17β-雌二醇和甲基睾酮对离体长臀(鱼危)脑垂体促性腺激素分泌的影响

性类固醇激素对性腺发育期间的鱼类促性腺激素(GTH)分泌有负反馈作用,而对性未成熟的鱼类GTH分泌有正反馈作用.本实验选取性腺发育中期的长臀(鱼危)(Cranoglanis bouderius)进行研究,将实验用鱼分成4组(实验重复3次,每组共用6尾鱼,):①持续性17β-雌二醇(17β-Estradiol,E2)处理;②E2在注入促性腺激素释放激素类似物(Analogue of gonadotropin-releasing hormone,GnRH-A)脉冲刺激的处理;③持续性甲基睾酮(17α-methyltestosterone,MT)处理;④MT在注入GnRH-A脉冲刺激的处理;采用离体灌流孵育和GTH放射免疫测定的方法研究E2和MT对长臀(鱼危)脑垂体GTH分泌的影响.持续性的E2(1μmol/L)处理能显著性地抑制长臀(鱼危)脑垂体碎片基础GTH的分泌,而持续性的MT(1μmmol/L)处理能抑制长臀(鱼危)3脑垂体碎片基础GTH的分泌,同时E2和MT处理能抑制GnRH-A刺激的GTH分泌,而高浓度的E2和MT处理(10μmol/L)要比低浓度的E2和MT处理(0.1μmol/L)对长臀(鱼危)脑垂体碎片基础GTH释放抑制能力强.这些结果表明,在离体实验中,E2和MT对性腺发育中期的长臀(鱼危)脑垂体的GTH的分泌具有负反馈的作用,并且可能直接参与了长臀(鱼危)脑垂体的GTH调节.     

17β-雌二醇和甲基睾酮对离体长臀脑垂体促性腺激素分泌的影响

性类固醇激素对性腺发育期间的鱼类促性腺激素(GTH)分泌有负反馈作用,而对性未成熟的鱼类GTH分泌有正反馈作用.本实验选取性腺发育中期的长臀(鱼危)(Cranoglanis bouderius)进行研究,将实验用鱼分成4组(实验重复3次,每组共用6尾鱼,)①持续性17β-雌二醇(17β-Estradiol,E2)处理;②E2在注入促性腺激素释放激素类似物(Analogue of gonadotropin-releasing hormone,GnRH-A)脉冲刺激的处理;③持续性甲基睾酮(17α-methyltestosterone,MT)处理;④MT在注入GnRH-A脉冲刺激的处理;采用离体灌流孵育和GTH放射免疫测定的方法研究E2和MT对长臀(鱼危)脑垂体GTH分泌的影响.持续性的E2(1μmol/L)处理能显著性地抑制长臀(鱼危)脑垂体碎片基础GTH的分泌,而持续性的MT(1μmmol/L)处理能抑制长臀(鱼危)3脑垂体碎片基础GTH的分泌,同时E2和MT处理能抑制GnRH-A刺激的GTH分泌,而高浓度的E2和MT处理(10μmol/L)要比低浓度的E2和MT处理(0.1μmol/L)对长臀(鱼危)脑垂体碎片基础GTH释放抑制能力强.这些结果表明,在离体实验中,E2和MT对性腺发育中期的长臀(鱼危)脑垂体的GTH的分泌具有负反馈的作用,并且可能直接参与了长臀(鱼危)脑垂体的GTH调节.     

长臀鮠人工繁殖技术探讨

采用林彼(Linpe)方法和传统人工催产方法对长臀鮠进行人工繁殖孵化，促性腺激素释放激素类似物(GnRH-A)和地欧酮(DOM)药物组合诱导的排卵率与GnRH-A和鲤鱼脑垂体匀浆(CPE)组合的效果相同。对于长臀鮠而言，采用Linpe方法进行人工催产具有一定的优点，可以弥补CPE来源有限和价格昂贵的不足。     

长吻鮠脑垂体的组织学观察

应用Azan、PAS-MB、AF以及H．E染色方法，时长吻鮠脑垂体的形态组织结构和注射催产激素前后的GTH分泌细胞分别进行了观察研究。结果表明。长吻鮠脑垂体由腺垂体和神经垂体构成。神经垂体较简单,腺垂体结构较复杂，明显分为前腺垂体（RPD）、中腺垂体（PPD）和后腺垂体（PI）。腺垂体内可鉴别出7种激素分泌细胞，其中RPD内2种：为促肾上腺皮质激素（ACTH）分泌细胞和催乳激素（PROL）分泌细胞；PPD内3种：为生长激素（GH）分泌细胞、促甲状腺激素（TSH）分泌细胞、促性腺激素（GTH）分泌细胞；PI内有2种：为促黑色素激素（MSH）分泌细胞和1种嫌色细胞。     

