草鱼营养性脂肪肝病致病因素的初步研究

草鱼属于草食性鱼类，长期投喂非全价饲料，不投喂青饲料，就会因营养不平衡而患脂肪肝病。除在一定时限内补充投喂青饲料外，尚无其他治疗此病的成功方法的报道。本试验在不投喂青饲料，只投喂非全价饲料的情况下，添加相关营养素，对草鱼营养性脂肪肝病的致病因素进行了初步研究。     

草鱼PGC-1β基因克隆及高糖高脂饲料对其表达的影响

为探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子-1β(peroxisome proliferator-activated receptor-γ coactivator-1 beta, PGC-1β)基因在草鱼能量代谢中的作用,本研究克隆了草鱼PGC-1β基因的核心序列,并对其进行了生物信息学分析;利用Real-time PCR技术检测了PGC-1β在不同组织的表达状况;同时研究了饥饿、饥饿再投喂及高糖(糖含量45%)高脂(脂含量8%)饲料对草鱼肝胰脏PGC-1β表达的影响。结果显示,所获得的草鱼PGC-1β基因部分cDNA片段长为885bp(GenBank登录号为：KM580493.1),共编码293个氨基酸,与斑马鱼的同源性为81%;该基因在脑中的表达量最高,肠和肝胰脏次之;与正常投喂组相比,饥饿(7d)导致PGC-1β在肝脏中的mRNA水平显著升高(P<0.05),再投喂后几乎恢复到对照组的表达水平。饲喂高脂以及高糖高脂饲料(65d)后,与对照组相比,草鱼肝胰脏中PGC-1β的mRNA水平显著升高(P<0.05)。研究结果表明,PGC-1β基因在草鱼能量代谢旺盛的组织中高表达,同时饥饿处理、饲料糖和脂肪水平等营养状况显著影响PGC-1β mRNA的表达。以上提示,PGC-1β在草鱼能量代谢过程中可能起到重要作用。     

水体盐度与饲料脂肪含量对尼罗罗非鱼生长、营养组成和肉质的影响

为研究水体盐度和饲料脂肪含量对尼罗罗非鱼生长、营养组成和肉质的影响,本实验设置0、8和16共3个盐度梯度,每个梯度分别投喂中脂(6%)和高脂(12%)饲料,投喂初始体质量为(5.0±0.2) g的尼罗罗非鱼8周,并测定生长性能、血清生化指标、肌肉营养成分和肉质相关指标。结果显示,在中脂饲料投喂下,与对照组(盐度为0)和高盐组(盐度为16)相比,中盐组(盐度为8)的尼罗罗非鱼具有最大终末体质量、躯壳比、脂体比、肌肉蛋白质含量、肌肉氨基酸和乳酸含量和总产肉率,但其饲料系数、脏体比、肝体比和肌肉p H值显著降低;而中脂高盐组的尼罗罗非鱼其饲料系数、肥满度、脏体比、肝体比、全鱼总脂、肝脏甘油三酯、血糖、血清乳酸和血清甘油三酯含量、血清谷草转氨酶活性较高,但全鱼和肌肉水分、全鱼灰分、产肉率和肌肉离心失水率降低。在高脂饲料投喂下,随着盐度的上升,其终末体质量、成活率和脂体比降低,但饲料系数、脏体比、肝体比和肥满度增大。其中,高脂中盐组尼罗罗非鱼的肌肉蛋白以及氨基酸含量显著降低,而高脂高盐组的全鱼灰分、肝脏甘油三酯、血糖、谷草转氨酶活性、肌肉总脂、肌肉甘油三酯和磷脂含量显著提高,但全鱼总脂、肝糖原、产肉率、肌肉离心失水率和pH值显著降低。而不论在淡水还是盐水养殖情况下,与中脂饲料组相比,高脂饲料组尼罗罗非鱼均显示出更高的脂肪积累量和肌肉乳酸含量,以及更低的成活率和产肉率。尤其在高盐度水体中,高脂饲料对尼罗罗非鱼肌肉脂肪和乳酸积累的促进作用和对成活率、饲料系数和产肉率的负面作用尤为明显。研究表明,在中脂饲料投喂下,适宜的盐度(盐度8)可以促进尼罗罗非鱼的生长并提高肌肉品质,然而,在高盐度水体中使用高脂饲料对尼罗罗非鱼的生长与肉质则有较大的负面影响。     

