四种鲍45S rDNA在染色体上的比较定位

为了研究皱纹盘鲍、西氏鲍、绿鲍和杂色鲍等4种鲍的核型特征,实验利用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization, FISH)技术比较定位了上述4种鲍的45S rDNA位点。皱纹盘鲍中约83%的中期细胞均检出2对45S rDNA位点,分别位于13号和16号染色体的长臂端部。西氏鲍中约75%的中期细胞均检出3对45S rDNA位点,分别位于6号染色体短臂端部、14号和17号染色体长臂端部。绿鲍中约85%的中期细胞均检出3对45S rDNA位点,分别位于4号、6号和8号染色体长臂的端部。杂色鲍中约65%的中期细胞均检出3对45S r DNA,位点,分别位于3号、4号和12号染色体短臂的端部。此外,4种鲍均有少数中期相的45S rDNA位点数高于众数,这提示,除了明确的45S rDNA位点外,4种鲍可能均有若干个不稳定的45S rDNA位点。实验结果丰富了鲍细胞遗传学研究资料,同时为鲍的遗传育种研究提供了基础数据。     

杂交三倍体泥鳅染色体C带及rDNA序列的FISH定位

对杂交三倍体泥鳅(4n♀×2n♂)的胚胎染色体进行了C带及染色体荧光原位杂交(FISH)分析,首次探讨了杂交三倍体泥鳅C带特征,为准确鉴别染色体提供依据,研究了核糖体5.8S+28S r DNA在杂交三倍体泥鳅胚胎中期染色体上的数目和位置。C带结果表明,杂交三倍体泥鳅的染色体C带包括臂端C带和着丝粒C带,没有发现臂间C带。M染色体只有1号染色体既有臂端C带又有着丝粒C带,但臂端C带均比着丝粒C带大,信号也比着丝粒的强;而其他M染色体及SM染色体、T染色体只有着丝粒C带。FISH分析显示,核糖体5.8S+28S r DNA清楚地定位在杂交三倍体泥鳅中期染色体中部着丝粒染色体(M)的端部区域,在杂交三倍体泥鳅中期染色体上可以检测到三簇杂交信号。该结果从分子细胞遗传学层面进一步证实了杂交三倍体泥鳅是含有三套染色体组的遗传三倍体。     

核糖体DNA在厦门白姑鱼和大黄鱼染色体上的比较定位

为了探究石首鱼核型微观结构上的变化,实验利用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)比较定位了厦门白姑鱼和大黄鱼18S rDNA和5S rDNA的分布特征。结果表明,厦门白姑鱼与大黄鱼在宏观核型以及18S rDNA和5S rDNA染色体分布等3个方面均存在较大差异。厦门白姑鱼的核型公式为2n=48t,臂数FN=48;单对18S rDNA信号分布于1号染色体臂间;单对5S rDNA信号分布于3号染色体近着丝粒区域。大黄鱼的核型公式为2n=2sm+4st+42t,臂数FN=50;单对18S rDNA信号分布于18号染色体短臂端部;5S rDNA信号9~11对,除一对分布于臂间外,其余全部分布于着丝粒端或短臂端部。综合其他石首鱼核型数据可以推断:厦门白姑鱼呈现原始核型特征,而大黄鱼核型是原始核型经染色体重排和/或转座衍生的特化核型;石首鱼宏观核型和18S rDNA分布模式总体保守,仅少数物种存在变化,而5S rDNA位点的分布模式存在高度的种间变化。本研究首次揭示了石首鱼物种间核型微观结构的变化,为进一步开展石首鱼分子细胞遗传学研究奠定了基础。     

