秋水仙素处理离体叶片获得皇家嘎拉苹果四倍体植株

采用皇家嘎拉苹果（Malus domestica Borkh.)离体新梢叶片作为外植体，研究了不同浓度的秋水仙素长时间处理（5d)诱导四倍本的效率。结果表明，以不定芽再生培养基附加25mg/L秋水仙素效果最好，最高在36．7％的叶片外植体上获得了四倍体植株。高浓度（75－200mg/L)秋水仙素处理严重抑制组织的再生。采用流式细胞技术测定出诱变植株的细胞核DNA含量比对照高出一倍，确定了植株为四倍体。四倍体植株不仅在遗传上而且在外观形态上也明显区别于二倍体。四倍体植株已移栽于大田，并进行了嫁接育苗和大树高接。     

寒富苹果叶片离体再生及四倍体诱导

为建立寒富苹果高效的离体再生体系和多倍体诱导体系,以试管苗叶片为外植体,研究了培养基中激素对寒富叶片再生芽的影响及适宜的四倍体诱导方法。结果表明,当培养基中BA质量浓度为0.5mg/L时,再生频率最高达35.7%;当培养基中BA质量浓度为2.5mg/L时,再生频率超过90%,平均再生芽数在4以上。在培养基中附加1.0mg/LTDZ,再生频率达100%,平均再生芽数达19.47。以附加15、30、60、120mg/L秋水仙素的液体再生培养基处理叶片5d,各个质量浓度处理均诱导出四倍体植株,诱变率在5.3%～22.2%之间;寒富苹果叶片在附加50mg/L秋水仙素固体再生培养基上处理5d亦获得了四倍体植株。研究结果表明寒富苹果叶片具有极强的不定芽再生能力,叶片再生过程中进行秋水仙素处理是获得其四倍体的一个有效途径。     

秋水仙素离体诱导同源四倍体青花菜

 以青花菜品种‘海兹’高频再生试管苗为外植体, 利用秋水仙素离体诱导四倍体。结果表明: 用含秋水仙素200 mg·L ^{- 1}的MS + 0.1 mg·L ^-1NAA + 6.0 mg·L ^{- 1} 6-BA液体培养基处理2 cm长的再生苗48 h, 每个外植体平均可产芽2.1个, 再生植株变异率为83.33% , 四倍体诱导率达79.17%。与二倍体相比, 四倍体植株叶片、花冠、气孔等均表现巨大性; 流式细胞仪倍性鉴定显示, 对照DNA相对含量为200, 四倍体再生植株为400。四倍体根尖染色体2n = 4x = 36。     

秋水仙素诱导樱桃矮化砧木'吉塞拉6号'获得六倍体再生植株

 以三倍体樱桃矮化砧木'吉塞拉6号'（Prunus ceransus × P. canescens）的离体叶片为外植体,采用秋水仙素诱导处理再生出六倍体植株。将外植体首先在加有秋水仙素（50 mg. L-1）、生长素（IBA 0.5 mg. L-1）和细胞分裂素（BA 5.0 mg. L-1）的改良WPM液体培养基中培养5 d,再转移到不含秋水仙素（其它成分相同）的固体培养基上继续培养56 d,再生出形态变异明显的新梢。采用流式细胞仪鉴定染色体倍性,确定其为六倍体新梢。六倍体植株与三倍体的'吉塞拉6号'植株形态学上有明显差异。六倍体的试管苗已在大田移栽成活,并已成功高接在甜樱桃大树上。     

君子兰未成熟胚四倍体诱导及染色体数鉴定

 以君子兰（Clivia miniata Regel.）品种‘胜利’为试材,采用一种新型外植体未成熟胚,利用秋水仙素与组织培养相结合的方法,研究秋水仙素浓度、处理时间和不同胚龄对未成熟胚诱导加倍的影响。结果表明：在MS + NAA 2.0 mg · L-1 + BA 1.5 mg · L-1培养基上,0.01%秋水仙素处理180 d胚龄的未成熟胚20 d诱变效果最佳,四倍体诱变率最高,达30.8%,形态变化率达36.5%,死亡率为34.1%。经0.03%秋水仙素处理120 d胚龄的未成熟胚30 d诱变效果也较好,四倍体诱变率较高,达24.0%,形态变化率达21.1%,死亡率为46.7%。经染色体数观察,加倍处理后代中存在2x、4x和混倍体植株。随机调查了267株加倍处理植株,得到30株四倍体（2n = 4x = 44）、194株二倍体（2n = 2x = 22）和43株混倍体,平均四倍体诱变率为11.2%。秋水仙素处理出现的植株生长缓慢,生根明显较晚,叶片变宽变短等形态变化可以作为加倍的初期有效判断指标。     

