甜菜SSR-PCR反应体系的优化

为了建立适宜甜菜的SSR反应体系,笔者以甜菜不育系TB005A为试验材料,研究了甜菜SSR技术中PCR反应体系的主要成分对SSR扩增结果的影响。对SSR反应体系中的DNA模板浓度、引物浓度、Taq聚合酶浓度、dNTPs浓度以及退火温度进行了探索,确立了适合甜菜的SSR反应体系为;在20μL反应体系中,模板DNA为60ng,引物（50ng／μL）1．2μL,Taq DNA聚合酶1．0U,dNTPs（2、5mM／L）0．6μL。并利用该反应体系对30个甜菜不同品系进行SSR反应,用6％的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,不同品系间DNA谱带多态性丰富,证实该体系稳定可靠。     

小麦籽粒DNA提取方法的比较及SSR反应体系的优化研究

为了快速获得较高质量的DNA用于SSR分析,并建立一套稳定的SSR反应体系,以小麦单粒干种子为材料,比较了CTAB法和SDS法获得的DNA条带清晰度和RNA残留带的清晰度;同时,研究了模板DNA浓度、引物浓度、dNTPs浓度以及Taq酶用量对SSR结果的影响。结果表明,CTAB法微量提取小麦干种子DNA可获得理想的扩增结果;SSR的最佳反应体系是:模板DNA浓度为4.0~4.8ng·μL-1,Taq酶用量为1U,引物浓度为50~200nmol·L-1,dNTPs浓度为50~500μmol·L-1。     

大豆SSR检测体系的优化研究

以大豆为试材,研究了大豆SSR检测体系中PCR扩增的各主要成分对检测结果的影响,确立了适宜的退火温度和反应体积,改进了PCR扩增程序和银染方法,进一步优化了适用于大豆的SSR检测体系.优化后的SSR反应体系为:10×Buffer 1.00μL、2.00 ng/μL模板DNA、0.15μmol/L SSR引物、150.00μmol/L dNTPs、0.50 U Taq酶、2.00mmol/L Mg2 ,加ddH20至终体积10.00μL.优化的PCR扩增程序为:94℃预变性3 min;94℃变性25s,47℃退火25s,72℃延伸30s,共35个循环;72℃延伸5min,4℃保存.优化后的检测体系更为经济有效.     

中国玉米新品种DNA指纹库建立系列研究Ⅰ.玉米品种纯度及真伪鉴定中SSR技术标准实验体系的建立※

本研究从DNA提取、PCR扩增、电泳检测等环节对SSR技术进行了优化,最终建立一套完善的适用于玉米品种鉴定的SSR标准体系.并以玉米杂交种农大108的纯度鉴定为例,探索了该体系在玉米杂交种鉴定中实际应用的可行性。     

中国玉米新品种DNA指纹库建立系列研究 1．玉米品种纯度及真伪鉴定中SSR技术标准实验体系的建立

本研究从DNA提取、PCR扩增、电泳检测等环节对SSR技术进行了优化，最终建立一套完善的适用于玉米品种鉴定的SSR标准体系。并以玉米杂交种农大108的纯度鉴定为例，探索了该体系在玉米杂交种鉴定中实际应用的可行性。     

中国玉米新品种DNA指纹库建立系列研究Ⅰ.玉米品种纯度及真伪鉴定中SSR技术标准实验体系的建立

本研究从DNA提取、PCR扩增、电泳检测等环节对SSR技术进行了优化,最终建立一套完善的适用于玉米品种鉴定的SSR标准体系.并以玉米杂交种农大108的纯度鉴定为例,探索了该体系在玉米杂交种鉴定中实际应用的可行性.     

TP-M13-SSR技术及其在玉米遗传多样性研究中的应用

遗传多样性分析是种质资源研究的重要组成部分。由于研究群体通常都较大,简便可靠的高通量分析技术显得尤为重要。本文概述了在SSR扩增产物检测过程中的一种基于荧光测序技术的高通量低成本分析技术体系TP-M13-SSR(simple sequence repeat with tailed primer M13)的发展历程、反应原理和应用,并比较了它与普通银染、琼脂糖检测以及常规荧光检测体系在SSR扩增产物检测上的优劣,讨论了该技术在植物遗传多样性研究中的应用潜力。     

玉米SSR指纹技术反应体系的优化

SSR指纹技术是一种非常有效的遗传分析技术,在生物遗传多样性分析、遗传图谱构建、品种鉴定和品种保护等方面有着广泛的用途。SSR技术简单、重复性高、采用银染显色技术等优点,为SSR的广泛应用奠定了良好的基础和可行性。在SSR扩增过程中,影响因素很多,如Mg2 、dNTPs、Taqpolymeras、引物等。本实验通过对各种影响因素不同浓度梯度的比较,得出优化后的SSR扩增的反应体系为:20μL的反应体积中包括2.0mmol/LMg2 ,0.1mmol/LdNTPs,0.25μmol/L引物,0.5UTaqDNA聚合酶,10×PCRbuffer2.0μL和40ng模板DNA。扩增条件为94℃预变性5min,94℃1min,60℃2min,72℃2min,35个循环,最后72℃5min。     