长臀(鱼危)人工繁殖技术探讨

采用林彼(Linpe)方法和传统人工催产方法对长臀宣进行人工繁殖孵化,促性腺激素释放激素类似物(GnRH-A)和地欧酮(DOM)药物组合诱导的排卵率与GnRH-A和鲤鱼脑垂体匀浆(CPE)组合的效果相同.对于长臀(鱼危)而言,采用Linpe方法进行人工催产具有一定的优点,可以弥补CPE来源有限和价格昂贵的不足.     

GnRH_A和紫萁抑制大黄鱼性腺早熟的机制

应用脑垂体组织生理学和免疫组织化学方法，对GnRH-A和紫萁抑制大黄鱼性早熟的作用机制进行了研究。结果表明，性早熟大黄鱼脑垂体许多促性腺激素分泌细胞的胞质出现空泡，提示性早熟的原因可能是由于GtH细胞提早进入分泌活动所致。长期服用促性腺激素释放激素类似物的养殖大黄鱼（没有性早熟），它的脑垂体GtH细胞对GnRH抗独特型发生弱的免疫阳性反应，而对照组性早熟鱼仍出现强的反应，表明实验组大黄鱼脑垂体GtH细胞对GnRH-A的应答能力下降，出现脱敏效应，这可能与GnRH-A抑制大黄鱼性早熟有关。养殖大黄鱼长期服用紫萁，它的脑垂体GtH细胞膜上GnRH受体则没有出现脱敏现象，提示紫萁抑制大黄鱼性早熟的机制不同于GnRH类似物，确切机制有待进一步研究。     

LHRH-A、DA对施氏鲟脑垂体碎片释放GtH的影响

为了探讨在古老的软骨硬鳞鱼中促性腺激素(GtH)的双重内分泌调节作用,本实验设计用离体灌流的方法研究促黄体素释放激素类似物(LHRH-A)和多巴胺(DA)对施氏鲟脑垂体碎片分泌GtH的影响。引入10、100和1 000 nmol/L 3个浓度的LHRH-A对施氏鲟脑垂体碎片3次脉冲式刺激实验;每次间隔1 h,持续5 min,研究不同剂量LHRH-A对鲟鱼脑垂体释放GtH的作用;用200 nmol/L DA对施氏鲟脑垂体碎片持续2 h灌流后引入5 min的1 000nmol/L LHRH-A刺激实验,研究DA如何抑制鲟鱼脑垂体释放GtH。每5 min收集一管灌流液,用放射免疫测定法(RIA)检测灌流液中GtH的含量。结果显示,低剂量LHRH-A随着刺激引入脑垂体释放GtH出现波浪式的增加,中、高剂量出现释放延后现象。LHRH-A在10nmol/L到1 000 nmol/L范围内对刺激脑垂体释放GtH没有剂量依存关系。DA对施氏鲟脑垂体碎片GtH的分泌没有显著影响,但是可以抑制LHRH-A引起的GtH分泌,即DA不能抑制施氏鲟GtH的基础分泌,而只能抑制LHRH-A诱导的GtH分泌。研究结果证明,在高等硬骨鱼类中存在的双重神经内分泌调节在古老的鲟鱼中也存在。     

