农杆菌介导GFP基因转化苹果茎尖碎片获得转基因植株

【目的】为解决基因型依赖性比较强的苹果品种遗传转化困难等问题,研究不同伤害处理方式下苹果茎尖碎片的再生能力及其对苹果转化率的影响。【方法】以苹果‘姬神’试管苗为试材,运用农杆菌介导法对苹果茎尖和离体叶片进行遗传转化。【结果】将茎尖纵切为4部分时,可以高比率的形成愈伤组织(88.4%)和再生不定芽(59.8%)。在20 mg·L-1的卡那霉素筛选压下,300个茎尖外植体中有50.4%的茎尖碎片形成愈伤组织并获得了19株表达GFP的转基因植株。而在同样的筛选压下有22.6%农杆菌介导的离体叶片形成愈伤组织,但不能获得转基因植株。降低筛选压可以提高植株再生率,但其中包含大量嵌合体,转化效率并没有明显提高。【结论】苹果茎尖做为转化受体基因型依赖性较低,要优于苹果离体叶片。     

热处理结合茎尖培养技术对不同富士品种脱毒效果研究

以4种富士苹果品种为试材,研究了热处理结合茎尖培养技术对不同富士品种的脱毒效果。结果表明,4种富士的耐热性依次为红将军美乐富士烟富6号2001;随着热处理时间延长,不同富士品种的茎尖成活率和分化率呈下降趋势;热处理结合茎尖培养对苹果锈果类病毒(ASSVd)的脱毒效果最差,对苹果茎痘病毒(ASPV)的脱毒效果最好。热处理30 d为富士组培苗最适热处理时间。     

苹果砧木中砧1号茎尖离体保存研究

为了建立苹果砧木中砧1号茎尖离体保存技术,以M9和富士为对照,研究了培养基中添加不同浓度蔗糖或生长抑制剂对试管苗生长速率的影响以及包埋干燥法和玻璃化法预处理对试管苗茎尖超低温保存效果的影响.结果表明,不添加生长抑制剂,蔗糖浓度为20g·L-1时,中砧1号试管苗离体保存效果比较好.常规培养基(蔗糖浓度30 g·L-1)中...     

梨的试管实生苗茎尖培养成植株

目前国内外对苹果矮化砧木离体组织培养已有很多报道。另据国外报道,桔苹实生苗茎尖培养获得了植株。中国科学院植物研究所对国光、红星、金冠、青香蕉、胜利等五种苹果实生苗茎尖培养,得到了国光实生苗茎尖培养完整植株。英国朗、艾什顿研究站罕德逊(Hudson 1977)、     

苹果病毒病研究概况和防治技术

本文通过简述苹果病毒病研究概况,分析苹果病毒病传播方式,包括嫁接、人为或根系传播等,总结苹果病毒病的防治方法,如栽植无病毒苗木、采取农艺措施和药剂防治等,以及利用热处理、茎尖培养、茎尖培养结合热处理、微体嫁接离体培养、化学脱毒和超低温等脱毒技术,旨在促进苹果产业健康可持续发展。     

利用茎尖分生组织繁殖苹果植株

概要苹果(Malus domesfica Bor—kh)植株可由植入培养基中的茎尖分生组织再生,经移植而繁殖。茎尖分生组织外植体初期的生长和发育,仅仅要求培养基含有 BA(苄基腺嘌呤),最适浓度为5×10~(-6)M。移植后,可高频率地生产再生枝条。使用 NAA 浓度为10~(-5)M 的培养基     

烟富8苹果脱毒苗木工厂化育苗技术体系的建立

对苹果砧木M9T337、八棱海棠和烟富8苹果3种材料，通过茎尖培养建立无菌体系，采用剥取茎尖初脱毒、高温钝化脱毒二次茎尖剥离脱毒技术，通过病毒检测后，利用无毒茎尖进行分化增殖培养快速繁殖、生根培养，然后进行温室驯化成穴盘苗。利用温室驯化培养的原始一代脱毒M9T337砧木、烟富8穴盘苗，建立采穗圃，原始一代脱毒八棱海棠和M9T337砧木穴盘苗直接移栽到苗圃，利用脱毒砧木和品种材料，在苗圃嫁接繁育苗木，建立烟富8苹果脱毒苗木工厂化育苗技术体系。同时介绍了脱毒苗苗圃管理和脱毒苗木果园管理注意事项。     

几种苹果砧木和品种茎尖组培苗的培养基筛选试验

几种苹果砧木和品种茎尖组培苗的培养基筛选试验姜淑荣，王际轩，刘志，李博文，谢秀华（辽宁省果树科学研究所熊岳１１５２１４）茎尖组织培养做为快速繁殖的一种手段已广泛应用于苹果的苗木生产中。近年来，富士等十余个苹果品种都已获移栽成活苗（王际轩，１９８１）。...     

静香苹果的茎尖培养

静香苹果的茎尖培养滕人贵，刘丽君，张万春，谷迎春，刘业斌（大连市金州区农科所１１６１００）静香苹果是从日本引进的新品种。为了加速繁殖，我们从１９９０年春季开始了离体茎尖培养，繁耷静香苹果组培苗。经过四年工作，成功地培育出静香“组培”自根苗。１外殖体选...     

