图丽鱼寄生破坏古氏虫的形态描述及系统发育

在调查新疆乌鲁木齐市观赏鱼感染寄生虫种类期间,从图丽鱼(Astronotus ocellatus)鳃部采集到一种单殖吸虫,经过形态学比较具有鉴定依据的背腹中央大钩、联接片、交接器等结构后,鉴定为锚首虫亚科(Ancyrocephalinae)的破坏古氏虫(Gussevia asota)。首次测定了破坏古氏虫28S rDNA基因序列(GenBank登录号:MG596661),系统发育分析表明,该虫与鲻鱼虫属(Ligophorus)、嗜丽鱼虫属(Cichlidogyrus)的亲缘关系较近,聚为稳定的独立分支。     

额尔齐斯河银鲫寄生指环虫18S rDNA序列测定及 系统发育研究

为验证依靠形态鉴定的指环虫种类的正确性,进行了分子生物学鉴定,并研究了系统发育。2009-2014年在额尔齐斯河采集的银鲫(Carassius auratus gibelio)鳃部的指环虫,依靠形态鉴定为坏鳃指环虫(Dactylogyrus vastator)和伸展指环虫(Dactylogyrus extensus)。18S rDNA序列与Gen Bank中18S rDNA序列同源性比较结果,坏鳃指环虫同源性为99.36%(457/460),碱基转换率为0.65%(3/460);伸展指环虫同源性为100%(472/472)。用MEGA4.1软件分析和计算3科8属19种单殖吸虫18S r DNA序列的遗传距离。3个科单殖吸虫种类的种间遗传距离0.006~0.238,指环虫科的遗传距离0.007~0.047,指环虫科与锚首虫科的遗传距离0.097~0.182,指环虫科与鳞盘虫科的遗传距离0.164~0.235。系统发育研究结果,坏鳃指环虫和中间指环虫首先聚为一支,然后与伸展指环虫聚为一支,最终指环虫科的所有虫种聚为一支。研究结果同时也为额尔齐斯河人工养殖银鲫的病害防治提供依据。     

太白湖主要经济鱼类寄生蠕虫种类调查

2015年12月,采用形态学方法对长江中游的太白湖鱼类鳃和肠道寄生蠕虫进行了初步调查和种类鉴定。结果显示:在调查的15种131尾鱼中,共分离鉴定了36种寄生蠕虫,其中单殖吸虫30种,复殖吸虫1种,绦虫5种;对其中6种单殖吸虫的形态特征进行了重新描述。大部分鱼类的鳃部都感染单殖吸虫,只有4种鱼类的肠道感染寄生蠕虫,较低的体内寄生蠕虫多样性表明该湖泊的生态环境可能受到较严重的干扰。     

鳗鲡常见疾病及其防治（续）

9．指环虫病 病原：为指环虫，属于单殖类蠕虫，至今已发现了大约200多种，其中以伪指环虫危害最严重，以吸食鳗鲡鳃组织和血液为生，当伪指环虫在鳃部的寄生数量达到一定程度时，引起鳗咬食，甚至不摄食，全年均可发生。且虫体多携带病菌和病毒，当虫体寄生较多时，鳗鳃部呈现开放型的伤口，同时病菌侵入，造成烂鳃或败血病等。     

指环虫病

指环虫病是由指环虫属的单殖吸虫寄生于鱼鳃而引起疾病。指环虫属的种类众多，主要致病种类有小鞘指环虫、页形指环虫、鳙指环虫、坏鳃指环虫，常造成鳃的严重损伤，可引起苗种的大批死亡。为我国三类疫病。     

大口黑鲈寄生异形锁钩虫在中国的首次报道

在乌鲁木齐市周边某大口黑鲈(Micropterus salmoides)养殖场采样过程中,采集到大口黑鲈鳃部一种单殖吸虫(monogenean),经过形态学初步鉴定,确定这一单殖吸虫为锚首虫科(Ancyrocephalidae)锁钩虫属(Onchocleidus Mueller)的异形锁钩虫(Onchocleidus dispar)。异形锁钩虫的特征主要为:背、腹中央大钩形态相似,但背中央大钩几乎是腹中央大钩的一倍,背联接片平直,两端膨胀呈圆形,有一细长、漏斗状的交接管,并在尖端末梢有点螺旋;附属片呈"钳形"。通过资料检索发现,异形锁钩虫在我国属首次报道,系我国新纪录属种。     

