樟芝发酵液和液体发酵菌丝体提取物对SPCA-1细胞的体外抑制作用

樟芝(Taiwanofungus camphoratus)发酵液和经95％乙醇浸提后的菌丝体醇提物分别用石油醚和氯仿进行分级提取,得到石油醚和氯仿提取物.对不同提取物进行体外抑制SPCA-1肺癌细胞增殖实验,发现各提取物均可抑制SPCA-1细胞的增殖,其中发酵液石油醚提取物抑制作用最好,IC5.为62.5 μg/mL,发酵液和菌丝体氯仿提取物的抑制作用较好,IC50分别为120.9和109.5 μg/mL,菌丝体石油醚提取物的抑制作用较差,在25～150 μg/mL作用浓度下,抑制率低于20％.各提取物对SPCA-1细胞凋亡和生长周期作用的测定结果表明,各提取物在肺癌细胞SPCA-1中通过诱导细胞凋亡及S期周期阻滞来表现其抑制作用.     

猴头菌子实体提取物对人肺癌细胞SPCA-1的抑制作用

猴头菌(Hericium erinaceus)子实体的醇提物用不同极性有机溶剂分部提取,得到石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇分部,其中仅石油醚分部能抑制SPCA-1细胞增殖和促进其释放ROS(reactive oxygen species),对石油醚分部的进一步研究发现石油醚分部可诱导SPCA-1细胞早期凋亡和降低G_0/G_1期细胞数量。     

樟芝子实体和菌丝体萃取物的抑菌及抗氧化活性

以樟芝(Taiwanofungus camphoratus)子实体、液体发酵菌丝体和固体培养菌丝体为研究对象,分别利用石油醚、氯仿和正丁醇有机溶剂进行萃取,获得相应的萃取物,测定其抑菌和抗氧化活性.结果表明:子实体氯仿和正丁醇萃取物以及固体发酵菌丝体氯仿萃取物对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)有较好的抑制效果;子实体石油醚、氯仿、正丁醇萃取物和固体发酵菌丝体氯仿萃取物对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)有较好的抑制效果,并且子实体氯仿萃取物对供试菌的抑菌效果均好于其它萃取物;子实体氯仿、正丁醇萃取物和固体发酵菌丝体氯仿萃取物具有超氧阴离子清除能力,清除超氧阴离子的IC50值分别为5.94、1.32和1.97 mg/mL;子实体石油醚、氯仿和正丁醇萃取物具有过氧化氢的清除能力,清除过氧化氢的IC5o值分别为0.13、0.11和0.18 mg/mL.     

人工栽培黑柄炭角菌子实体的生物活性

从野外采集的黑耳(Exidia sp.)上分离到一株黑柄炭角菌(Xylaria nigripes),通过人工栽培获得子实体,对子实体水提粗多糖的体外免疫活性及有机溶剂萃取物的抗氧化和抗肿瘤活性进行测定.结果表明:黑柄炭角菌子实体粗多糖体外刺激RAW 264.7巨噬细胞分泌NO的效果不明显;石油醚萃取物具有O2-·清除能力,氯仿萃取物具有H2O2清除能力;乙酸乙酯萃取物可抑制SPCA-1增殖,促进其释放ROS (reactive oxygen species)并引起早期凋亡.     

荷叶离褶伞子实体有机溶剂萃取物的化学成分和抗肿瘤活性

用不同有机溶剂依次对荷叶离褶伞(Lyophyllum decastes)子实体醇提物进行萃取,得石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取物和剩余物.化学定性鉴别结果表明:石油醚萃取物中含有甾类(或三萜)、有机酸类、黄酮类物质;氯仿萃取物中含有生物碱类、甾类(或三萜)、有机酸类、黄酮类、蒽醌类物质;乙酸乙酯萃取物中含有生物碱类、甾类(或三萜)、有机酸类、黄酮类物质;正丁醇萃取物和剩余物中均含有糖类、氨基酸(蛋白)、黄酮类和有机酸类物质.体外抗肿瘤活性研究结果表明:石油醚、氯仿和乙酸乙酯萃取物对K562、HepG2和SW620肿瘤细胞的增殖均有抑制作用,氯仿萃取物对人正常前列腺细胞WPMY-1的增殖也有抑制作用,但在实验浓度内石油醚和乙酸乙酯萃取物对该正常细胞的增殖无抑制作用,实验浓度内的正丁醇萃取物和剩余物仅对肿瘤细胞K562的增殖有抑制作用,对供试的其它肿瘤细胞和正常细胞均无抑制能力.     

