绿粘帚霉诱变生物型(GVD)对三种病原真菌的拮抗作用

本文通过对峙、对扣培养试验，扫描电镜观察，胶霉毒素粗提液的拮抗活性和热稳定性试验系统研究了绿粘帚霉诱变生物型（GVD）对三种苗木猝倒病菌的抗生机制。结果表明：绿粘帚霉GVD对三株病原真菌均有竞争作用；绿粘帚霉GVD对丝核菌、镰刀菌和腐霉有重寄生现象，可缠绕、侵入寄主菌丝，使菌丝溶解或断裂，变形。绿粘帚霉GVD产生的非挥发性代谢产物对病原菌的抑制率为100％，挥发性代谢产物对丝核菌、镰刀菌和腐霉的抑制率分别为26．7％、51．5％和43．5％，胶霉毒素粗提液在100℃以下具有热稳定性。     

内生枯草芽孢杆菌CN181防治桉树青枯病及促生作用研究

试验采用抑菌圈法检测内生枯草芽孢杆菌CN181对青枯病菌的抑制作用,并用尾叶桉实生苗蘸根法,探索枯草芽孢杆菌CN181的生物防治效果及促进生长作用,同时以生防菌株荧光假单胞杆菌WCS417r作为有效对照,结果表明:CN181对桉树青枯病菌的抑制作用强于WCS417r;在生防试验中,CN181对桉树青枯病菌生物防治效果为66%,WCS417r的防治效果为26%,与对照相比CN181具有显著的防治效果;在促生试验中,CN181对桉苗的生根和鲜重有抑制作用,对苗高生长没有影响,而WCS417r对苗高和鲜重有抑制作用,但对生根无影响。     

害虫的生物防治简况

生物防治具有选择性强,对人畜无害、无残毒,不污染环境等优点。生物防治通常是利用寄生昆虫和食虫昆虫,病原微生物以及引诱剂和激素杀死害虫。一、菌剂的利用苏联从发病和死亡的苹小卷叶蛾幼虫体内分离出黄曲霉、短帚霉和白僵菌,制成浓度为每毫升含菌孢子300亿的菌悬浮液防治苹小卷叶蛾。黄曲霉和短帚霉防治这种害虫的效果为22—28％,如果在菌悬浮液中加入0.05％敌百虫,那么防治效果就可增加到     

2株拮抗生防菌对油茶炭疽病多种病原菌的抑菌活性及防效

【目的】精准防治油茶炭疽病,为开发油茶炭疽病生物防治菌剂,获取更加高效、安全的油茶炭疽病生物防治技术提供参考。【方法】以枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis YL13、球孢链霉菌球孢亚种Streptomyces globisporus subsp. Globisporus F10为供试拮抗菌,研究其发酵滤液对5种油茶炭疽菌(胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides、果生炭疽菌C. fructicola、暹罗炭疽菌C. siamense、山茶炭疽菌C. camelliae、哈锐炭疽菌C.horii)生长的影响,测定其发酵滤液对优势炭疽菌胶孢炭疽菌和果生炭疽菌的效价,并在离体叶片上对油茶炭疽病进行防效研究。【结果】YL13发酵滤液对5种炭疽菌的抑制效果由强到弱依次为胶孢炭疽菌、暹罗炭疽菌、果生炭疽菌、哈锐炭疽菌、山茶炭疽菌,F10发酵滤液对5种炭疽菌的抑制效果由强到弱依次为胶孢炭疽菌、果生炭疽菌、哈锐炭疽菌、暹罗炭疽菌、山茶炭疽菌。2种发酵滤液对胶孢炭疽菌的抑制效果均为最佳,抑制率分别为83.46%、62.20%,对山茶炭疽菌的抑制率均为最低,分别为49.15%、30.99%。YL13发酵滤液对胶孢炭疽菌和果生炭疽菌的效价分别约为100、400倍,F10发酵滤液对胶孢炭疽菌、果生炭疽菌的效价均为40倍。当2种拮抗菌的发酵滤液稀释到一定浓度后,抑菌率均发生了不同程度的降低。随着稀释倍数的增大,YL13发酵滤液的抑菌活性降低速率远超过F10。在离体叶片上拮抗菌株对油茶炭疽病均有一定的防治效果,在接种YL13菌株2 d后再接种病原菌的预防效果最佳,达到了60%,F10对油茶炭疽病的预防和治疗均是拮抗菌与病原菌相隔1 d接种效果最佳,防治效果均达到了70%。【结论】2株生防菌对不同油茶炭疽病菌的拮抗效果存在一定的差异,但均具有明显的抑制作用。在离体叶片上,2种生防菌对油茶炭疽病均有良好的防治效果,可以用于生物防治药剂的开发。     

