泡桐丛枝病检测试剂盒的研制和应用

在进行引物筛选、DNA提取和试剂筛选的基础上 ,合成了高严谨的巢式 PCR检测试剂盒。该文对构成试剂盒的各种影响因素进行了分析 ,给出了详尽的试剂盒使用步骤和注意事项 ,可为有关泡桐丛枝病的研究和应用提供参考     

“松材线虫SCAR标记与系列分子检测技术及试剂盒研制”项目通过鉴定

2006年5月，由南京林业大学森林资源与环境学院叶建仁教授主持完成的“松材线虫SCAR标记与系列分子检测技术及试剂盒研制”通过了江苏省科技厅组织的科技成果鉴定。该项研究对松材线虫与拟松材线虫特异片段进行了系统筛选，共获得了7个松材线虫DNA特异片段与5个拟松材线虫DNA特异片段，为松材线虫与拟松材线虫的分子鉴定奠定了基础。首次将2个松材线虫与2个拟松材线虫的DNA特异片段成功转化为SCAR标记，丰富了松材线虫与拟松材线虫分子标记方法。首次采用SCAR标记方法成功构建了松材线虫检测试剂盒，PCR检测过程仅需2．2小时。首次成功标记了一个可用于检测松材线虫的非放射性探针DIG-F2／R1。用该探针对线虫基因组DNA点杂交，松材线虫均表现有较强的杂交信号，而拟松材线虫、霍夫曼尼伞滑刃线虫、大核滑刃线虫、长尾属线虫等均无杂交信号。     

乙型肝炎病毒检测试剂盒

由深圳益生堂生物企业有限公司等单位联合研制的基于基冈芯片的“乙型肝炎病毒核酸及拉米呋啶耐药检测试剂盒”，获得了国家食品药品监督管理局颁发的新药证书和生产号。该试剂盒的研制成功，标志着我国个体化医疗检测试剂进入实用阶段。     

适合转录组测序的芒果不同组织RNA试剂盒提取方法研究

为了探寻能够满足芒果各组织转录组测序要求的高质量RNA提取方法,以‘桂热芒82号’的叶片、花和果实为材料,从RNA提取质量和产率、琼脂糖电泳和RT-PCR结果分析、RNA测序质量评价这3个方面,对常用的3种试剂盒的提取效果进行了实验研究和评价分析。结果表明:以来自于天根生化科技有限公司的DP 419试剂盒提取的芒果各组织的RNA质量均较好,提取的RNA产率远高于其余两种试剂盒的提取产率;除以美伯生物医药技术有限公司的RM 103试剂盒提取芒果各组织所得RNA,经琼脂糖电泳未见有5S条带出现外,以其余两种试剂盒提取的芒果各组织的RNA都存在28S、18S、5S条带且RT-PCR分析结果理想;对以3种试剂盒提取所得的RNA进行完全测序,结果表明,3种试剂盒提取的RNA完全测序都大于98.99%,能满足RNA-Seq分析的要求。文中综合上述评判因素分析认为,天根生化科技有限公司的DP 419试剂盒是适用于芒果叶片、花和果实RNA提取的最优试剂盒。     

3种方法提取菠萝蜜叶片和种子总RNA的比较

为了筛选最适的菠萝蜜总RNA提取方法,采用Trizol提取法、Tris-硼酸提取法和试剂盒提取法提取菠萝蜜叶片和种子总RNA,通过紫外分光光度计检测、琼脂糖凝胶电泳、RT-PCR检测以及Agilent2100检测,对提取结果进行比较分析。结果表明:采用这3种方法均能从菠萝蜜叶片和种子中提取到总RNA,Tris-硼酸提取法较其他2种方法所提取的总RNA产率高,但杂质较多;采用Tris-硼酸提取法能提取完整性较好的总RNA,28S、18S和5S清晰可见,但提取质量较试剂盒提取法差;试剂盒提取法省时省力,有明显的28S和18S条带,A260/A280分布在1.92~1.98,A260/A230分布在2.04~2.09,叶片总RNA产率42.3ng/μL,种子总RNA产率15.6ng/μL。RT-PCR检测结果表明在约200bp处存在清晰整洁的电泳条带,Agilent2100检测结果显示杂峰极少,28S峰积分面积约是18S峰积分面积的2倍。经综合评定认为,试剂盒提取法是适合菠萝蜜叶片和种子总RNA提取的方法。     