黄姑鱼染色体识别与重复序列定位

黄姑鱼是我国重要的海水经济鱼类。然而,由于细胞遗传标记匮乏,黄姑鱼染色体仍然难以辨识。为了提高黄姑鱼染色体的配对识别水平,本研究利用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)、吉姆萨染色和荧光染色技术分析了黄姑鱼染色体的特征。以总DNA为探针进行基因组DNA荧光原位杂交(genomic fluorescence in situ hybridization,GISH),从而获得黄姑鱼染色体图谱,可使每对染色体呈现特定的荧光信号。依据GISH荧光信号分布模式,可以辨识黄姑鱼的24对染色体。18S r DNA FISH结果显示,18S r DNA只有一对信号,分布于1号染色体臂间,并与吉姆萨染色呈现的次缢痕、DAPI阴性带和DPI染色高亮区域同位。5S r DNA有一强一弱两对信号,信号强的一对分布于1号染色体着丝粒端,信号弱的一对分布于4号染色体的远端。端粒信号在所有染色体的端部显示,但个别染色体一端信号微弱。本研究结果丰富了黄姑鱼的细胞遗传标记,为解决黄姑鱼染色体辨识问题提供参考依据,也为进一步研究石首鱼科染色体进化提供了资料。     

点带石斑鱼的核型、C带、Ag-NORs

采用PHA活体注射结合秋水仙素培养，取点带石斑鱼全肾，低渗处理，空气干燥制片法制作染色体标本，对染色体进行Giemsa染色、C带及Ag-NORs等系列研究。结果表明：(1)点带石斑鱼2n=48，核型组成为48t，NF=48，没有异型性染色体分化；(2)在最小一对染色体的着丝粒与其染色体臂之间，靠近着丝粒部位有明显的次缢痕；(3)在间期核中，通过银染表现出核仁的数目为1～4个，1个核仁的间期核数目最高，多达55％，4个核仁的间期核数目占2％；(4)50％有丝分裂中期相能观察到Ag-NORs，Ag-NORs主要出现在第24对同源染色体上，第5对同源染色体也可观察到，但其它染色体上则没有；(5)Ag-NORs的数目在不同的细胞中表现出多态性，数目为1～4个，出现4个Ag-NOR~的频率最低(6．8％)，出现2个Ag-NORs的频率最高(58．1％)；(6)第24对同源染色体近着丝粒的臂内具次缢痕，是A乎NORs所在的区域，该区域分布有大量的结构异染色质，即Ag-NORs与C带强阳性呈现严格的同步对应；(7)点带石斑鱼所有染色体着丝粒为阳性C带，而且第24对染色体几乎整个染色体臂都呈C带阳性，着色强度与该对染色体上的着丝粒C带相同。最后讨论了核型演化规律和Ag-NORs、C带的发生机制。     

色林错裸鲤染色体组构成及倍性分析

西藏地区严酷的高原环境孕育出了独特而丰富的生物资源,其中裂腹鱼亚科鱼类其各属种间不同类群的染色体表现出多样性特征。以体质量246.0～374.2 g的雄性色林错裸鲤肾脏组织细胞为材料,采用常规冷滴片法制备染色体标本,通过吉姆萨染色,确定其染色体数目、核型;通过银染显带(Ag-NORs)技术及荧光染料色霉素A(CMA₃)和4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)双重荧光染色技术,推测其带型及倍性。结果表明：色林错裸鲤染色体数目为4n=88,核型公式为40m+20sm+28st/t, NF=148。通过Ag-NORs染色观察,色林错裸鲤间期核最高银染点数为4个,有丝分裂中期染色体分裂相银染点数最高为4个,且信号点2强2弱,位于第2组亚中部着丝粒染色体(sm2)短臂上,为端部Ag-NORs。经CMA₃/DAPI双重荧光染色,有丝分裂中期分裂相显示有4个CMA₃阳性部位,且信号点2强2弱,位于第2组亚中部着丝粒染色体(sm2)短臂的端部区域。因此,推测色林错裸鲤是含有4套染色体组的遗传四倍体。本研究结果补充了色林错裸鲤细胞遗传学...     