鲈鱼海盘虫病的诊断和治疗

症状与危害：病鱼游于水面，鳃上粘液增多，鳃丝末梢发白、溃烂，呼吸困难，食欲减退，甚至停止摄食。若不及时处理，上述症状出现２日后即开始死鱼。幼苗感染 １００只虫、成鱼感染 １０００只虫即可出现大量死亡。日死鱼可达 ３％～５％，幼苗死亡率更高。 病原海盘虫是锚首科海盘虫属单殖吸虫的总称，我国有２０多种，是海水鱼类常见的寄生虫。其形态结构与寄生于淡水鱼类的指环虫十分相似，常被误作指环虫。事实上，到目前为止，已发现的指环虫全部寄生于淡水鱼中。而海水鱼鳃部类似结构的寄生虫主要为海盘虫。肉眼仔细现察红的鳃丝，可…     

金鱼三代虫病的诊断与防治

三代虫(Gyrodactylus)隶属于扁形动物门、单殖吸虫纲、三代虫目、三代虫科,一般寄生于海水和淡水鱼类的鳃、体表及鳍条。三代虫与指环虫一样具有较强的宿主特异性,种类较多,已报道的种类达400余种。三代虫个体大多较小,虫体长叶形,体长一般为0.2～1.0毫米,运动方式如尺蠖。虫体前端1对头器,无眼点;后端为几丁质组成的伞状后吸器,其上有1对中央大钩和8对边缘小钩;虫体中部的胚体内有1～2代子代。     

寄生部位分化对吉陶单极虫种群分化的影响

为探究寄生部位分化对黏孢子虫种群分化的影响, 以吉陶单极虫(Thelohanellus kitauei)为例, 研究了寄生于鲤(Cyprinus carpio)皮肤和肠道的吉陶单极虫的形态、寄生特征和分子遗传信息。寄生皮肤的吉陶单极虫(S 型)形成单个明显孢囊, 直径约 2.1 cm, 寄生肠道的吉陶单极虫(I 型)形成多个(16 个)孢囊, 直径 0.21~0.82 cm; 孢子形态特征相比, S 型和 I 型孢子鞘膜宽差异不显著(P＞0.05), 但孢子厚差异显著(P＜0.01), 孢子长、极囊长、鞘膜长、孢子宽和极囊宽呈现极显著差异(P＜0.001); 组织病理结果显示, 二者均寄生于结缔组织中, 引起淋巴细胞浸润、组织增生等炎症反应, 但 S 型孢子主要分散在真皮疏松层, 部分孢子侵入致密层, 造成结缔组织弯曲、变形, 而 I 型孢子主要分散在肠黏膜下层上方, 挤压并导致肠绒毛萎缩; 分子序列比对发现, S 型和 I 型的 SSU rDNA 序列相似度较高, 为 99.7%, 具有 4 个差异位点, ITS-5.8S rDNA 序列间相似度较低, 仅 97.3%, 共有 20 个差异位点。基于 SSU rDNA 和 ITS-5.8S rDNA 序列构建的系统进化树显示, S 型和 I 型于吉陶单极虫支系内部各自聚类, 表明相同寄生部位的吉陶单极虫具有更近的亲缘关系。综上所述, 寄生不同部位的吉陶单极虫在形态、寄生特征和遗传信息方面存在不同程度的差异, 具有明显的种群分化特征, 说明寄生部位分化是驱动黏孢子虫种群分化的重要因素。     

