蝴蝶兰新品种‘8411’花梗离体培养技术研究

以蝴蝶兰新品种‘8411’花梗为外植体,研究了各种因素对其离体培养各阶段的影响。结果表明：蝴蝶兰花梗芽的无菌消毒以0.1% HgCl2处理15 min较好,污染率和萌芽率分别为24.0%和72.0%;蝴蝶兰不定芽最适继代增殖培养基为1/2MS＋6-BA5.0mg/L＋AD5mg/L＋NAA0.1mg/L＋CH1.0g/L＋糖30g/L,增殖系数达2.43;香蕉泥、土豆泥、椰汁的添加均有利于蝴蝶兰的壮苗生根,叶片大小及平均根数与对照组相比均有显著增加,叶片大小均达2.58 cm以上,平均根数均达2.65条以上,生根率均达100%。     

澳洲鸽子石斛兰花梗芽组织培养技术研究

以澳洲鸽子石斛兰（Dendrobium kingianum Bidwill）的花梗为外植体,研究花梗芽的诱导、增殖和生根情况。结果表明：在1号诱导培养基[MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+10%椰子汁（CM）]和2号诱导培养基（MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+AC 1.0 g/L+10% CM）中均能诱导出芽,尽管在诱导过程中70.6%带节间的花梗茎段因不能诱导出侧芽或侧芽弱小而死亡,但为种苗生产和种质资源的保护提供了一种有效途径。在增殖培养过程中,2号增殖培养基（MS+6-BA 3.0 mg/L+AD 3.0 mg/L+10% CM）有利于增殖培养;在生根壮苗过程中,生根培养基（1/2 MS+NAA 0.3~0.5 mg/L+10% CM）适宜澳洲鸽子石斛兰‘金斯卡’的生根培养。     

黑毛石斛×鼓槌石斛杂交种组培快繁技术研究

本研究以黑毛石斛×鼓槌石斛杂交种蒴果为外植体,通过对种子无菌萌发和原球茎诱导、原球茎增殖及丛生芽诱导、生根壮苗以及移栽驯化研究,建立杂交石斛兰的组培快繁技术体系。结果表明,最适合种子无菌萌发和原球茎诱导的培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L+琼脂6.8 g/L+蔗糖20 g/L+马铃薯50 g/L;原球茎增殖及丛生芽诱导的最佳培养基为1/2 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+KT 1.0 mg/L+蔗糖25 g/L+琼脂6.8 g/L+碳粉1.0 g/L+马铃薯50 g/L+香蕉50 g/L,继代培养50 d,增殖系数达6.19;最佳生根壮苗培养基为1/2 MS+6-BA 0.2 mg/L+NAA 0.5 mg/L+花宝1号0.5 g/L+蔗糖25 g/L+琼脂6.8 g/L+碳粉1.0 g/L+马铃薯50 g/L+香蕉50 g/L,培养2个月后,平均株高达7.14 cm,平均根数6.17条,平均根长6.46 cm,生根率达100%。体积比为单一松树皮和松树皮∶兰石=1∶1适于移栽,移栽65 d成活率分别达到96.32%和96.71%。     

姜荷花‘红色印象’工厂化组培育苗技术研究

以姜荷花‘红色印象’植株的多个部位作为外植体,进行丛生芽诱导、增殖扩繁、生根壮苗以及出瓶移栽育苗的研究,完善姜荷花工厂化组培快繁流程,为其规模化生产提供参考。以姜荷花球茎、储藏根、球茎小芽、侧芽、幼嫩花芽、幼嫩叶片6个部位为材料,通过添加不同浓度6-BA和NAA的MS培养基,对丛生芽诱导培养、丛生芽增殖培养、生根壮苗以及移栽育苗等步骤进行优化。姜荷花‘红色印象’最佳外植体为球茎小芽和侧芽,诱导培养基为MS+6-BA (3 mg/L或5 mg/L)+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+卡拉胶7 g/L,最佳丛生芽增殖培养基为MS+6-BA3 mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+卡拉胶7g/L,生根壮苗培养基选用1/2MS+NAA0.1mg/L+蔗糖20g/L+卡拉胶7 g/L,经过炼苗后出瓶移栽,组培苗种植基质选用细泥炭和细椰糠1∶1混合基质最佳,出瓶移栽成活率达95%以上,表型稳定。利用EST-SSR标记对母株和随机选择的组培苗进行扩增分析,证实DNA水平上无明显变异。通过对姜荷花‘红色印象’外植体和培养基的筛选,实现姜荷花组培快繁流程优化,建立高效完整的姜荷花工厂...     