日本东京湾云纹石斑鱼染色体核型研究

采用PHA体内直接注射法制备了云纹石斑鱼(Epinephelus moara TemminckSchlegel1842)东京湾群体头肾组织染色体标本并分析其核型。结果显示,其东京湾群体二倍体染色体数为48,其中,亚中部着丝粒3对;其余21对染色体为端部着丝粒染色体,其染色体臂数NF为54,核型公式为:2n=48,6sm+42t,NF=54;第24对染色体的短臂的形态具有多态性。该鱼染色体臂数高于石斑鱼类的原始核型类群,属于石斑鱼属的特化类群。云纹石斑鱼日本东京湾群体与厦门群体染色体核型存在显著差异,东京湾群体比厦门群体多1对亚中部着丝粒染色体,可能是长期隔离导致染色体重组进化形成的。结果表明,云纹石斑鱼不同地理群体间存在丰富的遗传差异,可利用不同地理群体间的种内杂交优势改良云纹石斑鱼种质。     

淡水自鲳（Colossoma brachypomtim）染色体组型分析

淡水白鲳的染色体数目2n=54，全都为中部着丝粒和亚中部着丝粒染色体。核型公式20m 7sm,染色体臂数(NF)=108．     

淡水白鲳(Colossoma brachypomum)染色体组型分析

淡水白鲳的染色体数目2n=54,全部为中部着丝粒和亚中部着丝粒染色体。核型公式20m+7sm,染色体臂数(NF)=108。     

三倍体皱纹盘鲍活体倍性检测

以皱纹盘鲍的血细胞为材料，采用植物血球凝集素(PHA)体外浸泡法，运用正交实验设计，探讨PHA处理时间、PHA浓度、抽血时间对细胞分裂频度的影响。根据正交实验直观分析结果，得出用血细胞直接制备染色体标本进行三倍体皱纹盘鲍活体倍性检测的最优组合：PHA处理时间18h、PHA浓度0．04％，抽血时间22：00-24：00，3因素的主次顺序：PHA处理时间→PHA浓度→抽血时间。并可获得大量图象清晰、长度适中、分散良好的中期分裂相，是皱纹盘鲍活体倍性检测的最佳方法。同时，通过流式细胞仪测定皱纹盘鲍血细胞DNA相对含量进行三倍体皱纹盘鲍活体倍性检测，该方法制样简单，测试速度快。     

2种虾虎鱼染色体的核型分析

采用鱼鳍细胞空气干燥法制片,Giemsa染色,对生活于厦门和海南近海沿岸的2种虾虎鱼染色体核型进行分析研究。其中纹缟虾虎鱼（Tridentiger trigonocephalus）2n=44,有2对中部着丝点染色体（M）,13对亚中部着丝点染色体（SM）,2对亚端部着丝点染色体（ST）和5对端部着丝点染色体（T）,NF=78;拟丝虾虎鱼（Cryptocentroides insignis）2n=50,有9对中部着丝点染色体（M）,13对亚中部着丝点染色体（SM）,2对亚端部着丝点染色体（ST）和1对端部着丝点染色体（T）,NF=98。未发现随体、性染色体和异形染色体。     

Conventional and molecular cytogenetics of the pikeperch (Sander lucioperca L.)

Pikeperch (Sander lucioperca L.) is a percid fish species of high commercial value and potential for being aquacultured in Europe. As such, pikeperch needs to be karyologically studied with special attention dedicated to arrangement of the homologous chromosomes into pairs and chromosomal location of the chosen DNA sequences. The karyotype of the pikeperch consists of 48 small chromosomes: One pair of metacentric chromosomes, 15 pairs of submetacentric chromosomes and eight pairs of subtelo‐acrocentric chromosomes (FN = 80). Original data on the chromosomal distribution of early and late replication regions, segments resistant to AluI, DdeI, HinfI and HaeIII restriction endonucleases and identification of the C‐banded heterochromatin presented herein have been used to arrange pikeperch chromosomes into the karyotype. After Primed in situ labeling (PRINS) technique with primers enabling amplification of 5S rDNA sequences, hybridization spots observed on the short (p) arms of two the largest pikeperch submetacentric chromosomes (no. 2). Fluorescence in situ hybridization (FISH) with telomeric PNA (Peptide Nucleic Acid) probe enabled recognition of the conservative telomeric DNA sequences on the pikeperch chromosomes. No interstitial signals were observed. The specimens studied did not show any morphologically differentiated sex chromosomes.     