粉红粘帚霉的形态特征及分子生物学鉴定

粉红粘帚霉具有生长快、产孢量大、寄主范围广、寄生能力强、拮抗机制多等优点,是一种重要的生防菌,开展粉红粘帚霉对林果枝干病害的防治效果实验具有重要意义。实验室从苹果枝干发病部位分离获得一株粉红粘帚霉菌株,本文研究了该菌株的形态特征及分子生物学鉴定方法。     

华山松叶栖内生真菌的分离鉴定及筛选

用常规内生真菌分离方法从健康华山松Pinus armandii Franch.针叶上分离到17种内生真菌,其中子囊菌1种、酵母菌1种、半知菌15种。通过对峙培养初步筛选出抗真菌活性的内生真菌优势种:绿木霉Trichoderma viridePers.:Fr.、拟康宁木霉T.pseudok ningiiRifai,并对这2种木霉培养滤液的抑菌作用进行初步研究。结果表明,这2种木霉培养滤液对来自于针叶的拟盘多毛孢PestalotiopsisStey.和针叶树散斑壳Lophodermium conigenum(Brunaud)Hilitz菌落生长只有较弱抑制作用,对来自于枝干的拟茎点霉Phomopsis(Sacc.)Bubak有很强的抑制作用,对拟盘多毛孢孢子萌发有不同程度抑制作用。     

4种绿僵菌乙酸乙酯初提物抗菌活性比较

绿僵菌属真菌是一种具有很强致病性的昆虫病原真菌,广泛地寄生于多种昆虫体内。以冬虫夏草、蛹虫草为代表的昆虫病原真菌具有良好的医药保健功能,绿僵菌能产生多种具有活性的代谢产物。本研究采用液体深层培养技术,对4种绿僵菌菌丝体进行液体培养,培养液经乙酸乙酯萃取后获得绿僵菌初提物。采用抑菌圈法评价4种绿僵菌乙酸乙酯初提物对13种致病菌的抗菌活性,并测定对相应致病菌的最低抑制浓度。结果表明,经液体培养后的4种绿僵菌乙酸乙酯初提物均具有一定的抗菌活性。4种绿僵菌提取物均对蜡样芽孢杆菌和缓慢芽孢杆菌具有抑制作用,其中贵州绿僵菌提取物对蜡样芽胞杆菌的最低抑菌浓度达到6.45mg/m L,对溶血性葡萄球菌的最低抑菌浓度为3.23mg/m L。棕色绿僵菌初提物均对蜡样芽孢杆菌、缓慢芽孢杆菌、溶血性葡萄球菌、副溶血性弧菌、藤黄微球菌产生抑制效果,对藤黄微球菌的最低抑菌浓度达到13.9mg/m L。本研究为虫草绿僵菌抗菌化合物的进一步研究及开发利用奠定基础。     

