利用SSR技术对黄瓜新品种津优35号进行种子纯度鉴定

利用天津科润公司建立并优化了的黄瓜种子纯度鉴定技术体系,筛选黄瓜新品种津优35号特异分子标记。试验选用80多对SSR引物中,有2对引物(85号和212号)在杂交种和亲本间表现多态性,杂交种条带为父母本的互补型,且特异性强,适合做杂交种纯度鉴定。用这2对引物对津优35号50粒种子进行了SSR鉴定。结果表明:这2对引物鉴定结果相同,且与田间鉴定结果吻合率高达96%以上,表明所筛选到的2个SSR标记可以作为津优35的特异分子标记用于其种子纯度的鉴定。     

SSR技术检测‘津优48’种子纯度试验

利用成熟的黄瓜SSR技术体系,筛选‘津优48号’黄瓜新品种的特异分子标记。共采用30多对SSR引物对亲本及杂交一代进行了谱带筛选,其中有3对引物(N618号、N383号和N251号)在杂交种和亲本间有多态性,杂交种同时具有父母本的谱带,且特异性强。用N618引物、N383引物和N212引物对50粒‘津优48’种子进行了分子鉴定。结果表明:该3对引物所鉴定的种子纯度与田间纯度结果吻合率高达96%以上,表明上述3个SSR标记可以作为黄瓜新品种‘津优48’的特异分子标记进行其种子纯度的鉴定。     

利用SSR技术鉴定西葫芦杂交种子纯度

为了建立一套快速、简单、准确、高效的西葫芦种子纯度检测方法,以西葫芦'福美1号'及其亲本为试验材料,利用SSR分子标记技术鉴定杂交种子纯度。从114对SSR引物中筛选出了1对引物(SGSSR25),在杂交种和父、母本之间存在显著差异的条带,且杂交种含有父、母本的特异互补带型。利用该引物对23株'福美1号'杂交种进行纯度鉴定,结果为91.30%,与大田种植鉴定结果一致,表明该引物可用于'福美1号'杂交一代种子纯度的快速检测和准确鉴定,SSR分子标记技术应用于西葫芦杂交种子纯度检测具有可行性。     

甜瓜分子标记纯度鉴定研究

以2个甜瓜品种西域雪1号、西域雪2号及其亲本为试材,建立并优化了单粒种子DNA快速提取法和适合甜瓜的RAPD、SSR分子标记杂交种纯度鉴定体系。从100条随机引物中筛选出G17用于西域雪2号纯度鉴定,可有效区分母本和杂交种。从19对SSR引物中筛选出9对稳定扩增、多态性丰富的引物构建西域雪1号、西域雪2号的SSR指纹图谱。SSR分子标记用较少引物即可扩增出品种特异性条带,且多数F1代带型呈双亲互补,非常适合种子纯度鉴定。同时,使用高浓度、非变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染,条带更清晰,可区分只相差1个碱基的扩增片段,同RAPD相比,SSR分子标记更适合甜瓜杂交种纯度快速鉴定。     

黄瓜新品种‘津优401’种子纯度的SSR鉴定

为了改变现有的田间检测周期长以及受气候条件影响的弊端,建立一种高效、准确的纯度检测方法,采用SSR分子标记技术对黄瓜新品种‘津优401’种子的纯度鉴定结果进行比较。结果表明:在备选的100对引物中有12对引物在亲本间出现多态性互补的条带,尤其引物N67和N87,由于它们的特异性强、条带清晰的特点以及与田间鉴定的高度吻合被选为鉴定‘津优401’黄瓜新品种种子纯度的标记引物,从而将以往该品种种子纯度鉴定的时间从2~3个月缩短到4~5 h。     

'吉椒15号'和'吉椒16号'辣椒种子纯度SSR分子标记鉴定体系的初步建立

以‘吉椒15号’和‘吉椒16号’辣椒及其亲本为研究材料,筛选快速鉴定其种子纯度的SSR分子标记。结果发现,72对候选SSR引物中,有6对在杂交种及亲本之间具有多态性且重复性好的共显性标记,其中SSR11、SSR16、SSR34、SSR48及SSR52分别在‘吉椒15号’及其亲本间具有多态性,SSR11、SSR14、SSR16及SSR52分别在‘吉椒16号’及其亲本间具有多态性,上述6对SSR引物可以作为鉴定种子纯度的分子标记。研究结果表明,采用单个SSR标记或2～3个组合标记可以快速鉴定出‘吉椒15号’和‘吉椒16号’辣椒种子中混杂的母本或异形株,SSR分子标记鉴定体系的初步建立可以为辣椒种子纯度的鉴定工作提供便利。     