2个葡萄品系外植体愈伤组织诱导和植株再生

进行了无核白、红地球2个葡萄品系外植体愈伤组织诱导和植株再生的研究。通过葡萄品系无核白、红地球叶片和叶柄外植体的愈伤组织的诱导、再分化,以器官发生途径实现植株再生。结果表明:(1)愈伤组织诱导以MS+BA5mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖40g/L培养基最佳,诱导率为35%;同一葡萄品种的叶片与叶柄诱导愈伤组织的频率基本相同,而红地球外植体诱导愈伤组织的频率高于无核白;(2)不定芽的诱导再生以1/2MS+BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L+CH500mg/L+蔗糖30g/L培养基最佳,平均诱导率达35.4%;叶柄来源的愈伤组织诱导不定芽的频率高于叶片愈伤组织;(3)根系的诱导以1/2MS+KT0.5mg/L+IBA1.0mg/L+AC2g/L+蔗糖15g/L培养基最佳,无核白和红地球来源的不定芽诱导生根频率基本相同,都在80%以上。     

高品质甜叶菊品系“1096”的组培快繁

采用改良DNS等方法筛选出的生长快、糖苷含量高的甜叶菊品系1096为材料,研究了不同外植体、不同激素种类和配比对愈伤组织诱导、不定芽分化和生根的影响。结果表明:以茎尖为外植体愈伤组织和不定芽诱导率均最高;其次是带腋芽茎段;再次为叶片。无腋芽茎段和无菌根均能诱导出愈伤组织,但不能诱导成芽。茎尖不定芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA 1.0mg/L;叶片不定芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+IAA 1.0mg/L;带腋芽茎段不定芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA 1.5mg/L。不定芽继代增殖培养采用MS+6-BA 0.5mg/L+NAA0.05mg/L;在1/4MS+IBA 0.1mg/L+NAA 0.1mg/L+1g/L活性炭的培养基上诱导生根,生根率可达100%,生根苗移栽后成活率达95%。     

贵港报春苣苔的叶片组培与植株再生

以贵港报春苣苔的叶片为外植体,研究不同培养基对其不定芽诱导和增殖、愈伤组织诱导与分化以及生根的影响。结果表明,外植体叶片以纵切为宜,不定芽诱导最适培养基为MS+6-BA 4.0 mg/L+IAA 1.5 mg/L,愈伤组织诱导最适培养基为MS+6-BA3.0～5.0 mg/L+2,4-D0.5～1.0 mg/L,不定芽诱导率以及愈伤组织诱导率均为100.00%;愈伤在MS+KT 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+potato 30 g/L+banana 30 g/L+apple 20 g/L+coconut juice 100 mL/L培养基上分化系数达12.64;不定芽在MS+ZT 1.0 mg/L+NAA 0.10 mg/L+potato 30 g/L+banana 30 g/L+apple 20 g/L+coconut juice 100 mL/L培养基的增殖系数为8.55;不定芽在3/4 MS+NAA 0.01～0.05 mg/L+活性炭1.0～3.0 g/L培养基上的生根率为100.00%。综上所述,叶片纵切后能通过不定芽途径以及愈伤组织途径建立贵港报春苣苔的组织培养技术体系,在该体系下不定芽增殖系数高、愈伤分化高,组培苗生根好。     

