辣椒疫霉菌拮抗细菌L14-3的生防潜力及其鉴定

为探讨L14-3菌株对辣椒疫病的生防潜力,采用皿内对峙试验和孢子萌发试验,测定其对辣椒疫霉菌的抑制活性,通过盆栽试验验证其对辣椒疫病的防治效果,并根据形态特征、生理生化特性和16S rDNA序列同源性分析对其进行鉴定。结果表明,L14-3菌株对辣椒疫霉菌的菌丝生长、游动孢子囊的形成、游动孢子的释放和休止孢子的萌发均具有显著的抑制作用;在盆栽试验中,L14-3处理对辣椒疫病的防治效果达到75.00%。经过鉴定,L14-3菌株为多黏类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)。     

绿针假单胞菌HG28-5对辣椒疫病的抑制活性及其根际定殖特性的研究

 利用从小麦根系中分离筛选得到的对辣椒疫病有较高拮抗活性的生防细菌HG28-5菌株,通过平板对峙培养、产孢子囊和孢子萌发试验,检测其对辣椒疫霉菌的抑制作用;通过温室盆栽和小区试验,确认了对辣椒疫病的防治效果;以平板稀释培养法测定了根际定殖能力。结果表明：HG28-5显著抑制辣椒疫霉菌菌丝生长、游动孢子囊形成、游动孢子释放和休止孢子萌发;HG28-5对辣椒疫病具有明显的防治效果,在盆栽试验和小区试验中防治效果分别达到92.57%和79.96%;HG28-5在辣椒根际的定殖能力很强,用HG28-5处理辣椒种子,发芽胚根中其定殖密度为4.45 × 10⁵ cfu · cm^-1,HG28-5处理盆栽辣椒根系,其定殖密度稳定维持在10⁵ cfu · g^-1以上。利用形态特征、生理生化特性和16S rDNA序列分析,鉴定HG28-5为绿针假单胞菌。     

葡萄炭疽病防治药剂筛选试验

采用菌丝生长速率法和孢子萌发法在室内条件下测定了8种杀菌剂对葡萄炭疽病病原菌的抑制作用。试验结果表明,咪鲜胺、吡唑醚菌酯、丙环唑、甲基硫菌灵和戊唑醇对葡萄炭疽病病原菌的菌丝生长有明显的抑制作用,EC50分别为0.025 8、0.087 0、0.492 7、0.623 4、1.420 1 mg/L;吡唑醚菌酯、福美双、甲基硫菌灵对葡萄炭疽病病原菌的孢子萌发有很好的抑制作用,EC50分别为1.19×10-6、2.34×10-4、5.94×10-4mg/L。室内测定结果表明,嘧菌酯和福美双1?10混配时有较强的增效作用。田间试验结果表明,55%嘧菌酯.福美双可湿性粉剂1 500倍液涂抹枝条后对葡萄炭疽病的防效达75.78%;25%吡唑醚菌酯乳油3 000倍液喷洒果穗后对葡萄炭疽病的防效达87.62%。     

辣椒疫病拮抗放线菌的筛选及防治试验初报

通过平板对峙培养法，从辣椒根际土壤中分离获得的276个分离物中筛选出对辣椒疫病菌有较强 拮抗作用的放线菌7株。室内测定其对辣椒疫病菌的抑菌带宽为7.8～13.0 mm；温室盆栽防治试验表明， 菌株CQ21-3对辣椒疫病控病效果最好，控病效果达73.2 %；无菌发酵液试验表明，放线菌CQ21-3无菌发 酵液在一定浓度范围内均能有效抑制疫病菌菌丝生长，降低孢子萌发率。     

苦参有效成分对辣椒枯萎菌的抑菌活性

采用生长速率法和悬滴法测试了不同浓度苦参提取物、黄酮类化合物及生物碱对辣椒枯萎病的抑菌活性.结果表明:苦参提取物对辣椒枯萎菌菌丝生长和孢子萌发均有很强的抑制作用.在供试质量浓度40 g/L时,对辣椒枯萎菌菌丝生长、孢子萌发抑制率分别达到94.48％、89.01％;并且黄酮类化合物抑菌活性显著高于生物碱.     