三棱碘泡虫 (粘体动物门：碘泡科) 重描述及其系统发育关系分析

为有效鉴定三棱碘泡虫的有效性,补充其生物学特征,实验利用现代粘孢子虫整合分类学方法,包括形态特征、寄生特性(宿主特征和寄生部位)及分子特征,对其进行重新描述,证实其分类有效性,探讨其系统发育关系。结果显示,三棱碘泡虫专性寄生于草鱼鳃丝间,未在其他器官(肝脏、肾脏、肠道等)检获孢子。包囊呈乳白色,长椭圆形,长(2.4±0.3)(2.1～2.7) mm,宽(0.8±0.1)(0.6～0.9) mm。成熟孢子壳面观呈卵圆形,孢子后端未见"V"形褶皱,孢子外包裹有一层透明的圆形黏液膜,缝面观呈纺锤形,孢子缝面可见三条平行而突出的脊线;孢质均匀,孢子后端具有一个大嗜碘泡;成熟孢子长(10.3±0.4)(9.4～11.0)μm,宽(9.5±0.5)(8.7～10.9)μm,厚(7.4±0.5)(6.4～8.0)μm;两极囊等大,梨形,极丝7～8圈;组织病理显示,病灶鳃组织未出现严重炎症反应。BLAST比对发现,三棱碘泡虫与隐杆碘泡虫小核糖体RNA序列相似性最高(89.58%),但远低于种内序列相似性。分子系统发育分析结果显示,三棱碘泡虫先与寄生于鲤科鱼类的隐杆碘泡虫形成姊妹关系,再与寄生于胭脂鱼科鱼类鳃的诺布尔碘泡虫、微小碘泡虫及毕斯塔斯碘泡虫形成独立的鳃寄生碘泡虫分枝,表明宿主亲缘关系与组织趋向性在鱼类组织寄生碘泡科粘孢子虫系统演化历程中扮演重要作用。本研究补充了三棱碘泡虫包囊形态结构、组织趋向性及分子数据,证实了其分类有效性。     

饲料脂肪水平对胭脂鱼幼鱼生长、体组成和抗氧化能力的影响

试验选用体重(6.73±0.21)g的胭脂鱼(Myxocyprinus asiaticus)幼鱼540尾,随机分成6个组,每组3个重复,每个重复30尾试验鱼。以大豆油为脂肪源,配制成脂肪水平为2.04%、4.43%、6.88%、9.02%、11.98%、13.39%的半精制饲料,进行为期56 d的生长试验,研究脂肪水平对胭脂鱼幼鱼生长、体组成及机体抗氧化能力的影响。结果显示:饲料脂肪水平对胭脂鱼的生长性能有显著影响(P<0.05)。脂肪水平为6.88%时,胭脂鱼增重率、特定生长率、蛋白质沉积效率最高,饲料系数最低。脂肪沉积效率随脂肪水平的增加呈下降趋势。随脂肪水平增加,胭脂鱼全鱼、肌肉和肝胰脏脂肪含量逐渐上升,至6.88%组后稳定,而全鱼水分、粗蛋白含量没有显著变化(P>0.05)。胭脂鱼机体抗氧化能力随着脂肪水平的增加呈现先升后降趋势,脂肪水平为6.88%时,总抗氧化能力(T-AOC)、超氧物歧化酶(SOD)值最大,丙二醛(MDA)值最小,即抗氧化能力最强。以增重率、特定生长率和饲料系数进行回归分析并考虑脂肪水平对胭脂鱼营养组成和抗氧化能力的影响,确定胭脂鱼幼鱼适宜脂肪水平为6.62%~7.02%。     

十种常见淡水鱼类的RAPD鉴定

用１４种１０ｂｐ长的随机引物对青鱼、草鱼、鲢鱼、鳙鱼、鲫鱼、鲤鱼、团头鲂、胭脂鱼、土鲶和黄颡十种鱼进行ＲＡＰＤＰＣＲ扩增。除引物ＯＰＫ０８外，其它的１３种引物都得到较清晰的ＤＮＡ带。１３种引物共产生６７２条带，平均每种鱼产生６７条带，每种引物产生５２条扩增带。鲤鱼扩增带最多，胭脂鱼扩增带最少。引物ＯＰＱ０１、ＯＰＱ０４、ＯＰＱ０６、ＯＰＱ１１、ＯＰＱ１２、ＯＰＫ０７、ＯＰＰ０１、ＯＰＰ１５、ＯＰＰ１７扩增的带谱可以作为种间鉴定的标记。本文结果显示ＲＡＰＤ是一种非常灵敏的种间鉴定技术，特别是对鱼卵和鱼苗的鉴定有重要意义。     