欣赏颌泡金鱼

目前,由饲料品质、饲料营养不平衡等诸多因素引发的鱼类肝脏病变时有发生,其中,营养性脂肪肝已严重危害了养殖业的发展,本文在对鱼类脂类代谢的基本原理阐述的基础上,对营养性脂肪肝的病理特征、诱发因素及调控措施进行了综述,以期实现对营养性脂肪肝的预防治疗.     

淡水鱼类肝病的病因与防治

近年来,由于集约化淡水养殖的普及导致鱼类肝病大量暴发,造成严重的经济损失,而淡水鱼类的肝病易被养殖户所忽视,并且耽误治疗。一、淡水鱼类肝病的病因1.营养性因素饲料中蛋白质、脂肪、糖类等营养物质过多或缺乏;饲料中营养指标与养殖对象不适合;饲料蛋白质含量过高;等等。例如:用高营养的鲤鱼饲料投喂团头鲂或草鱼;用鱼苗、鱼种饲料投喂成鱼,且投喂量过多,致使鱼类生长过快,出现肥胖和脂肪肝;饲料中维生素E、胆碱、肌醇、硒等微量元素缺乏,磷缺乏或钙磷比例失调等,都容易诱发肝病。2.毒性物质由多种外来的污染物或内部产生的毒物引起,如…     

转基因vp28蓝藻口服疫苗半数有效量测定及其对斑马鱼的安全评价

蓝藻是对虾幼苗的天然饵料,使用转vp28基因蓝藻(Synechococcus sp. PCC 7942)直接投喂凡纳滨对虾(Litopenaeus vanname)幼苗来防治白斑综合征病毒(WSSV),可起到“药食同源”的作用。转基因蓝藻作为对抗WSSV的口服疫苗,目前面临环境释放的安全性问题。斑马鱼是最常见的模式生物之一,本研究将转vp28基因蓝藻投喂凡纳滨对虾幼苗,验证其剂量梯度抗WSSV的影响,并测定其半数有效剂量(ED50)。以该剂量为依据投喂斑马鱼后,通过测定斑马鱼体内的酶学指标、进行组织切片观察以及养殖水体中氮磷等的变化,来探究转vp28基因蓝藻对水生生物、水体环境造成的影响。研究结果表明,随着转基因蓝藻口服疫苗剂量的增加,凡纳滨对虾幼苗抗WSSV的能力也随之增强,测得ED50为0.027 g。分别使用野生型和转基因型蓝藻配合饲料投喂斑马鱼15天,投喂结束后其生长状态良好、游动正常；投喂前后身体颜色无明显差异,不同组间体长增长的差异不显著(p > 0.05)。转基因组投喂的过氧化氢酶活力稍低于空白组和野生型组,过氧化物酶活力随着投喂天数的增长而呈现降低趋势；水质监测发现总氮和总磷无较大差异,投喂蓝藻的两组氨氮均要低于空白对照组,氨氮含量的提升对斑马鱼的抗氧化能力存在一定影响；组织切片发现斑马鱼各组的肝脏、心脏组织细胞无明显差异。研究表明转vp28基因蓝藻可有效增强凡纳滨对虾抗WSSV能力,且抗病能力随着口服疫苗剂量的升高而增强；投喂斑马鱼后,斑马鱼无明显的毒理效应，且对水质影响较小；转vp28基因蓝藻作为亚单位疫苗投放对水生生物的影响较小,可为后续产业规模应用提供基础。     

