圆叶椒草的组织培养与植株再生研究

以圆叶椒草茎段为试材,采用植物组织培养方法,研究了6-BA、NAA、IBA对圆叶椒草的愈伤组织诱导、不定芽分化以及试管苗生根培养的影响,以期筛选出愈伤组织和芽分化以及生根诱导的最佳培养基.结果表明:愈伤组织诱导、愈伤组织和不定芽分化最理想的培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1mg/L;试管苗生根培养最佳培养基为1/2MS+NAA 0.5mg/L+0.5％活性炭.     

菊花的快速繁殖

以带顶芽的菊花茎段为外植体,接种在诱导侧芽生长培养基中(MS NAA0.2mg/L 6-BA2.0mg/L),25d左右诱导成芽,再将芽接种于愈伤组织诱导培养基中(MS NAA0.1mg/L 6-BA3.0mg/L)进行继代培养,最后接种于生根培养基中(1/2MS NAA0.1mg/L),15d即可生根,30～35 d平均生根率达100%.将生根试管苗开盖练苗,移栽,成活率达95%以上.     

月季‘萨蔓莎’愈伤组织的诱导及植株再生

 以试管苗的小叶为外植体, 探讨了月季品种‘萨蔓莎’愈伤组织诱导及植株再生的方法。结果表明: 高浓度的生长素能诱导小叶产生愈伤组织, 经2,4-D 7.0～10.0 mg/L光下诱导愈伤15 d的小叶外植体, 在含TDZ 1.5 mg/L的MS培养基上光下培养约20 d后有白色假珠芽形成, 此芽暗培养在含NAA、ZT和GA3 的培养基上产生新的假珠芽和新的愈伤组织, 通过持续选择继代生活力高的组织, 约1年后获得可长期继代的愈伤组织, 到目前为止已保存了16个月。此愈伤组织在TDZ 1.0 mg/L、NAA 0.01 mg/L和GA3 0.1 mg/L的诱导下30 d内分化出不定芽, 在含BA 2.0 mg/L和NAA 0.01 mg/L的培养基上不定芽伸长形成正常植株。     

天女木兰嫩茎愈伤组织诱导及再生体系建立研究

为了保护濒危植物天女木兰,采用植物组织培养方法,以嫩茎为材料,进行愈伤组织诱导与分化、不定芽生根与试管苗生根继代增殖的培养,以及试管苗移栽与定植的研究,建立起天女木兰再生体系技术.结果表明:MS+ZT 0.4 mg/L+2,4-D 2.5 mg/L是嫩茎愈伤组织诱导培养和继代增殖培养的理想培养基;MS+GA30.5 mg/L+BA 0.6 mg/L是愈伤组织分化培养的理想培养基;把不定芽用10 mg/L的IAA溶液处理24 h后,接种到1/3 MS+IBA 0.6 mg/L+0.8 DA-60.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基上的生根培养方法是不定芽生根培养和试管苗生根继代增殖培养的理想方法;在温室中试管苗易移栽成活,定植的试管苗保持了野生天女木兰的所有植物学性状.     

葡萄组织培养快速繁殖体系研究

以葡萄茎尖、茎段、叶柄、根尖为外植体,对葡萄外植体的选择、愈伤诱导、茎叶分化苗、不定根诱导及试管苗的练苗移栽过程进行研究。结果表明:外植体以茎尖为最佳,茎尖愈伤诱导最适培养基:l/2MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.10 mg/L,诱导率达95%;茎叶分化以1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+IBA 0.10 mg/L,分化率达100%;生根培养以1/2MS+IBA 1.0 mg/L为佳,生根率达90.3%。     

鸳鸯茉莉不同外植体诱导愈伤组织研究初探

以鸳鸯茉莉花瓣、叶片、茎段为外植体,MS为基本培养基,探索外植体取材季节和部位对污染的影响;分析植物生长调节剂的种类、浓度对不同外植体诱导愈伤组织的影响和最适组合。结果表明:在34、月取材比5、6月好,12月取材效果较差;通过花瓣能成功诱导出健康的愈伤组织,但诱导率较低(27.1%),平均出愈时间为23~25 d,3种外植体中以嫩叶诱导愈伤组织的效果最好(87.1%),平均出愈时间最短,为18~20 d;茎段愈伤组织诱导率其次(68.1%),平均出愈时间为21~23 d;2,4-D6、-BA对以花瓣为外植体诱导愈伤组织的影响达显著水平,花瓣诱导愈伤组织的最适培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 1.5 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L,2,4-D对叶片诱导愈伤组织的影响达显著水平,叶片诱导愈伤组织的最适培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L,2,4-D、6-B对茎段诱导愈伤组织的影响达到极显著水平;MS+6-BA 3.0 mg/L+KT 3.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L最适合茎段诱导愈伤组织。     