苹果砧木茎尖培养玻璃化与内源激素的关系

苹果砧木茎尖培养玻璃化与内源激素的关系牛自勉，王贤萍，许月明，陆军（山西省农业科学院果树研究所，太谷０３０８００；浙江省林业科学研究所，杭州３１００２３）关键词苹果砧木，玻璃化，茎尖培养，内源激素ＴｈｅＲｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎＥｎｄｏｇ...     

茎尖、幼叶和功能叶对苹果枝梢加粗生长的影响

苹果树枝梢的加粗生长,与枝类演化及产量形成关系密切,在育苗上则关系到能否嫁接及苗木质量问题。除环境因子如温度、光照和水分等,对枝梢加粗生长有所影响外,新梢上的附属器官如茎尖、幼叶和功能叶等;对其新梢的增粗生长也具有明显的影响。     

苹果组培苗脱毒试验

热处理是苹果获得无病毒原种材料的有效途径之一。我们研究了不同品种苹果组培苗热处理对褪绿叶斑病毒、茎沟病毒的脱毒率和影响组培苗脱毒的因素 ,现报道如下。(1)材料和方法　分别从经指示植物和血清酶联免疫检测带有褪绿叶斑病毒、茎沟病毒的国光、金晕、秋富 1号、优良短枝、北斗苹果树正在生长的新梢上取茎尖 ,用 70 %酒精处理 4 0秒 ,再用 0 .1%升汞处理 8分钟 ,用无菌蒸馏水冲洗 3～ 4次 ,接种到外植体培养基MS+6 - BA1.5 mg/ L上 ,茎尖正常分化后 ,移入 MS+6 - BA1.2 mg/ L +IAA0 .3mg/ L +蔗糖 30 g/ L+琼脂 7g/ L的分化培…     

提高苹果脱毒效率初试

本试验采用茎尖二次脱毒方法,对艳红等七个苹果品种进行茎尖组培。结果表明:二次脱毒虽取茎尖稍大(0.5～0.7mm),但可提高成活率50％以上,降低污染率在10％以下,明显提高繁殖效率,并且操作简便,易于掌握。     

果树通过茎尖培养无病毒苗

果树等木本植物茎尖培养的研究比草本植物要晚,在60年代开始,70年代有所进展。近几年才逐渐应用到苹果、悬钩子、樱桃、葡萄上。木本植物茎尖培养比较困难,其原因很多,但最主要的原因是未能掌握茎尖对养分的需求,特别是对激素的需求。     

两类生态型区苹果器官内源激素含量及生长发育的变化

采用酶联免疫法（ＥＬＩＳＡ）测定了南亚热带干热多日照河谷（Ｅ１）和北亚热带湿热少日照河谷（Ｅ２）两类生态型区的金冠苹果７种器官内源激素ＩＡＡ、ＧＡ、ＺＲ、ＡＢＡ含量和不同生长时期叶片各激素的含量变化。结果表明，Ｅ２型区苹果茎尖和叶片ＩＡＡ、ＧＡ、ＺＲ含量，幼叶和芽的ＧＡ含量以及伸长中的茎、幼叶、叶、根的ＺＲ含量均显著高于Ｅ１型区，而各器官ＡＢＡ含量则显著低于Ｅ１。两类生态型区苹果的生长结果状况也呈现相应的变化。     

苹果离体茎尖超低温保存方法的比较

 以苹果离体茎尖为试材，对4种超低温保存方法(两步降温法、玻璃化法、包埋干燥法和小滴冰冻法)从操作程序、存活率、再生率及恢复生长速度等方面进行比较，确定包埋干燥法为最佳保存方法。     

梨树苹果茎沟病毒的脱毒技术研究

１９９３—１９９６年,采用热处理材料茎尖培养及试管苗热处理方法,对１３个梨品种及矮化砧材料进行苹果茎沟病毒脱毒试验的结果表明,二者对茎沟病毒的脱除率分别较单纯茎尖培养高５７．０％和６２．４％。脱毒苗生根率和移栽成活率分别达７０％和８０％。     

苹果离体繁殖过程中玻璃化苗的发生及其特性的初步研究

<正> 利用植物组织培养技术进行苗木工厂化生产在很多国家已经成为一种新兴的产业。苹果属植物茎尖培养的研究已有许多报道。为了加速苹果优良品种“长富-2”和楸子砧木的离体繁殖,我们于1985～1987年利用茎尖培养进行了离体繁殖的研究。但在增殖阶段常出现一种异常现象——玻璃化现象(Vitrification),在有     

苹果和梨树茎尖培养结合热处理脱病毒研究

1995～2000年,以18个苹果品种和15梨品种为试材,以茎尖培养结合热处理进行脱毒研究.用酶联免疫吸附法检测结果表明,苹果茎沟病毒和褪绿叶斑病毒脱毒率可分别达到75%以上和100%.现已获得16个苹果品种和6个梨品种的无病毒母本树.     

苹果资源离体条件下保存效果

对苹果试管苗离体保存研究表明;在室温条件下,通过提高培养基中碳源的浓度或改变碳源种类,以及增养基中添加生长抑制物质等,试管苗可离体保存至８个月。在低温条件下,试管苗的生长明显受到抑制,并进一步延长了其保存周期。而在超低温条件下,茎尖的生长完全受到抑制,可实现种质资源的长期保存。