适于转录组测序的枣不同器官总RNA提取方法筛选

为获得适用于转录组测序的枣花、结果枝和果实的总RNA提取方法,以中秋酥脆枣为材料,比较分析了Ambiogen和Autolab 2种总RNA提取试剂盒和基于Autolab试剂盒改良的CTAB法的总RNA的提取效果。结果表明:3种方法提取RNA的OD260/OD280差别不大,但用2种试剂盒提取的RNA有降解,其中Ambiogen试剂盒提取的花、结果枝和果实3个器官的RNA质量浓度分别为126、284和222 ng/μL;Autolab试剂盒提取的RNA质量浓度分别为307、402和266 ng/μL;基于Autolab试剂盒改良的CTAB法提取的RNA质量浓度分别为401、417和296 ng/μL。与2种试剂盒相比,基于Autolab试剂盒改良的CTAB法提取出来的RNA完整性好、纯度和浓度高,能够满足转录组测序的要求。     

龙利的组织培养

多年来，我们进行了龙利组织培养营养基的优化基筛选，研究结果认为，利用MS基幼苗长势较好，在此基础上我们又进行激素种类等的对比试验，从而初步筛选为适宜的分生培养基和生根培养基。     

枣花蕾总RNA提取方法的比较

为了探究枣花蕾总RNA提取的最优方法,以沾化冬枣的花蕾为材料,利用改良CTAB法、Trizol法和2种RNA提取试剂盒(PureLinkTMRNA小提试剂盒和北京奥莱博生物技术有限公司提供的植物RNA提取试剂盒)分别提取花蕾的总RNA,并对RNA浓度和电泳图谱进行比较分析,利用奥莱博生物技术有限公司提供的植物RNA提取试剂盒法可提取到纯度较高,完整性好的总RNA,并可用于Northern杂交、cDNA文库构建和半定量RT-PCR等分子生物学试验。     

刺五加AFLP分子标记技术体系的建立

用改良的的试剂盒法提取刺五加叶片的基因组DNA,可以获得高质量的刺五加基因组DNA,DNA降解较少、污染低、电泳条带清晰,可以用于PCR扩增反应,可以被内切酶EcoRⅠ和MseI彻底消化。通过优化酶切反应、引物连接、预扩增、选择扩增,建立了优化的刺五加AFLP分析技术体系,从64对引物中筛选到5对高效扩增引物,并利用这5对引物在6个刺五加种源中获得了89个多态性AFLP分子标记。建立了利用红外荧光检测技术和Li-Cor4300DNA分析系统,进行刺五加AFLP分析的分子标记技术。     

平邑甜茶基因组DNA提取方法的比较

为获得高质量的基因组DNA,以平邑甜茶及其与扎矮山定子杂交所得四倍性矮生后代33#、45#新鲜叶片为试材,分别采用常规CTAB法、改良的CTAB法和基因组试剂盒法提取平邑甜茶总DNA,进行琼脂糖凝胶电泳,使用核酸蛋白仪对DNA质量和纯度进行检测。结果表明:利用基因组试剂盒法、常规CTAB法和改良CTAB法均可获得DNA,但获得的DNA质量和纯度存在一定的差异。试剂盒法和CTAB法可以获得较高质量的DNA。但由于基因组试剂盒法成本相对较高,改良CTAB法较耗时,建议采用常规CTAB法提取平邑甜茶及其杂交后代33#、45#品种基因组DNA。     

果树的抗病性研究进展

筛选抗病性果树资源，可以为生产提供经济适用的品种，为育种提供抗性基因。为此，果树和植保工作者为果树的抗病性进行了深入的研究，并取得了一定进展。本文综述了国内外在果树的抗病机制、抗病资源筛选、抗病育种等方面的进展，并对此项研究上的局限性及展望提出了建议。     

柠檬黑星病防治技术试验

本文对安岳柠檬黑星病病原、初侵染时间及发病规律进行了调查研究．为确定该病防治时间提供了依据：同时，对柠檬黑星病防治技术和药剂进行了筛选．并筛选出了L（自配药剂，主要成分代森锰锌，三唑酮）、B（百果灵）、XD（仙生与大生的组合）等三种可供生产中轮换使用的药剂种类。     

