胡萝卜14-3-3基因家族的鉴定与分析

以胡萝卜为试材,采用分子生物学和生物信息学方法对胡萝卜14-3-3基因家族各成员进行鉴定,研究分析其理化特性、基因结构、保守结构域、复制事件、系统进化及顺式作用元件,以期为进一步研究胡萝卜14-3-3蛋白的功能提供参考依据。结果表明：胡萝卜中共鉴定到11个14-3-3基因,不均匀分布在6条染色体上,含有3～7个外显子,其中1对基因发生片段复制事件;编码的蛋白序列长度为236～264 aa,分子量为26.64～30.14 kD,等电点为4.65～5.33,具有7个Motif,全部为酸性非分泌型蛋白,定位在细胞核。系统进化分析显示,胡萝卜14-3-3蛋白分为ε类(3个)与非ε(8个)类2个亚族。此外,顺式作用元件分析结果表明,胡萝卜14-3-3基因含有大量激素与逆境胁迫相关元件。     

龙眼14-3-3基因的克隆与原核表达

 以龙眼(Dimocarpus longan Lour. ) 为试材, 应用同源克隆和RACE方法从花芽中获得了调控 蛋白14-3-3的全长cDNA序列, GenBank登录号为FJ479618 (GI: 218202931) 。该cDNA全长1 121 bp, 包括一个783 bp的开放阅读框, 编码261个氨基酸, 序列比较分析显示14-3-3 cDNA具有较高的保守性。半定量RT-PCR分析结果表明, 14-3-3 mRNA在龙眼叶芽、叶片、花芽和成熟的花中都有表达, 但在花芽中表达量最大。构建了pET14-3-3原核表达系统, 将14-3-3全长cDNA在大肠杆菌中表达, 获得一个分子量约为34 kD的可溶性融合蛋白, 经Western blotting验证, 该蛋白为14-3-3蛋白。     

烟富3苹果矮化栽培试验

比较了八棱海棠砧,M9自根砧,八棱海棠作基砧、M26作中间砧嫁接的烟富3苹果生长结果情况.3种砧木烟富3苹果树树高、树冠覆盖面积、干周由小到大依次均为:M26矮化中间砧＜M9矮化自根砧＜八棱海棠砧.M26矮化中间砧、M9矮化自根砧烟富3定植后第3年开始大量结果,定植后第4年果园有收益,而八棱海棠砧烟富3定植后第4年尚未大量结果.     

大棚西瓜-结球甘蓝-菜豆3种3收栽培模式

为充分利用单位土地面积上不同时间和空间的光、温、水、气等自然资源,解决生产中作物之间的争地矛盾,经过试验、示范和优化,总结出大棚西瓜、结球甘蓝、菜豆1年3种3收高效栽培模式。     

NaHSO_3和KHCO_3复合处理对设施黄瓜幼苗生长的影响

以黄瓜"津优33号"品种为试材,研究1 500 mg/L浓度的KHCO3和不同浓度NaH-SO3复合对设施黄瓜幼苗生长的影响,探讨促进黄瓜幼苗生产的最佳组合。结果表明:KHCO3和NaHSO3复合配比可提高设施黄瓜幼苗光合速率,进而提高幼苗的根系数、根冠比、植株干重和鲜重比值等指标,培育壮苗。与对照相比,1 500 mg/L KHCO3+200 mg/L NaHSO3处理使黄瓜的茎粗、根系数、光合速率、根冠比、植株干重和鲜重比值分别提高了10.19%、42.86%、62.89%、46.15%、39.60%,效果较为显著。     