白三叶草黄酮含量及其抑菌活性研究

测定了白三叶草提取物的石油醚相、氯仿相、乙酸乙酯相和水相的黄酮含量,并以大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、普通变形杆菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌5种细菌及可可葡萄座腔菌、尖孢镰刀菌、腐皮镰刀菌、多主棒孢霉和尖孢炭疽菌5种真菌为供试菌,采用抑菌圈法和抑制菌丝生长速率法测定了其抑菌活性。结果表明:石油醚相的黄酮含量为12.98 mg/g(12.98%),氯仿相的黄酮含量为13.89 mg/g(13.89%),乙酸乙酯相的黄酮含量为7.4 mg/g(7.4%),水相的黄酮含量为1.5 mg/g(1.5%);石油醚相对5种细菌无明显的抑制作用,氯仿相对普通变形杆菌和铜绿假单胞菌有抑制作用,其最低抑菌浓度(MIC)分别为2 mg/m L和8 mg/m L;乙酸乙酯相对枯草芽孢杆菌、普通变形杆菌和铜绿假单胞菌的有抑制作用,其最低抑菌浓度(MIC)分别为4,4和8mg/m L,仅水相对5种供试菌株有不同程度的抑制作用。氯仿相和乙酸乙酯相对5种真菌均具有抑制作用,氯仿相对5种供试真菌的抑制作用没有明显差异,其EC50分别为3.54、6.42、8.45、3.63和5.90 mg/m L;乙酸乙酯相对多主棒孢霉的抑制抑制作用最强,EC50为2.51 mg/m L,对尖孢镰刀菌的抑制作用最弱,EC50为165.43mg/m L,石油醚相和水相对5种真菌均无抑制作用。     

一株桑椹菌核病生防菌分离鉴定及其拮抗作用分析

桑椹菌核病是主要由桑实杯盘菌Ciboria shiraiana、桑椹核地杖菌Scleromitrula shiraiana和肉阜状杯盘菌Ciboria carunculoides引起的果桑毁灭性病害。采用组织分离法从健康桑椹中分离纯化获得内生细菌Wh-1,对其进行抑菌谱测定和种类鉴定;以桑实杯盘菌为靶标菌株研究Wh-1发酵滤液拮抗活性,分析拮抗机理。结果表明:Wh-1对分离自发病桑椹上的真菌具有显著拮抗作用,对桑椹核地杖菌,肉阜状杯盘菌,桑实杯盘菌的抑菌率分别为100%,100%,63.15%;基于形态学、Biolog鉴定及16S rDNA序列分析结果,将该菌株鉴定为贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezens,其在PDB中振荡培养48 h,发酵滤液具有较强拮抗活性;PDA平板中发酵滤液的体积分数为5%时可完全抑制菌丝的生长;且发酵滤液热稳定性好。发酵滤液对桑实杯盘菌菌丝有致畸作用,Wh-1菌株具有脂肽基因(srfAA)、芽孢菌霉素基因(bmyB)、杆菌溶素基因(bacA)、丰原素基因(fenD)和生物素基因(bioA)脂肽类化合物合成相关功能基因。菌株Wh-1可作为开发桑椹菌核病生防制剂较为理想的候选菌株。     

板栗壳提取物抑菌作用研究

研究了板栗(Castanea mollissima Blume)壳的乙醇水溶液提取物对2种细菌、2种酵母菌和2种霉菌的抑制作用，并对其有效成分进行了初步鉴定。结果表明，板栗壳提取物中含有黄酮类物质和可水解单宁；一定浓度的提取物对供试的大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、啤酒酵母、赤酵母、黑曲霉和桔青霉等都有较明显的抑制作用，对上述供试菌的最低抑菌浓度(MIC)依次为3％、3％、0．5％、0．5％、2％和2％；热处理对提取物的抑菌效果无影响；提取物对食品有一定的防腐效果，可以作为天然食品防腐剂进行开发和利用。     

坚强芽孢杆菌对3种病原真菌的抗生现象

病害生物防治,具有无污染、不诱导抗药性、防效持久等特点,是今后植物病害控制的主要方向,也是综合治理的一个重要环节.     