利用SSR标记鉴定3个辣椒杂交种品种的纯度

辣椒(Capsicum annuum L.)杂交种子纯度快速检测技术对于保证辣椒杂交品种种子生产具有重要的意义。红龙13号、红龙18号、红龙25号辣椒杂交种是新疆隆平红安生物科技有限责任公司选育并大面积栽培的主栽品种。为鉴定上述3个品种的纯度,本实验在特异性引物筛选的基础上,利用SSR标记技术对3个辣椒品种进行了种子纯度鉴定。结果表明,每个品种都有1对以上SSR引物可将其父本和母本分开,3个辣椒杂交种品种的纯度分别为95.35%、89.36%和95.25%。SSR分子标记方法可以准确鉴定辣椒杂交种纯度,且大大缩短纯度鉴定周期。     

利用SSR技术鉴定西瓜品种纯度

利用SSR分子标记技术对‘雪龙三号’西瓜品种及其亲本间的多态性进行了引物筛选和种子纯度研究。结果表明,在供选的23对SSR核心引物中,有2对引物(BVWS02048和BVWS00106)在‘雪龙三号’杂交种及其亲本的带型具有多态性。利用这2对引物对‘雪龙三号’进行纯度鉴定,鉴定结果均为98%,与大田纯度检测结果吻合率达99%,说明SSR分子标记对‘雪龙三号’的纯度鉴定结果是可靠的。同时2对引物鉴定结果的一致也验证了品种的真实性。     

利用SSR分子标记鉴定“中丝2号”丝瓜杂交种纯度

为了建立一套丝瓜种子纯度的快速鉴定方法，采用SSR分子标记对丝瓜杂交一代品种“中丝2号”的纯度进行鉴定，利用24对SSR引物对“中丝2号”丝瓜及其亲本的DNA进行扩增。结果表明：从24对引物中筛选出1对特异性引物ZS-SSR24，能够分别在“中丝2号”母本和父本中扩增出特异的2条多态性条带，大小分别为220 bp和250 bp,F1继承双亲的特异性条带，利用此标记能够鉴定出混在F1中的父本或母本。经田间鉴定，供试丝瓜种子纯度为91.3%，这与分子标记的结果完全吻合，故该标记能够用于“中丝2号”丝瓜品种的纯度鉴定。     

辣椒品种镇研22种子纯度的SSR分子标记鉴定

分子标记技术因其具有高效、稳定、可靠等优点越来越多地被应用到种子纯度鉴定中;而基于分子标记的辣椒(Capsicum annuum L.)杂交种子纯度快速检测技术体系的建立对辣椒杂交品种的选育和生产则具有重要的意义。以辣椒杂交品系镇研22及其两亲本为试验材料,利用SSR分子标记技术对辣椒杂交品种间的多态性进行了引物筛选和种子纯度鉴定研究。结果表明,从20对SSR引物中筛选出CAMS-327引物,在亲本和杂交种中表现出稳定的共显性,并对镇研22杂交种进行纯度鉴定,结果为98%,与田间鉴定结果基本一致;SSR标记分析可实现对辣椒杂交品种种子纯度的快速和准确鉴定。     

西瓜品种‘蜜多’种子纯度SSR标记鉴定

为了准确、快速鉴定西瓜杂交种纯度,建立8424类型西瓜品种的SSR分子标记纯度鉴定体系。基于23对西瓜SSR核心引物,对天津市静海区主要种植的8424类型西瓜品种‘蜜多’进行分子标记纯度鉴定。从供试引物中,总共筛选到4对在双亲上具有多态性差异的特异性引物,并从中选出2对多态性良好,条带清晰的引物10号和22号,应用于‘蜜多’的分子标记纯度鉴定。对4份杂交F_1代样品进行分子鉴定,结果分别为97.4%、94.9%、98.1%、97.8%,对比分子鉴定结果和田间形态学鉴定结果,结果偏差≤1.5%,表现出高度一致。研究结果表明,SSR分子标记适用于该品种纯度鉴定,并可以取缔田间表型鉴定,实现准确、快速检测。     

利用SSR标记快速鉴定西瓜杂交种纯度

为了快速高效地鉴定杂交种纯度,建立完善的西瓜杂交种纯度SSR分子标记鉴定技术体系。利用30对杂合率高、多态性高的SSR引物对‘豫艺360’‘豫艺黑小宝’‘国豫二号’和‘甜王’这4份在河南省广泛种植的西瓜杂交种父母本进行筛选,筛选出7对条带清晰、多态性较好的引物。通过PCR反应体系扩增及凝胶电泳进行纯度分析,对4份杂交种的F_1样本进行鉴定,纯度分别为91.1%、93.2%、92.6%、91.4%,将分子标记鉴定结果与田间形态学鉴定的结果相比对,两者偏差≤2%,在允许范围之内,表现出高度一致。     