山海带的组织培养及其植株再生

以山海带优树萌芽条上的茎段为外植体,在适宜的培养基及培养条件下,诱导出丛生芽,建立再生体系.其中,茎段在MS 6-BA1 mg/L NAA0.5 mg/L 10%椰汁的培养基中,切口形成绿色的愈伤组织,将愈伤组织转到MS 6-BA2 mg/L NAA0.1 mg/L 10%椰汁的培养基中,50 d后能发出丛生芽,将丛生芽切割,转到上述相同的培养基中,进行增殖培养.将增殖后的丛生芽单个切开,接种于1/2MS IBA2 mg/L NAA0.2 mg/L 0.3%C培养基上,30 d后,长出根,形成完整的植株,将植株炼苗移栽,成活率达90%以上,起到了在短期内大量育苗的作用.     

光叶子花茎段愈伤组织的诱导及其植株再生的研究

 研究了光叶子花(Bougainvillea glabra Choisy) 茎段愈伤组织的诱导及植株再生。结果表明:愈伤组织诱导以MS +BA 3.0 mg·L ^-1 + 2,4-D 0.2 mg·L^-1 +NAA 0.1 mg·L^-1培养基最好, 茎段愈伤组织的诱导率和分化率分别达78.2%和25.6%。不定芽的产生有两种类型: 直接从茎段基部诱导产生不定芽和茎段基部形成大块愈伤组织后再从愈伤组织上分化出不定芽。丛生苗诱导以MS +BA 2.0 mg·L^-1 +NAA 0.1 mg·L^-1为培养基, 增殖倍数可达5.4, 当培养基中BA 3.0 mg·L^-1和2,4-D 0.5～1.0 mg·L^-1时再生植株会出现叶片变异现象。MS+ BA 0.2 mg·L^-1 + GA₃ 0.5 mg·L^-1 +NAA 0.1 mg·L^-1培养基对有效苗培养具有较好的效果; 生根诱导以MS +NAA 3.0 mg·L^-1培养基诱导率最高, 为88.3%。     

睡菜的离体培养与植株再生研究

以不带节的睡菜茎段为外植体,研究其离体再生体系.结果表明:将茎段接种到MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L培养基上10 d可以诱导产生愈伤组织,然后转接至MS+6-BA 2.5mg/L+NAA 0.2mg/L+KT 0.05 mg/L培养基上15 d可使愈伤组织分化为幼苗;将带节的睡菜茎段接种到MS+IBA 0.1～0.2 mg/L培养基上7d可使其腋芽萌发为幼苗;将幼苗接种到1/2MS+IBA 0.5mg/L培养基上3～5 d可生根,实现植株再生.     

不同外植体和生长调节剂对猕猴桃愈伤组织形成与再分化的影响

本试验以金魁猕猴桃试管苗为试材，外植体选用茎段，叶柄和叶片，分别置于培养基MA（MS＋ZTlmg/L),MB(MS 2,4-D2mg/L）和MC（MS＋6－BA3mg/L)诱导愈伤组织，后转入分化培养基MD（MS＋蔗糖800mg/L 玉米素1mg/L)和（MS 蔗糖800mg/L 6-BA2mg/L NAA0.1mg/L)进行植株再生诱导。试验结果表明：外植体以茎段的出愈率和分化率最高，分别为90．2％和94．4％；叶柄次之，叶片最低；生长调节剂以加有ZT的培养基出愈率最高，2，4－D次之，6－BA最低，愈伤组织的再分化率以培养基中加入ZT中加入6－BA＋NAA效果好。     

紫外线辐照对马铃薯茎段愈伤组织及其再生植株的影响

用紫外线和低温处理马铃薯试管苗茎段,然后观察其再生过程,记载试管苗的生长速度、生长形态等及棚栽苗和扦插苗的生长特点并测定其生理指标,研究紫外线和4℃低温对大西洋马铃薯茎段组织的影响。结果表明,紫外线和4℃低温能够渗入生长点细胞;显著降低愈伤组织的生长势,诱导再生植株及其组织器官发生变异;证实紫外线照射4 min以上或紫外线照射3 min＋4℃处理1个月对马铃薯具有明显的诱变效应。     