新疆细虫草提取物对胃癌AGS细胞增殖的影响

用不同浓度的新疆细虫草(Ophiocordyceps gracilis)氯仿相和正丁醇相浸膏和发酵菌丝体的醇提物作用于人胃癌AGS细胞24 h和48 h后,用MTT法测定对细胞的抑制率,并在显微镜下观测细胞形态变化。结果表明:新疆细虫草及菌丝体提取物对人胃癌细胞的增殖有抑制作用,且具有浓度依赖性,当菌丝体醇提物、新疆细虫草正丁醇相和氯仿相浓度为400μg/mL,作用于胃癌细胞48 h时,IC_(50)值分别为(82.0±0.1)μg/mL、(134.4±0.1)μg/mL和(36.0±0.1)μg/mL。     

桑黄醇提物对MCF7乳腺癌细胞活力和周期改变的影响

为评价桑黄(Phellinus baumii)子实体醇提物对MCF7乳腺癌细胞的影响,用不同浓度醇提物作用于MCF7细胞,用Alamar blue法测定细胞增殖率,显微观察细胞形态变化,用流式细胞术PI染色法和DCF染色法分别检测细胞周期变化和ROS释放量。结果表明:桑黄子实体醇提物使MCF7细胞形态发生明显变化,对MCF7细胞增殖有显著的抑制作用,能引起MCF7凋亡细胞数量升高、降低S和G2/M细胞数量,并呈现浓度梯度依赖性,但ROS实验结果提示桑黄子实体醇提物的促肿瘤细胞凋亡与ROS释放无关。     

不同中药提取物对牛樟芝生长和胞内三萜产物形成的影响

研究了6种中药材的水提物和醇提物对牛樟芝(Antrodia camphorata)液态发酵过程中菌丝体生长和胞内三萜类成分产量的影响。将不同中药的水提物和醇提物分别加入到发酵基础培养基中,培养20 d后测定牛樟芝菌丝体生物量和胞内三萜含量。结果表明,除了薏苡仁水提物添加浓度在0.6%时,对牛樟芝生长有抑制作用,其他中药水提物对牛樟芝生长均有促进作用。枸杞水提物对牛樟芝生长和胞内三萜的产生有显著的促进作用;陈皮和当归醇提物在高浓度时对牛樟芝菌丝体生长和胞内三萜的产生有明显的抑制作用;连翘醇提物对牛樟芝胞内三萜物质的产生有显著的促进作用,是对照组的4.5倍。     

山茶靛牛肝菌子实体提取物的体外抗肿瘤活性

依次用95％乙醇和蒸馏水提取山茶靛牛肝菌(Boletus pseudoregius)子实体,再用不同有机溶剂萃取95％乙醇提取物,考察山茶靛牛肝菌子实体不同有机溶剂萃取物和水提物的体外抗肿瘤活性.结果表明:石油醚萃取物对白血病细胞K562抑制作用较弱,对人肠癌细胞SW620和人肝肿瘤细胞HepG-2的增殖有较强的抑制作用,IC50分别为95.7和195.4 μg/mL;正丁醇萃取物对K562、SW620和HepG-2的增殖都有较强的抑制作用,IC50分别为24.2、89.0和59.6 μg/mL;石油醚和正丁醇萃取物在实验浓度范围内对人正常前列腺基质永生化细胞WPMY-1的增殖无抑制作用;氯仿和乙酸乙酯萃取物对K562、SW620和HepG-2肿瘤细胞和WPMY-1正常细胞的增殖均有较强抑制作用,其中氯仿萃取物的抑制作用最强;水提物对以上3种肿瘤细胞抑制作用不明显,对正常细胞的增殖无抑制作用.     