沙棘定向培育的试验研究

在内蒙古克什克腾旗对引进和选优的沙棘品种进行了13年的区域性试验，筛选出无刺、高V-C型、高氨基酸型、大果等10个有较高经济价值的沙棘优良类型，在筛选的基础上，结合生化测定，在不同立地条件下，定向栽培，推广面积达3000hm^2。     

试剂盒法提取山杨基因组DNA的条件优化

利用DNA提取试剂盒提取山杨叶片DNA,对其过程进行改良优化,从而获得一种快速、简便的提取山杨高质量基因组DNA的方法.在原试剂盒的操作基础上,对异丙醇是否冰预冷、消化时间、洗脱液用量、材料用量等条件进行了优化,并对所提取的基因组DNA的浓度、纯度进行了检测.优化后的方法提取到了较高质量的山杨基因组DNA.     

观花乔木树种在沈阳街路推广与应用

通过对沈阳市街路栽植的观花乔木现状分析，确定了观花乔木的引种与筛选的原则。对初选出的近30种观花乔木进行了各种观测试验，基本摸清了这些观花乔木的生物学特性和生态习性；通过应用栽培试验，筛选出栾树、香花槐、红肉苹果、暴马丁香等26种优良观花乔木树种；列出了适合沈阳街路栽植的观花乔木树种名录；并进行了推荐。     

草珊瑚叶片总RNA提取方法及效果的比较研究

采用CTAB法、CTAB-Li Cl法、CTAB-Trizol法、Trizol法、天根RNA提取试剂盒及百泰克RNA提取试剂盒提取草珊瑚(Sarcandra glabra)叶片总RNA,并通过微量紫外分光光度计、电泳检测等对提取的结果进行了分析比较。结果表明:CTAB-LiCl法和天根RNA提取试剂盒比较适合提取草珊瑚叶片的总RNA。这两种方法提取的总RNA的完整性和纯度较高,无明显的蛋白质及其他杂质污染,OD_(260)/OD_(280)的值在1.9~2.1,OD260/OD230在2.0~2.4。获得质量高、完整性好、纯度高的总RNA,为后续构建cDNA文库以及相关基因的克隆提供了试验基础。     

天女木兰不同组织总RNA提取方法的筛选与优化

试验以天女木兰叶芽、幼叶、成熟叶、花芽、花瓣、种子为材料,分别采用Trizol法、改良Trizol法、CTAB-异丙醇法、CTAB-Na Ac和无水乙醇法、CTAB-Li Cl法、天根试剂盒法对其各器官进行总RNA的提取。总RNA的完整性、纯度和浓度等提取效果分别通过琼脂糖凝胶电泳和酶标仪进行检测。结果表明:叶芽的总RNA最适合用改良Trizol法进行提取,花瓣和花芽的总RNA最适合用改良的CTAB法提取,幼叶的总RNA可选择试剂盒法,Trizol可用于成龄叶片的提取,而天根试剂盒最适合天女木兰种子总RNA的提取。通过不同提取方法获得的高质量总RNA经RT-PCR检测表明:可以直接用于后续分子克隆和基因表达分析等分子生物学实验。     

槭属树种DNA提取方法比较研究

采用3种DNA提取方法对8种槭属树种基因组DNA进行质量、浓度和纯度对比研究,结果表明,3种方法提取的基因组DNA差异较大,浓度由高到低依次为改良CTAB法TIANGEN试剂盒法改良SDS法;提取的基因组DNA纯度为TIANGEN试剂盒法CTAB法SDS法。3种方法中TIANGEN试剂盒法提取的槭属树种基因组DNA含有的杂质最少,但成本较高;改良CTAB法提取的基因组DNA质量、浓度和纯度均优于改良SDS方法,适用于槭属树种的后续研究。     

对雷州林业局建立林种树种结构优化问题的探讨

作者运用系统工程原理，对雷州林业局现栽培树种进行筛选和定位，并经系统诊断、分析和综合后，建立了林种树种结构优化模型，为该局的营林生产提供了科学指导。     

论离心机在工业污水处理中的应用

从离心机工作原理出发，根据工业污水处理的实际情况，对污水处理中离心机的种类、筛选原则及应用等进行了分析和探讨，以期提供参考。