山苍子繁殖材料外植体防褐变技术研究

分别从外植体处理和在培养基中加入褐变抑制剂两方面,进行山苍子外植体防褐变处理技术研究。研究结果表明,外植体冷处理有一定的降低褐变率的效果。接种前外植体在5℃下冷处理15 h的效果最好,褐变率降低11.67%;接种前在1 g/L PVP溶液中切割外植体也能减轻褐变,褐变率降低10%;接种前在无菌水中切割外植体,褐变率降低3.34%;在培养基中添加不同的褐变抑制剂,AC控制褐变的效果最好。在培养基中添加0.5 g/L AC时,褐变率降低18.89%,能够较好地控制山苍子外植体的褐变。     

阿月浑子外植体褐变抑制方法

外植体褐变是阿月浑子组培的主要障碍之一。对阿月浑子外植体母树年龄、遮光、外植体枝条部位与采集季节、组培条件、添加剂以及多酚氧化酶活性等与外植体褐变的关系进行了研究,结果表明,阿月浑子外植体的褐变率夏季最高、秋季其次、春季最低,枝条中部最低,而枝条上端最高,1年生与7年生树褐变率差异不大,与母树是否遮光关系不明显,在培养基中添加抑制剂PVP能减轻褐变,而添加维生素C、Na2S2O3与活性碳的效果不显著,低光和低温对控制外植体褐变有显著效果,但从低温下转入常温后褐变率高于一直在常温下培养的,阿月浑子褐变率与多酚氧化酶活性关系不显著,可能主要决定于外植体多酚含量,但需要进一步实验数据支持。     

儿茶素对蝴蝶兰叶片离体培养褐变发生的影响

用0.3 g/L儿茶素处理蝴蝶兰叶片外植体,在MS+3 mg/L 6-BA(pH 5.8)培养基上培养4 d,外植体褐变率高于对照227.6%.用香草醛-盐酸溶液染色反应法发现鞣质分布在维管束和细胞间隙.叶片剪切的外植体(培养0 d)鞣质含量较高,培养4 d降低,8 d后再升高.儿茶素处理的外植体鞣质含量明显高于对照.在培养期间,儿茶素处理的外植体PPO、POD和PAL活性高于对照外植体,其中POD活性在第8天达到最大值,PPO和PAL活性在培养第12天达到高峰.     

蝴蝶兰叶外植体发生褐变超微细胞结构和酚类物质分布观察

观察蝴蝶兰叶外植体发生褐变后的细胞亚显微结构发现,细胞膜以及细胞壁扭曲变形甚至断裂,细胞壁降解严重,集聚大量黑色颗粒物质,细胞内出现黑色絮状物质,叶绿体结构破坏。Pauly试剂和亚硝酸钠溶液染色结果表明:褐变外植体存在有较多酚类物质,染色较深。以上结果说明,外植体在褐变过程中,细胞膜完整性被破坏,酚类含量增加促进褐变。     

银叶杜鹃组织培养抑制褐变研究

以3年生银叶杜鹃为供试材料,研究不同外植体、培养条件、培养基质以及抗褐化剂等对银叶杜鹃褐变的影响。结果表明:生长旺盛季节选取幼嫩组织作为外植体的褐变程度较轻,适宜的培养条件能显著减轻褐变;在培养基中添加0.5g/L活性炭,能有效抑制银叶杜鹃在组织培养过程中的褐化现象,培养物能正常生长发育。     

洋兰组培快繁褐变抑制因子探讨

兰科植物在组培快繁时,存在着易褐变死亡的问题.在培养基中添加1～2g/L活性碳,适时切除培养物的褐化部分及时更换新鲜培养基,能有效地抑制褐变死亡的发生.培养基中加入10%椰子水,采用适宜的培养温度,能促进原球茎的生长,减少原球茎增殖过程中的褐变.采用大花蕙兰幼嫩花梗做外植体,在诱导培养基中添加NAA,有利于防止外植体褐化,降低外植体的褐变率.     