马铃薯SSR-PCR体系的优化与建立

以马铃薯叶片DNA为模板,采用单因素试验的方法,对影响马铃薯SSR-PCR反应体系的主要成分模板DNA、dNTP浓度、引物浓度、Mg2+浓度、Taq酶浓度及退火温度进行了优化,并建立最优化的马铃薯SSR扩增反应体系。结果表明:在20μL反应体系中,模板DNA用量为60 ng,dNTP为0.3125 mmol/L,引物浓度为2.4pmol,Mg2+为1.5 mmol/L,Taq酶为0.5 U,筛选各引物最适宜的退火温度,经2.0%琼脂糖凝胶电泳检测,扩增条带清晰,优化后的SSR反应体系稳定性好,可用于马铃薯遗传多样性分析。     

国家玉米主产区预试品种的SSR分析 Ⅰ. 预试品种的真实性和一致性评价

建立简单、快速、准确的品种真实性检测技术体系对于农作物品种管理有重要意义。本文应用SSR技术构建了2004～2005年国家玉米主产区预试参试品种的DNA指纹图谱,并根据SSR指纹图谱分析了参试品种的真实性和一致性。两年参试品种的分子标记差异均在3对引物以上,大多数品种的标记差异在10～12对引物之间,没有发现近似品种。选用19对SSR引物对2005年参试品种的一致性进行了分析,一致性好和比较好的分别占16%和69%,一致性差的和比较差的各占1%。本研究表明,SSR分子标记具备环境的稳定性、品种间变异的可识别性,最小的品种内变异和实验结果的可靠性,同时具有快速、准确、多态性丰富、可操作性强的特点,在玉米品种真实性和一致性的鉴定中具有良好的应用前景     

色素万寿菊试管苗玻璃化控制的研究

以色素万寿菊带腋芽的茎段为外植体,研究离体快繁中蔗糖、AgNO₃、琼脂、植物凝胶、活性炭及不同封口材料对芽增殖及玻璃苗产生的影响。结果显示：30 g/L蔗糖适合万寿菊幼苗的生长,玻璃化率随蔗糖浓度（10~60 g/L）的增加而减少,60 g/L的蔗糖玻璃化率仅9.13%;AgNO₃有抑制玻璃苗发生作用,5.0 g/L AgNO₃可使玻璃化率低至9.81%;活性炭的用量对玻璃化影响最为明显,5.0 g/L活性炭可使玻璃化率高达38.18%;琼脂和植物凝胶对芽的增殖及玻璃化发生表现相同的趋势,低浓度时有利于芽的增殖,高浓度可有效防止玻璃化发生,10 g/L的琼脂玻璃化率低至8.31%;2.0 g/L的植物凝胶芽增殖系数高达3.35,5.0 g/L植物凝胶玻璃化率低至6.67%;棉花塞+双层牛皮纸+棉线封口时,芽增殖系数高达3.24,玻璃化率低至8.46%。     

秋水仙素处理对黑麦根尖细胞有丝分裂的影响

为了解秋水仙素对黑麦根尖细胞有丝分裂的影响，以黑麦根尖为材料，在不同浓度秋水仙素（0．01％、0．05％、0．10％、0．15％、0．20％）和不同处理时间（12、24、36、48、60、72h）条件下测定了根尖细胞中期分裂指数和细胞加倍指数。结果表明，随着秋水仙素浓度的升高，细胞加倍指数增加，当秋水仙素浓度为0．15％时细胞加倍指数达到最大值（0．0362％），以后迅速下降。随着处理时间的延长，中期分裂指数逐渐下降，而细胞加倍指数在处理36h时达到最大值（0．0208％）。在浓度与时间的互作方面，0．15％的秋水仙素处理24h，细胞的中期分裂指数最高，达到0．202％；而0．15％的秋水仙素处理36h，细胞加倍指数最高，达到0．096％。     

大豆新品种绥农42的选育与推广

绥农42是黑龙江省农业科学院绥化分院以合03-1099为母本,以绥02-339为父本有性杂交选育而成,2016年通过黑龙江省审定,该品种高产、抗病、适应性广,适于黑龙江省第二积温带及吉林、内蒙、新疆等相应区域种植。     

低丘红壤茶园土的持水特性及水分循环特征

对浙赣地区第四纪红壤茶园土壤调查研究结果表明,该地区茶园土壤质地较粘,持水量与粘粒(<0.01毫米)含量和毛管孔隙(<0.05毫米)的数量呈密切线性相关,田间持水量可达32%以上,然而有效水含量仅为11%左右,且其50%以上的释放量在0.1—0.3MPa的低吸力段内,对茶树供水力差。高产茶园持水量虽然低于低产茶园,但其土壤性状都明显优于低产茶园,且土层深,贮水量大,因而较耐早。该地区的土壤水动态特征与其水文气候特点基本一致,大致可分为贮水高峰期(3—6月)、蒸散消耗期(7—10月)和补充恢复期(11—2月     

