热处理脱除梨病毒技术研究

1996－1997年采用恒温热处理，变温热处理两种方法，对11个梨优新品种进行脱毒试验，获得10个梨品种38株无病毒单株，其脱毒率恒温热处理为58．1％，变温热处理为74．7％。     

不同苹果品种和砧木的热处理脱病毒效应

以１３个苹果品种、砧木为试材，采用热处理和茎尖培养相结合的方法脱除病毒。结果表明：Ｍ４及国光的脱病毒效果最好，热处理３０天以上，脱毒率为８３．３％；金矮生和长富２号经２１天热处理，脱毒率也可达８０％；北斗和新乔纳金的脱毒率稍低，但也比传统热处理绿枝接高３６．７％和３０．０％。另外，各试材热处理后的死苗率和死苗高峰期有较大差异，而且茎尖培养绿枝芽的分化反应也不同。     

不同苹果品种和砧木的热自理脱病毒效应

以１３个平果品种、砧木为试材，采用热处理和茎尖培养相结合的方法脱除病毒。结果表明：Ｍ４及国光的脱病毒效果最好，热处理３０天以上，脱毒率为８３．３％；金矮生和长富２号经２１天热处理，脱毒率也可达８０％；北斗和新矫纳金的脱毒率稍低，但也比传统热处理绿枝接高３６．７％和３０．０％。另外，各试材热处理后的死苗率和死苗高峰期有较大差异，而且茎尖培养绿枝芽的分化反应也不同。     

梨树苹果茎沟病毒的脱毒技术研究

１９９３—１９９６年,采用热处理材料茎尖培养及试管苗热处理方法,对１３个梨品种及矮化砧材料进行苹果茎沟病毒脱毒试验的结果表明,二者对茎沟病毒的脱除率分别较单纯茎尖培养高５７．０％和６２．４％。脱毒苗生根率和移栽成活率分别达７０％和８０％。     

茎尖培养等处理脱除梨病毒的技术研究

以梨茎尖培养、热处理＋茎尖培养、试管苗热处理＋茎尖培养３个处理，对适于北方栽培的３个梨矮化砧和７个梨品种进行脱除茎沟病毒和褪绿叶斑病毒试验。经１９９３—１９９５年对３个处理的试管苗用室内血清快速诊断法检测表明，茎沟病毒和褪绿叶斑病毒的平均脱除率，茎尖培养处理分别为７８．１％和９５．０％，热处理＋茎尖培养和试管苗热处理＋茎尖培养两个处理均为１００％。较详细叙述分析了茎尖培养技术及其效应。还讨论了３个脱除病毒处理的优缺点。     

西伯利亚百合脱毒技术研究

运用茎尖培养、热处理结合茎尖培养、病毒唑结合茎尖培养、热处理加病毒唑结合茎尖培养4种方法，脱除西伯利亚百合品种CMV、LSV和LMoV病毒，分析了4种处理后的成苗率和脱毒率。结果表明：以热处理加病毒唑结合茎尖培养法效果最为明显。     

草莓病毒脱除方法的比较与评价

以感染病毒的草莓品种宝交早生为试材,利用多重RT-PCR同时检测SMoV和SMYEV技术,对茎尖培养、热处理、抗病毒药剂处理3种脱毒方法进行了比较和评价,以期为草莓脱毒苗培育提供重要参考.结果表明,0.2mn茎尖和0.5 mm茎尖都能够有效地脱除SMoV和SMYEV;热处理能够脱除草莓试管苗中的SMoV,但不能脱除SMYEv,39℃恒温处理30 d,SMoV脱除率达到63.0%;利巴韦林不能清除草莓植株体内的SMov和SMYEV.综合脱毒率和茎尖分化成苗率2个指标,认为0.5 mm茎尖培养是适宜的草莓病毒脱除方法.     

草莓茎尖培养脱毒效果研究

以草莓"丰香"品种为材料,利用匍匐茎剥取茎尖,以茎尖培养结合改良热处理、冷处理、二次脱毒等方法来进行草莓脱毒研究,用电镜及野生草莓小叶嫁接法进行鉴定,结果表明,草莓脱毒效果与剥取的茎尖大小有关,茎尖越小,脱毒效果越好.以0.5mm(毫米)大小剥取茎尖,直接剥取茎尖法不能够彻底清除病毒,而二次脱毒法、改良热处理 茎尖培养法、冷处理 茎尖培养法等获得的植株都没有检测到病毒,脱毒效果良好.其中改良热处理 茎尖培养法的茎尖成活率最高,达47.37%.因此最适宜的脱毒法为改良热处理 茎尖培养法,即先将草莓匍匐茎放在40℃热水中处理4h(小时),再剥取≤0.5mm(毫米)大小的茎尖进行培养,脱毒效果良好.     