草鱼肠道约氏不动杆菌的分离鉴定及药敏特性研究

研究草鱼肠道不动杆菌,为鱼类肠道细菌的分离鉴定与微生态机制研究积累资料。从草鱼肠道中分离纯化获得1株细菌,编号为SW-2,采用细菌形态观察、生理生化特性分析、16S rDNA克隆测序及系统发育树构建等进行研究。结果表明SW-2菌株为革兰氏阴性短杆菌,对葡萄糖、甘露糖、木糖、枸椽酸盐利用等均为阴性;PCR方法扩增SW-2菌株16S rDNA并亚克隆至pMD18-T载体,测序获得序列长度为1 503 bp,与约氏不动杆菌(Acinetobacter johnsonii)序列相似性最高为99.7%;进一步构建系统发育树显示与A.johnsonii亲缘关系最近,自然聚类为一支,从而确定为约氏不动杆菌(A.johnsonii);药敏试验结果显示SW-2菌株对庆大霉素、羧苄青霉素、阿莫西林、氨苄西林、卡那霉素等药物敏感。人工回归感染草鱼7 d后未出现发病死亡现象,但是否为条件致病菌有待进一步研究。     

肌醇对胭脂鱼生长、体成分和部分血清生化指标的影响

以酪蛋白、明胶和鱼粉为蛋白源配制6组实验饲料,分别在饲料中添加0、75、150、300、600和1 200mg/kg的肌醇,每组设3个重复,连续投喂初始体质量(10.01±0.24)g的胭脂鱼(Myxocyprinus asiaticus)幼鱼8周,考察饲料中添加不同水平的肌醇对胭脂鱼幼鱼生长性能、全鱼以及肌肉营养成分和部分血清生化指标的影响,以确定胭脂鱼幼鱼饲料中肌醇的适宜添加量。结果显示:随着饲料中肌醇含量增加,胭脂鱼幼鱼增重率、成活率和特定生长率呈先上升后稳定的趋势,均在300 mg/kg组时达到稳定;饲料肌醇对全鱼体成分无显著性影响,肌肉脂肪含量在300 mg/kg组时显著低于未添加组;饲料中肌醇对血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和血清甘油三酯均有显著性影响;饲料中肌醇(150 mg/kg)不足时,血清中谷草转氨酶和谷丙转氨酶的活性显著高于其它实验组。以特定生长率为评价指标,经折线回归分析,饲料中补充310.3 mg/kg的肌醇时,胭脂鱼幼鱼获得最大生长。     

齐口裂腹鱼维氏气单胞菌１６ＳｒＤＮＡ序列分析

报告齐口裂腹鱼病原菌的检测和生物学特性。从齐口裂腹鱼肠道中分离出菌株Spc0408, 采用常规形态特征的观察、生理生化试验、结合16SrDNA基因序列分析对其进行鉴定并构建系统发育树。该菌为革兰氏染色呈阴性,短杆形,无芽孢。生化鉴定结果显示具该菌有动力性,H2S、尿素阴性、不发酵木糖、鼠李糖、山梨醇等;β-半乳糖苷酶、葡磷胨水、枸橼酸盐阳性等。菌株16SrDNA的长度为1443 bp,登录号为JF929912,其和Genbank中多株维氏气单胞菌相似性高达97%,系统发育树显示菌株Spc0408和多株维氏气单胞菌聚为一簇。结合分离菌的表型特征及分子鉴定结果,可以判定该菌株在分类上属于维氏气单胞菌,本研究可以对相关病原菌的分类鉴定提供参考。     

Molecular characterization and confocal laser scanning microscopic study of Pygidiopsis macrostomum (Trematoda: Heterophyidae) parasites of guppies Poecilia vivipara

Pygidiopsis macrostomum and Ascocotyle (Phagicola) pindoramensis (Digenea: Heterophyidae) parasitize guppies as intermediate hosts and, respectively, fish‐eating mammals or birds as definitive hosts. Heterophyids have zoonotic potential, and molecular studies associated with morphological and ecological aspects have helped to clarify their taxonomy and phylogeny. Poecilia vivipara naturally parasitized by metacercariae of both species (100% prevalence) exhibit no external signs of parasitism. In this work, four new sequences of P. macrostomum (18S rDNA, 28S rDNA and ITS2 rDNA) and one new sequence of A. (P.) pindoramensis (mtDNA cox‐1) are presented. Phylogeny reconstructions linked P. macrostomum to other heterophyids, but the separation of the Heterophyidae and Opisthorchiidae remains unclear. Additionally, we used indirect immunocytochemistry and the phalloidin‐fluorescence techniques allied with confocal laser scanning microscopy to describe muscular and neuronal structures of P. macrostomum. A complex arrangement of muscular fibres is associated with the tegument, suckers, gut and reproductive system. Radial fibres around the ventral sucker are thick, branched and extend to the body wall. High‐resolution confocal imaging revealed a typical digenean muscular arrangement and important heterophyid morphological traits. These data will support future control measures to reduce the parasitism in guppies reared in fish farming systems, especially for aquarium and experimental purposes.     