滁州白头翁组织培养及再生体系的建立

为建立白头翁再生体系,以白头翁主根的切段和试管苗叶片为外植体,比较2种外植体离体培养差异,探讨不同植物生长调节剂对不定芽和愈伤组织诱导、愈伤增殖和再分化及芽苗生根的影响。结果表明:叶片可以通过愈伤组织再分化和直接产生不定芽2种途径建立再生体系,而根只诱导出了愈伤组织,增殖培养中逐渐褐化死亡;在含6-BA培养基上,叶块死亡,而根只诱导出少量愈伤组织;叶片诱导不定芽的培养基为MS+TDZ 0.3 mg/L+NAA 0.1 mg/L;愈伤组织增殖的培养基为MS+TDZ 0.2 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L;再分化时,需要转接到TDZ和NAA组合的培养基上,其中处理组合TDZ 0.3 mg/L+NAA0.1 mg/L的再分化率达100%;生根培养基为1/2MS+NAA 0.2 mg/L+IBA 0.2 mg/L+蔗糖20 g/L。不同外植体离体培养存在差异,叶片较根易培养;TDZ对白头翁叶片培养效果较好,2,4-D对愈伤组织的诱导能力较强,而NAA适合于不定芽分化,NAA与IBA组合使用生根效果较好。     

红花高效再生体系的建立

目的筛选红花不定芽高效诱导条件,结合红花茎尖微嫁接技术,解决转基因红花再生效率低的问题。方法以新疆塔城裕民无刺红花的子叶作为外植体,子叶--愈伤组织--不定芽分化--伸长--生根/嫁接,分别对红花不定芽高效诱导培养基、伸长培养基和生根培养基进行筛选。结果确定了不定芽分化培养基:MS+1.0mg/L TDZ+0.5mg/L NAA,不定芽伸长培养基:MS+1%蔗糖,生根培养基:White+3mg/L IBA+Ag NO3 10mg/L+2%蔗糖+0.2g/L活性炭,生根率为12.5%;以14d红花实生苗做砧木,劈接法嫁接再生植株的成活率为53.3%。结论本研究采用不定芽高效诱导与茎尖微嫁接技术相结合的方法,成功的获得了再生植株。     

莫氏兰的组织培养与快速繁殖

以腋芽为外植体,建立莫氏兰的组织培养和再生体系。结果表明：腋芽采用0.1%升汞消毒2次的效果最好;6-BA 4.0 mg/L＋NAA 0.4 mg/L的激素配比适合原球茎诱导;原球茎增殖培养基的最佳6-BA、NAA浓度分别是1.0、0.1 mg/L;不定芽诱导培养基的最适6-BA、NAA浓度分别是0.5、0.05 mg/L;在生根培养基VW(含NAA 0.5 mg/L,香蕉40 g/L,土豆30 g/L,糖20 g/L,卡拉胶8.0 g/L,活性炭1.5 g/L)上幼苗生根率达到100%;移栽成活率达95%。     

“蜜宝”火龙果的组织培养技术

对“蜜宝”火龙果组织培养的外植体选择,不同培养基对腋芽诱导、丛生芽增殖及生根培养的影响等进行了研究。结果表明：近老熟茎段为最佳外植体,最适腋芽诱导培养基为MS+6-BA3.0 mg/L+NAA0.1 mg/L+琼脂6.4 g+蔗糖30 g,最适增殖培养基为MS+6-BA1.5 mg/L+NAA0.1 mg/L,最适生根培养基为1/2 MS+IBA0.5 mg/L+活性炭1 g/L+琼脂6.4 g+蔗糖30 g。     