西伯利亚百合脱霉技术研究

运用茎尖培养、热处理结合茎尖培养、病毒唑结合茎尖培养、热处理加病毒唑结合茎尖培养4种方法,脱除西伯利亚百合品种CMV、LSV和LMoV病毒,分析了4种处理后的成苗率和脱毒率.结果表明:以热处理加病毒唑结合茎尖培养法效果最为明显.     

四个苹果砧木和品种苹果潜隐性病毒的变温热处理脱毒效果分析

以同时携带ASPV、ACLSV、ASGV 3种潜隐性病毒的"八棱海棠"、"小金海棠"、"华红"和"JAZZ"组培苗为试材,分别采用2种变温热处理方式结合茎尖培养的脱毒方法,运用RTPCR技术对组培苗内病毒进行跟踪检测,研究了不同苹果品种和砧木对变温热处理结合茎尖培养脱除苹果潜隐性病毒的反应以及脱毒苗的适宜检测时机。结果表明:变温热处理条件不同,病毒脱除效果不同。同一热处理条件下,不同苹果基因型其病毒脱除率也不同。"小金海棠"脱毒率最高,"JAZZ"和"八棱海棠"次之,"华红"最低。同时,不同病毒种类的被脱除率存在差异,ASPV最容易脱除,ACLSV居中,ASGV最难脱除。脱毒完成后180d,病毒总检出率最高;220d,3种病毒均有检出,检出顺序为ASGV最先,ACLSV次之,ASPV最晚。因此,对脱毒苗进行多次跟踪检测十分必要。     

草莓热处理脱病毒的研究

试验研究了草莓盆栽苗及茎尖组培苗热处理的脱毒效果,并对盆栽苗热处理致死原因作了初步探索。结果表明,影响草莓盆栽苗热处理寿命的一个重要因素是根际温度。采用根系保护变温法(39℃/18℃昼/夜),由于根际温度变低(29℃/14℃/昼/夜),“绿色种子”品种苗寿命达30—90天。经90天热处理后,脱毒率达66％。热处理期间,分期取母株上原有的匍匐茎进行茎尖培养(外植体为1.0毫米),其组培苗脱毒效果(y)与热处理天数(x)呈极显著的正相关(y=24.45+1.33x,r=0.9388匍匐茎最长寿命达30天,相应的茎尘组培苗脱毒率为88.9％。采用茎尖组培苗进行热处理脱毒,“女峰”39℃/18℃变温30天结合38℃恒温30天;“明晶”,“女峰”38℃恒温46天的脱毒率均达到100％;“80—9—4”,“女峰”39℃/18℃变温60天,脱毒率分别为82％和88％。     

甘蔗茎尖脱毒培养技术研究

针对热处理结合茎尖分生组织培养甘蔗脱毒苗在茎尖培养阶段由于污染率和褐变率高培养成功率较低问题，在甘蔗的热处理、茎尖解剖、接种等阶段设计不同试验进行研究探讨，以期提高茎尖培养的成活率和成功率。试验结果表明，不同的甘蔗品种在热处理时应需不同的水浴温度和时间；在茎尖解剖前，使用75％酒精处理可以减少茎尖培养的污染率；在接种前，将茎尖放到无菌水或者150mg／L的PVP（聚乙烯毗咯烷酮）溶液中浸泡15min可以减少酚污染，PVP还对其生长有促进作用；活性炭的作用有利有弊，需要进一步的研究确定其用量。     

热处理结合茎尖培养技术对不同富士品种脱毒效果研究

以4种富士苹果品种为试材,研究了热处理结合茎尖培养技术对不同富士品种的脱毒效果。结果表明,4种富士的耐热性依次为红将军美乐富士烟富6号2001;随着热处理时间延长,不同富士品种的茎尖成活率和分化率呈下降趋势;热处理结合茎尖培养对苹果锈果类病毒(ASSVd)的脱毒效果最差,对苹果茎痘病毒(ASPV)的脱毒效果最好。热处理30 d为富士组培苗最适热处理时间。     

葡萄试管苗热处理脱毒技术研究

为加快培育葡萄优良品种无病毒苗木,提高脱毒效率,开展了葡萄试管苗热处理脱毒技术研究。将携带葡萄扇叶病毒(GFLV)、葡萄斑点病毒(GFkV)、沙地葡萄茎痘相关病毒(GRSPaV)、葡萄卷叶相关病毒-1(GLRaV-1)和葡萄卷叶相关病毒-2(GLRaV-2)的8个葡萄品种试管苗进行恒温热处理,对分离成活的62个茎尖进行RT-PCR和ELISA检测。结果显示,62个茎尖中,29个茎尖脱除了上述5种病毒,葡萄卷叶相关病毒-1、葡萄斑点病毒、葡萄扇叶病毒、葡萄卷叶相关病毒-2和沙地葡萄茎痘病毒的脱毒率分别为81.8%、80.0%、78.1%、75.0%和61.5%。采用试管苗热处理结合茎尖培养方法可获得良好的脱毒效果,适用于葡萄无病毒原种母本树的培育。     