一株苏云金亚种的发酵产物对柳蚜3种保护酶活性的影响

为探究苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis Bt)对蚜虫的生物活性影响及作用方式,以苏云金亚种(Bacillus thuringiensis subsp.thuringiensis)为目的菌株,以发酵产物为材料。利用5种不同浓度的菌液分别喷雾处理柳蚜,72h校正死亡率为29.74%～78.88%,其浓度与及死亡率呈正相关关系。苏云金杆菌亚种发酵液和发酵液滤液处理柳蚜后,12～24h柳蚜超氧化物歧化酶(SOD)比活力均被抑制,其抑制率分别为21.06%～38.11%和4.69%～36.79%,其中18h、24h对SOD比活力的抑制达显著水平(p<0.05)。发酵液和滤液处理组18h前对柳蚜过氧化氢酶(CAT)比活力的影响总体呈激活趋势,其中发酵液和滤液处理组分别在18h、12h对柳蚜CAT的激活率最高,其CAT比活力分别为对照的1.8890倍和2.9463倍。滤液处理组对柳蚜POD比活力总体呈激活作用,其激活率为14.78%～57.39%;发酵液处理组6h和18hPOD比活力显著高于对照,其他时间点POD比活力与对照无显著差异。     

松材线虫伴生细菌的分离鉴定及其致病性

从松材线虫虫体上分离到两个细菌菌株:GD1和R,经鉴定,菌株GD1为坚强芽孢杆菌.利用水培马尾松离体松枝作接种材料,接种消毒后的松材线虫(Bx)、GD1、R、Bx GD1和Bx R.结果表明,松材线虫和坚强芽孢杆菌混合接种,松枝发病,松枝流脂减少至停止,蒸腾作用降低,单独接种松材线虫或坚强芽孢杆菌,松枝不发病.菌株R对松材线虫病的发生没有影响.提出松材线虫及其伴生细菌均是松材线虫病不可缺少的致病因素.     

Synergistic effects between Suilllus luteus and Trichoderma virens on growth of Korean spruce seedlings and drought resistance of Scotch pine seedlings

Korean spruce(Picea koraiensis Sieb. El Zucc.)is one of the main afforestation species in northern China.Seedling quality is a critical factor at planting time. To test whether the synergistic growth enhancement of Scotch pine(P. sylvestris var. mongolica) seedlings brought by the plant beneficial fungus Trichoderma virens(J.H. Mill., Giddens and A.A. Foster) Arx and ectomycorrhizal fungus(Suillus luteus(L.) Roussel.) can also benefit Korean spruce seedlings, we examined the effects of S. luteus and T. virens on the growth of P. koraiensis seedlings and drought resistance of P. sylvestris var. mongolica in peat soils. The two fungi were added to sterilized peat soil in pots, and the plants were grown for 4 months. Seedling growth and physiological variables, including mycorrhizal colonization rate of roots,biomass, and chlorophyll content, were examined. The colonization rate of the mycorrhizal fungus on P. koraiensis exceeded 65 %, and the synergism between S. luteus and T.virens enhanced most of the variables for P. koraiensis seedlings after inoculation with S. luteus then 30 days later with T. virens as in our published results for seedlings of P.sylvestris var. mongolica. When seedlings of P. sylvestris var. mongolica were inoculated with this sequence, they became more drought tolerant. T. virens also induced S.luteus to produce-1,3-glucanase and chitinase. This inoculation sequence at planting can thus improve the quality of P. sylvestris var. mongolica and P. koraiensis seedlings and substantiates our previous results.     

绿粘帚霉F051产几丁质酶条件优化及其对三种病原菌的作用

系统研究了碳源、氮源、温度、起始pH值、培养基装量和接种量等因素对绿粘帚霉(Gliocladium virens)F051产几丁质酶的影响。结果表明,碳、氮源分别为麦芽糖和酵母粉最好,并通过正交试验法优化了发酵条件。优化后的产酶条件为:温度为28℃,pH值7,瓶装量为100 ml,每100 ml接种1 ml孢悬液,且碳源和氮源的量分别为1.5%和0.2%。从时间对菌丝生长和几丁质酶活的影响来看,培养第4天酶活便达到最高。在此基础上探索了几丁质对病原菌细胞壁的作用,结果显示,该几丁质酶粗酶液对3种病原真菌细胞壁有一定的降解效果,使病原真菌出现细胞壁变薄、断裂,质壁分离,原生质空泡等现象。     