对萼猕猴桃无菌离体再生体系研究

[目的]建立对萼猕猴桃的无菌离体再生体系研究。[方法]以单腋芽茎段、叶柄和叶片作为外植体,探讨其在不同激素组合的MS培养基上的诱导效果及生根培养效果。[结果]单腋芽茎段在MS+1.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA+0.7﹪琼脂+3﹪蔗糖的培养基上的诱导效果最佳,叶柄和叶片易诱导出愈伤组织,进一步诱导出不定芽的效果较差。生根培养以1/2MS+0.2 mg/L NAA+0.7﹪琼脂+3﹪蔗糖的效果最好。[结论]对萼猕猴桃的初代及生根培养相对容易,单腋芽茎段为最佳的外植体来源,成活率高,综合诱导率可达90.9%;生根培养中添加NAA的效果优于IBA。     

蝴蝶兰花梗的组织培养及快速繁殖

以蝴蝶兰的花梗为外植体，在1／2MS＋6－BA3mg/L NAA0.2mg/L的培养基上诱导花梗苗；以去茎法的茎段为增殖材料，增殖培养基为花宝1号2g/L,6-BA5-10mg/L,NAA0.2mg/L，腺嘌呤0mg/L,肌醇100mg/L，椰子汁10％（V／V），可取得较高的增殖率，增殖芽在生根培养基中，花宝1号3．5g/L,NAA2mg/L,IBA1mg/L，水解乳蛋白1g/L，香蕉泥105，活性炭1g/L，生根效果好。     

应用正交设计方法探讨蝴蝶兰丛生芽生根壮苗的条件

利用正交设计方法[L9(3)^4]研究了培养基中的无机营养，NAA，蔗糖和多效唑等四种因素对蝴蝶兰组培丛生芽生根壮苗的影响。试验得出：无机营养是影响蝴蝶兰丛生芽生根率的主要因素，蔗糖次之，NAA和多效唑影响程度较弱；无机营养也是影响根长的主要因素，多效唑次之，NAA和蔗糖影响较小；四种因素对叶片生长的影响差异不明显。本次试验的结果统计分析表明，蝴蝶兰丛生芽生根壮苗的较佳培养基为：花1宝号3.5g/L NAA1mg/L IBA1mg/L 蔗糖25g/L 香蕉泥100g/L 蛋白胨2g/L 活性炭1g/L。     

辣木离体组织培养技术研究

为建立辣木离体组织培养体系,以辣木嫩枝为外植体,对外植体的选取与消毒、不定芽的诱导及增殖、炼苗移栽等技术进行研究。研究结果表明,用75%酒精消毒1 min,再用0.1%HgCl_2消毒25 min,污染率和褐化率均能保持相对较低水平。以辣木带腋芽茎段为外植体,不定芽的最佳诱导和增殖培养基分别为MS+0.5mg/L6-BA+20g/L蔗糖和MS+0.5mg/L6-BA+0.2mg/LNAA+30g/L蔗糖,芽的诱导率和增殖系数分别可达73.3%和5.6。辣木生根培养基最佳配方为1/2MS+2mg/LNAA+0.2mg/L6-BA+20g/L蔗糖,生根瓶苗经炼苗10天后移栽至泥炭土:珍珠岩=1:1的基质中成活率可达80.6%。     

甜叶菊茎尖组培苗生根及移栽的研究

采用甜叶菊的幼嫩茎尖为外植体,MS为基本培养基。在添加6-BA1．0mg／L＋蔗糖30g／L＋琼脂6g／L的诱导培养基上．进行丛生芽的诱导培养。如果不感染病菌,诱导出芽率可达100％。继代增殖培养基采用MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．05mg／L＋蔗糖30g／L＋琼脂6g／L,继代培养30d后,丛生芽数可增殖14--15倍。在1／4MS＋IBA0．1mg／L＋NAA0．1mg／L＋蔗糖30g／L＋琼脂6g／L＋性炭1g／L的生根培养基上诱导生根,效果最好,生根率达100％．组培苗出瓶前先敞口炼苗2d．生根苗移栽后成活率可达95％以上。     