冬虫夏草菌培养物抗氧化活性研究

采用清除DPPH自由基法、普鲁士蓝法2个指标研究冬虫夏草菌培养物不同极性相的抗氧化活性。结果表明,冬虫夏草菌培养物的正丁醇相E、乙酸乙酯相D、氯仿相C、石油醚相B均有良好的DPPH自由基清除能力,且清除自由基能力与浓度呈现一定的线性关系,随着浓度的增加抗氧化活性不断增强。正丁醇相E、乙酸乙酯相D、氯仿相C、石油醚相B的IC50值分别为0.083 mg·m L-1、0.132 g·m L-1、0.081 mg·m L-1、0.143 mg·m L-1,均大于水相F、醇提物A,其中正丁醇相E和氯仿相C的清除能力最强。总还原能力的强弱大小依次为乙酸乙酯相D、氯仿相C、正丁醇相E、石油醚相B,且前三者均比水相F、醇提物A总还原能力强,其中乙酸乙酯相D最强,氯仿相C次之。综上,冬虫夏草菌不同极性相具有较强的抗氧化能力,正丁醇、乙酸乙酯、氯仿部位抗氧化效果明显,可以作为最佳提取溶剂。     

八种食用菌提取物对不同类型肝细胞损伤保护作用

探究刺芹侧耳(Pleurotus eryngii)、瓦尼桑黄(Sanghuangporous vaninii)、灰树花(Grifola frondosa)、赤芝(Ganoderma lucidum)、香菇(Lentinula edodes)、蟹味菇[Hypsizygus marmoreus (brown cultivar)]、白玉菇[H. marmoreus (white cultivar)]的子实体和樟芝(Antrodia cinnamomea)菌丝体水提物及醇提物对乙醇、H₂O₂和对乙酰氨基酚诱导肝细胞损伤的保护作用。研究结果表明：在乙醇诱导的肝损伤中,相较于乙醇组,质量浓度为25、50、100μg·mL^-1的灰树花和樟芝醇提物和质量浓度为25、100、400μg·mL^-1的蟹味菇、刺芹侧耳、灰树花、香菇、白玉菇水提物均可显著提高肝细胞存活率。在H₂O₂诱导的肝损伤中,相较于H₂O₂组,质量浓度为25、50、...     

CHO细胞源性二肽基肽酶Ⅳ抑制剂筛选模型的建立及食药用菌活性提取物筛选

建立中国仓鼠卵巢(CHO)细胞来源的二肽基肽酶Ⅳ(Dipeptidyl peptidase IV,DPPIV)抑制剂筛选模型并对多种食药用菌提取物及萃取物抑制DPPIV活性的效果进行研究。以H-甘氨酰脯氨酸对硝基苯胺(H-Gly-pNA·HCl)为反应底物,通过发色底物法检测CHO细胞来源DPPIV的活性,优化的筛选模型条件为:底物浓度90mmol/L、显色时间60min、孵育温度37℃、pH 7.6,阳性对照药物Ile-Pro-Ile的最佳作用浓度5mmol/L。利用此模型检测供试样品抑制CHO细胞源性DPPIV活性结果表明,鲍姆木层孔菌(Phellinus baumii)和灵芝(Ganoderma lucidum)醇提物的抑制效果明显好于其他7种食用菌;鲍姆木层孔菌及灵芝的石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇等四种萃取物在10g/mL和100g/mL浓度下均具有一定抑制效果,其中鲍姆木层孔菌及灵芝的乙酸乙酯萃取物抑制效果较好。     

两种无孢灵芝子实体醇提物的比较

以龙芝2号和鹿角灵芝两种无孢灵芝(Ganoderma lingzhi)子实体为原料,95%乙醇超声提取,对醇提物中的三萜进行了分析和体外抗肿瘤实验。结果表明,两种样品的醇提物得率分别为1.8%和3.7%,醇提物中三萜化合物含量分别为0.53%和1.16%;高效液相结果表明,鹿角灵芝中三萜的种类也多于龙芝2号。两种无孢灵芝的醇提物对肿瘤细胞K562和SW620的增殖均有一定的抑制作用,龙芝2号抑制肿瘤增殖的活性优于鹿角灵芝。     