草鱼SREBP-1基因的克隆及糖对其在肝脏中表达的影响

固醇调节元件结合蛋白(SREBPs)是调控糖脂代谢相关基因表达的关键核转录因子。为获知草鱼SREBP-1基因的序列及其在肝脏中的表达规律,本实验采用同源克隆和RACE方法获得了草鱼SREBP-1基因的部分cDNA序列,并通过生物信息学方法对该基因及所编码蛋白的结构特征进行了分析;采用实时荧光定量PCR技术,对SREBP-1基因在8种不同组织的表达规律及低糖(糖含量24%)和高糖(糖含量42%)投喂条件下肝脏中的表达水平进行了研究。结果显示,所克隆到的草鱼SREBP-1基因cDNA长4 760 bp,其中包括开放读码框3 426bp,编码1 141个氨基酸;草鱼SREBP-1具有一个典型的碱性螺旋-环-螺旋亮氨酸拉链结构(bHLH-zip);氨基酸序列比对结果显示,草鱼SREBP-1与其他鱼类的同源性在76%~88%之间,与斑马鱼的进化关系最近;草鱼SREBP-1基因在脑中的表达量最高,肝脏和肠次之,在肾脏、脾脏、肌肉、脂肪和性腺中均有少量表达;与对照组相比,SREBP-1基因在高糖诱导下表达量显著提高(P0.05),低糖诱导下没有显著性差异。研究表明,在高糖负荷条件下,草鱼肝脏中SREBP-1可能会促进糖的利用和转化,从而参与糖代谢调节过程,为丰富鱼类糖代谢调控机理提供研究资料,并有望为提高鱼类对饲料糖的利用效率提供理论依据。     

高水平烟酸对吉富罗非鱼脂代谢和体脂沉积的影响

为探讨高水平烟酸对鱼类脂代谢和体脂沉积的影响,本研究以吉富罗非鱼(Oreochromisniluticus)为研究对象,设计了2个实验。在实验I中,为确定烟酸是否具有改善血脂作用及其适宜水平,首先通过高糖高脂饲料喂养初始体重(15.28±0.23) g的实验鱼40 d,建立高血脂模型,随后改投添加500 mg/kg、1000 mg/kg、2000 mg/kg烟酸的饲料。结果发现添加500～2000mg/kg的烟酸,均有降低实验鱼血清胆固醇和甘油三酯水平的作用,但以1000～2000 mg/kg的效果较为显著。在实验Ⅱ中,采用2×2双因素实验设计,研究了2种饲料类型(对照组和高糖高脂饲料)和2个烟酸水平(100 mg/kg和1000 mg/kg)对初始体重(24.45±0.07) g实验鱼生长、饲料利用、血脂水平和体成分的影响。养殖8周。结果发现,饲料类型或烟酸水平未对实验鱼的末体重、增重率、特定生长率、肥满度、脏体比和肠脂比,以及全鱼粗脂肪、粗蛋白、水分和灰分含量等生长性能指标产生显著影响(P0.05);对饲料粗蛋白和粗脂肪的表观消化率、饲料系数、摄食率等饲料利用指标也未产生显著影响(P0.05)。与投喂对照组饲料的相比,投喂高糖高脂饲料的实验鱼对饲料干物质和总能的表观消化率,及其血清胆固醇、甘油三酯和游离脂肪酸水平,肝脏、内脏、腹肌的粗脂肪含量显著升高(P0.05);而投喂高水平烟酸实验鱼的血清低密度脂蛋白、胆固醇和游离脂肪酸水平,肝脏粗脂肪含量则显著降低(P0.05)。饲料类型和烟酸水平仅对实验鱼血清的高密度脂蛋白和胆固醇水平存在显著的交互作用(P0.05)。结果表明,饲料中添加1000 mg/kg烟酸不会影响吉富罗非鱼的生长性能和饲料利用,并具有降低血脂水平和肝脏脂肪含量的作用。     