红实美草莓脱毒技术研究

以感染病毒的红实美草莓为材料.时试管苗热处理脱毒和试管苗热处理后茎尖培养脱毒的成活率和脱毒率效果进行研究.试验结果表明,试管苗热处理后茎尖培养脱毒能显著提高脱毒效果,比试管苗热处理脱毒效果好;其中剥离0.5～0.6 mm的茎尖培养成苗,试管苗0.5～1.0 cm高时40℃(4 h)～250C(20 h)变温处理4周,再次剥离0.5～0.6 mm茎尖培养的脱毒效果最好,成活率85.6%,脱毒率98.8%.     

2种脱毒方法对新疆大蒜脱毒效果比较试验

研究2种脱毒方法对新疆大蒜的脱毒效果,为进一步完善新疆白皮蒜和红皮蒜的脱毒快繁体系提供依据.采用热处理结合茎尖组培、热处理结合气生鳞茎的鳞茎盘组培等方法进行脱毒试验.结果表明,MS培养基添加1.7 mg/L左右的6-BA和0.3 mg/L左右的NAA有利于新疆白皮蒜与红皮蒜的茎尖组织培养.茎尖组织脱毒培养时以0.5 mm大小的茎尖成活率高,脱毒率可达100％.白皮蒜与红皮蒜气生鳞茎的鳞茎盘组培的脱毒率分别为58％～86％和54％～85％.新疆白皮蒜和红皮蒜茎尖组织培养脱毒效果优于气生鳞茎的鳞茎盘组织培养脱毒,茎尖脱毒时剥取茎尖的大小以0.5 mm的脱毒率可达100％,气生鳞茎通过鳞茎盘组织培养也具有一定的脱毒效果,设想可将气生鳞茎与茎尖组培结合起来脱毒,剥取的茎尖大小可以大于0.5 mm,这样可以提高茎尖组织培养的效率而又不影响脱毒率,并且可将生产周期缩短为1～2年.     

不同培养基及附加成分对大樱桃脱毒茎尖初分化的影响

不同培养基及附加成分对大樱桃脱毒茎尖初分化的影响用热处理结合茎尖分生组织培养，对已成话的大樱桃茎尖（长０．２～０．４ｍｍ，带１个叶原基）进行脱毒，然后以ＭＳ和Ｂ５为基本培养基，附加不同浓度的ＩＢＡ、６—ＢＡ及生长抑制剂ＰＰ３３３等诱导茎尖的初分化，每...     

无病毒草莓良种繁育技术体系的建立

利用茎尖分生组织（０．３ｍｍ）培养技术，在ＭＳ附加１．３２μｍｏｌ６－苄基嘌呤的培养基上培养，获得了早美光、矮丰、瑞星、奇妙、北斗和全明星６个草莓品种的无病毒苗。将微体繁殖技术与大田生产相结合，建立了６个草莓品种从无病毒组增“原原种”苗到“生产”用苗的良繁技术体系，年内增殖可达数万倍以上，比传统的热处理脱毒、网室繁育提高了效率。     

大樱桃脱毒苗与普通苗对比观察

大樱桃脱毒苗与普通苗对比观察我们采用热处理结合茎尖分生组织培养，经多次重复后大樱桃脱毒率平均达９８％。１９９４年开始，对大樱桃脱毒苗和普通苗（由脱毒试管苗经温室多次摩擦接种各类病毒）进行了对比观察。大樱桃品种为斯坦勒、萨韦脱和佐藤锦，以２ｍ×３ｍ株行...     

不同培养条件对分蘖洋葱茎尖脱毒效果的影响

为建立高效的分蘖洋葱脱毒体系,以吉林省内不同地区分蘖洋葱品种为试验材料,在建立分蘖洋葱茎尖脱毒体系的基础上,通过热处理温度及处理时间的比较,提高了茎尖剥离的体积,降低了茎尖剥离的难度。结果表明,最佳茎尖启动培养基为MS+NAA 0.1 mg/L+zip 0.4 mg/L,生根培养基为1/2 MS+NAA 0.1mg/L;最佳热处理条件为80℃处理10 min,茎尖大小从原0.1~0.5 mm增大到0.5~1.0 mm;不同品种处理后成活率均在90%以上,脱毒率也均在93.3%以上。