科学出版社图书介绍

DNA小分子检测技术及其应用本书分七章介绍了荧光定量PCR技术、环介导等温扩增技术、焦磷酸测序技术、变性高效液相色谱技术、变性梯度凝胶电泳技术、肽核酸探针技术、基因芯片技术等DNA小分子检测技术及其应用。概述了每一项DNA小分子检测技术的产生及其发展,重点阐述了它们的原理、操作流程、应用进展及其发展前景,涵盖了相关领域的最新研究成果     

分子指纹图谱技术及其在茶树品种资源中的应用

随着各种新型DNA分子标记的出现,带动了DNA指纹图谱技术的快速发展。本文简要阐述了几种常见DNA指纹鉴定技术,如限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism,简称RFLP)、随机扩增多态性DNA(random amplified polymorphic DNA,简称RAPD)、扩增片段长度多态性(amplified fragmentlength polymorphism,简称AFLP)、简单重复序列或微卫星标记(simple sequence repeat,简称SSR)、内部简单重复序列(inter-simple sequence repeat,简称ISSR)和单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,简称SNPs)等的基本原理、在技术上的优缺点及其在茶树品种资源中的应用,包括品种的鉴定、纯度的检测、品种亲缘关系与分类的研究及品种专利权的正当维护等。同时,对DNA指纹图谱技术在应用中的存在问题及相应的解决途径进行了简单的讨论,如目前DNA的提取方法与育种应用的大规模群体不相适应和大多数DNA指纹图谱检测技术仍比较繁琐,限制了该技术在育种中的大规模应用等。     

外源DNA直接导入(DIED)法的大豆分子育种成效

本文以高产优质高蛋白大平黑生101品种的育成为例，介绍了我国创立的花粉管通道转移总DNA的技术，并就该技术与现有体外重组DNA技术进行对比，拟提出我国目前转基因技术路线和产业化发展策略。     

棉花抗源DNA导入育种初探

生物技术的发展,给作物分子育种开拓了新途径。以离体组织为受体的DNA转移技术,如Ti质粒载体法、电激法、显微注射法等,在双、单子叶植物中均获得了转化植株;以整体植株细胞为受体的DNA转移技术,如微量注射法和花粉载体法,在黑麦、玉米、烟草、棉花等作物上也获得了变异的新个体。为探索棉花抗源DNA导入在棉花抗性育种中的可能性,于1981年,我们同上海生化所协作,进行了棉花枯萎病抗源总体DNA的导入试验。     

DNA分子标记检测方法及在茶树中的研究进展

DNA分子标记检测方法是分子标记研究中的一项重要技术,直接关系到分子标记研究的效率、准确性和成本等.本文概述了现有DNA分子标记检测方法的种类及技术原理、特点和应用情况,综述了DNA分子标记检测方法在茶树中的应用并探讨了其发展前景,为茶树DNA分子标记检测方法的研究提供参考.     

外源总DNA直接导入大豆的分子验证研究简报

黑龙江省农科院生物技术研究中心和中国科学院遗传所合作,利用RAPD(Random Amplitied Polymorphic DNA)技术对通过花粉管通道技术实现外源总DNA导入所获转化后代,进行了分子验证。第一次从DNA分子水平上找到了证据。     

CTAB法提取红麻总DNA技术优化与ISSR和SRAP扩增效果

红麻基因组总DNA的提取纯度,关系到新型分子标记ISSR、SRAP的PCR扩增效果。经反复实验,对CTAB法提取红麻总DNA技术进行了改进,即采集足量的红麻嫩叶、提取时加入β-巯基乙醇、提取过程中使用2.5%CTAB、最后用预冷的无水乙醇沉淀DNA。OD260/OD280比值检测结果为平均1.824,而且DNA得率也较高,证明用此法提取的DNA能完全满足ISSR和SRAP分析的要求和获得较理想的效果,本文还讨论了高质量DNA提取应注意的有关技术环节。     

玉米DNA的小量快速提取

以玉米的幼叶为实验材料,用小量快速法提取玉米总DNA.提取的DNA经0.8%琼脂糖凝胶电泳检测,结果发现DNA质量较好,所得的DNA可用于RAPD和DNA酶切等技术.此法具有提取速度快、DNA质量好和经济实用等优点,为玉米及其他植物DNA的提取提供了一个快速、简便的途径。     

外源DNA浓度对玉米开苞导入后代性状变异的影响

外源DNA浓度是影响玉米开苞导入技术转化效率的主要因素之一。采用玉米开苞导入技术将玉米自交系13A的总DNA以不同浓度分别导入受体玉米自交系沈109和系599中,得到了广泛的变异。结果表明,供体DNA的浓度对导入后代的结实率和转化率都有影响,供体DNA的浓度在500～800 μg/mL为宜。     

水稻DNA分子标记的特点与应用

DNA标记是一种新类型的遗传标记,在水稻育种研究和品种鉴定中发挥了越来越大的作用。本文简要介绍了DNA标记的一般特点和检测技术,以及常用水稻DNA标记的基本特点和主要应用价值。     

