‘凤丹’子叶愈伤组织诱导及分化研究

研究了层积时间对‘凤丹’胚萌发的影响,并探讨了基本培养基、植物激素等因素对子叶愈伤组织的诱导及不定芽分化的影响。结果表明:40d层积时间对胚萌发的效果最好,MS+Ca2++2mg/L2,4-D+30g/L蔗糖是胚诱导愈伤组织的最佳培养基,诱导率85%;MS+Ca2++1.5mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+20g/L蔗糖是诱导不定芽发生的最佳培养基;不定芽高约1.5cm转入生根培养基,生根率可达80.7%。     

南蛇藤愈伤组织的诱导和植株再生

以南蛇藤无菌苗子叶、上胚轴及幼根为材料,比较研究不同激素配比条件下不同外植体愈伤组织的诱导、分化及植株再生。结果表明:上胚轴是诱导产生胚性愈伤组织的最佳外植体;愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA(0.5mg/L)+NAA(0.5¹.0mg/L);愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA(0.5mg/L)和MS+6-BA(2.0mg/L)+IBA(0.11.0mg/L);愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA(0.5mg/L)和MS+6-BA(2.0mg/L)+IBA(0.1⁰.5mg/L);芽增殖最佳培养基为MS+6-BA(1.00.5mg/L);芽增殖最佳培养基为MS+6-BA(1.0².0mg/L)+NAA(0.1mg/L),增殖系数平均达7.05;最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.1mg/L,生根率达88%。     

北五味子组织培养研究

通过对北五味子(Schisandra chinensis)不同外植体诱导愈伤组织,进行不定芽分化、生根培养基优化筛选。结果表明:选用嫩叶作为外植体诱导愈伤组织的效果较好;培养基MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.2mg/L+NAA2.0mg/L为不定芽的分化最佳培养基组合,分化倍数可达4.7;生根阶段最适培养基为1/4MS+6-BA1.0mg/L+NAA1.0mg/L+活性炭0.5g/L,生根率为89.13%,平均根长为3.1cm。     

短柄五加愈伤组织诱导及再生体系的建立

以短柄五加(Acanthopanax brachypus Harms)当年生嫩枝为材料,选择叶片、叶柄为外植体,使用6-BA、NAA、IBA、2,4-D等激素,配制成不同质量浓度的培养基,进行短柄五加愈伤组织诱导,同时分析愈伤组织诱导丛生芽和丛生芽增殖培养基的最佳配方,建立短柄五加植株的再生体系。结果表明,短柄五加叶片是较适宜诱导愈伤组织的外植体,愈伤组织诱导的培养基是MS+0.3mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA,诱导率为75.0%;愈伤组织诱导不定芽形成的适宜培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L,不定芽诱导率为100%;适宜不定芽增殖的培养基为MS+6-BA3.0mg/L+NAA 0.2mg/L,增殖系数为5.80;同时活性炭能够有效防止愈伤组织诱导过程中的褐化问题。     

紫苏组织培养的研究

以紫苏为材料,通过对其子叶、下胚轴、幼嫩叶片最佳外植体的筛选、愈伤组织诱导、不定芽分化及生根培养,建立紫苏的离体培养再生体系,为紫苏种质资源保存及快速繁殖提供理论依据和技术支撑。结果表明:紫苏种子萌发最佳培养基MS培养基;最佳消毒方法为0.1%升汞消毒8 min。此时种子萌发率最高达96%。离体培养最佳外植体为叶片。紫苏叶片和子叶诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+6-BA3.0 mg/L+NAA0.3mg/L,诱导率分别为97.5%和91.7%;愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,叶片优于子叶。最佳生根培养基为1/2MS+NAA0.1 mg/L,生根率为100%。     