黑美人粗肋草的组织培养研究

以黑美人粗肋草带腋芽的茎段为外植体,研究不同灭菌方法、不同接种方法以及在培养基中添加不同浓度的植物生长调节剂对黑美人粗肋草离体快繁的影响.结果表明:(1)采用75％酒精擦拭外植体和0.1％ HgCl2灭菌处理20min较适合黑美人粗肋草的离体快繁;(2)采用芽眼朝上水平放置的接种方式较适合不定芽的诱导;(3)不定芽诱导最佳培养基为MS+2.0mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA,不定芽诱导率达94.10％;(4)通过继代增殖培养筛选出较适合的培养基为MS+4.0mg/L 6-BA+0.05mg/L NAA,增殖倍数为6.30倍,最适继代代数为5～6代;(5)幼苗转入1/2MS+0.2～0.3mg/L NAA的培养基中生根效果较好,生根率达到100％;(6)移栽至泥炭或者菜园土的基质中并保温保湿,成活率较高,分别达到92.30％和88.00％.     

刚果12号桉愈伤组织的诱导与再生植株快繁体系的构建

以刚果12号桉（Eucalyptus 12ABL）7 d苗龄的下胚轴为外植体,进行了组织培养试验,研究了具分化潜力的愈伤组织的获得、不定芽的分化、增殖培养、生根培养,建立了从愈伤组织到再生植株的快繁体系.结果表明：诱导愈伤组织阶段表现最优的配方是改良H培养基＋6-BA0.5mg/L＋NAA0.5mg/L＋蔗糖40g/L,红色紧密愈伤组织诱导率达65.7%;诱导不定芽表现最优的配方是改良H＋6-BA1mg/L＋NAA0.1 mg/L＋蔗糖40g/L,诱导率达54%;增殖培养中表现最优的配方是MS＋6-BA1mg/L＋NAA0.1mg/L＋蔗糖30g/L,增殖系数达3.4;生根效果表现最优的配方是1/2MS＋IBA0.5mg/L＋蔗糖30g/L,生根率达100%,平均每株萌发的根系数为3.6条.     

文心兰的组织培养和移栽管理技术

以文心兰的侧芽为外植体,对侧芽的选择、处理,外植体的消毒方法、培养基的选择等技术进行研究。结果表明：最适合的材料为叶片还未展开的侧芽,二次消毒对文心兰侧芽消毒效果最好。文心兰理想的诱导培养基为MS＋6－BA 5.0 mg/L＋NAA 0.5 mg/L＋椰子水100 mL/L,增殖培养基为MS＋6－BA 2.0 mg/L＋NAA 0.2mg/L+椰子水100 mL/L,壮苗培养基为MS＋香蕉20g/L,生根培养基为1/2MS＋NAA 1.0 mg/L+香蕉50 g＋土豆20 g/L＋AC2.0 g/L。同时     

珠芽魔芋组培快繁技术

为探索出一套适于珠芽魔芋的组培快繁技术体系,本研究以珠芽黄魔芋不同发育时期的叶片为外植体,开展组培快繁技术研究。结果表明：以开始伸出鳞片叶片作为外植体材料,75%酒精消毒30 s后,0.1% HgCl₂溶液中浸泡15 min为宜,其成活率达到96.7%;最优愈伤组织诱导培养基配方为MS+TDZ 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖30.0 g/L+琼脂6.0 g/L,其诱导率达到95.6%;最优不定芽诱导培养基配方为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖30.0 g/L+琼脂6.0 g/L,不定芽诱导率达到71.1%,单位接种质量愈伤组织分化芽数达到2.88;全展叶片苗在MS+NAA 0.25 mg/L+蔗糖15.0 g/L+琼脂 6.0 g/L培养基的生根率达到100.0%,平均根数达到1.36。以开始伸出鳞片叶片为外植体建立的珠芽黄魔芋组培快繁技术体系,达到了魔芋种苗的规模化生产技术水平,对解决珠芽魔芋产业发展中种芋供不应求的问题具有积极意义。