甜菜茎端分生组织的培养

本文报导了二倍体甜菜离休茎尖的培养条件和植株再生作用。采用5种培养基,由甜菜的茎尖组织都获得了愈伤组织,从其中的三种培养基上再生了植株。实验结果表明,不同种类的生长素,不同的蔗糖浓度对愈伤组织的诱导及绿苗分化率都有明显影响。对甜菜茎尖外植体,蒙乙酸(NAA)是适合的生长素。MS全成份的一半附加NAA可诱导出粗壮的根系。过筛消毒的砂土配合浇灌营养液可提高移栽苗的成活率。     

白芦笋花药培养再生植株染色体倍性检测研究

采用茎尖压片染色体计数法对两个品种的白芦笋花药培养的再生植株进行了染色体的倍性检测。试验结果显示了芦笋花药培养再生植株中染色体构成的多样性,还观察到再生植株中极个别细胞出现染色体缺失现象。‘Thielim’品种中再生植株的染色体变异率为11．1％,单倍体占1-8％,双倍体占88．9％,三倍体占4．2％,四倍体占5．1％。‘硕丰’品种中再生植株的染色体变异率为9．1％,双倍体占90．9％,三倍体占5,9％,四倍体占3,2％,没有发现单倍体。     

大麦(Hordeum vulgare L.)花药培养再生植株染色体的遗传分析和酯酶同工酶的研究

通过观察82株大麦花药培养再生植株根尖细胞有丝分裂和56株花粉母细胞（PMC）减数分裂过程中染色体的结构和分离情况。结果表明，单倍体和二倍体植株各为17．1％和35．4％，混倍体植株47．5％，在混倍体植株中，有二倍体、三倍体、四倍体甚至六倍体细胞和一些非整倍体细胞，但仍以单倍体、二倍体和四倍体细胞为主。根尖细胞有丝分裂过程中有染色体结构的变异，如染色体断片，环状染色体等。二倍体PMC减数分裂过程中染色体分离有异常现象，如染色体“桥”，但绝大多数能正常完成。而单倍体和四倍体不能正常完成，单倍体染色体分离以2：5或3：4为主，并在中后期Ⅰ看到染色单体分离现象，四倍体细胞染色体有多种联会形式。酯酶同工酶（EST）聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）结果表明，利用Estl座位不同等位基因的分离规律可检出再生植株中的纯合体与非纯合体。不同的二倍体花粉植株在性状上出现明显的分离现象，观察到二类性状有显著差异的植株，Ⅰ类和Ⅱ类，Ⅰ类占6．6％，Ⅱ类占93．4。     

文摘

88010 单倍体高粱体细胞组织培养的植株再生——(L.A.Flkonin等),Tsitologiya I Genetica,1987,Vo1.21 No1,18～22(俄文) 在单倍体品种迈罗145(n=10)叶、茎和穗外植体的培养中获得了细胞系,由此可再生植株。迈罗145衍生自一个双胚体。多数再生株为二倍体。试验证明,在培养全过程中一些单倍体细胞同二倍体细胞一直存在着竞争性。经7次继代培养后,进行细胞学分析发现50株再生株有47株二倍体和3株单倍体。     

大麦（Hordeum vulgareL.）花药培养再生植株染色体的遗传分析和酯酶同工酶

通过观察８２株大麦花药培养再生植株根实细胞有丝分裂和５６株花粉母细胞（ＰＭＣ）减数分裂过程中染色体的结构和分离情况，结果表明，单倍体和二倍体植株各为１７．１％和３５．４％，混倍体植株４７．５％，在混倍体植株中，有二倍体，三倍体，四倍体甚至六倍体细胞和一些非整倍体细胞，但仍以单倍体，二倍体和四倍体细胞为主，根尖细胞有线分裂过程中有染色体结构的变异，如染色体断片，环状染色体等，二倍体ＰＭＣ减数分裂过程     

高粱单倍体组织培养的二倍化

高粱单倍体组织培养的二倍化Ｌ．Ａ．Ｅｌｋｏｎｉｎ等现已清楚，在从单倍体高梁幼叶所得到的细胞系以及在初始培养中所出现的二倍再生植株中，二倍体植株占优势（Ｅｌｋｏｎｉｎ等，１９８７）。本文报道原始外植体的个体发育阶段和培养基里２，４－Ｄ浓度对再生植株倍性...     