秋水仙素处理对‘红阳’猕猴桃四倍体诱导的影响

为获得抗性强、果实品质优良的多倍体品种,以‘红阳’猕猴桃愈伤组织为试验材料,利用抽滤灭菌的低、中、高浓度的秋水仙素溶液分别浸泡3、4、5、6 h,培养再生植株,利用流式细胞仪进行倍性鉴定。结果表明,‘红阳’猕猴桃愈伤组织的存活率随着秋水仙素浓度和处理时间的增加而不断降低,其中,以浓度为150mg/L的秋水仙素分别处理5 h和6 h时,其愈伤组织存活率分别降低到22%和18%。以100 mg/L秋水仙素处理5h,变异率为23.68%,获得1株四倍体,其余均为嵌合体。验证试验进一步表明,100 mg/L秋水仙素处理‘红阳’猕猴桃愈伤组织5 h变异率达到23.97%,并得到47株变异植株,其中6株为四倍体植株。多倍体与二倍体相比,叶片明显变大,叶面厚,但叶片形状明显畸形,与二倍体差异显著。     

金冠苹果成熟胚离体诱导四倍体的研究

 以自然授粉的‘金冠’苹果种子为材料，研究了秋水仙素处理成熟胚离体诱导四倍体技术和嵌合体分离方法。结果表明：将完整胚在0.5%秋水仙素+1%二甲基亚砜的混合溶液中暗处理48 h，然后接种在MS+TDZ 1.0 mg·L^-1+IBA 0.5 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂6 g·L^-1的再生培养基中，变异率高达10.6%。与二倍体相比，四倍体试管苗生长缓慢，节间变短，叶片增大，叶形指数趋小化，气孔密度降低，保卫细胞增大。经压片法鉴定茎尖染色体数和流式细胞仪分析DNA含量，表明多数变异植株为同质四倍体。利用叶片离体再生器官技术，从诱导获得的嵌合体植株中分离出同质突变体。     

苹果叶片离体培养中秋水仙素加倍效应的研究

用不同浓度的秋水仙素溶液处理苹果的栽培品种嘎拉试管苗的离体叶片，发现以０．５％的秋水仙素溶液处理４ｄ效果最佳，诱变频率达５６．１％。诱变后获得的四倍体植株在形态学和细胞学上发生了明显变异。     

水芋体细胞胚胎发生及植株再生体系的建立

以水芋幼叶为外植体，应用均匀设计法筛选其最适合的胚性愈伤组织及胚性细胞复合体诱导、体细胞胚胎发育及植株再生的培养基，建立了水芋体细胞胚胎发生体系。对不同阶段培养材料的形态结构及超微结构的观察证明了水芋体细胞胚胎的发育过程。结果表明：水芋叶片胚性愈伤组织及胚性细胞复合体诱导最适宜培养基为：LS＋6-BA0．5mg／L＋2，4-D2．0mg／L，诱导率为98．5％；体胚发育及植株再生最适宜的培养基为：IS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．5mg／L＋IAA 10mg／L，体胚萌发率为96％，萌发的体胚在发育培养基上继续培养25d后全部发育成完整植株。     

曲面分析在‘雪花梨’叶片不定芽诱导培养基筛选上的应用

以‘雪花梨’试管苗幼叶为外植体,采用正交设计和曲面分析的方法对叶片不定芽诱导培养基进行筛选。结果表明,‘雪花梨’叶片在MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．05mg／L＋葡萄糖30g／L＋琼脂6g／L培养基上诱导不定芽再生芽数为2．95,高于其他处理;在MS＋6-BA1．0mg／L＋TDZ1．0mg／L＋NAA0．05mg／L＋葡萄糖30扎十琼脂6g／L培养基上再生率最高,达75％。经过曲面分析,‘雪花梨’在MS＋TDZ1．0mg／L＋6-BA0．5mg／L＋蔗糖30g／L＋琼脂6g／L的培养基上进行培养,理论再生芽数可达7．00,在MS＋TDZ1．0mg/L＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．05mg／L＋蔗糖30只,L＋琼脂6玑的培养基上进行培养,理论再生率可达100％。     

外源GA_3对藤稔葡萄果实生长发育及内源激素水平的影响

试验观测了施用外源GA_3后葡萄果实的生长发育及内源激素变化动态，结果表明：25 mg／L GA_3处理对果实生长发育有明显的促进作用，果实纵横径、干鲜重均明显高于对照；糖分积累速率增加，酸的变化进程加速；果肉细胞数目、细胞体积均显著增加。外源GA_3对果实内源激素也产生影响：处理后不但提早了玉米素峰值的出现，而且提高了峰值；生长素的含量在整个生育时期都高于对照；内源赤霉素在前期提高很多，但盛花后23 d含量与对照差异不大；脱落酸含量前期提高，后期的上升推迟，但其上升速度比对照快。     

