松材线虫扩散型四龄幼虫向成虫转型发育阶段研究

通过光学显微镜观察松材线虫Bursaphelenchus xylophilus扩散型四龄幼虫(DL4)转型的形态结构变化过程以及油红染色后脂肪的特征变化,分析了不同植物对于转型过程的影响。结果表明:松材线虫由扩散型四龄幼虫向成虫转型分为5个阶段,定义为DL4,转型前期(TP),转型中期(TM),转型后期(TA)和转型末期(TT)。DL4阶段,头部钝圆,无溢缩,尾部较尖,无性别特征;TP阶段,线虫呈现竖直状态,可见头部蜕皮,出现口溢缩,尾部膨大;TM阶段,蜕皮明显,线虫开始弯曲,出现不显著的性别特征;TA阶段,进一步完成蜕皮,成虫状态表现明显,雌虫出现阴门盖,雄虫出现交合刺;TT阶段完成蜕皮。DL4时期脂肪含量最高,占据线虫全部身体;而转型前期则脂肪含量迅速下降,仅有头、尾和体表内侧较高;转型中期、后期和末期脂肪含量较少,脂肪颗粒化明显。松科植物红豆杉Taxus chinensis、圆柏Sabina chinensis、侧柏Platycladus orientalis、雪松Cedrus atlantica、油松Pinus tabuliformis、黑松Pinus thunbergii和马尾松Pinus massoniana促进转型效果明显,以黑松和马尾松木块刺激下松材线虫转型效率最高,而非松科植物银杏Ginkgo biloba无转型促进效果。     

3个株系松材线虫电镜扫描比较研究

松材线虫病是一种毁灭性的森林病害,不同地区的松材线虫在形态特征方面有一定的差异.采用扫描电子显微镜对来自湖南、广东两地3个株系松材线虫进行了形态观察比较.结果表明:这3个株系的松材线虫成虫的头部、尾部形态特征无明显差异,幼虫和成虫的唇区与体部都出现缢缩;松材线虫口针的开口端呈一斜面;雄性成虫尾部交合伞呈“M”型.这些特征都是在过去的研究中没有描述过的,可为松材线虫的形态研究提供参考依据.     

松材线虫染色观察及植物凝集素对松材线虫作用的初步研究

研究了4种染色剂对松材线虫的染色效果,结果表明,虎红和水溶性苯胺兰对松材线虫的染色效果好,虫体全身着色且着色较深,而亚甲基蓝和结晶紫对松材线虫的染色能力较弱,只在头部和尾部着色明显;初步研究了刀豆凝集素、麦胚凝集素和花生凝集素对松材线虫的作用,结果显示,植物凝集素处理后,松材线虫初期均表现出活动加强、幅度增大,部分线虫身体卷曲呈"S"状或"8"字状,部分线虫出现聚集现象,随着处理时间的延长,松材线虫的死亡率逐渐上升,4.0mg/mL的刀豆凝集素、麦胚凝集素和花生凝集素分别处理10min,松材线虫的死亡率分别为100%、80%和65%。该研究为松材线虫的形态观察及防治提供了参考。     

拟松材线虫研究进展

松材线虫和拟松材线虫共同构成松材线虫复合群体,为松材线虫病的病原物。拟松材线虫危害过去没有引起足够重视,相关研究工作不如松材线虫细致。近年来,随着拟松材线虫致病性增强现象不断被报道,人们逐步加强了拟松材线虫研究。本文从拟松材线虫分类学特征、致病性研究及与松材线虫关系等角度对拟松材线虫研究进展进行综述,并展望未来可能的研究热点。     