龙眼组织培养褐变抑制研究

由于龙眼富含多酚化合物，在组培中褐变非常严重，接种后6小时就开始褐变，导致外植体死亡，难以建立无性繁殖体系，限制了龙眼的组培快速繁殖。本试验主要从抗氧化剂的使用和取材等方面对组培中抑制龙眼褐变进行了研究。     

蝴蝶兰外植体褐变发生与总酚含量、PPO、POD和PAL的关系

 蝴蝶兰外植体在褐变发生前期PPO和POD活力皆升高, 褐变发生后酶活力下降。同工酶谱分析发现, 培养0 d的蝴蝶兰外植体PPO没有酶带出现, 而POD有1条弱带。离体培养2 d POD出现3条酶带, 第4天有新酶带Ⅰ发生, 随后消失, 其余3条带, 随培养天数的延长, 酶带活性渐弱。PPO同工酶谱在培养2 d出现3条酶带, 迁移率为0128的酶带Ⅲ在培养4 d活性较强, 随后3条酶带减弱。总酚含量和PAL活力随外植体褐变增强而逐渐增加, 两者呈现极显著正相关。     

温度及光照条件对中华红叶杨外植体褐变的影响

以中华红叶杨茎段为外植体,研究了温度及光照条件对其褐变的影响。结果表明:外植体低温预处理与简单培养基培养相结合,抑制褐化效果好;培养初期进行暗培养能有效降低褐化率,以暗培养10d为宜;温度对褐化率也有影响,在一定范围内,温度越高,褐化越严重,低温可较好地减轻褐化;光照强度1 000~3 000lx对褐化率的影响不大。     

抗褐变剂对阿月浑子外植体褐变以及几种酶活性的影响

为了探明阿月浑子组织培养过程中的褐变机制,以阿月浑子组培丛生芽为外植体,在其继代培养基(1/2DKW)中分别添加抗褐变剂PVP和Cys,分析组培苗叶片、茎段和愈伤组织的总酚含量以及PPO、POD、PAL、C4H酶活性的变化,研究其与褐变的关系。结果表明,在一个继代培养周期内,愈伤组织中PPO活性呈增加趋势,而叶片和茎中PPO活性呈"V"字形变化。POD活性随继代时间增长而逐渐升高,继代28 d后开始下降,愈伤组织中POD活性变化范围较叶片和茎段中要高一个数量级。PAL活性总体呈下降趋势,而C4H酶活性在继代前期上升,继代14 d或21 d后下降。结合相关性分析可知,阿月浑子各组织的总酚含量与褐变率呈显著正相关,并且POD酶在促褐变反应中发挥主要作用。在实验中发现,PVP与Cys虽然对POD、PPO、CH4酶活性也有一定影响,但其主要是通过抑制PAL的酶活性,显著减少了组培苗和愈伤组织的酚类物质含量,从而降低褐变率。     

酚类物质与蝴蝶兰褐变关系初探

 利用高效液相色谱法对3个褐化程度不同的蝴蝶兰品种A1 (大白花红心) 、B3 (迷你型白花黄心) 和R4 (深红花红心) 进行了9种酚酸定性定量分析, 并研究了以叶片为外植体的初代培养过程中总酚含量的动态变化。结果表明: 绿原酸、邻苯二酚、儿茶酚、咖啡酸及没食子酸、对羟基苯甲酸、香豆酸可能与蝴蝶兰褐变相关, 苯甲酸对蝴蝶兰褐变影响很小; 在褐变过程中, 总酚含量越高, 褐变程度越严重。     

红掌组织培养过程中外植体褐变的研究

在红掌组织培养过程中,外植体易发生褐变,严重阻碍了红掌组织培养的正常进行。现以红掌‘红粉佳人’(Anthuriumandraeanum cv.Sonate)品种为试材,取健康植株幼嫩叶片为外植体,对其愈伤组织培养过程中褐变现象进行研究。研究不同抗氧化剂、吸附剂(柠檬酸、抗坏血酸VC、叶酸、聚乙烯吡咯烷酮PVP、活性碳AC)以及不同培养基硬度的防褐化效果。结果表明:使用硬度为5 g/L琼脂的MS培养基,并添加6-BA1.0 mg/L+2,4-D0.2 mg/L+聚乙烯吡咯烷酮(PVP)0.2%可有效控制褐变并获得较高的愈伤诱导率。     