广州地区番石榴根结线虫鉴定与14-3-3基因的克隆

【目的】摸清广州地区番石榴根结线虫的种类、分布及致病机制。【方法】观察番石榴根结线虫的雄虫、二龄幼虫、雌虫及其会阴花纹的形态学特征,根据根结线虫的通用引物#C2F3和#1108对线虫mt DNA的COⅡ和lr RNA基因间序列进行PCR扩增,获得750 bp的特异扩增产物,将扩增片段在Gen Bank上进行Blast比对。通过南方根结线虫与北方根结线虫的14-3-3序列设计简并引物,进一步扩增已鉴定的象耳豆根结线虫的14-3-3基因。【结果】广州地区番石榴根结线虫的形态与象耳豆根结线虫(Meloidogyne enterolobii)相似;其扩增片段与象耳豆根结线虫(M.enterolobii)比对,序列相似性在99%以上。扩增了象耳豆根结线虫的14-3-3基因,结果显示该基因的开放阅读框包含783 bp的片段,编码261个氨基酸,命名为Me-14-3-3。【结论】广州地区番石榴根结线虫为象耳豆根结线虫(M.enterolobii),14-3-3蛋白基因被成功克隆,扩增结果为进一步研究14-3-3蛋白基因在象耳豆根结线虫生长发育中的功能、摸清致病机制等方面奠定良好的基础。     

大棚西瓜、生姜1年3种3收高效栽培模式

为充分利用鲁东南地区的水分、光照、空气等自然资源,实现大棚高产、高效种植,在大棚内进行西瓜、生姜1年3种3收反季节栽培,获得了较高的经济效益,可以生态条件类似的地区进行推广。     

黄瓜果实弯曲相关基因Cs14-3-3 的克隆及表达分析

 以黄瓜（Cucumis sativus L.）果实易发生弯曲的品种‘长春密刺’为试验材料,采用RT-PCR 技术从果皮中分离并克隆了14-3-3 蛋白基因,并将此基因命名为Cs14-3-3。Cs14-3-3 基因cDNA 全 长792 bp,编码263 个氨基酸,分子量29 589.287 Da,等电点为4.585。生物信息学分析表明此基因含有 14-3-3 蛋白基因的典型结构域,与其他物种14-3-3 蛋白基因核苷酸序列同源性达到75%以上,编码的氨 基酸序列同源性达到85%以上,属于14-3-3 蛋白基因家族。同时,采用实时荧光定量PCR 方法对顺直果 实和弯曲果实腹部及脊部在果实开花的2、4、6、8、10、12 d 的基因表达量进行了研究。结果显示,在 果实发育各个时期,Cs14-3-3 的表达量均为在弯曲果实腹部 > 顺直果实 > 弯曲果实脊部的表达量;在 各个部位,Cs14-3-3 在果实开花2 d 的表达量明显高于开花后其他时期。试验结果表明,Cs14-3-3 基因为 黄瓜果实弯曲相关基因,在黄瓜果实开花早期发育过程中起重要作用。     

日光温室西瓜、结球甘蓝、花椰菜3种3收高效栽培模式

为充分利用鲁东南地区的土壤、水分、光照等自然资源,实现温室瓜菜的多茬、优质、高效栽培,在温室内进行西瓜、结球甘蓝、花椰菜3种3收高效栽培模式的探索,并取得初步成功,可获得较高的产量和较好的经济效益。     

鲁东南地区温室茄子、结球甘蓝、西葫芦3种3收高效栽培模式

为充分利用山东省莒南地区日光温室的光照、水分、空气等自然资源,实现高产、优质、高效种植,在温室内进行茄子、结球甘蓝、西葫芦反季节栽培,实现1年3种3收,获得了较高的经济效益。     

大棚西瓜-豇豆-芹菜1年3种3收栽培模式

经过试验、示范和优化,总结出鲁东南地区大棚西瓜-豇豆-芹菜1年3种3收高效栽培模式,可充分利用单位土地面积上不同时空的光、温、水、气等自然资源,解决生产中不同作物之间的争地矛盾.     

番茄3个抗疮痂病菌T3小种基因的等位性测定和序列分析

将分别携带抗番茄疮痂病菌Xanthomonas perforans T3小种基因Xv3、Rx4和RxLA1589的番茄材料Hawaii7981、PI128216和LA1589相互杂交,获得了包含535 ~ 1 655个单株的3个F2分离群体 Hawaii7981 × PI128216、Hawaii7981 × LA1589和PI128216 × LA1589。采用注射法对这3个F2群体的每个单株及亲本和感病对照OH88119进行抗T3小种鉴定,结果显示除OH88119外的所有单株对T3小种都具有过敏型抗性反应,表明Xv3、Rx4和RxLA1589为等位基因。根据Rx4基因的序列设计引物,从Hawaii7981、PI128216和LA1589中扩增该基因并测序,序列比对显示,来自于3个材料的Rx4位点编码区序列完全一致,表明这3个材料所携带的对番茄疮痂病菌T3小种的抗性由同一基因控制。     