黄瓜线粒体DNA指纹图谱的构建及其在杂交品种纯度鉴定中的应用

为实现黄瓜杂交种子纯度的快速鉴定,利用分子标记技术构建‘长春密刺’等21份黄瓜品种的线粒体DNA指纹图谱。结果表明:从69对线粒体引物中,共筛选出13对在21份黄瓜品种中呈现出多态性的引物。同时,基于亲本材料的指纹图谱,利用引物mtSSR 4对‘南水3号’商品种子进行检测,分子标记鉴定纯度为95.7%,且真、假杂种编号与田间形态鉴定结果一致。黄瓜线粒体DNA指纹图谱的构建,不仅能为‘南水3号’等杂交种的纯度检测工作提供新的技术指导,还可为黄瓜品种的鉴定、遗传亲缘关系分析等提供一种新的方法。     

花椰菜新品种浙801杂交种纯度的SSR鉴定

浙801是由浙江省农业科学院蔬菜研究所选育的杂交一代中熟花椰菜新品种.以浙801杂交种及其父本和母本为材料,筛选得到1对SSR引物,该引物可将浙801杂交种与其父母本区分开来.利用这对引物对浙801商品种进行了鉴定,其结果与田间鉴定结果一致.研究结果表明,所筛选到的SSR标记可以作为浙801的特异分子标记用于其商品种纯...     

茄子种子纯度SSR标记快速鉴定

以茄子杂交种"京茄218"及其父母本为试材,采用SSR分子标记技术,研究了其双亲及F1之间的多态性,并结合田间鉴定对其进行验证。结果表明:在152对SSR引物中有2条引物(qzssr17和qzssr20)的扩增产物在杂交种中呈现父母本互补带型。利用qzssr17引物对6个制种单位繁制的"京茄218"杂交种进行SSR纯度鉴定,其鉴定结果与田间鉴定结果具有较好的一致性。试验证明,与田间种植鉴定相比,SSR标记是一种更准确、简单高效的茄子种子纯度鉴定方法。     

基于SNP标记的黄瓜杂交种纯度鉴定方法

根据国际葫芦科基因组数据库CuGenDB中序列信息,应用高分辨率熔解曲线技术筛选出用于黄瓜杂交种纯度鉴定的SNP位点CLA6（A/G）,该位点在33个市售黄瓜品种中的多态信息量为0.401,处于中度多态|结合焦磷酸测序技术,建立基于CLA6位点的SNP-Pyrosequencing黄瓜杂交种纯度鉴定方法。利用该鉴定方法检测黄瓜杂交种优一90粒种子,结果其种子纯度为96.7%,该结果与CLA0位点及SSR鉴定结果相符,表明该鉴定技术适于黄瓜杂交种纯度鉴定,具有用于DUS测试分析的潜力。     

印度南瓜‘贝栗7号’杂交种子纯度SSR分子标记鉴定

为了准确和快速地鉴定南瓜品种杂交种纯度,建立‘贝栗7号’南瓜品种的SSR分子标记纯度鉴定体系。基于24对南瓜SSR特异性引物对‘贝栗7号’品种亲本进行引物筛选,筛选出4对可扩增出差异片段的引物,再与F_1代扩增出的片段进行对比,获得2对最优引物。最后通过大田和室内2种鉴定方法,对同一批次样本开展鉴定试验,结果表明,室内分子鉴定与大田鉴定符合率达99.97%,成功开展了鉴定技术的应用。     

西瓜杂交种纯度SSR分子鉴定技术研究

以西瓜杂交一代品种黑宝、红与黑、黑优美及其亲本为试验材料,利用SSR标记对西瓜杂交种纯度进行了快速鉴定筛选试验。从93对SSR引物中最终筛选到4对特异性引物可快速准确地区分父本、母本及F1代,且鉴定结果与大田鉴定结果一致;同时对西瓜大群体快速基因组DNA提取、PCR扩增等进行了优化,初步建立了西瓜杂交种纯度SSR分子鉴定技术体系。     

佳宝苦瓜杂交种纯度的SRAP鉴定

利用SRAP技术对佳宝苦瓜杂交种子进行纯度鉴定。试验结果表明,从153对SRAP引物中筛选出1对引物Me6-Em4,能同时扩增出F_1代及其父母本的多态性条带,且PCR扩增产物具有高度的稳定性和重复性;利用该引物对48株佳宝苦瓜进行纯度鉴定,其种子纯度为97.9%,与其田间鉴定结果接近,表明利用SRAP分子标记可以快速、准确地鉴定佳宝苦瓜杂交种纯度。     

利用SSR分子标记技术快速鉴定津甜100甜瓜种子纯度

利用SSR分子标记技术鉴定甜瓜种子纯度,是甜瓜种子生产、销售过程中的关键环节,对甜瓜产业发展具有重要意义。利用津甜100亲本对24对甜瓜SSR引物进行多态性筛选,得到多态性高、在F₁代中条带差异较大的2对引物。利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对F₁群体进行鉴定,鉴定结果与田间鉴定结果一致,纯度均为99.0%。因此,笔者筛选得到多态性高、条带差异大的2对引物,可鉴定津甜100甜瓜种子。