绿针假单胞菌HL5-4对番茄灰霉菌的抑制活性及其定殖能力

为探讨绿针假单胞菌HL5-4对番茄灰霉病的生防潜力,通过对峙培养和孢子萌发试验测定其对灰葡萄孢菌的抑制活性;进行离体试验和苗期试验测定其对番茄灰霉病的防治效果;采用平板稀释法测定其在番茄果实和叶片的定殖能力;并根据形态特征、生理生化特性及16SrDNA序列同源性对其进行鉴定。结果表明:HL5-4显著抑制灰葡萄孢菌的菌丝生长和分生孢子萌发,萌发抑制率为70.74%;在离体试验中,对番茄果实和叶片灰霉病的防治效果分别达到72.36%和59.85%,在盆栽试验中,对番茄苗期灰霉病的防治效果为62.88%;HL5-4在番茄果实和叶片保持一定的定殖密度,处理7d时能保持10~4和10~3 cfu·g~(-1)以上;HL5-4菌株鉴定为绿针假单胞菌(Pseudomonas choloeaphtis)。     

枯草芽孢杆菌(Bacillus subtils)B10对采后草莓果实病害的抑制效果

主要研究使用生物防治的方法来控制草莓果实采后病害以达到防腐保鲜的目的.以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)B10作为拮抗菌,以新鲜草莓果实为试验材料,测定了不同贮藏温度、不同接种时间的B10活菌液、菌悬液、热处理液和过滤液对草莓果实人工接种灰霉病的抑制效果;以及不同浓度菌悬液对果实自然病害的抑制效果.结果表明,B10活菌液、菌悬液对病害的抑制效果较好,热处理液和过滤液次之,但均显著好于对照;在25℃和15℃的不同温度条件下,较高的贮藏温度有利于拮抗菌对病原菌的抑制作用;在接种拮抗菌之后8 h和16 h分别接种病原菌的不同时间下,拮抗菌接种时间早,抑制效果好;B10菌悬液对草莓果实自然病害有抑制作用,且浓度越高该作用越显著.     

枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)B10对采后草莓果实病害的抑制效果

主要研究使用生物防治的方法来控制草莓果实采后病害以达到防腐保鲜的目的。以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)B10作为拮抗菌,以新鲜草莓果实为试验材料,测定了不同贮藏温度、不同接种时间的B10活菌液、菌悬液、热处理液和过滤液对草莓果实人工接种灰霉病的抑制效果;以及不同浓度菌悬液对果实自然病害的抑制效果。结果表明,B10活菌液、菌悬液对病害的抑制效果较好,热处理液和过滤液次之,但均显著好于对照;在25℃和15℃的不同温度条件下,较高的贮藏温度有利于拮抗菌对病原菌的抑制作用;在接种拮抗菌之后8h和16h分别接种病原菌的不同时间下,拮抗菌接种时间早,抑制效果好;B10菌悬液对草莓果实自然病害有抑制作用,且浓度越高该作用越显著。     

防治辣椒疫病的芽孢菌株的筛选及其抑菌效果的测定

从辣椒根际土壤中分离出293个分离物,通过平板对峙培养,筛选出对辣椒疫霉菌有较强拮抗作用的5个芽孢菌株。室内测定其对辣椒疫霉菌的抑菌带宽达8.0-11.3mm。温室控病试验表明,芽孢菌Bn-130对辣椒疫病防治效果最好,达64.7%。无菌滤液试验表明,拮抗菌Bn-130无菌滤液在一定浓度范围内能有效地抑制菌丝生长,减少孢子萌发。     

辣椒种子拮抗青枯病菌内生细菌的分离、鉴定

为了探究抗青枯病辣椒品种种子中拮抗青枯病菌内生细菌的种群组成及其在青枯病防治中可能发挥的生态学功能,从抗青枯病辣椒品种种子中分离、筛选出拮抗青枯病菌的内生细菌,对其进行抑菌广谱性分析,测定其对青枯病的生防效果。结果表明,从抗青枯病辣椒品种种子中分离出14株内生细菌,通过平板对峙,筛选出6株拮抗青枯病菌的内生细菌,初步鉴定它们分别为假单胞菌(Pseudomonas)、苍白杆菌(Ochrobactrum)和微杆菌(Microbacterium)。对6株内生细菌进行抑菌广谱性研究,所有内生细菌均至少对1种病原真菌有拮抗作用;将6株内生细菌的菌悬液分别对辣椒种子进行浸种处理后育苗,辣椒苗抗青枯病能力显著提升。辣椒种子中拮抗青枯病菌的内生细菌具有多样性,用其菌悬液处理辣椒种子后,植株对青枯病具有较好的抗病能力,为开展辣椒青枯病微生物防治提供了理论依据及菌种资源。     