不同种的灵芝醇提物对肝癌细胞增殖的抑制作用

为探讨7种不同种的灵芝中三萜及甾醇含量及子实体醇提物对人肝癌细胞HepG2和SMMC-7721增殖的抑制作用,采用紫外-可见分光光度法测定三萜及甾醇含量,采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法测定不同种的灵芝子实体醇提物对肝癌细胞增殖的抑制效果。结果表明:松杉灵芝(Ganoderma tsugae)、黄边灵芝(G.luteomarginatum)、赤芝(G.lucidum)、紫芝(G.sinense)、无柄灵芝(G.resinaceum)、无柄紫灵芝(G.mastoporum)、皱盖假芝(Amauroderma rude)三萜及甾醇含量依次降低,除无柄紫灵芝和皱盖假芝外,其余5种的含量均符合《中华人民共和国药典》的要求;7种灵芝的子实体醇提物均具有抑制HepG2细胞增殖的作用,半抑制率(IC_(50))分别为102.12、143.84、92.17、121.11、92.74、163.11、40.25μg/mL;对于SMMC-7721细胞,除皱盖假芝具有较小的抑制作用外,IC_(50)为166.21μg/mL,其余6种均无明显的抑制作用。7个种中皱盖假芝对肝癌细胞增殖的抑制作用效果最好,但其三萜及甾醇含量却最低,因此推测皱盖假芝的抗肿瘤活性成分可能除三萜及甾醇外还包含其它成分。     

毛蜂窝菌提取物体外抗肿瘤活性的研究

以人肺癌细胞NCI-H460、中枢神经系统癌细胞SF-268及乳腺癌细胞MCF-7为供试细胞株,采用MTT(四甲基偶氮唑盐)法对毛蜂窝菌(Hexagona apiaria)野生子实体、栽培子实体、培养废料、发酵菌丝体的醇提物和发酵液乙酸乙酯萃取物、发酵液水相部分等各提取物进行了体外抗肿瘤活性研究.结果表明,毛蜂窝菌发酵液乙酸乙酯萃取物对三种肿瘤细胞株都有较明显的抑制作用,抑制率达80%以上;其它提取物也有一定的抑制作用,但抑制率在40%以下.     

猴头菌子实体醇提物的生物活性

通过对猴头菌(Hericium erinaceus)子实体的乙醇提取物进行萃取,得到了石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇和剩余水分部共5个分部,通过定性鉴定分析了其中次生代谢物质的成分,并以保护PC12细胞损伤和抑制DPP-IV酶的活性为实验模型,寻找具有抗衰老、降血糖等生物活性组分。结果表明,猴头菌子实体的醇提取物中可能含有生物碱、酚类(或鞣质)、甾类(或萜类)、蒽醌等物质。5个分部对NaN3诱导所致的PC12细胞损伤均具有一定恢复作用,与对照(69.5%)比,剩余水分部活性最强(84.6%)。石油醚分部和剩余分部在浓度为1.0mg/mL时对DPP-IV酶的抑制率超过了阳性对照药(25.25%),而氯仿萃取分部在浓度为0.4mg/mL时活性已超过阳性对照药,说明氯仿分部具有较强的降血糖潜力。     

棘托竹荪发酵物的体外抗肿瘤活性

以肿瘤细胞HepG2、B16、K562和正常细胞WPMY-1为受试细胞,对棘托竹荪(Dictyophora echinovolvata)发酵菌丝体和发酵液不同浓度乙醇提取物和水提物的体外抗肿瘤活性进行测定.结果表明:菌丝体的不同乙醇浓度提取物仅对肿瘤细胞K562和B16的增殖有较好的抑制作用,而在实验浓度内对肿瘤细胞HepG2和正常细胞WPMY-1增殖的抑制能力较弱.与菌丝体相比,发酵液对肿瘤细胞的增殖抑制作用更强,其不同浓度乙醇提取物对肿瘤细胞HepG2、B16、K562和正常细胞WPMY-1的增殖都有较强的抑制能力.     