生防细菌杀松材线虫的作用机制及应用

由松材线虫Bursaphelenchus xylophilus引起的松树枯萎病是一种世界性森林病害,严重威胁松属Pinus植物的健康。生防细菌可以通过多种作用方式杀死松材线虫,如产生毒素、分泌胞外蛋白酶消解线虫体表组织、干扰线虫行为模式以及捕食线虫与动员真菌捕食线虫等。围绕上述几种主要作用机制,介绍生防细菌杀线虫作用机理研究的最新进展以及杀线菌株在松材线虫病防治中的应用现状,指出生防细菌杀线虫的作用机理研究与应用中存在的问题,展望未来杀线虫机理研究与松材线虫病生防细菌制剂的研发前景。     

马尾松钙调素基因的克隆及响应松材线虫侵染的表达特征

松材线虫病是由松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)侵染引起的严重病害,引起重大的经济和生态损失。钙调素(CaM)是真核生物中Ca2+主要传导蛋白,本研究采用RT-PCR方法,首次从马尾松中克隆获得CaM,命名为pmCaM,并检测了其响应松材线虫侵染的表达特征。序列分析表明:pmCaM完整的开放阅读框核苷酸序列为450bp,编码149个氨基酸的蛋白质;该蛋白含有4个EF-hand结构域,具有钙调素的典型特征,与其它植物的CaM蛋白均有较高同源性。实时荧光定量PCR分析显示:接种松材线虫后30 180 min时间段,马尾松苗根、茎、叶器官中的pmCaM均下调表达,但不同器官间显著下调表达的时间点存在差异;同时,不同器官pmCaM表达量变化均存在特异的随时间发展的波动特征,其中发现,根茎pmCaM在松材线虫接种45 min时均处于表达量高峰。本研究结果显示pmCaM表达响应了松材线虫侵染,揭示pmCaM可能参与了调控松材线虫-马尾松互作早期的钙信号响应。     

松树抗松材线虫病机制研究进展

松材线虫病(Pine wilt disease)是由松材线虫Bursaphelenchus xylophilus引起的一种世界性森林病害。本文对松树感染松材线虫病后的组织病理学变化、生理生化响应、松树抗松材线虫分子生物学研究和抗病反应对松材线虫定殖影响等进行了总结和分析。     

松墨天牛成虫行为反应的研究

松材线虫（Bursaphelenchus xylophilus（Steiner et Buhrer）Nickle）引起的松萎蔫病是松树的一种毁灭性病害，该线虫原产于北美，借助于人类的贸易等活动，已于1982年扩散至我国并迅速蔓延。松材线虫需借助昆虫媒介才能完成寄主松树间扩散蔓延。松墨天牛（Monochamus alternatus Hope）是东亚松林内习见的蛀干害虫，是松材线虫最有效的传播媒介。有关该虫行为反应的研究，国内外虽有一些报道，但缺乏系统深入的研究。1986年以来，作者在研究松墨天牛综合防治技术过程中，陆续开展了成虫行为反应的系列研究。研究松墨天牛成虫的行为反应，对于深入探索该虫种群发展、松材线虫传播机制、灾害成因及其制定控制策略具有重要的科学意义。     

松材线虫病的细菌参与学说

<正>松材线虫病是由松褐天牛为媒介者携带病原体松材线虫而引起的一种松树的传染病。因此,其防治对策应基于松树、松材线虫、松褐天牛三者之间的相互关系。     

松材线虫对湖北省的潜在威胁和防御对策

松材线虫病由松材线虫（Bursaphelenchusxylophilus）引起,日本、韩国、美国、加拿大等均有发生;国内江苏、安徽、浙江、广东、山东、台湾、香港等局部地区有分布。它具有发病快、死树快、传播快和防治难的特点,一旦传入,控制不当,就会在社会、经济、生态等方面造成巨大损失。虽然湖北省目前尚未发现松材线虫病,但存在发病的可能性,因此,应有所防范。1发生特点松材线虫分布在媒介昆虫天牛的气管中,每条天牛可携带成千上万条线虫。当天牛补充营养时,松材线虫就从天牛取食的伤口进入木质部的树脂道、被松树线虫侵染了的树往往是天…     

