丛生芽生根率达到最大值98.2％,且生根时间最早,主根明显、粗壮且根毛数量多.     

紫花苜蓿下胚轴愈伤组织诱导及再生植株的研究

以培养4～5d的紫花苜蓿无菌苗的下胚轴为材料,改良SH(SH大量元素+MS微量元素+MS铁盐+UM有机)+水解酪蛋白(CH)2000 mg/L为基本培养基,对紫花苜蓿愈伤组织诱导和植株再生进行了研究。愈伤组织诱导和继代培养基分别为2,4-D 1.0 mg/L+KT 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L及2,4-D 0.05 mg/L+BA0.5 mg/L+蔗糖30 g/L,将获得的愈伤组织转入正交设计的培养基上进行筛选,得到了愈伤组织分化率相对较高的培养基配方:基本培养基+KT 0.4 mg/L+蔗糖20 g/L,其分化率为73.0%。获得的再生芽在生根培养基上(1/2MSO)培养约10d便能获得具有根和叶的再生植株。本试验结果为下一步将来自蓝藻的Na⁺/H⁺ an-tiporter基因转入苜蓿,获得转基因耐盐苜蓿奠定了基础。     

亚洲百合遗传转化受体系统的建立

以亚洲百合"精粹"(Lilium Asiatic 'Elite')的鳞片、再生形成的叶片和鳞片叶为外植体,进行了不定芽的诱导分化、试管苗小鳞茎诱导、卡那霉素抗性筛选等研究,建立了亚洲百合遗传转化受体系统.结果表明:鳞片诱导最佳分化培养基为MS 6-BA 2.0 mg/L NAA 0.2 mg/L,试管苗小鳞茎诱导培养基为MS IBA 0.5 mg/L 70 g/L蔗糖,试管苗叶片分化培养基为MS TDZ 1.0 mg/L NAA 0.2 mg/L,试管苗鳞片叶分化培养基为MS 6-BA 2.0 mg/L 2,4-D 0.1 mg/L.抗生素敏感性试验表明,百合叶片的卡那霉素选择压为80 mg/L,鳞片叶为115 mg/L.     

加拿大一枝黄花愈伤组织的诱导及增殖效应研究

以加拿大一枝黄花的幼嫩叶柄为外植体,接种于附加NAA、2,4-D、KT、6-BA及其组合的MS培养基上,观察加拿大一枝黄花愈伤细胞的诱导、愈伤组织分化以及愈伤细胞的生长状态。结果表明,MS BA 0.4mg/L NAA 2.0 mg/L对加拿大一枝黄花愈伤组织的诱导效果最好,MS BA 0.2mg/L 2,4-D 1.5mg/L适合于愈伤组织器官的分化,MS BA 0.4mg/L NAA 4.0mg/L适合于愈伤组织的快速生长,其愈伤组织适合于做悬浮培养加拿大一枝黄花细胞的种细胞材料。     

油松种胚组织培养激素组合

以采集于2007年和2010年的油松成熟种胚为外植体,研究了不同激素组合及浓度对外植体愈伤组织分化、不定芽诱导和生根的影响。研究结果表明:诱导愈伤组织的适宜培养基为1/2MS+6-BA1.5mg.L-1+NAA0.2mg.L-1+蔗糖30g.L-1+琼脂6g.L-1,2007年和2010年的成熟种胚愈伤诱导率分别为33.33%和54.17%。诱导不定芽最佳光培养条件是12/12h,适宜的培养基为1/2MS+6-BA1.5mg.L-1+NAA0.1mg.L-1+蔗糖30g.L-1+琼脂6g.L-1,2007年和2010年的种胚愈伤诱导的不定芽分化率分别为50.0%和58.3%。生根培养效果较好的培养基是DCR+IBA0.1mg.L-1+NAA0.1mg.L-1+KT0.1mg.L-1+蔗糖30g.L-1+琼脂6g.L-1,2007年和2010年的种胚愈伤诱导的不定芽生根率分别为36.4%和18.2%。     

强旱生濒危植物霸王的组织培养

实验以霸王无菌苗的子叶、下胚轴和茎段为外植体,探讨不同激素组合的培养基对霸王外植体愈伤组织诱导、增殖以及幼苗生根的影响,并找出更为合理的培养基配方。结果表明:最佳愈伤组织诱导的培养基配方为MS+0.1mg/L6-BA+1.0mg/LNAA,最适宜愈伤组织诱导的外植体是子叶,诱导率为100%,茎段诱导率为93.3%,下胚轴的诱导率最低;不定芽诱导的最佳培养基配方为MS+1.0mg/L6-BA+0.1mg/L NAA,诱导率高达98.1%,诱导时间为7周;最适宜霸王幼苗生根的培养基为1/2MS+0.5mg/L IBA+1.0mg/L NAA,生根率高达90.4%,比已报道生根率86.7%提高了3.7%,且不定根在第7d开始出现。     