长吻鮠不同时期脑垂体的超微结构

采用组织学方法和透射电镜技术对性周期内不同阶段和不同季节的雌性长吻鮠(Leiocassis longirostris)脑垂体的超微结构进行较详细的研究，结果表明：长吻鮠脑垂体包括腺垂体和神经垂体两个部分，腺垂体组织中有6种分泌细胞，即促性腺激素(GTH)分泌细胞、生长激素(STH)分泌细胞、促甲状腺激素(TSH)分泌细胞、促黑色素细胞刺激激素(MSH)分泌细胞、催乳激素(PRL)分泌细胞、促肾上腺皮质激素(ACTH)分泌细胞。神经垂体组织中存在A型(A1、T2)和B型神经分泌纤维，A型分泌纤维轴突中具有不同类型的分泌颗粒，B型分泌纤维轴突中含有许多透明小囊泡。产卵前GTH细胞胞质中充满了电子密度较高的大、小两种分泌颗粒；TSH细胞胞质中分泌颗粒排空，电子密度降低，出现大空泡；STH细胞处于活跃的合成和分泌状态；MSH细胞粗面内质网相当发达，成层围核分布，分泌颗粒极少；PRL细胞电子密度高，具圆球形被膜的分泌颗粒；ACTH细胞分泌物颗粒数量少。产卵后GTH细胞中的分泌颗粒排空；TSH细胞出现空泡；STH细胞中的粗面内质网围核环状排列；MSH细胞分泌颗粒多但比较小，粗面内质网呈扁状或网状；PRL细胞分泌颗粒极少，分布不均匀；ACTH细胞内质网近核分布。秋季GTH细胞中发现GTH1和GTH2两种细胞，GTH1细胞具有大量围核分布的分泌颗粒，GTH2细胞胞质中分泌颗粒数量较少；STH细胞胞质中粗面内质网极发达，围核分布，线粒体数量增加；TSH细胞内质网膨大成泡状；MSH细胞有明显的双核结构，其中一核具核仁，胞质内分泌颗粒较产后增多；PRL细胞具有呈不均匀分布的圆球形分泌颗粒；ACTH细胞线粒体与内质网围核分布，分泌颗粒较少，不均匀分布于细胞质中。冬季GTH细胞内有少量分泌颗粒散布在核周围；TSH细胞含有较多的小型分泌颗粒，胞核外周有大量长条形的粗面内质网；STH细胞中分泌颗粒数量较少，合成和分泌活动微弱；MSH细胞粗面内质网呈泡化状，绕核排列；PRL细胞、ACTH细胞和秋季时的超微结构无明显差异。神经垂体中的分泌纤维各阶段也有一定的变化，产前阶段具有较多球形的无被膜分泌颗粒，产后阶段分泌颗粒呈现排空，秋季部分可见到分泌颗粒，但数量相对较少，冬季变化不明显。     

高效鱼类催产合剂（RES＋LRH-A）应用的进展

中山大学鱼类研究室生殖内分泌生理研究组和加拿大Alberta大学动物系R.E.Peter教授合作,近三年来对鱼类生殖机理的研究,已经证明下丘脑神经分泌细胞产生的多巴胺,既能抑制脑下垂体分泌促性腺激素(GTH),也能抑制LRH-A对GTH分泌的促进作用;同时也已证明儿茶酚胺排除剂Reserpine(简称RES)能将多巴胺对GTH分泌的抑制作用减弱以至消除,从而显著增强LRbI-A促进GTH分泌和诱导排卵作用。根据上述理论,结合前二年实践获得的最新研究成果,中山大学鱼类研究室和浙江宁波市激素制品     

长吻鮠人工催产及脑垂体促性腺激素细胞的超微结构的变化

通过对催产和未催产的长吻鮠脑垂体中腺垂体促性腺激素分泌细胞（ＧＴＨ 细胞） 的分泌活动分析,证实了用促黄体素释放激素类似物（ＬＲＨ－ Ａ） ５０μｇｋｇ 加ＤＯＭ５ｍｇｋｇ 混合注射催产长吻鮠,能有效地促使ＧＴＨ细胞分泌促性腺激素,诱导卵母细胞成熟和排卵,催产效果显著。超微结构的进一步观察,揭示了长吻鮠脑垂体ＧＴＨ 细胞中存在两种分泌颗粒,即分泌小球,直径１２００～２０００ｎｍ ,电子密度低;分泌颗粒直径３００ ～５００ｎｍ ,电子密度高。分泌小球释放与卵母细胞的发育成熟有关,分泌颗粒的释放则与排卵相关。     

高效新型鱼类催产合剂介绍

<正> 近年来对鱼类生殖生理的研究已经证明:(1)鱼类脑垂体促性腺激素(GtH)的分泌活动既受到下丘脑分泌的促性腺激素释放激素(GnRH)的促进,又受到下丘脑产生的促性腺激素释放的抑制因素(GRIF)的抑制。(2)下丘脑神经分泌细胞产生的多巴胺具有GRIF的作用,它既能直接抑制脑垂体GtH细胞的分泌活动,亦能抑制GnRH促进GtH的分泌作用。(3)多巴胺的拮抗物或合成抑制剂能消除多巴胺对鱼脑垂     

鱼类下丘脑—垂体神经分泌系统功能综述

鱼类的生殖是受环境影响的。感觉器官把外界环境的刺激(如温度、光照等)传送到脑,使下丘脑分泌促性腺激素释放激素(GnRH),激发脑垂体分泌促性腺激素作用于性腺并促使性腺分泌性甾类激素,以促使性腺发育成熟及排出精子和卵子。     