丹红杨愈伤组织诱导与器官再生的影响因子分析

采用正交设计,首次建立了丹红杨离体培养技术体系.结果表明:丹红杨叶片最佳胚性愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D0.20 mg/L+6-BA1.00 mg/L,诱导率为57.50%;叶柄、无芽茎段最佳胚性愈伤组织培养基诱导为MS+6-BA0.30～0.80 mg/L+ZT0.30～0.80 mg/L+NAA0.02～0.05 mg/L,诱导率为82.26%;根最佳胚性愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA1.00 mg/L+KT0.50～1.00 mg/L+NAA0.50～1.00 mg/L.胚性愈伤组织增殖最佳培养基为MS+BR0.10 mg/L+NAA 0.10 mg/L.胚性愈伤组织分化不定芽最佳培养基为WPM+6-BA0.20 mg/L+TDZ0.001～0.003 mg/L+KT0.50 mg/L+NAA0.05～0.10 mg/L.     

紫娇花组织培养中愈伤组织的诱导及植株再生

紫娇花种子经灭菌处理后,于试管内培养基中萌发,取幼苗的下胚轴、子叶,进行愈伤组织的诱导、不定芽的分化及试管苗生根技术的研究。结果显示,紫娇花种子最佳灭菌方式为0.1%升汞浸泡10 min,污染率可控制在37.0%,萌芽率达到86.3%;愈伤组织最适诱导部位为下胚轴,愈伤组织诱导最佳培养基为MS+0.2 mg/L 6-BA+2.0 mg/L 2,4-D,诱导率达到83.7%;紫娇花不定芽分化的最适培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,不定芽分化率为48.0%;最适生根培养基为1/4 MS+0.1 mg/L NAA+0.5%AC,生根率可接近100%。     

朱顶红愈伤组织诱导及增殖发育体系的建立及优化

以朱顶红带有小鳞茎的试管苗作为外植体,进行愈伤组织的诱导、增殖及不定芽分化研究,结果表明:诱导愈伤组织形成的最佳培养基为MS+2,4-D 2.0mg/L+6-BA1.0mg/L+KT2.0mg/L。愈伤组织增殖需要的最佳2,4-D 2.0mg/L浓度为1.0mg/L,促进不定芽分化及植株再生的6-BA浓度为0.5mg/L。     

黑荆树愈伤组织诱导、增殖与分化

以黑荆树叶片为外植体,MS培养基为基本培养基,研究了外源激素对愈伤组织诱导、增殖及分化的影响。结果表明:外源激素6-BA与IBA组合、6-BA与2,4-D组合、TDZ与IBA组合均可诱导愈伤组织,但诱导率差异达极显著水平;不同外源激素组合上诱导的愈伤组织,其增长率为165.21%~208.53%,其中以6-BA与IBA组合的增长率最大;在添加TDZ与IBA的培养基上易分化出不定芽,但不同培养基上诱导的愈伤组织对不定芽的分化率和芽的生长影响达极显著差异。综合考虑,筛选适宜愈伤组织诱导、增殖培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.5mg/L IBA,诱导率为43.36%,平均增量和增长率分别为1.04 g和208.53%;最适宜继代时间为18~21 d;最适宜愈伤组织分化培养基为MS+0.05 mg/L TDZ+0.2 mg/L IBA,分化率为51.85%,每块愈伤组织上分化5~8个芽点。     

葡萄柚品种哈路比叶片离体再生体系的优化

为给葡萄柚的大规模育苗提供方法,以葡萄柚品种哈路比的叶片为外植体,在MS培养基中添加不同浓度配比的激素,探索其离体再生的优化体系。试验结果如下:培养基为MS+0.6 mg/L 6-BA+1.0 mg/L 2,4-D愈伤组织诱导率最高为78.57%,愈伤组织呈黄绿色,结构疏松,长势良好;MS+3.0 mg/L 6-BA+1.5 mg/L NAA是诱导愈伤组织分化不定芽的最佳培养基激素浓度配比,分化率最高为48%,不定芽分化快,长势良好;培养基MS+2.0 mg/L IBA有利于诱导生根,生根率达60.74%。初步建立了葡萄柚哈路比的离体再生体系。     