化学诱变结合离体选择选育胡椒抗瘟病无性系

在胡椒(PipernigrumLinn.)茎尖丛生芽增殖技术的基础上,以印尼大叶种“LampongType”无菌实生苗作外植体源,采用EMS(ethylmethanesulphonate)对胡椒茎尖进行化学诱变处理,并结合辣椒疫霉(Phytophthoracapsici)培养滤液对胡椒茎尖及其增殖形成的丛生芽进行离体选择。结果表明,利用EMS在胡椒茎尖接种前进行化学诱变可提高抗瘟病变异体的产生频率。利用EMS不同浓度和不同时间对胡椒实生苗茎尖处理后接种,不经离体选择,直接在再生植株上进行抗病检测,抗性植株频率在4.3%￣26.67%之间,而不施用化学诱变的处理则未获得抗性植株。利用不同浓度EMS和不同诱变处理时间结合不同浓度的辣椒疫霉培养滤液离体选择,各种组合所获得的抗性植株比率在33.33%￣100%范围,但各种组合均较EMS和辣椒疫霉培养滤液单独处理的要高,其中以1.0%EMS处理60min结合25%辣椒疫霉培养滤液处理的最好。     

甜菜花粉萌发孔检查及其制片方法

甜菜育种或栽培实践中,常常需要进行甜菜倍性鉴定。其检查方法多利用根尖、茎尖细胞的有丝分裂或花粉母细胞减数分裂中期的染色体数目加以确定。这种方法比较细致、准确,但操作比较麻烦,且不易找到合适的分裂相。根据大量研究表明:甜菜的倍数性与花粉大小、萌发孔数目多少等有密切的相关关系。如多倍体往往比二倍体甜菜的花粉粒大、萌发孔数目较多。因此,在生产实践中,科学工作者利用简单地镜检方法测定花粉粒大小和萌发孔数目来判断甜菜植株的倍性。但是,由于甜菜花粉粒的壁较厚,并且有丰富的内含物,萌发孔数目也较多,这样给准确计算萌发孔数目带来困难。我们在观察过程中,应用了Ertman乙酰解方法处理花药后,检查花粉萌发孔得到较满意的效果。     

大麦小孢子再生植株气孔保卫细胞长度与倍性的相关性

为了建立一种快速鉴定大麦小孢子来源植株倍性的方法,对大麦品种"花30"不同倍性(种子来源二倍体,小孢子来源单倍体和单倍体加倍系)早期植株的不同叶位、不同叶片部位的气孔保卫细胞长度进行了测定,考察了不同取材部位气孔保卫细胞长度的差异,对种子来源二倍体、小孢子来源单倍体和单倍体加倍材料的气孔保卫细胞长度的分布进行了区分。结果表明,"花30"单倍体材料的气孔保卫细胞长度在不同叶位以及不同叶片部位差异较小,而单倍体加倍材料和种子来源二倍体材料受叶片部位影响较大,单倍体和二倍体材料间气孔保卫细胞的长度差异显著,而单倍体加倍材料和种子来源二倍体材料间气孔保卫细胞长度未观察到明显差异。单倍体和单倍体加倍材料气孔保卫细胞的长度值范围分别为26.9~37.7μm和36.7~62.1μm;利用37μm临界值可对大麦小孢子来源的DH群体中的单倍体进行快速区分。     

利用药剂诱导玉米孤雌生殖Pa1代植株的倍性变异

为研究药物诱导玉米孤雌生殖植株的倍性变异，用2%DMSO 40mg/kgMH诱导掖单13号等材料获得结实。实验结果表明，孤雌生殖根尖体细胞以二倍体细胞最多，其次为非整倍体细胞，其它异倍体和单倍体细胞极少。Pa1植株可分为二倍体和混倍体两类，以二倍体占绝对多数的混倍体植株最多。讨论了体细胞染色体变异的来源问题。     

二硝基苯胺类除草剂对单头切花菊‘白扇’的倍性诱导效果

以日本单头切花菊‘白扇’无菌苗的带腋芽茎段为材料,选用2种二硝基苯胺类除草剂（二甲戊灵和氟乐灵）溶液在不同浓度和浸泡时间下进行诱导处理,并接种到生根培养基中诱导完整植株。通过早期突变形态、根尖细胞染色体计数、叶片气孔特征、农艺性状和开花的形态观察统计和对比,总结出除草剂对切花菊‘白扇’无菌茎段的诱导效果。结果表明：200 μmol/L二甲戊灵和200 μmol/L氟乐灵分别浸泡36 h和24 h时诱导效果最佳,诱导率达25.00%和40.00%。经诱导的变异植株普遍染色体数增多,农艺性状变化明显。变异植株的叶片气孔和保卫细胞增大,气孔密度减小,株高和节间长度明显缩短,茎粗、叶长、叶宽显著增大,舌状花瓣形态出现多种明显变化且数量增多。     