西伯利亚鲟脂肪肝模型的建立

选择规格相近[体重(8.41±0.82)g,体长(10.12±0.44)cm]的西伯利亚鲟鱼225尾,分为3组,每组3个平行,分别用8%(对照组)、12%(中脂组)、16%(高脂组)油脂含量的饲料投喂。养殖42 d后,测定体长、体重,尾静脉取血,解剖。通过生长指标、生理生化指标及肝脏组织切片观察等评价建模是否成功。结果表明,高脂组生长最快,终末体长、体重显著高于对照组和中脂组(P0.05),肝指数显著高于对照组和中脂组(P0.05),存活率与另两组差异不显著(P0.05);高脂组血清AST、ALT及TC、TG显著高于对照组(P0.05),肝脏TG显著高于中脂组和对照组;对照组肝脏呈暗红色,中脂组肝脏呈浅红色,高脂组呈暗白色,病理切片观察表明,高脂组部分肝细胞坏死,细胞破裂,脂肪颗粒融成一个大的脂肪滴,细胞呈现透明空泡化,细胞核破裂或溶解。通过肝指数、血清生化指标、肝脏TG、肝脏外观颜色及病理组织切片分析,高脂饲料组成功地建立了鲟鱼脂肪肝模型。     

复合益生菌在高蛋白日粮水产养殖动物中的应用

全价配合饲料是水产养殖动物所需要维持机体生长的最常见的日粮,尤其是水产养殖动物在生长期更是需要持续大量的投喂高蛋白全价配合饲料才能维持稳定的生长速度.但高蛋白日粮在养殖水产动物过程中由于蛋白含量高,脂肪含量高会加重水产养殖动物的肝脏负担,导致脂肪肝炎的发生.同时由于鱼粉价格的上涨,为了提高蛋白含量,饲料配方中加入的植物...     

Physiological and molecular changes in large yellow croaker (Pseudosciaena crocea R.) with high‐fat diet‐induced fatty liver disease

Fatty liver disease is regularly observed in cultured large yellow croaker, and the disease leads to lower growth rates and reduced harvest yields. The goal of this study was to achieve a more detailed understanding of the physiological and molecular changes in response to high‐fat diet‐induced fatty liver in large yellow croaker. Large yellow croaker fed a high‐fat diet (HFD) for 9 weeks developed hepatic steatosis characterized by histological observation and significantly increased plasma triglyceride levels and serum alanine aminotransferase (ALT) activities. However, no significant differences in serum total protein, glucose, cholesterol, non‐esterified free fatty acids (NEFA), aspartate aminotransferase, high‐density lipoprotein and low‐density lipoprotein were observed between the normal diet and the high‐fat diet (HFD) group. The fatty acid composition of tissue lipids was not affected significantly by dietary lipid levels. Gene expression analysis demonstrated that the HFD decreased fatty acid synthase expression and increased PPARγ expression, but had no effect on lipoprotein lipase and PPARα expression. These results suggest that the HFD‐induced physiological changes and fatty liver may be due to the alteration of related gene expression. As such, further investigations of the metabolic pathways and differentially expressed genes are of particular significance in the mechanistic study and understanding of HFD‐induced fatty liver disease.     

养殖鱼类脂肪肝成因及相关思考

养殖鱼类脂肪肝病,是困扰水产养殖业多年的广发性病害,虽经多年研究和防治实践,至今尚不能得到根本遏制。本文回顾了近年来在养殖鱼类脂肪肝研究领域的重要研究成果,从营养和饲料、养殖环境、鱼类生理特性、物种差异和遗传变异等5个方面系统总结了导致养殖鱼类肝脏脂肪过量累积的原因。在综述已有成果的基础上,分析了当前鱼类脂肪肝研究和防治实践中存在的可能误区,并结合自身多年在鱼类、哺乳动物和人类脂肪肝研究中的成果和经验,探讨了养殖鱼类脂肪肝发生的生物学机制,提出了"营养型脂肪肝"与"氧化型脂肪肝"的区分标准,揭示了当前鱼类脂肪肝防治的复杂性和困难性,并对今后鱼类脂肪肝研究和防治实践提出了具体的研究方向和防治策略。     

Resveratrol supplementation improves lipid and glucose metabolism in high-fat diet-fed blunt snout bream