窄冠白杨3号组培与快繁技术研究

以窄冠白杨3号单芽茎段为实验材料,对适合芽分化、生根的培养基进行了研究,结果表明,愈伤组织诱导最佳培养基为MS+6-BA1.0mg/L+2,4-D4.0 mg/L,诱导芽分化最佳培养基为MS+6-BA0.3mg/L+ZT0.25mg/L+IAA0.25mg/L,最佳生根培养基为MS+6-BA0.01mg/L+IBA0.5mg/L+NAA0.1mg/L。     

三角梅愈伤组织诱导和植株再生

以三角梅(Bougainvillea glabra choisy.)当年生枝条为材料,比较研究不同激素配比条件下外植体愈伤组织的诱导及植株再生。结果表明:三角梅茎段在MS+6-BA 0.3mg/L+NAA 0.05mg/L培养基上,可诱导出愈伤组织,愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L,经再分化可获得无性系芽,继而产生丛生芽;将高度大于3cm的增殖芽接种于添加1/2MS+IAA 1.0mg/L培养基上可诱导产生不定根,生根率高达50%。生根后移栽成活,获得完整再生植株。     

黑荆树不同外植体愈伤组织诱导与芽分化的研究

为建立高效的黑荆树快速繁殖体系,以黑荆树叶片、茎段和下胚轴为外植体,在添加不同植物生长调节剂的MS培养基上进行了愈伤组织的诱导和不定芽的分化研究。结果表明:综合最高诱导率结果和愈伤组织的生长状况,外植体的愈伤组织诱导能力顺序为叶片(44.83%)下胚轴(36.35%)茎段(30.05%);愈伤组织诱导最佳培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.005 mg/L TDZ+1.0 mg/L IBA。叶片和下胚轴所诱导的愈伤组织均可分化出不定芽,但芽诱导率差异达极显著水平;不定芽分化最佳培养基为MS+0.01 mg/L TDZ+0.2 mg/L IBA,叶片愈伤组织的芽分化率最高可达32.60%。     

四倍体楸叶泡桐体外植株再生系统建立

将楸叶泡桐四倍体的叶片和叶柄分别置于含有不同质量浓度的6-BA(6～20 mg/L)和NAA(0.1～1.1 mg/L)的组合培养基上诱导再生植株,筛选最佳外植体与最适培养基,建立同源四倍体楸叶泡桐体外植株再生系统。结果表明,同源四倍体楸叶泡桐体外植株再生的最佳外植体是叶片;其幼苗叶片愈伤组织诱导的最适培养基为MS+14 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA;愈伤组织芽诱导的最适培养基为MS+16 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA;幼芽生根的最适培养基为1/2MS。     

蓖麻离体培养体系的建立

为建立蓖麻的离体培养体系,以其无菌发芽的种子苗为材料,切取其根、茎、叶及顶芽为外植体,探讨不同诱导途径中不同生长调节剂对愈伤组织诱导、愈伤组织分化、不定芽诱导及腋芽增殖的影响。结果表明:(1)去种皮后消毒种子的萌发率最高,萌发所需时间最短,染菌率也低;筛选出种子萌发适宜培养基为MS 0;(2)器官发生型诱导途径中,诱导愈伤组织最适的培养基为MS+2,4-D 2 mg/L+6-BA 1 mg/L,其中以茎为外植体诱导率最高,可达90%,但愈伤组织的分化较困难;(3)器官型诱导途径中,叶基、叶脉处能直接诱导不定芽,最适培养基为MS+6-BA 2 mg/L+2,4-D 1 mg/L;(4)顶芽诱导腋芽增殖的效果最佳(51个芽/外植体),最适培养基为MS+6-BA 2 mg/L+TDZ 1 mg/L;(5)生根最适培养基为位1/2 MS+NAA 0.5 mg/L+IAA 0.5 mg/L。     