‘薄壳香’核桃组培中的褐化及防止措施研究

 以‘薄壳香’核桃为试验材料, 对其组织培养过程中褐化的发生及防止措施作了探讨。结果证明: 褐化发生程度与培养温度、培养基中激素浓度和无机盐含量、外植体本身的生理状态等因素有关;较高培养温度、培养基中较高浓度无机盐、较高浓度激素及木质化程度高的外植体都会促进褐化的发生;培养基中加入抗氧化剂会抑制褐化的发生。     

热激处理抑制牛蒡鲜切片褐变的研究

 研究了热激处理对鲜切牛蒡褐变的影响及其抑制褐变的机理。结果表明,切后50 ℃ 6 min,55 ℃ 3 min和切前50 ℃ 10 min 3种不同热激处理均较好地抑制了贮藏期间鲜切牛蒡的褐变。在1 ℃,未经处理的对照3 d就明显褐变。热激处理的牛蒡贮藏至12 d仍具有较好的色泽,且失水程度明显低于对照,感官品质明显好于对照。热激处理抑制了苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性、总酚含量和呼吸速率的上升,是其延缓褐变的主要原因。     

鸭梨果心褐变过程中膜质过氧化及细胞内膜微粘度的变化

采用急降温和缓降温两种方法处理鸭梨果实，并对冷藏中果心褐变指数、保护酶活性、膜质过氧化水平和细胞内膜微粘度进行测定。结果表明：急降温处理的果实约３０天果心出现褐变症状，６０天后褐变指数达到１００％，而缓降温处理的果实在贮藏中无褐变产生。在６０天的贮藏过程中，急降温处理的果实果心组织的超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、过氧化物酶（ＰＯＤ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）活性均呈下降趋势，丙二醛（ＭＤＡ）水平和细胞内膜微粘度则显著升高。缓降温果实果心组织中ＳＯＤ、ＰＯＤ活性呈上升趋势，ＣＡＴ活性虽呈下降趋势，但下降水平明显低于急降温处理。ＭＤＡ水平及细胞内膜微粘度的上升率明显低于急降温处理组。实验结果说明：急降温处理导致果心细胞膜质过氧化作用加剧，同时造成细胞内膜流动性下降，从而造成细胞膜系统组分及功能发生变化，导致细胞中区域化分布被打破，造成果实组织褐变。     

降低苹果梨组培过程中外植体褐化的研究

为克服苹果梨组织培养过程中外植体的褐变现象,提高试验材料的成活率,试验以苹果梨1 a生营养枝嫩梢为试材,通过不同培养基配方、不同药剂处理及水培处理,探讨降低苹果梨外植体褐变的影响因素.结果表明:1/3 MS培养基中的外植体成活率较高;液体培养基较固体培养基对降低外植体的褐变的效果好;水培处理可有效降低外植体的褐变率;生长季节取材,随外植体木质化程度的加深,随水培期的延长,外植体的褐变率呈现先降低后上升的趋势,水培4 d 处理的外植体成活率最高;最佳取材时期为盛花后期,将材料水培6 d,在1/3 MS 6-BA 1.0 mg/L IBA 0.2 mg/L Vc 75 mg/L中获得83.3%的外植体成活率.     

秦岭野生春兰组织培养过程中的褐化控制研究

以秦岭野生春兰为材料,选花梗和花萼作为外植体,以1/2MS作为基本培养基,运用L9(34)正交实验研究处理对褐化的影响。结果表明:处理4是控制春兰外植体褐化的最佳的方法,即1/2MS+活性炭(AC)1 g/L+PVP 5 g/L+暗培养10 d。     

花盖王梨果实抗褐变机理研究

对花盖王果实中与褐变有关的多个因素进行了研究,结果表明:花盖王的果实与花盖梨相比,果实中的保护酶(超氧化物歧化酶SOD和过氧化氢酶CAT)活性高,非酶类保护物质(维生素C和GSH)含量高,酚氧化酶的活性很弱,酚类物质含量低,这4个因素导致了花盖王果实具有较强的抗褐变性能。     

蝴蝶兰外植体酚类物质和活性氧代谢与组培褐变的关系

（1Institute of Vegetables and Flowers,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Beijing 100081,China;2College of Horticulture and Landscape Architecture,Southwest University,Chongqing 400716,China）