蒙古黄榆体细胞胚胎发生及组织学研究

以蒙古黄榆成熟胚为外植体,研究不同生长调节物质对黄榆体细胞胚胎发生的影响,并通过石蜡切片技术观察其生长过程,结果表明:诱导黄榆胚性愈伤组织的适宜培养基为MS+1.0 mg·L-12,4-D+0.5mg·L-16-BA;体胚诱导适宜培养基为MS+1.0mg·L-16-BA+2.0mg·L-1IAA+400mg·L-1水解乳蛋白;带少量愈伤组织的体细胞胚胎可转移至新鲜的体胚诱导培养基上继续增殖。黄榆体细胞胚胎的发育经历了球形胚期、心形胚期、鱼雷胚期和子叶胚期。组织学研究结果显示,体胚具有两极性,子叶期体胚结构完整。     

烟草抗苯磺隆变异体的筛选及变异体种子活力测定

采用组织培养技术,将烟草(NC-82)叶片诱导产生的胚性愈伤组织转移到加有半致死浓度苯磺隆的Murashige-Skoog(MS)培养基上,经3代筛选,获得抗苯磺隆愈伤组织。抗性愈伤组织在加有苯磺隆的分化培养基上分化出植株。再生植株移栽成活后,对获得的再生植株种子与对照种子活力及抗性指数进行检测。结果表明:苯磺隆诱导再生植株种子与对照种子的简化活力指数分别为10.81和9.53;过氧化物酶活力分别为47.36和29.44 U·g-1·min-1,酸性磷酸酯酶活力分别为2.927和2.447 nmol·g-1·min-1。潜在抗性趋势检测表明,再生植株种子对苯磺隆的抗性显著提高,抗性指数为3.18。再生种苗和对照种苗的乙酰乳酸合成酶活力分别为10.41和6.67 nmol·h-1·mg-1。     

壳寡糖对干旱胁迫下信前胡生长及叶片生理特性的影响

以信前胡盆栽幼苗作为研究材料,通过测定信前胡的株高、叶面积、生物量、含水量、根冠比和叶片抗旱相关的生理指标,研究了5、10、15 mg·L^-1和2 mg·L^-1的壳寡糖(Chitooligosaccharide,COS)溶液处理对干旱胁迫下信前胡生长和叶片生理特性的影响。结果表明,不同浓度壳寡糖对干旱胁迫下信前胡生长均有不同程度的促进作用,且随壳寡糖浓度的增加,各生长指标均表现出先增后降的趋势,均有一定的最适浓度。与单纯干旱处理相比,5、10、15 mg·L^-1和20 mg·L^-1壳寡糖处理信前胡的单株叶片数分别提高了32.5%、50.8%、29.3%和6.3%,均达到了显著水平（P<0.05）;10 mg·L^-1和15 mg·L^-1壳寡糖处理信前胡的单株平均叶面积分别提高了27.3%和20.8%,均达到了显著水平（P<0.05）;5、10、15 mg·L^-1壳寡糖处理信前胡的株高分别显著提高了17.4%、31.7%和19.6%。10 mg·L^-1壳寡糖处理信前胡叶片的脯氨酸含量较单纯干旱处理显著提高了11.8%,10 mg·L^-1壳寡糖处理信前胡叶片的H₂O₂含量和MDA含量均较单纯干旱处理显著降低（降幅分别为46.9%和14.4%）。因此,10 mg·L^-1壳寡糖处理可显著缓解信前胡苗期的干旱胁迫（P<0.05）。     

Ca2+对Cd2+胁迫下板蓝根种子萌发及幼苗抗氧化酶活性的影响

研究了Cd²⁺（10 mg·L^-1、30 mg·L^-1）胁迫下不同浓度Ca²⁺（0、80、160、320 mg·L^-1）对板蓝根种子萌发、幼苗抗氧化酶系统及蛋白质含量的影响。结果表明：低浓度Ca²⁺（80、160 mg·L^-1）可缓解Cd²⁺毒害,显著提高板蓝根种子的发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数,促进蛋白质含量的增加,提高SOD、POD、CAT活性,且160　mg·L^-1 Ca²⁺缓解效果最好,缓解能力随Cd²⁺浓度的升高有所下降;高浓度Ca²⁺（320 mg·L^-1）与Cd²⁺作用,反而抑制了板蓝根种子的萌发,幼苗的POD、SOD、CAT活性及蛋白质含量下降。低浓度Ca²⁺可以显著提高板蓝根的抗性,对Cd²⁺毒害起缓解作用,高浓度的Ca²⁺与Cd²⁺对板蓝根种子起协同毒害作用。     