结缕草愈伤组织诱导及植株再生

 以日本结缕草种子为外植体，2份材料在附加2,4-D 2.0 mg/L水平的Ms培养基上愈伤组织诱导率较高；在含不同水平2,4-D的培养基中添加6-BA对非胚性愈伤组织转变成胚性愈伤组织起重要作用，其中2,4-D 2.0 mg/L配合6-BA 0.1mg/L的Ms培养基诱导出的胚性愈伤组织比例较高；胚性愈伤组织在2,4-D为0.1mg/L的分化培养基上分化率和生根率最高，为46.8％~ 48.1％。     

抗菌肽MB39基因导入‘皇家嘎啦’苹果及其四倍体植株的培育

 采用农杆菌介导法, 将抗菌肽MB₃₉基因转入‘皇家嘎啦’苹果, 获得了7 个转基因株系。通过秋水仙素诱变染色体组工程育种技术, 由转化体叶片获得了20 个四倍体植株。经PCR 检测和Southern Blotting 杂交证明, 抗菌肽MB₃₉基因已经整合到皇家嘎啦苹果的染色体组中。转基因株系TR21、TR23 提高了对火疫病的抗性。采用流式细胞技术( Flow Cytometry) 确定植株为四倍体。     

甜樱桃与中国樱桃杂种的胚抢救及杂种鉴定

 以甜樱桃为母本，中国樱桃为父本，进行种间杂交，建立了杂种胚抢救技术体系，并对部分 杂种进行了鉴定。结果表明：(1)母本中，‘养老’坐果率最高，‘养老’在授粉4周后胚发生败育，而‘那翁’与‘红灯’则是在第3周后败育；(2)最佳萌发与生长培养基为1／2 MS+BA 2 mg／L+IAA 1 mg／L+维生素c 10 mg／L，最佳继代增殖培养基为1／2 MS+BA 2 mg／L+IAA 1 mg／L+NAA 0．1 mg／L+维生素c 10 mg／L，最佳生根培养基为1／2 MS+IBA 0．2 mg／L+维生素C lOmg／L；(3)S-allele specific PCR、RAPD及叶片形态鉴定结果证实了杂种的真实性.     

柿和君迁子试管苗缓慢生长法保存及其遗传稳定性研究

 对柿(Diospyros kaki Thunb．)和君迁子(D．1otus L)试管苗缓慢生长法保存及其恢复生长植株的遗传稳定性进行了研究，结果表明：低温(6±1)℃和光照800 lx(12 h／d)的条件下，试管苗在添加有甘露醇20 g／L或PPⅢ 1．0 mg／L的MS(1／2N)+蔗糖20 g／L+琼脂7 g／L+PVP 500 mg／L培养基上或在含有CPPU 0．2 mg／L的1／2 MS(1／2N)+蔗糖15 g／L+琼脂7 g／L+PVP 500 mg／L培养基上保存18个月，平均存活率在90％以上；上述3种方法保存后恢复生长的植株，在核DNA含量和染色体数目上没有发生改变；RAPD分析时表明，只有在添加PP 的保存中，次郎3个单芽姊妹系扩增出的1827条谱带中，增加了3条新带，变异率为0．16％，君迁子3个单芽姊妹系扩增出的1736条谱带中，增加了1条新带，缺失了l4条带，变异率为0．86％。该结果为柿属植物种质资源缓慢生长法保存的有效性和可行性提供了理论依据。     

秋水仙素注射大蒜花苞诱导四倍体的研究

为获得染色体加倍的大蒜植株,用0.05%、0.10%、0.15% 和0.20% 的秋水仙素注射苍山糙蒜和金蒜3 号的花苞,并在不同生长调节剂组合的MS 培养基上培养花苞内形成的气生鳞茎,当再生体系建立后,对根尖进行倍性鉴定。结果表明,MS 基本培养基添加0.05 mg·L-1 NAA 和2.0 mg·L-1 KT 能诱导较多的气生鳞茎萌发,直径4～5 mm 的气生鳞茎萌发率最高,且苍山糙蒜气生鳞茎的萌发率整体比金蒜3 号高。秋水仙素注射花苞后,金蒜3 号的花苞死亡率远远高于苍山糙蒜。随着秋水仙素浓度增大,花苞内形成气生鳞茎数不断降低,染色体加倍率升高。苍山糙蒜以0.20% 秋水仙素浓度处理下四倍体诱导率最高,为7.69%;金蒜3 号以0.15% 秋水仙素浓度处理下四倍体诱导率最高,为11.76%。     

无花果不同器官浸提液对几种蔬菜和豆类种子发芽和生长的影响

通过浸种发芽率测定和生长量比较，研究了无花果对几种蔬菜和豆科作物的他感效应。结果表明，无花果不同器官浸提液浸种处理对供试的几种蔬菜和豆科作物的种子发芽和生长均有程度不同的抑制作用；主要表现为叶浸提液浸种、高浓度浸提液浸种的抑制作用大；对西瓜、杨花萝卜、赤豆和绿豆的抑制作用较大。此外，加时浸提、加热浸提和乙醇浸提均能增强浸提液对小白菜种子发芽的抑制作用。