松材线虫与拟松材线虫杂交试验及后代繁殖力研究

松材线虫Bursaphelenchus xylophilus和拟松材线虫B.mucronatus是伞滑刃属内两个独立的种,均可引起松材线虫病。松材线虫与拟松材线虫能否进行种间杂交在学术界一直存在争议。采用4个虫株在实验室条件下开展了杂交试验及杂交后代繁殖力研究。结果表明:实验室条件下松材线虫和拟松材线虫可成功杂交,他们之间未发展出严格的生殖隔离,二者极可能来源于同一祖先。     

伊氏杀线真菌与苏云金芽孢杆菌对松材线虫的联合毒力研究

[目的]探究伊氏杀线真菌与苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)对松材线虫的联合毒力。[方法]使用Esteya vermicola孢子悬浮液与Bt发酵液处理松材线虫,通过线虫的形态变化、死亡率及死亡速度3个方面测定E.vermicola与Bt联合对松材线虫的影响。[结果]经过E.vermicola孢子悬浮液处理过的线虫会出现内容物渗漏,体腔收缩、弯曲、断裂的现象;高浓度的E.vermicola孢子悬浮液与Bt发酵液联合处理松材线虫可以明显地提高线虫的死亡率,最高可以达到100%;联合处理的线虫死亡速度较快,随着处理时间的延长,死亡率会一直呈上升的趋势。[结论]应用这两种生防微生物在合适的浓度下混配能够在较短时间内提高松材线虫的死亡率。     

脉冲磁场对松材线虫生理生化及超微结构的影响

松材线虫病又称松树枯萎病,是由病原松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)引起的一种毁灭性森林病害。随着国际贸易日益频繁,松材线虫随木包装以及木材的进出口,反复传播的可能性越来越大(张星耀等,2003),而传统的熏蒸、热处理和杀线虫剂处理效率低、易造成环境污染(陈劲松等,     

松材线虫病病程特征变化的研究

为提高从松树病死木上取样分离松材线虫的检出率,及时、准确诊断疫木和疫点,根据病害的外部症状,把松材线虫病发病过程分为四个阶段,对各阶段的松材线虫分布、松褐天牛发生情况、含水率的变化、木材蓝变情况等特征进行研究。结果表明：病死木上松材线虫的分布由多到少为：发病前期上部>中部>下部,后期上部<中部<下部,松材线虫的数量与松褐天牛老熟幼虫的数量呈正相关,最佳的取样阶段为第Ⅱ和第Ⅲ阶段靠上部稍段取样,第Ⅳ阶段偏下部取样。     

（拟）松材线虫耐久型四龄幼虫（LⅣ）的形态及其分化变异

本文对浙江省宁波市松材线虫病疫区内的松材线虫和拟松材线虫的耐久型四龄幼虫(LⅣ)的形态及其分化变异作了观察研究.结果表明,松墨天牛成虫体内携带的松材线虫和拟松材线虫的LⅣ在形态上完全相同;同一来源的(拟)松材线虫的LⅣ既可发育形成松材线虫,也可形成拟松材线虫.它的分化变异结果受寄主等环境因子影响,规律是:带尾尖突的LⅣ离开松墨天牛成虫进入黑松多变为无尾尖突的松材线虫;进入马尾松多变为带尾尖突的拟松材线虫.     