鱼类芳香化酶活性研究的进展

鱼类的生殖活动受外部环境因素和神经内分泌的双重调节。下丘脑、脑垂体和性腺通过相互调节 ,促进和制约着鱼类生殖细胞的发生、性别分化和性腺发育成熟及其繁殖活动。如下丘脑产生促性腺激素释放激素 (ＧｎＲＨ)可刺激脑垂体分泌促性腺激素 (ＧｔＨ)作用于性腺 ,促使性腺组织产生类固醇激素直接作用于生殖细胞 ,引起生殖细胞发育成熟和排卵。同时 ,类固醇激素也会反馈抑制ＧｎＲＨ和ＧｔＨ的分泌。在类固醇激素的代谢过程中 ,需要多种酶参与催化 ,其中一种酶称为芳香化酶 (ａｒｏｍａｔａｓｅ) ,在其中起着关键的作用。许多研究表明 ,芳香…     

细胞外Ca2+和K8对鲤鱼脑垂体离体生长激素分泌的影响

采用脑垂体离体灌流孵育系统,研究细胞外 Ca~(2+)和 K~+对鲤鱼脑垂体基础的和鲑鱼促性腺激素释放激素(sGnRH)刺激的生长激素(GH)分泌的影响。离体灌流孵育的鲤鱼脑垂体基础 GH分泌和 sGnRH 刺激的 GH 分泌都是细胞外 Ca~(2+)依赖的,缺细胞外 Ca~(2+)存在时,基础 GR分泌显著下降,2分钟脉冲式 sGnRH 刺激的 GH 分泌反应接近消失。Ca~(2+)通道阻滞剂异搏定以剂量依存形式显著抑制基础的和2分钟脉冲式sGnRH 刺激的 GH 分泌,表明细胞外 Ca~(2+)的作用至少部分通过细胞膜电位敏感性 Ca~(2+)通道。50mM K~+显著刺激基础GH 分泌,并显著加强高剂量sGnRH 刺激的GH 分泌,且K~+的作用是细胞外 Ca~(2+)依赖的。     

尼罗非鲫腺垂体中外侧部的超微结构

取越冬前期、越冬期、初春期及夏季高温期3龄雌性尼罗非鲫(Oreochromisnilotica),对其腺垂体中外侧部的超微结构进行观察分析。其中外侧部主要由生长激素(GH)分泌细胞、促甲状腺激素(TSH)分泌细胞和促性腺激素(GTH)分泌细胞所组成。对脑垂体结构的年周期观察结果表明,在卵黄发生期和成熟期阶段,GH细胞处于活跃状态;产卵期间,TSH细胞与GTH细胞显示了同步的高度活跃,TSH分泌可直接促进排卵活动。并讨论各类腺细胞的超微结构特征及分泌颗粒释放方式的特点。     

促性腺激素诱发大西洋鲑卵黄发生期卵巢滤泡释放性类固醇激素的离体研究

提要应用大麻哈鱼(Oncovhynchus keta)促性腺激素(GTH)诱发大西洋鲑(Salmosalar)卵黄发生期的离体卵巢滤泡(直径为3．4毫米)产生性类固醇激素的研究表明，不论用0．1或1微克／毫升GTH刺激，经培育10天后，未出现卵母细胞卵核消失的现象，卵核偏位也不明显。对培养液中17α，20β-双羟孕酮(17α20βP)的积累浓度测定结果，仅1微克／毫升GTH组含少量的17α20βP；0．1微克／毫升GTH组，培养液中雌二醇的积累浓度明显高于对照组和1微克／毫升GTH组，并为后者的两倍。除雌二醇外，孕酮，17α-羟孕酮，17α20βP，雄烯二酮和睾酮的产生，都呈现对GTH剂量的依赖关系，1微克／毫升GTH组的产生量明显高于0．1微克／毫升GTH组和对照组。离体研究的结果表明，处于卵黄发生期的卵巢滤泡对低剂量(0．1微克／毫升)和高剂量(1微克／毫升)GTH的反应不同。低浓度的GTH，引起性类固醇激素生物合成的途径沿着形成雌二醇的方向进行，雄激素被芳香化成雌激素，雌二醇再而刺激肝脏合成卵黄物质的前体，从而促进卵黄发生。高浓度的GTH，有抑制雌二醇合成的作用，而是促使卵母细胞向着最终成熟的方向发展，使性类固醇生物合成的途径转向形成大量雄激素和孕激素，特别是17α20βP。这与已充分生长和卵黄积累完成的卵巢滤泡离体试验的结果一致，与活体观察以上各种性类固醇激素的变化一致。     