亚麻单倍体抗逆基因的转化

为提高亚麻抗逆性,尽快获得转基因纯系亚麻,本研究采用农杆菌介导的转基因技术,将抗盐和低温胁迫基因HY15CS导入单倍体亚麻,结果获得抗性再生植株24株,从15株生长健壮的再生植株中PCR检测到3株阳性植株,阳性率20%;同时进行了不同方法的单倍体检测技术的研究,确定DAPI染色可以做为快速鉴定植物体倍性常用方法。     

亚麻单倍体抗逆基因的转化

为提高亚麻抗逆性，尽快获得转基因纯系亚麻，本研究采用农杆菌介导的转基因技术，将抗盐和低温胁迫基因HY15CS导入单倍体亚麻，结果获得抗性再生植株24株，从15株生长健壮的再生植株中PCR检测到3株阳性植株，阳性率20％；同时进行了不同方法的单倍体检测技术的研究，确定DAPI染色可以做为快速鉴定植物体倍性常用方法。     

愈伤组织再生马铃薯脱毒苗生产体系的建立

以马铃薯茎尖、茎段、全叶、半叶为外植体,进行愈伤组织的诱导、继代、根芽分化和植株再生的研究,建立马铃薯脱毒再生体系。结果表明:(1)马铃薯茎尖、茎段、半叶、全叶在MS+6-BA1.5 mg·L-1+NAA1 mg·L-1+3%蔗糖+0.6%琼脂培养基中,愈伤组织诱导率分别达到97.3%、75.6%、96.8%、97.4%;(2)在MS+6-BA1.5mg·L-(1或ZT2.0 mg·L-1)+NAA0.5 mg·L-1+GA3 5 mg·L-1+3%蔗糖+0.6%琼脂培养基中不同外植体芽诱导率在15.4%～67.7%,根的分化率21.3%～88.2%。     

木薯根尖染色体制片方法的优化

以华南6号木薯根尖为材料,采用酶解去壁低渗法和压片法,制备木薯染色体标本,并对其制片过程中的预处理药品、预处理时间、酶解时间等因子进行优化。结果表明：酶解去壁低渗法能获得较好的染色体标本,α-溴代萘与对二氯苯饱和液的混合液和0．1％的秋水仙素与0.002 mol/L 8-羟基喹啉混合液的预处理效果最好,预处理时间以2 h为宜,酶解时间4 h效果最好。     

大豆不同器官中的RNA的提取分析

从植物组织中提取高质量的RNA是进行基因克隆和基因表达分析的基础.同种植物不同器官的组织由于组成成分的差别,其RNA的提取有不同的难点.本文分别采用异硫氰酸胍法、改进的异硫氰酸胍法提取了大豆的根、茎、叶、胚芽等不同器官的RNA,结果发现异硫氰酸胍法适合根和茎的RNA提取,改进的异硫氰酸胍法不仅适合根与茎的RNA提取,还适于胚芽RNA的提取.而两种方法对从叶中提取RNA则均不是很理想.     

空心莲子草浸提液对苏丹草根缘细胞的化感作用

采用悬空气培养法研究了入侵植物空心莲子草(Alternanthera phiLoxeroides Griseb)不同器官水浸提液对苏丹草根尖生长、根缘细胞活性和根冠果胶甲基酯酶(PME)的化感效应。结果表明:空心莲子草水溶性化感物质对苏丹草根尖的发育有明显的抑制及伤害作用,且随着处理浓度增加抑制作用显著增强;苏丹草根缘细胞存活率随着水浸提液浓度的升高而下降;苏丹草根冠果胶甲基酯酶(PME)活性与水浸提液处理浓度具有密切相关性,呈先上升后下降趋势(茎例外),经茎的水浸提液处理的苏丹草根冠PME活性则表现出与空心莲子草根、根状茎和叶相反的趋势;空心莲子草不同器官化感作用差异显著,其综合化感效应表现为:叶>根和根状茎>茎。化感作用是空心莲子草实现干扰性竞争的基础,也是排挤和绞杀土著物种迅速占领生态位的主要原因之一。     

提高水稻愈伤组织植株再生能力几种方法的评价

选用提高水稻愈伤组织植株再生能力的几种方法,对3个光温敏核不育水稻品系的愈伤组织进行培养比较.结果表明:愈伤组织在继代培养过程中再生能力的衰退难以避免,但不同品种间的衰退速度存在差异;选用的几种方法中,除了添加亚精氨的处理没有效果外,其它处理均能提高水稻愈伤组织的再生能力,而两步分化培养法的效果远远优于其它方法,可优先考虑应用于诱导经过长期继代创造体细胞无性系变异的愈伤组织的植株再生.