圆斑星鲽染色体与多种显带的形态特征分析

采用体内注射植物血细胞凝集素(PHA)和秋水仙素法制备圆斑星鲽染色体,研究其染色体C-带、Ag-NORs带及G-带的显带特征.结果发现,圆斑星鲽具有46条染色体,核型为2n =46t,染色体臂数为NF =46,所检个体全部为二倍体,未发现存在异型性染色体和随体染色体的现象.带型研究表明,C-带特征为46条染色体均有大小不一的C-带,其中第22对染色体整体呈阳性深染,第19对染色体具有端部C-带,其余均为着丝粒C-带；计算其异染色质含量为30％；Ag-NORs带型特征为具有1对Ag-NORs,位于2号染色体的长臂末端,为端部Ag-NORs; G-带特征为具有38条深染带,21条浅染带.研究结果为圆斑星鲽染色体组学和种质资源保护提供了基础资料.     

乌苏里拟鲿的染色体组型研究

采用体内注射PHA和秋水仙素,体内肾细胞短期培养,常规空气干燥法制备乌苏里拟鳞的染色体玻片标本.对100个中期分裂相记数统计,确定乌苏里拟鲿的染色体数为2n=52.由测得的核型参数和按Levan等提出的染色体划分标准得出:有12对中部着丝点染色体(m),9对亚中部着丝点染色体(sm),5对亚端部着丝点染色体(st).染色体臂数(NF)为94.乌苏里拟鳞组型公式为2 n=24m+18 s m+10st.     

Molecular cytogenetic study in Octopus (Amphioctopus) areolatus from Japan

Octopus (Amphioctopus) areolatus is an important marine cephalopod in Japan. We examined its diploid chromosome number, karyotype, and genome size (C value), and performed fluorescence in situ hybridization (FISH) using a vertebrate telomeric probe. The diploid chromosome number was 60 in embryonic cells, with 24 pairs of metacentric chromosomes, four pairs of metacentric/submetacentric chromosomes, and two pairs of submetacentric chromosomes. The mean C value was estimated to be 5.47 pg. From these findings, and those reported previously for other octopus species, we suggest that the factor causing the quantum change of C value in O. (A.) areolatus was genome duplication, and not polyploidy. In telomeric FISH analysis, hybridization signals were clearly observed in the telomeric regions of the chromosomes. This is the first report of FISH analysis of cephalopod chromosomes, and our findings suggest that the telomere sequence of O. (A.) areolatus is (TTAGGG) _n , which may allow gene mapping in the future.     

黄颡染色体组型的初步分析

采用体内注射PHA和秋水仙素,肾细胞短期培养,常规空气干燥法制备黄颡鱼的染色体玻片,对100个中期分裂相记数统计,确定黄颡的2倍染色体数为2n=52。由测得的核型参数和按Levan等提出的染色体划分标准得出：有14对中部着丝点染色体(m)；5对亚中部着丝点染色体(sm)；4对亚端部着丝点染色体(st)；3对端部着丝点染色体(t)。其染色体总臂数(NF)为90,黄颡核型公式为2n=28m 10sm 8st 6t。     

Karyotype analysis of the yellowtail kingfish Seriola lalandi lalandi (Perciformes: Carangidae) from South Australia

The karyotype and chromosomal characteristics of the yellowtail kingfish Seriola lalandi lalandi were investigated by examining metaphase spreads from kidney cells of 4-month-old fish artificially bred using wild-captured broodstock from the coast of South Australia. A total of 80 mitotic metaphases from 10 individual fish were analysed, with 52 spreads having a mode of 2 n =48 chromosomes, representing 65% of the metaphases observed. The diploid consisted of two metacentric, two submetacentric, six subtelocentric and 38 telocentric chromosomes, with the fundamental number of chromosome arms being 52. The total haploid chromosome length was approximately 44.412 μm. This study shows that the karyotype of S. lalandi lalandi differs from those reported previously for other Seriola species in having one pair of metacentric chromosomes.     

阿德利尔虹鳟染色体组型分析

选用蒸汽固定法对阿德利尔虹鳟的染色体核型进行了研究。结果表明:阿德利尔虹鳟具有染色体60条,中部着丝点染色体(m)20对,亚中部着丝点染色体(sm)2对,端部着丝点染色体(t)8对,核型公式为:2n=4sm+40m+16t,NF=104。未发现异形染色体。