粗毛纤孔菌不同极性萃取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用及抗氧化活性研究

为探讨粗毛纤孔菌(Inonotus hispidus)子实体对α-葡萄糖苷酶抑制作用及体外抗氧化活性的影响,采用系统溶剂萃取法对粗毛纤孔菌甲醇粗提物进行萃取,得到石油醚、乙酸乙酯、正丁醇极性萃取物。选用福林酚比色法、α-葡萄糖苷酶活性抑制法、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除法以及铁离子还原能力(FRAP)试验测定不同极性萃取物总酚含量及对α-葡萄糖苷酶抑制作用和抗氧化能力影响。结果表明,在4种不同极性萃取物中,乙酸乙酯萃取物的多酚提取率最高,为(10.21±0.03)%;其次是正丁醇萃取物(4.85±0.18)%,甲醇萃取物(1.85±0.04)%,石油醚萃取物(1.07±0.02)%。1000μg·mL^-1时,乙酸乙酯萃取物对α-葡萄糖苷酶的抑制率最高,为(98.17±0.60)%,其次是正丁醇萃取物(88.60±0.68)%,甲醇萃取物(50.62±1.32)%,石油醚萃取物(6.12±0.60)%。250μg·mL^-1、500μg·mL^-1、1000μg·mL^-1乙酸乙酯萃取物的铁离子还原能力显著高于阳性对照2,6-二叔丁基对甲酚(P<0.05)。     

蛹虫草抗肿瘤和免疫活性部位的体外筛选

为筛选蛹虫草(Cordyceps militaris)子实体的抗肿瘤和免疫活性部位,采用系统溶剂法,分别用氯仿、乙酸乙酯、95%的无水乙醇、沸水(100℃)、3%草酸铵和5%NaOH依次提取并计算提取物得率,且测定了沸水提取物、草酸铵提取物、NaOH提取物1和2的多糖含量.采用体外抗肿瘤模型测定了氯仿提取物、乙酸乙酯提取物和乙醇提取物对肿瘤细胞L1210和SW620的抑制活性;采用体外免疫增殖试验模型测定了沸水提取物、草酸铵提取物和NaOH提取物1和2的免疫活性.结果表明,乙酸乙酯提取物对肿瘤细胞L1210和SW620的抑制效果最好,当乙酸乙酯提取物浓度为200μg/mL时,抑制率分别为(85.2±2.5)%和(67.7±6.3)%;体外免疫活性测定结果表明,草酸铵提取物刺激小鼠脾淋巴细胞后的增殖活性最高,当浓度为500μg/mL时细胞增殖率为(312.0±7.2)%,与阳性对照PHA的细胞增殖率(329.3±3.0)%相当.     

裂蹄针层孔菌发酵菌丝体对人肝癌HepG-2细胞的抑制作用

研究了裂蹄针层孔菌(Phellinus linteus)发酵菌丝体对人肝癌Hep G-2细胞的抑制作用。采用MTT比色法测定不同浓度发酵菌丝体对肝癌细胞存活率的影响;建立荷瘤Hep G-2裸鼠模型,检测不同剂量裂蹄针层孔菌发酵菌丝体对肿瘤的抑制作用。MTT法观察结果显示,裂蹄针层孔菌发酵菌丝体可抑制人肝癌Hep G-2细胞的增殖,且呈现剂量效应关系,高剂量(960 mg·L~(-1))能显著抑制肿瘤细胞的增殖,最佳抑制时间为24 h;裂蹄针层孔菌发酵菌丝体中剂量(500 mg/kg·d)、高剂量(1 000 mg/kg·d)对荷瘤Hep G-2裸鼠有显著的抑瘤作用,抑瘤率分别为40.42%、35.06%。裂蹄针层孔菌发酵菌丝体对人肝癌Hep G-2肿瘤细胞有较好的抑制作用。