促黄体素释放激素和多巴胺拮抗物对鲇促性腺激素释放的作用

以珠江流域鲇为研究对象，分别在性腺发育早期、性腺发育晚期、性腺发育成熟与产卵前期、性腺退化期注射促黄体素释放激素类似物和多巴胺D2受体拮抗物，处理后6h、12h、24h测定血液中的促性腺激素水平变化。结果表明，在性腺发育的各个时期，促黄体素释放激素类似物和多巴胺D2受体拮抗物联合注射能显著剂激鲇促性腺激素分泌；鲇脑垂体促性腺激素的分泌受下丘脑释放的促性腺素释放激素和多巴胺的双重调节，多巴胺只能抑制促性腺素释放激素诱导的促性腺激素分泌。在建立鲇人工繁殖技术时，可采用促黄体素释放激素类似物和多巴胺D2受体拮抗物联合注射方法。     

驼背鲈脑垂体显微和超微结构的观察

采用PAS、Mallory三色法和腺垂体不同细胞改良染色法3种组织学染色方法,以及透射电镜技术,对驼背鲈(Cromileptes altivelis)脑垂体的形态、组织结构和超微结构进行了研究。结果表明,驼背鲈脑垂体为圆球形实心腺体,位于间脑腹面,由神经垂体和腺垂体2部分组成。根据神经纤维中所含分泌颗粒形态和大小把神经分泌纤维分为A1、A2和B型。神经纤维中存在2种垂体细胞,即呈椭圆形的Ⅰ型垂体细胞和呈梭形的Ⅱ型垂体细胞。腺垂体由3部分组成:前外侧部(RPD)、中外侧部(PPD)和中间部(PI)。腺垂体部可以鉴别出6种内分泌细胞,其中RPD有2种内分泌细胞:促肾上腺皮质激素(ACTH)分泌细胞和催乳激素(PRL)分泌细胞;PPD有3种内分泌细胞:生长激素(GH)分泌细胞、促性腺激素(GTH)分泌细胞和促甲状腺激素(TSH)分泌细胞;PI只有1种内分泌细胞,即促黑激素(MSH)分泌细胞。此外,腺垂体还有1种非分泌细胞星状细胞(SC)。驼背鲈腺垂体中6种内分泌细胞的分布情况为:前外侧部分布有2种细胞,即嗜酸性的PRL分泌细胞和嗜碱性的ACTH分泌细胞;中外侧部有GH、GTH、TSH 3种分泌细胞;MSH分泌细胞分...     

中华鳖脑垂体的显微与超微结构观察

为了探讨中华鳖脑垂体的组织结构及其季节性变化,采用H.E染色、三色染色和免疫组织化学染色法在光镜下观察中华鳖脑垂体的显微结构,结合电镜对鳖脑垂体进行超微显微观察。结果发现中华鳖脑垂体同样分为神经垂体和腺垂体,但是缺乏中间部。腺垂体包括结节部和远侧部,远侧部可分头叶和尾叶两部分,头叶大于尾叶,神经部很小。腺垂体中的细胞可分为嗜酸性细胞、嗜碱性细胞和嫌色细胞,各类细胞的分布和形态有明显区别。免疫组化染色证明促肾上腺皮质激素(ACTH)细胞密集分布于结节部,在远侧部也有零星分布;促性腺激素(GTH)细胞和生长激素(GH)细胞数量在繁殖季节明显多于冬季。电镜下根据细胞大小、细胞核的形状和胞质中分泌颗粒特征可将腺垂体中的细胞分为GH细胞、ACTH细胞、GTH细胞、催乳激素(LTH)细胞、促甲状腺激素(TSH)细胞和嫌色细胞。在这些细胞间有明显的细胞连接。细胞形态和数量在繁殖季节和冬季有明显变化。     

介绍效果更好的鱼类催产合剂——高效鱼类催产合剂2号和3号

鱼类促性腺激素(GtH)的分泌和生殖活动已经证明为双重的神经内分泌系统所调节，即促性腺激素释放激素(GnRH)刺激GtH分泌和多巴胺作为促性腺激素释放的抑制因素(GRIF)抑制GnRH的作用以及GtH的自行释放。我们先前对养殖鱼类的研究已证明多巴胺受体的拮抗物(如pimozide，PIM)，排除剂(如reserpine，RES)和多巴胺合成抑制剂都能显著增强LRH-A诱导GtH分泌和排卵的作用。