Here, we aimed to investigate whether resveratrol (RSV) can ameliorate high-fat diet (HFD)-induced metabolic disorder in fish. Blunt snout bream (Megalobrama amblycephala) with average weight 27.99 ± 0.56 g were fed a normal fat diet (NFD, 5% fat, w/w), a HFD (11% fat), or a HFD supplemented with 0.04, 0.36, or 1.08% RSV for 10 weeks. As expected, fish fed a HFD developed hepatic steatosis, as shown by elevated hepatic and plasma triglycerides, raised whole body fat, intraperitoneal fat ratio and hepatosomatic index, and increased plasma alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST). RSV supplementation lessened increases in body mass, whole body fat, and intraperitoneal fat, and alleviated development of hepatic steatosis, elevations of plasma triglyceride and glucose, and abnormalities of ALT and AST in HFD-fed fish. RSV supplementation increased SIRT1 messenger RNA (mRNA) expression and consequently hepatic mRNA expression of adipose triglyceride lipase (ATGL), carnitine palmitoyltransferase (CPT1a), and microsomal triglyceride transfer protein (MTTP), implying upregulation of lipolysis, β-oxidation, and lipid transport, respectively, in the liver. Conversely, hepatic lipoprotein lipase (LPL), sterol regulatory element-binding protein 1 (SREBP-1c), peroxisome proliferator-activated receptor γ (PPARγ), and ATP citrate lyase (ACLY) mRNA expression were decreased, implying suppression of fatty acid uptake, lipogenesis, and fatty acid synthesis. Additionally, RSV downregulated glucokinase (GCK) and sodium-dependent glucose cotransporter 1 (SGLT1) and upregulated glucose transporter 2 (GLUT2) mRNA expression, thus restoring normal glucose fluxes. Thus, RSV improves lipid and glucose metabolisms in blunt snout bream, which are potentially mediated by activation of SIRT1.     

Metabolism and antioxidation regulation of total flavanones from Sedum sarmentosum Bunge against high-fat diet-induced fatty liver disease in Nile tilapia (Oreochromis niloticus)

Fish Physiology and Biochemistry - Diet-induced fatty liver is a considerable threaten to fish aquaculture due to the popularity of the high-fat diet (HFD) feeding. Our study aims to investigate...     

Dietary salmon milt deoxyribonucleic acid prevents hepatosteatosis in mice

With the increased incidence of lifestyle-related diseases, prevalence of nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD) is increasing at an unprecedented rate, leading to rising interest in studying the role of functional foods in its prevention. This study demonstrated the efficacy of salmon milt deoxyribonucleic acid (SM DNA) in preventing liver dysfunction in a diet-induced obesity model. Seven-week-old male C57BL/6J mice were fed normal diet (ND), high-fat diet (HFD), and HFD supplemented with 3% SM DNA (HFD?+?SM DNA) for 12 weeks. Increased body weight, fat-to-body weight ratio, and fat accumulation in HFD-fed mice demonstrated successful establishment of an obesity model. The HFD group showed increased alanine aminotransferase (ALT) levels, a marker of liver function, and NAFLD activity score (NAS) based on histological observations showed steatosis and mild inflammation but no fibrosis, indicating NAFLD but no nonalcoholic steatohepatitis. In the HFD?+?SM DNA group, the improved superoxide dismutase activity and NAFLD activity score suggested that SM DNA prevented liver dysfunction while maintaining antioxidant capacity and suppressing intrahepatocyte fat droplet formation. SM DNA attenuated fat accumulation in the liver and improved hepatic function. This study explored the potential of SM DNA as a functional food to prevent NAFLD and other visceral obesity-related diseases.