牡丹“虞姬艳妆”的茎尖培养

以牡丹"虞姬艳妆"(Paeonia suffruticosa cv.YuJi YanZhuang)茎尖和单芽茎段为材料,研究不同植物激素配比对其芽的诱导、增殖,愈伤组织诱导、分化及生根的影响。结果表明:适合牡丹"虞姬艳妆"腋芽诱导的培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L+活性炭1.00g/L,萌芽率为66.67%;适合芽增殖的培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.01mg/L,增殖系数为2.80;适合茎段愈伤组织诱导的培养基为MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.5mg/L+活性炭1.00g/L,诱导率为62.5%;适合愈伤组织分化的培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.01mg/L,分化率为80%。     

北乌头组培快繁技术体系初步研究

本文对北乌头组培快繁技术体系进行了初步研究,同时比较了不同外源激素组合对北乌头外植体诱导的影响,其结果表明:北乌头愈伤组织诱导最佳外植体为叶片,丛生芽诱导最佳外植体为带芽茎段及茎尖,愈伤组织诱导最佳培养基为MS+1.0mg/L6-BA+1.0mg/L2,4-D,丛生芽诱导最适合培养基为MS+1.0mg/L2,4-D+0.2mg/LNAA,继代培养以WPM+1.0mg/L6-BA+0.5mg/LIBA效果最为显著,增殖率在4倍以上;北乌头生根最佳培养基为1/2MS+0.1mg/LNAA,生根率可到90%。     

植物生长调节剂对黑果枸杞愈伤组织诱导、增殖及分化的影响

为建立黑果枸杞高频再生体系及进行细胞突变体筛选、遗传转化奠定基础,以黑果枸杞叶片、茎段和腋芽为外植体,以MS为基本培养基,附加不同浓度的植物生长调节剂进行愈伤组织的诱导、增殖及不定芽分化研究。结果表明:诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2,4-D 2.0mg/L+6-BA 0.5mg/L;在愈伤组织的继代培养过程中,高浓度的2,4-D有利于愈伤组织的诱导,但对愈伤组织的生长有一定的抑制作用,最佳培养基为MS+2,4-D 1.0mg/L+6-BA 0.5mg/L;在愈伤组织的再分化过程中,6-BA对再生芽的分化效果最好,出芽率高,且多诱导出丛芽,最佳培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.10mg/L。试验表明:黑果枸杞叶片、茎段和腋芽均可诱导愈伤组织,茎段诱导率最高;筛选出了茎段愈伤组织诱导、增殖及再生芽分化的适宜培养基,为其细胞工程育种及规模化生产提供支撑。     

紫穗槐茎段愈伤组织诱导及再生体系的建立

以紫穗槐茎段为研究对象,确定了影响其愈伤组织诱导的关键因子、不定芽分化及生根培养的最佳条件,建立了紫穗槐稳定高频再生体系。试验结果表明：紫穗槐茎段愈伤组织的最适诱导培养基为MS＋6-BA4.0mg/L＋NAA2.0mg/L＋2,4-D0.5mg/L,诱导率为100%,经愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS＋6-BA0.5mg/L＋NAA0.1mg/L＋KT2mg/L,分化率为96.2%,增殖倍数为7.3;不定芽最佳生根培养基为1/2MS＋酵母提取物0.5mg/L;再生植株移植在选用田园土、蛭石（5∶1）混合的基质上,光强3000lx,光照时间14h/d下生长,3周后成活率达85.67%。     

白鹃梅叶片芽再生体系的构建

对白鹃梅叶片芽再生的适宜培养基和适宜条件进行研究的结果表明,2,4-D、NAA、IBA与6-BA组合均可诱导叶片愈伤,但以MS+1 mg/L 2,4-D +0.5mg/L6-BA为愈伤诱导培养基,MS+0.3 mg/L IBA+2mg/L 6-BA+0.1 mg/L TDZ为芽分化培养基,1/2MS+0.3 mg/L IBA为生根培养基最佳.