7种生物菌剂对西瓜枯萎病的防治作用

采用育苗接种生物菌剂的方法,研究7种生物菌剂对西瓜苗期生长的影响和对枯萎病的防治效果。结果表明:处理S1(绿色木霉菌剂)、S4(枯草芽孢杆菌菌剂)和S6(西瓜专用菌剂)对西瓜的促生效果较为显著,株高、茎粗、地上部鲜质量、根冠比、壮苗指数等指标高于对照。生物菌剂对西瓜枯萎病都有一定的防治效果,与各自对照相比,早佳8424病情指数降低了76.2~92.8,西农8号病情指数降低了37.0~54.6,且对于2个品种的防病效果均以S6最为显著。进一步研究发现,枯草芽孢杆菌菌株对西瓜枯萎病菌生理小种1的生长发育有明显抑制作用,对峙培养抑菌率达67.75%,分生孢子萌发数目仅为对照的24.4%,对病原菌的持续抑制作用达49.3%。综上,S6在西瓜促生和防治西瓜枯萎病两方面的综合效果最好,且其菌株对西瓜枯萎病菌生长和孢子萌发有明显的抑制作用。     

抗病诱导剂与杀菌剂混合处理对马铃薯晚疫病的防治效果

采用菌丝生长速率法和孢子囊萌发抑制法测定β- 氨基丁酸（BABA）、苯并噻二唑（BTH）、水杨酸（SA）和茉莉酸甲酯（MJ）4 种抗病诱导剂对马铃薯晚疫病菌菌丝生长和孢子囊萌发的影响，通过盆栽试验筛选出最佳药剂和适宜浓度，将抗病诱导剂与杀菌剂混合进行大田试验。结果表明：离体条件下，4 种抗病诱导剂对马铃薯晚疫病菌的菌丝生长和孢子囊萌发无抑制作用；盆栽试验中，4 种抗病诱导剂处理能够导致马铃薯植株晚疫病病情指数下降和产量增加，且随浓度增加，晚疫病抗性增强，其中BABA 诱导抗病效果最好，适宜浓度为50 μg · mL-1，防效为64.83%。田间试验结果显示，与单独使用化学杀菌剂相比，BABA与杀菌剂混合处理效果更好，晚疫病最终防效高达81.28%，产量为2 911.08 kg ·（ 667 m²）^-1。以上结果说明：BABA 能够较好地诱发马铃薯对晚疫病的抗病性，田间防治推荐将化学杀菌剂与抗病诱导剂BABA 联合使用。     

寡雄腐霉菌剂对辣椒疫病的防治及促生效应

利用自主分离的寡雄腐霉生防菌株(Pythium oligandrum CQ2010)制备固体菌剂(P.oligandrum agent,POA),通过培养、拮抗试验和田间试验,研究其对辣椒疫病的防治,以及对辣椒生长发育、产量和品质的影响。结果表明,P.oligandrum CQ2010能大量分泌纤维素酶、蛋白酶、β–1,3–葡聚糖酶和几丁质酶,前三者在固体培养基上的水解圈直径接近或超过菌落直径,POA提取液显著抑制辣椒疫霉菌菌丝生长,抑菌率处于化学药剂精甲霜锰锌和双炔酰菌胺之间。在辣椒田间疫病防治试验中,移栽时将POA基施于辣椒根系周围,显著降低辣椒疫霉病的发病率和病情指数,POA的防效和疗效分别为89.37%和61.19%,防效大于疗效。施用POA之后,辣椒开花期和结果期均比常规施肥提早6?9 d,植株生物量增加32.03%,氮、磷、钾吸收量分别提高35.74%、40.53%和53.23%,果实增产25.21%。此外,POA改善辣椒果实品质,提高可溶性蛋白、游离氨基酸、可溶性糖和维生素C含量,而硝酸盐含量无显著变化。结论:P.oligandrum CQ2010能分泌水解病原真菌细胞壁的酶类,其提取液可以抑制辣椒疫霉生长,田间施用能够降低辣椒疫病的发病率和病情指数,促进植株生长,增加养分吸收,提高产量品质。因此,POA有广阔的运用前景,适合大规模生产运用。     