DNA分子多态性标记技术及应用

DNA分子多态性标记技术是DNA分子水平上的多态性检测技术,在生物多样性、遗传多样性、濒危物种的鉴定和保护等研究中得到广泛的应用。本文介绍了几种常用的DNA分子多态性标记技术,这些技术准确、可靠,但各有其优缺点,建议在进行DNA分子多态性标记的研究中,应该至少使用两种以上的方法进行比较研究,综合数据,得出结论。     

新一代测序技术的应用及其对作物分子育种的影响

作为分子生物学研究中最常用的技术之一,近年来DNA测序技术的快速发展,催生了一批基因组学和后基因组学研究手段。本文概述了以Roche/454Genome Sequencer FLX System、Illumina/Solexa Ge-nome Analyer IIx和ABI SOLID System等测序平台为标志的新一代测序技术的基本原理以及优缺点,并分析了目前的主要应用情况,展望了新技术的发展对作物分子育种产生的影响。     

适用于SSR分子标记的玉米单粒种子DNA快速提取新方法

研究了玉米单粒种子DNA的提取新方法,利用该方法提取DNA,液氮、研磨、离心、沉淀、SDS、CTAB及氯仿都不用,一个工作人员提取100粒种子(1个检测样品)DNA只需30min左右,一天可以提取1600粒种子(16个检测样品)的DNA,并且提取的DNA分子量大,不降解,完全可以满足利用SSR分子标记进行DNA指纹分析的需要,为DNA指纹技术在玉米种子纯度及真伪快速鉴定中的广泛应用解决了关键性技术难题。     

CTAB法提取红麻总DNA技术优化与ISSR和SRAP扩增效果

红麻基因组总DNA的提取纯度，关系到新型分子标记ISSR、SRAP的PCR扩增效果。经反复实验，对CTAB法提取红麻总DNA技术进行了改进，即采集足量的红麻嫩叶、提取时加入β-巯基乙醇、提取过程中使用2．5％CTAB、最后用预冷的无水乙醇沉淀DNA。OD260，OD2踯比值检测结果为平均1．824，而且DNA得率也较高，证明用此法提取的DNA能完全满足ISSR和SRAP分析的要求和获得较理想的效果．本文还讨论了高庸量DNA提取应注意的有关技术环节．     

SSR技术分析玉米群体遗传变异的最优取样方法

针对单株DNA、多株叶片混合DNA和单株DNA混合的DNA取样方法,利用SSR技术对蒙A群和C群1进行遗传变异分析,探讨建立玉米群体遗传多样性分析的技术体系.采用均匀分布在玉米10条染色体上的34对SSR引物对不同处理的DNA样本进行扩增,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,对60个单株进行多态性信息量与遗传相似系数分析,比较不同处理的DNA样本扩增的等位基因数目.结果表明,2个供试群体均具有较丰富的遗传变异,建立的技术体系可用于群体的遗传多样性研究,采用12株叶片混合、5次重复提取的DNA样本可以代替相同数目的单株DNA混合的DNA样本,为最优取样方法.     

微卫星DNA分子标记技术及其在茶树研究中的应用

本文阐述了微卫星DNA的结构及其多态性分析原理和微卫星标记DNA技术的实践方法,并简要介绍了近年来微卫星DNA分子标记技术在茶树遗传多样性、亲缘关系、种质鉴定、遗传图谱构建、目的基因的定位等方面的应用.     

AFLP技术在大麻遗传研究中的应用

扩增片段长度多态性(Amplified Fragment Length Polymorphism,AFLP)技术是建立在RFLP标记和PCR技术的基础上,利用限制性内切酶片段的不同长度检测DNA多态性的一种DNA指纹分析技术.本文对AFLP技术在大麻遗传研究中的应用做了较为全面,系统的阐述.     

PCR技术在茶树害虫研究中的应用展望

聚合酶链式反应（PCR）是一种根据生物体内DNA复制的特点而设计的在体外对特定DNA序列进行快速扩增的新技术。随着重复多轮DNA合成技术的进步与具热稳定性的TaqDNA聚合酶的发现和应用，PCR技术不断完善，尤其是自动化PCR仪的设计成功，使PCR技术的操作程序大大简化，目前在分子生物学及其相关学科中已得到广泛应用，尤其在昆虫学研究中发展相当迅速。PCR技术可以应用到茶树害虫研究的许多方面，不久的将来，PCR技术也将成为我国茶树害虫研究的常用方法之一。     

亚麻外源DNA导入的技术与实践

为了尽快选育亚麻新品种,我所从20世纪90年代对亚麻外源DNA导入技术研究,从DNA提取、子房内部结构、外源DNA导入时间、方法、后代的变异、品种选育的应用等进行了一系列的研究,并取得了一定的成就,选育出等黑亚14、16、17等3个亚麻品种及一批优良品系。利用该技术进行亚麻育种,可缩短育种年限,加速育种进程。     

大麻研究中的分子标记应用

本文综述了以PCR技术为基础的RAPD、AFLP、ISSR、STR、IGS等DNA分子标记技术在大麻遗传变异、品种鉴定与来源推断等方面的应用进展,并提出了一些值得注意的问题以及今后可能的发展方向。