石榴2种外植体再生方法在遗传转化研究中的优势比较

【目的】为了利用‘突尼斯软籽’石榴开展遗传转化研究,【方法】分别以叶片和茎段为外植体,探讨了不同灭菌时间和不同植物生长调节物质对2种外植体再生的影响,并对2种愈伤组织再生体系进行了比较。【结果】结果表明,茎段比叶片更容易灭菌,但叶片更容易长出绿色致密愈伤组织并分化更多的不定芽,而茎段分化的愈伤相对较为疏松,分化的不定芽也相对较少;来自茎段愈伤组织的不定芽比来自叶片的更容易长高;叶片比茎段再生体系建立所需时间要短;少量翠绿的叶片刀口处可以直接产生不定芽,可以直接利用叶片进行遗传转化的侵染,简化愈伤形成这一步骤,而茎段未发现此现象。在遗传转化试验中,茎段和叶片2种外植体愈伤组织抗生素敏感性试验结果均无显著性差异。【结论】研究结果认为,2者相比,叶片愈伤组织再生体系更适宜于石榴的遗传转化研究。     

植物生长调节剂对豆腐柴愈伤组织诱导的影响

以湖北省罗田县野生豆腐柴叶片为材料,在MS培养基上附加不同浓度和比值的激素进行愈伤组织的诱导试验.结果表明:不同外源激素浓度及配比对外植体愈伤组织诱导率的表现不同,NAA比IBA更有利于豆腐柴愈伤组织的形成和生长;而低浓度6-BA更适于豆腐柴愈伤组织的分化与生长;外源激素的配比对愈伤组织诱导率有一定影响,浓度比为0.2的6-BA/NAA有利于豆腐柴愈伤的形成和生长;愈伤组织培养最终认为,诱导豆腐柴愈伤组织和生根的适宜培养基为0.2 mg/L 6-BA和1mg/L的NAA.     

黄花梨茎段培养及植株再生

以黄花梨的顶芽和带芽茎段为外植体,研究了不同生长调节剂组合对其丛生芽诱导及生根的影响。结果表明:顶芽和带芽茎段以0.1%的HgCl2分别处理10、13min为宜;适宜的增殖培养基是MS+1mg/L 6-BA+0.5mg/L IAA;适宜的生根培养基是MS+2.0mg/L IBA+0.5mg/L NAA。     

外植体及培养条件对葡萄不定芽再生的影响

以优良无核葡萄品种莫利莎、皇家夏天为试材,分别从外植体类型、叶片接种部位、接种方式及培养条件等方面进行不定芽再生技术研究。结果表明,2品种葡萄试管苗离体叶片切割后接种较节间和叶柄容易诱导不定芽再生;将叶片切分为叶尖、叶中、叶基部叶块分别接种,其不定芽再生能力没有差异;取自培养30～50d继代苗上的叶片,其不定芽再生效果相同;叶块以近轴面或远轴面接触培养基的接种方式对不定芽再生影响不大,不过叶片远轴面贴近培养基接种,产生的愈伤组织状态较好;25℃左右小幅变温或恒温的条件能诱发2个葡萄品种产生较多的不定芽;葡萄不定芽再生须经黑暗培养或弱光培养,暗培养时间在2周与4周之间再生效果差异不显著。     

六月鲜枣愈伤组织诱导及胚状体发生

采用5因素4水平的正交试验设计,对六月鲜枣的幼叶、嫩茎、冷藏5d后的花药、花后48～50d的胚乳,利用3因素3水平的正交试验设计,对花后58～60d的幼胚及子叶,进行愈伤组织诱导再分化试验。探讨了不同激素、碳源和基本培养基对产生愈伤组织的影响。结果表明:碳源对胚乳、花药器官,基本培养基对嫩茎、幼叶、花药愈伤组织的诱导有显著影响,而且生长素种类和浓度对不同外植体的愈伤组织诱导作用不同;嫩茎、子叶及幼胚较易诱导产生愈伤组织,但只有子叶及幼胚产生的愈伤组织具较强的再生能力,并可诱导出不定芽,不定芽分化率分别为51.1%和9.5%,ZT较BA易诱导愈伤组织产生不定芽,不定芽转移生根成苗获得了完整植株。另外,用子叶及幼胚培养获得了大量胚状体,且胚状体最终可发育成苗。     