2,4-表油菜素内酯对干旱胁迫下垂丝海棠生理特性的影响

以7～8叶龄的垂丝海棠实生苗为试验材料,研究外源喷施2,4-表油菜素内酯（EBR）对干旱胁迫下垂丝海棠幼苗光合及生理特性的影响。采用盆栽控水法,设置CK（正常水分）与干旱胁迫加6种浓度油菜素内酯处理,即T1(0 mg·L^-1)、T2(0.20 mg·L^-1)、T3(0.40 mg·L^-1)、T4(0.60 mg·L^-1)、T5(0.80 mg·L^-1)和T6(1.00 mg·L^-1),分别测定各处理下叶绿素含量、光合特性、抗氧化酶活性及渗透调节物质含量,并进行相关性与主成分分析。随干旱胁迫时间的延长,垂丝海棠叶片的Chl a、Chl b、Chl a+b、Chl a/b、净光合速率（P_n）、气孔导度（G_s）和蒸腾速率（T_r）均呈下降趋势;胞间CO₂浓度（C_i）、丙二醛（MDA）含量和相对电导率（REC）呈上升趋势;脯氨酸（Pro）含量、超氧化物歧化酶...     

硼调控干旱胁迫下马铃薯生长发育及抗性的生理机制

为了探讨叶面喷施硼（Na2B4O7·10H2O溶液）对马铃薯植株在干旱胁迫下生长发育及抗性的影响及其生理机制,在甘肃省景泰县条山集团马铃薯种植基地,对中度干旱和轻度干旱处理的两垄地,每隔3m进行一个硼浓度（Na2B4O7·10H2O）喷施处理,浓度依次为0、10、20、30、40、60 g·L-1,每个浓度（3 m长）的喷施量为166．7 ml。结果表明：叶面喷施硼相对增加了干旱胁迫下马铃薯的块茎产量及生物量,使干旱胁迫下叶片含水量和色素含量下降幅度减小;叶面喷施硼还从整体上表现为抗氧化酶活性的提高,并抑制了超氧阴离子产生速率的增加。通过去花与不去花植株生长发育的比较,发现去花后马铃薯植株地上部分重和地下部分重均有所下降,但施硼相对提高了块茎产量及地下部分重。可见,叶面喷施硼能促进马铃薯植株在干旱胁迫下的生长发育,提高其抗旱性及块茎产量,且这种变化可能与其促进光合产物向地下部分输送密切相关。     

青稞根际优良联合固氮菌的筛选及鉴定

为筛选获得对青稞具有促生性能的联合固氮菌，从西藏不同地区青稞根际采集土壤样品，以Ashby无氮培养基进行菌株分离，利用凯氏定氮法测定分离物的固氮量，通过培养皿纸上萌发法测定其对青稞种子萌发和幼苗生长的影响，根据菌株形态、理化特性和16SrDNA序列分析进行固氮菌株的鉴定。结果表明：从西藏高寒地区青稞根际分离获得的72株联合固氮菌，和CK相比，氮增量为0.30～26.07 mg·L^-1，其中有10个菌株的固氮量较高，氮增量为17.01～26.07 mg·L^-1。种子萌发和幼苗生长试验表明：10株菌中6株菌的综合促生效果较好，即菌株20-2、22-5、23-3、26-1、35-2和39-5。和CK相比，种子萌发率提高了-7.14%~25.00%，茎粗提高了1.53%~13.74%，株高提高了-9.52%~7.60%，根长提高了9.41%~38.09%，须根数提高了-11.26%~12.57%，鲜重提高了-4.97%~57.73%。经过多相分类鉴定，这6株菌分属于根瘤菌属、类芽孢杆菌属、无色杆菌属和假单胞菌属。     

Absorption and fate of imazapyr in leafy spurge (Euphorbia esula)