     

胆碱对高脂胁迫的团头鲂肝脏抗氧化、组织结构和免疫力的影响

以初始体质量(42.20±0.34)g团头鲂为研究对象,研究饲料中添加胆碱对高脂胁迫团头鲂肝脏抗氧化、组织结构和免疫力的影响。实验采用2×2因子设计方法,共配置2个脂肪水平(5%和15%)和2个胆碱水平(1200和2200 mg/kg)的等氮饲料4组。养殖实验在室内循环水系统中进行,养殖周期为8周。养殖实验结束后进行血液和肝脏生化指标、肝脏抗氧化指标和非特异性免疫指标等的检测分析,以及观察肝细胞的超微结构变化。结果显示,当饲料中添加1200 mg/kg胆碱时,随着脂肪水平的升高,团头鲂肝脏脂肪含量和甘油三酯浓度显著增加,而血浆中谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)活性则显著上升;肝脏中丙二醛(MDA)含量、总超氧化物歧化酶(t-SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性等显著升高;血液中白细胞数、溶菌酶活性、总蛋白和球蛋白水平以及还原型谷胱甘肽(GSH)活性显著降低;超微结构观察到肝细胞中存在大量脂滴,伴随着细胞核变性、核膜残缺、线粒体水肿等异常现象。这些结果表明高脂日粮不仅导致肝细胞的结构和功能的损伤,而且造成肝脏氧化应激和机体免疫力的下降。在高脂饲料(15%脂肪)中添加2200 mg/kg胆碱,可显著降低肝脏脂肪含量、血浆谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)活性,显著降低肝脏丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性,并显著提高白细胞数和球蛋白水平以及还原型谷胱甘肽(GSH)活性,同时肝细胞形态及细胞器结构也趋于正常。研究表明,添加适量胆碱能够减少肝脏脂肪沉积,维持肝脏结构和功能的正常,并增强团头鲂抗氧化能力和机体免疫力,继而保持鱼体的健康。     

添加动植物性油脂填饲对鸭肥肝性能的差异影响

在骡鸭与樱桃谷鸭的填肥料中添加4%玉米油或鸭油,研究添加动植物油脂填饲对鸭产肝性能的差异影响。结果表明:添加玉米油,与添加鸭油填饲相比,2个品种鸭获得较高的肝重与较低的料肝比,且骡鸭添加玉米油组的肥肝率显著高于鸭油组(高出30%);经填饲,骡鸭的肥肝重较樱桃谷鸭高,同时料肝比较低,但差异均不显著(P>0.05)。意味着肥肝生产中,填饲时添加玉米油较添加鸭油更利于提高产肝性能;并且对骡鸭更有效。对于其根本原因,需进一步从分子水平上研究鸭肝的生脂酶基因、与甘油三酯分泌及脂肪分解相关酶基因的表达差异。     

高糖饲料对吉富罗非鱼生长性能、饲料利用和糖脂代谢的影响

为探讨高糖饲料对吉富罗非鱼(GIFT Oreochromis niloticus)生长性能、饲料利用和糖脂代谢的影响,设置糖水平为34%的对照饲料(C组,能量水平13.68 k J·g-1)、糖水平为48%的高糖高能饲料(HCE组,能量水平16.03 k J·g-1)和高糖等能饲料(HE组,能量水平13.81 k J·g-1),在室内循环水系统中饲养初始体质量(20.34±0.42)g的吉富罗非鱼幼鱼60 d。结果表明,HCE组和HE组的增重率、特定生长率、肝脏粗蛋白均显著低于C组(P0.05),饲料系数、肝脏粗脂肪、肝糖原、总糖表观消化率、血清低密度脂蛋白胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇均显著高于C组(P0.05);HE组增重率、全鱼粗脂肪、血清甘油三酯和总胆固醇均显著低于HCE组(P0.05);高糖组肝脏葡萄糖激酶显著高于C组,HE组葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、苹果酸酶、脂肪酸合成酶活性最高,C组最低(P0.05);由肝脏组织切片看出,高糖饲料引起吉富罗非鱼肝脏细胞肿大变形,出现空泡,HCE组对肝脏损伤更加显著。研究结果表明,吉富罗非鱼能够耐受48%糖水平的饲料,但长期摄食导致鱼体糖脂代谢紊乱,尤其影响脂肪代谢,造成鱼体脂肪蓄积,肝功能损伤,不利于生长与健康。