瓜类枯萎病生防菌WQ-6的筛选鉴定、发酵工艺优化及防效研究

为研发对瓜类枯萎病有防治作用的微生物菌剂，以4种枯萎病菌（黄瓜2种、西瓜1种、甜瓜1种）为供试病原菌，采用平板对峙法结合抑制菌丝生长速率法，从蚯蚓堆肥中筛选到1株对4种病原菌均有显著抑制效果的拮抗细菌WQ-6。鉴定发现，WQ-6为暹罗芽孢杆菌（Bacillus siamensis）。通过单因素试验和响应面分析法优化培养条件，获得了菌株WQ-6最适的发酵工艺（葡萄糖30 g ? L-1，蛋白胨30 g ? L-1，硫酸镁1 g ? L-1，甘油1 g ? L-1，磷酸氢二钾1.5 g ? L-1，温度32.2 ℃，装液量19.2%，转速236.2 r ? min-1，pH 6.0，接种量4%，培养时间24 h），使得WQ-6发酵液对枯萎病菌的抑菌直径和抑菌率较优化前分别增加了3.52 ~ 10.45 mm和2.28% ~ 32.16%。黄瓜、西瓜和甜瓜种子发芽和盆栽试验表明，菌株WQ-6使接种枯萎病菌的种子发病率降低了32% ~ 68%，发芽率提高了100% ~ 259.6%，植株病情指数下降了20% ~ 34%。此外，菌株WQ-6发酵液复配蚯蚓堆肥浸提液后，与WQ-6发酵液相比，种子的根长、茎长和活力指数显著提高，对病原菌的防治效果提高了6.78% ~ 36.44%。上述结果表明菌株WQ-6对瓜类枯萎病菌有广谱性防效，并具有良好的促根壮秧能力。     

辣椒叶斑病的病原菌生物学特性研究

 针对在中国辽宁省设施栽培辣椒上首次发现的新病害辣椒叶斑病,鉴定其致病菌为尖孢枝 孢（Cladosporium oxysporum）。对该病的症状进行了描述,并对病菌的生物学特性进行了系统测定：病菌 菌丝生长以V8 汁培养基为最适;能有效利用多种糖和氮源,分别以山梨醇和麦芽浸膏最佳;菌丝适宜生 长温度为20 ~ 25 ℃;最适pH 6 ~ 8;光照可促进菌丝生长;菌丝致死温度为77 ℃。病菌分生孢子萌发适 宜温度为20 ~ 30 ℃;最适pH 7;光照对孢子萌发无明显的促进作用;分生孢子致死温度为48 ℃。     

杧果畸形病病菌(Fusarium mangiferae)生物学特性及杀菌剂对其室内毒力测定

为进一步了解杧果畸形病病原菌Fusarium mangiferae的生物学特性,筛选出防治效果较好的药剂应用于生产,系统研究了该菌在不同培养基、温度、光照和碳氮源条件下的生长特性,并测定了9种杀菌剂对该菌的抑制作用。结果表明,病菌在OMA培养基上生长速度最快,在液体PDA中生长量最大,最佳产孢培养基为PSA;菌丝生长和孢子萌发的最佳温度均为25～28℃;光照时间和酸碱(pH 4～10)对病菌菌丝生长速度、孢子产生及萌发的影响不明显。病原菌生长的最佳碳源和氮源分别为蔗糖和酵母提取物。室内9种杀菌剂病原的毒力测定结果表明:25%咪鲜胺乳油对病菌菌丝生长的抑制效果最好,EC50和EC95分别为1.200 4 mg·L-1和2.623 9 mg·L-1;25%嘧菌酯悬浮剂能够强烈抑制病菌分生孢子的萌发,EC50和EC95分别为0.531 2 mg·L-1和2.974 1 mg·L-1。25%咪鲜胺乳油和25%嘧菌酯悬浮剂对杧果畸形病病菌具有较好的抑制作用,可进一步进行田间药效试验。     

A combination of gum arabic and chitosan can control anthracnose caused by Colletotrichum musae and enhance the shelf-life of banana fruit

Summary

Anthracnose, caused by Colletotrichum musae, is the major disease affecting the quality of banana fruit during storage. To control banana anthracnose, the combined effects of coatings with gum arabic [GA; at 5, 10, 15 or 20% (w/v)] and 0.75% (w/v) chitosan (CH) were investigated and compared to untreated controls. In vitro results showed significant (P < 0.05) inhibition of mycelial growth and conidial germination of C. musae in all combined treatments compared to the untreated controls after 7 d of incubation at room temperature (25°C). However, potato dextrose agar (PDA) plates amended with 10% (w/v) GA gave the most promising results among all test treatments in suppressing mycelial growth (86%) and inhibiting conidial germination (80%), while no effective inhibition of conidial germination was observed in the controls. In vivo results confirmed that 10% (w/v) GA was the optimum concentration to control fruit decay (70%), while showing efficacy on the reduction of growth of C. musae on artificially inoculated banana fruit. The combined coatings of GA + CH also significantly delayed ripening in terms of weight loss, fruit firmness, soluble solids content, and titratable acidity. These results support the possibility of using 10% (w/v) GA combined with 0.75% (w/v) CH as an alternative strategy to control post-harvest anthracnose disease in banana fruit.