果树3种食心虫的识别与防治

通过5年对梨小食心虫、桃小食心虫、桃蛀螟的观察、调查和防治,总结出3种虫害的寄主、为害症状、形态特征、发生规律的不同点和相同点,点明3种虫害容易混淆之处,通过对比的方式分清3种虫害的特征、特点,同时制定一套防治3种病虫害的有效措施,从根本上解决3种虫害难以分辨和防治的难题,从而提高果园的商品价值和经济效益。     

大棚番茄、菜豆、豇豆1年3种3收种植模式

根据立体种植原理,充分利用单位土地面积上不同时间和空间的光、热、水、气等自然资源,解决生产中作物之间的争地矛盾。经过研究和试验、示范,优化总结出大棚番茄、菜豆、豇豆1年3种3收高效栽培模式。     

小立碗藓C3H基因敲除载体的构建及C3H1-nptⅡ-C3H2目的片段最佳PCR条件筛选

以小立碗藓作为试材,将总长为1 981bp的小立碗藓C3H基因分为上游片段(1 000bp),下游片段(981bp),并以此设计引物,得到上游臂(C3H1,735bp)、下游臂(C3H2,700bp)。在C3H1引物设计时引入XhoI、EcoRV酶切位点到两端,C3H2设计时引入NdeI、BamHI酶切位点到两端。以小立碗藓总DNA为模板,通过PCR扩增得到C3H1和C3H2片段。将C3H1和C3H2插入到pTN182载体中,获得敲除载体(C3H1-pTN182-C3H2质粒),通过PCR获得C3H1-nptⅡ?C3H2目的片段,并且采用单因素方法研究引物浓度与退火温度对PCR产物浓度及特异性的影响。结果表明:引物浓度为0.20μmol/L,退火温度为58.7℃,PCR产物特异性最高且产物浓度较高。     

3种常见野生牛肝菌和3种大宗人工食用菌营养成分分析

以3种大宗野生牛肝菌(黑牛肝菌、黄牛肝菌、红乳牛肝菌)和3种大宗人工栽培食用菌(杏鲍菇、猴头菇、灵芝)为原料,对其基础营养成分进行测定分析,包括水分、灰分、蛋白质、脂肪、总糖、膳食纤维、氨基酸.结果表明,所选6种食用菌具有蛋白质含量高、脂肪含量低、富含丰富的氨基酸和矿物质等特点,所选野生牛肝菌与栽培食用菌在基础营养成分...     

3种梨树病虫害的鉴别与防治

通过3年对梨树梨锈病、梨叶疹病、梨缩叶病的观察、调查和防治,总结出3种病害的病源、症状、发生规律的不同点和相同点,区分3种病虫害容易混淆之处,同时制定了相应防治措施,从根本上解决3种病虫害难以分辨的难题,从而提高梨园的商品价值和经济效益.     

鲁东南地区温室菜豆、花椰菜、茄子1年3种3收高效栽培模式

为充分利用鲁东南地区的光照、水分、空气等自然资源,实现蔬菜的高产、优质、高效种植,在温室内进行菜豆、花椰菜、茄子1年3种3收反季节栽培,获得了较高的经济效益,推广前景广阔。     

3个栗新品种的选育

通过 2 0余年栗杂交育种研究 ,选育出辽栗 10号、辽栗 15号、辽栗 2 3号 3个新品种 ,2 0 0 2年 9月由辽宁省林木良种审定委员会与辽宁省科技厅组织了良种审定与成果鉴定。     

3个绿菜花新品种

绿菜花又名青花菜、西兰花等,其营养丰富,风味好,在我国广泛种植,深受消费者欢迎.为适应市场需求,青岛国际种苗有限公司从日本引进了歌舞伎、绿山、绿岛3个新品种,经青岛地区示范、推广种植,已取得成功,现将这三个品种简介如下.