松材线虫与其伴生细菌在寄主内的种群动态

利用马尾松水培离体松枝作接种材料 ,分别接种消毒后的松材线虫、松材线虫伴生细菌坚强芽孢杆菌和松材线虫与坚强芽孢杆菌的混合液 ,以研究松材线虫与其伴生细菌在松枝中的种群动态。结果表明 :松材线虫和坚强芽孢杆菌混合接种 ,松枝发病 ,松枝髓部发生褐变 ,褐变的过程是由接种枝发展到主枝 ,再由主枝下部向上部发展 ,而单独接种松材线虫或坚强芽孢杆菌 ,松枝不发病 ;松材线虫和坚强芽孢杆菌混合接种较单独接种松材线虫 ,松枝中的松材线虫繁殖量大、扩散速度快 ;松材线虫在松枝中扩散的过程是 :接种枝→主枝→侧枝→新梢 ,在主枝中由下部向上部扩散 ;松枝髓部褐变过程和松材线虫在松枝中扩散过程相一致 ,松材线虫扩散分布先行于髓部褐变 ;松材线虫和坚强芽孢杆菌混合接种较单独接种松材线虫或坚强芽孢杆菌初期 ,松枝中致病细菌的检测量大 ,从而提出细菌和松材线虫均是松材线虫病不可缺少的致病因素。文后指出寄主主干下部髓部褐变可用作病害的早期诊断。     

宁波萎蔫松树木质部内线虫类型镜检初报

本文描述了出现在萎蔫松树木质部内的八种线虫形态特征:2种小杆线虫、2种垫量线虫和4种滑量线虫。其中1种是在我省首次发现引起松树萎蔫的松材线虫。     

松材线虫的伴生微生物及其致病性研究概述

松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus Nickle)是全球首要检疫性有害生物,在松材线虫的生长、繁殖、侵染和致病过程中,有多种生物因子参与其中,形成复杂的微生态系统,特别是松材线虫与其体表携带微生物形成了密切的伴生关系。本文综述了松材线虫伴生微生物种类的多样性,并探讨了松材线虫与其伴生微生物的相互关系及其致病性。伴生细菌以松材线虫为载体(附着于松材线虫体表)一同侵入松树寄主,松材线虫的存在有利于伴生细菌的繁殖和产毒,反过来,伴生细菌也可为松材线虫的生长发育、扩散、繁殖提供某些营养和有利的环境条件,促进其生长和繁殖,并有助于松材线虫降解松萜类物质,从而提高了松材线虫的适应性和致病性;伴生真菌能为松材线虫提供食物,维持松材线虫种群繁衍,促进扩散型松材线虫种群数量增加,提高松材线虫侵染、扩散机率。文中还结合伴生细菌在松材线虫病生物防治中的应用,提出了今后研究的方向。     

基于国内外科技文献分析松材线虫研究现状和方向

为了解松材线虫病防控领域研究现状,本文以Web of Science数据库中SCI-E库和"中国知网"为数据源,收集2003—2019年发表的松材线虫研究相关科技文献,用文献计量学方法从文章发表年份、数量、国家、领域、关键词和基金项目等多角度对国内外松材线虫研究现状进行定量分析。结果表明:目前对松材线虫的研究主要集中在松材线虫病危害严重的国家,研究方向和发展趋势则根据各国实际情况各有侧重;我国近10 a在松材线虫研究领域活跃,但多集中在松材线虫本身、松材线虫与媒介昆虫及松材线虫与寄主之间的关系等方面。未来应以高效实用防控技术和产品为导向,着眼于监测预警、检疫检验、高效防治、抗性选育、生态修复等松材线虫病防控全过程,结合其致病机理,整合科研力量,开展联合科研攻关,力求早日突破松材线虫病防控的技术瓶颈。     

松材线虫病发病过程特征变化的研究

为提高松树病死木松材线虫检出率,及时、准确诊断疫木和疫点,根据病害的外部症状,把松材线虫病的发病过程分为四个阶段,对各阶段的松材线虫分布、松褐天牛发生情况、含水率的变化、木材蓝变情况等特征进行研究。结果表明：病死木上松材线虫的分布由多到少为：在发病前期,上部〉中部〉下部;发病后期,上部〈中部〈下部。松材线虫的数量与松褐天牛老熟幼虫的数量呈正相关,最佳的取样阶段为第Ⅱ和第Ⅲ阶段靠上部梢段取样,第Ⅳ阶段偏下部取样。