Imazapyr absorption, translocation, root release and metabolism were examined in leafy spurge (Euphorbia esula L.). Leafy spurge plants were propagated from root cuttings and [¹⁴C]imazapyr was applied to growth-chambergrown plants in a water + 28% urea ammonium nitrate + nonionic surfactant solution (98.75 + 1 + 0.25 by volume). Plants were harvested two and eight days after herbicide treatment (DAT) and divided into: treated leaf, stem and leaves above treated leaf, stem and leaves below the treated leaf, crown, root, dormant and elongated adventitious shoot buds. Imazapyr absorption increased from 62.5% 2 DAT to 80.0% 8 DAT. Herbicide translocation out of the treated leaf and accumulation in roots and adventitious shoot buds was apparent 2 DAT. By the end of the eight-day translocation period only 14% of applied ¹⁴C remained in the treated leaf, while 17% had translocated into the root system. Elongated and dormant adventitious shoot buds accumulated 3.2- and 1.8-fold more ¹⁴C, respectively, 8 DAT than did root tissue based on Bq g^?1 dry weight. Root release of ¹⁴C was evident 2 DAT, and by 8 DAT 19.4% of the ¹⁴C reaching the root system was released into the rooting medium. There was no metabolism of imazapyr in crown, root or adventitious shoot buds 2 DAT; however, imazapyr metabolism was evident in the treated leaf 2 and 8 DAT. Imazapyr phytotoxicity to leafy spurge appears to result from high imazapyr absorption, translocation to underground meristematic areas (roots and adventitious shoot buds), and a slow rate of metabolism.     

氰氟草酯、杀虫安亚致死剂量对金鱼Carrasius auratus和麦穗鱼Pseudorasbora parva肝脏酯酶及谷胱甘肽-S-转移酶活性的影响

研究了 10 %千金乳油 (有效成分 :氰氟草酯 )和 78%杀虫安可溶性粉剂对金鱼和麦穗鱼肝脏酯酶及谷胱甘肽-S-转移酶 (GST)活性的亚致死剂量效应。发现杀虫安 (0 .2 34mg· L-1)对两种鱼的 GST活性均具诱导作用 ,而氰氟草酯 (1,2 mg· L-1)仅诱导了麦穗鱼的 GST活性 ;当杀虫安与氰氟草酯混合处理时 ,对麦穗鱼 GST活性的诱导效应最为明显。在一定的浓度范围内 ,氰氟草酯 (1,2 mg· L-1)和杀虫安 (0 .117,0 .2 34mg· L-1)均可诱导金鱼肝脏酯酶活性 ;对麦穗鱼肝脏酯酶而言 ,杀虫安为诱导作用 ,氰氟草酯则抑制其活性。研究结果表明 :两种酶的活性直接或间接地受供试药剂的影响 ,两种试鱼对氰氟草酯和杀虫安的生物反应存在差异。     

甘露醇和烯效唑对培育马铃薯试管壮苗的影响

用不同浓度甘露醇和烯效唑处理马铃薯试管苗,来探究在组织培养条件下甘露醇和烯效唑对培育马铃薯试管苗壮苗的影响。试验设置对照组(CK)和处理组,处理组分别A(10 g·L~(-1)甘露醇)、B(20 g·L~(-1)甘露醇)、C(30 g·L~(-1)甘露醇)、D(40 g·L~(-1)甘露醇)、E(0.001 mg·L~(-1)烯效唑)、F(0.002 mg·L~(-1)烯效唑)、G(0.003mg·L~(-1)烯效唑)和H(0.004 mg·L~(-1)烯效唑)9个水平,分别在第30天和第60天取样测定。结果表明,培养30 d和60 d后,适宜浓度甘露醇(20 g·L~(-1))和烯效唑(0.003 mg·L~(-1))处理马铃薯试管苗,植株矮化(株高:82.54±3.84 mm和67.41±1.67 mm,30 d;93.74±1.30 mm和68.78±1.16 mm,60 d)且茎增粗(茎粗:1.45±0.03 mm和1.32±0.05 mm,30 d;1.80±0.13 mm和1.65±0.03 mm,60 d),鲜重达最大值(鲜重:1.35±0.04 g和1.32±0.04 g,30 d;1.75±0.09 g和1.53±0.04 g,60 d),马铃薯试管苗根长、根粗、根表面积和根体积也显著高于对照;同时,该处理下试管苗抗氧化酶超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性均达最大值。由此可知,甘露醇和烯效唑能促进马铃薯试管苗增粗矮化生长,使试管苗根系较发达,组织培养抗氧化酶活性增强,降低了活性氧对马铃薯试管苗造成的伤害,从而有利于培育壮苗。