Sequence and polymerase chain reaction–restriction fragment length polymorphism analysis of the large subunit rRNA gene of bivalve: Simple and widely applicable technique for multiple species identification of bivalve larva

ABSTRACT:   One of the biggest and long-standing difficulties in investigation of larval ecology in the field is species-level identification. In the present study, we developed polymerase chain reaction–restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) analysis based on the large subunit (LSU) rRNA gene (rDNA) D1/D2/D3 region for identification of multiple species of bivalve larvae using 14 species of bivalve collected from Maizuru Bay. The LSU rDNA D1/D2/D3 region of all analyzed species could be amplified by PCR using bvD1f/bvD3r primers, and RFLP analysis by Hae III digestion on the PCR products showed species-specific fragment patterns. Furthermore, this analysis applied to single bivalve larvae in Maizuru Bay revealed efficient amplification of the target region and the species-specific pattern from 80% of the larvae, 75% of which showed a pattern that matched a certain pattern of the adult bivalves. In addition, the analysis of inter- and intraspecies variation of the LSU rDNA D1/D2/D3 region using the sequence data of the genus Crassostrea from the DDBJ database showed high applicability of this RFLP analysis on closely related species. Because of the wide applicability and technical simplicity, this method can become the standard for the identification of bivalve larvae species once the sequence data of the LSU rDNA D1/D2/D3 region of many bivalve species have been accumulated.     

The tolerance threshold of Chinese sucker to total dissolved gas supersaturation

Total dissolved gas (TDG) supersaturation generated in the river may result in gas bubble disease to Chinese sucker (Myxocyprinus asiaticus Bleeker) and cause their mortality. To assess the effects of TDG supersaturation on Chinese suckers in laboratory, juvenile fish were exposed to different levels of TDG supersaturated water. All of the fish died when the TDG saturation reached and exceeded 125%, but none died at TDG of 120% saturation in 96 h. To evaluate the effects of intermittent exposure of TDG supersaturation, Chinese suckers were exposed to TDG of 130% for a specific duration and then provided a recovery period at 100% saturation. The results showed that some remission is possible for intermittent exposure. Because of the characteristics of natural rivers, experiments exploring the TDG supersaturation detection and avoidance abilities of Chinese suckers were conducted and demonstrated the fish can avoid TDG supersaturation in both the horizontal and vertical directions when higher TDG levels were available. The results indicate the tolerance threshold of juvenile Chinese suckers is a TDG level of 120% saturation.     

长江胭脂鱼开口饵料的研究

用不同组合的饵料投喂刚能平游的长江胭脂鱼鱼苗40 d,研究长江胭脂鱼适宜的开口饵料。结果显示,用配合饲料作开口饵料时长江胭脂鱼的开口率、成活率和出池规格都显著低于水蚯蚓组和卤虫组,补充蛋黄后开口率、成活率、出池规格变化不明显,但补充螺旋藻后开口率、成活率、出池规格均显著提高。用配合饲料和卤虫作主体饵料再补充蛋黄和螺旋藻粉也获得了较高的开口率和成活率。建议在水泥池育苗条件下长江胭脂鱼的开口饵料用配合饲料和鲜活饵料作主体饵料并补充少量螺旋藻粉。     

环境因子对胭脂鱼精子活力影响的研究

通过观察精子的快速运动时间和寿命,研究了6种环境因子对胭脂鱼(Myxocyprinus asiaticus Bleeker)精子活力的影响。结果表明:胭脂鱼精子对酸碱的耐受能力较强,在pH值为4~10时,精子均可以快速运动,且在pH值为8时精子的活力最强。不同浓度的NaCl、KCl、葡萄糖、CaCl2、MaCl2溶液对胭脂鱼精子运动的诱导效果不同。5种溶液最适于胭脂鱼精子运动的浓度分别为:NaCl 102 mmol/L;KCl 75 mmol/L;葡萄糖100 mmol/L;CaCl275.6 mmol/L;MgCl275.6 mmol/L。且在5种溶液低浓度时精子活力较强,超过一定浓度精子的运动开始被抑制。