High efficiency shoot regeneration from calluses of strawberry (Fragaria X ananassa Duch.) stipules of in vitro shoot cultures

A highly efficient method of shoot regeneration was developed from calluses of four culti- vars of strawberries (Fragaria x ananassa Duch.), ‘Addie’, ‘Dana’, ‘Gea’ and ‘Santana’, grown in vitro. Optimum shoot regeneration (84-96% of the explants), with four to eight shoots was obtained from calluses developed from stipules near the internal zone between petiole and stipule, on Murashige and Skoog (1962) or Gamborg et al. (1968) media, supplemented with 3% (w/v) glucose, 10 [iM BAP and 2.5 IBA and 0.8% agar. The calluses continued to produce shoots for at least six subsequent subcultures. This has been reported, up to now, only in juvenile explants. Microscopic observation showed no preformed buds or meristematic groups of cells in the connecting zone of petiole and stipule prior to culture. However, there were several layers of cells in this area containing higher amounts of starch, which were not observed in the cells of the bottom or in the external side of the stipule. Regeneration from stipules occurred five to six days earlier in whole leaves (stipule + petiole + lamina) than in leaves without laminae, but the final percentage was the same in the cases of all explants. The percentage of regenerating calli from the other explant sources (leaf lamina, petiole and root) was low and dependent on cultivar. Cv. Gea, which showed the highest regeneration capacity, regenerated 32% from leaf laminae, 16% from petiole and root calluses, followed by cv. Addie with 12% from leaf laminae only; the others failed to regenerate from calluses derived from these tissues. The regenerated shoots were successfully rooted and hardened for further observations on eventual somaclonal variation.     

马铃薯试管苗快繁方法改进试验

以马铃薯品种大西洋、无花的试管苗为材料,将剪去根部和顶芽的多茎节切段,直接横放,接种于含有不同激素及配比的培养基中培养.研究结果表明,MS培养基附加1.0 mg/L 6-BA和1.0 mg/L NAA,可使得每个腋芽快速萌发并生根、成苗,大大提高效率.     

马铃薯Desiree遗传转化体系的优化及转基因植株的获得

为优化马铃薯品种Desiree的遗传转化体系并获得转基因马铃薯,以Desiree叶片和茎段为外植体,分别比较了不同转化条件（预培养时间、菌液浓度、侵染时间及激素配比）对遗传转化效率的影响。结果表明：以茎段为外植体,预培养2 d后以OD600=0.5的菌液侵染10 min,在加有1.0 mg?L-1反式玉米素（ZT-t）的MS20选择培养基上的遗传转化率最高,其愈伤诱导率可达80 %,芽分化率可达70 %。通过该转化体系将抗晚疫病基因R1导入马铃薯,获得了具有卡那霉素抗性的转化植株。经PCR检测和抗病接种鉴定,外源基因已经导入马铃薯基因组中,获得的转基因马铃薯具有很强的抗晚疫病能力,且转基因马铃薯植株和块茎的重要农艺性状没有发生改变。     

Somatic embryogenesis from floral tissues of feijoa (Feijoa sellowiana Berg)

The objectives of the present work were to study the embryogenic competence of floral tissues of Feijoa sellowiana and to investigate the influence of plant growth regulators on somatic embryo induction and development in order to establish a somatic embryogenesis protocol starting from somatic tissues. Petals, stamens and ovaries of floral buds were cultivated onto LPm basal medium supplemented with different levels of 2,4-D, Picloram, 2-iP, Kin and BAP. The highest embryogenic callus induction was obtained with Picloram (10 μM) and Kin (1 μM). Rates of embryogenic calluses induction in stamens and petals were significantly affected by PGRs. Embryogenic calluses were transferred to the same medium, supplemented with gradually reduced levels of PGRs-free medium. After 60 days in suspension cultures with 2,4-D (1 μM) and 2-iP (1 μM) calluses were transferred to PGR-free medium. After 30 days it was observed the development of globular somatic embryos on the surface of 18% of friable calluses previously induced with Picloram (10 μM) and Kin (1 μM). Only embryogenic calluses derived from stamens gave rise to this morphogenetic pattern.Torpedo and cotyledonary somatic embryos transferred to PGR-free culture medium were converted to complete plantlets. This is the first report of somatic embryogenesis in this species starting from somatic tissues.