优质高产糯稻新品种圣香糯1号的选育及栽培技术

圣香糯1号是以镇稻88为母本、广陵香糯为父本,并用镇稻88回交,经系谱法选育而成的粳糯新品种。该品种具有品质优、产量高等优点,2019年6月通过山东省农作物品种委员会审定(审定编号:鲁审稻20196011),适宜在鲁南及沿黄稻区种植利用。     

Sensory evaluation of fabric touch by free modulus magnitude estimation

Fabric touch was evaluated psychophysically in order to determine the relationship between mechanical properties and subjective sensation. For subjective touch sensation, eight aspects such as hardness, smoothness, coarseness, coolness, pliability, crispness, heaviness and thickness were evaluated using free modulus magnitude estimation (FMME) technique. KES-FB was used to measure the mechanical properties of fabrics. Woolen fabric with the highest values of WC and weight was evaluated as the coarsest, heaviest and thickest. While silk crepe de chine with the lowest LT, G, 2HG, thickness and weight was rated as smoother and more pliable than any other fabrics. And flax with the highest values of LT and SMD was evaluated as hard, cool and crisp. Fabric touch and satisfaction were predicted well from the mechanical properties, especially from SMD, by regression analysis. Satisfaction for touch increased as smoothness increased.     

Process optimization for ethanol production from photoperiod-sensitive sorghum: Focus on cellulose conversion

Photoperiod-sensitive sorghum, as a competitive biomass for ethanol production, was investigated to develop an integrated process for improving ethanol yield. Response surface methodology was employed to study the relationship between pretreatment variables (including temperature, sulfuric acid concentration, and reaction time) and cellulose recovery, as well as efficiency of enzymatic hydrolysis (EEH) in the solid part. Recovery yield decreased and EEH increased as the pretreatment temperature, acidic concentration, and reaction time increased. A model was successfully developed to predict total glucose yield with a maximum value of 82.2%. Conditions of co-fermentation were also optimized, and the optimal ethanol yield was obtained with constant-temperature simultaneous saccharification and fermentation at 38 °C. Acetate buffer at a concentration of 50 mM was found helpful for increasing efficiency of enzymatic hydrolysis, as well as ethanol yield. The maximum ethanol yield was 0.21 g ethanol per dry mass at the conditions of 38 °C, 0.05 g yeast/L, and 50 mM acetate buffer. A complete cellulose balance was provided for the whole process.     

剑麻内参基因筛选与稳定表达分析

为了筛选剑麻中稳定表达的内参基因,保证基因表达结果的可靠性,本研究以热麻1号为材料,采用实时荧光定量RT-PCR方法对来自剑麻转录组数据的8个内参基因（EF1α、MADH、ACT2、GAPDH、TUB、ACT54、CYP和EF1β）在烟草疫霉侵染、水杨酸（SA）、茉莉酸甲酯（MeJA）和脱落酸（ABA）处理过程中的表达水平进行检测,并结合GeNorm、BestKeeper和NormFinder软件综合评价8个内参基因的稳定性。结果表明：8个内参基因在不同处理下的表达稳定性存在显著差异,其中在烟草疫霉侵染和茉莉酸甲酯处理过程中,EF1α表达最稳定,EF1β表达最不稳定。在水杨酸处理过程中,EF1α表达最稳定,ACT2表达最不稳定。在脱落酸处理过程中,GAPDH表达最稳定,ACT54表达最不稳定。该结果为剑麻基因的表达分析提供了可供选择的内参基因。     

大豆异黄酮提取新工艺的研究

目前工业是以乙醇为溶剂进行提取豆粕中的大豆异黄酮,由于豆粕中大豆异黄酮含量只有几千分之一,其含量较低。而在大豆胚中大豆异黄酮的含量较高,以大豆胚为原料,用乙醇和正己烷为溶剂混合萃取,其目的是为了提高异黄酮提取率,为大豆异黄酮的提取寻找新的工艺路线并对其工业生产的可行性进行进分析。     

一株来自红树林土壤的利普斯他汀产生菌的分离鉴定与发酵特性初步研究

从红树林土壤中筛选到一株产利普斯他汀(Lipstatin)的菌株GWL1.2012，通过形态特征、生理生化及16S rDNA序列分析，对该菌进行鉴定。结果显示，菌株GWL1.2012与毒三素链霉菌形成一个类群，同源性高达99.7%，故将其鉴定为毒三素链霉菌(Streptomyces toxytricini)，并对菌株GWL1.2012发酵特性进行初步研究，为以后的产业化开发生产提供参考依据。