引进木霉菌株T43对立枯病的抑制效果及对苗木的促生作用

把从以色列引进、室内抑菌试验显示对苗木立枯病菌(立枯丝核菌Rhizoctonia solani、腐霉Pythium sp.和腐皮镰刀菌Fusarium oxysporum)具有显著抑制效果的绿木霉Trichoderma virens菌株T43制成不同浓度菌剂,对落叶松Larix sp.和红松Pinus koraiensis 1年生苗木进行室外灌根处理,30 d后测定苗木生长及病害发生情况。结果表明:引进的绿木霉T43菌剂在显著控制落叶松和红松立枯病发生的同时,还显著提高苗木的生长、土壤微生物种群数量及土壤酶活性,该菌株液体菌剂适合落叶松苗木,孢子悬浮液适合红松苗木。     

成都市16种园林植物抑菌作用的比较

以成都市观赏价值较高的16种常绿植物为实验材料,比较不同植物叶片的综合抑菌能力及对空气中常见的致病细菌金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌率。结果表明:16种植物对空气中微生物的综合抑菌能力顺序为雪松、八角金盘、南天竹 > 天竺桂 > 桂花 > 乐昌含笑 > 含笑 > 香樟 > 榕树 > 广玉兰 > 蚊母树 > 鹅掌柴 > 黄葛树 > 锦绣杜鹃 > 山茶 > 狭叶栀子。雪松、八角金盘和南天竹对金黄色葡萄球菌抑菌率达到70%以上,八角金盘抑菌率最高为80.5%,山茶抑菌率最低为19.5%;雪松、天竺桂、八角金盘和南天竹对大肠杆菌的抑菌率达到70%以上,南天竹抑菌率最高为78.2%,狭叶栀子抑菌率最低为18.8%。本实验结果将为成都市园林绿化植物的选择及生态型植物配置提供科学依据。     

外源添加氨基酸对兽疫链球菌产透明质酸的影响

兽疫链球菌(Streptococcus zooepidemicus)是一种营养缺陷型菌株,其生长代谢需要外源添加各类营养因子。通过在兽疫链球菌发酵对数生长初期外源添加氨基酸的方式研究其对透明质酸生产的影响。结果表明,外源添加氨基酸对透明质酸的生产具有显著的促进作用。笔者初步研究了当添加质量浓度为0.5 g/L时,18种常见氨基酸对透明质酸产量的影响。在此基础上,在18种氨基酸中选取苯丙氨酸和丝氨酸对透明质酸合成进行浓度优化实验,结合细胞生长和代谢产物分析,更进一步研究氨基酸对透明质酸合成的影响。结果表明,苯丙氨酸和丝氨酸添加质量浓度分别为0.5 g/L和0.5 g/L时,透明质酸产量提高最大,与对照相比分别提高了18.05%和17.44%,菌体浓度均没有增加,但是乳酸浓度分别降低了9.93%和15.80%,说明氨基酸的添加不是通过增加菌体量来提高透明质酸产量,而是改变了碳源流向,减少了乳酸积累,使得透明质酸产量显著提高。本研究为高产透明质酸的发酵工艺提供了借鉴与依据。     

Effects of some bacteria (Pseudomonas spp. and Erwinia herbicola) on in vitro growth of Piptoporus betulinus

Summary Bacteria including Pseudomonas putida, Pseudomonas fluorescens biovar I, Pseudomonas fluorescens biovar V, Pseudomonas aureofaciens and Erwinia herbicola were isolated from discoloured zones in birch trunks. Antagonistic effects of these bacteria to growth of Piptoporus betulinus mycelium were tested in vitro, both in dual culture and using bacterial cell‐free culture filtrates. In dual cultures, P. putida was most effective at inhibiting mycelial growth of Piptoporus betulinus. Filtrates of P. putida inhibited growth of P. betulinus mycelium irrespective of filtrate concentration, incubation time of bacteria and timing of recording mycelium growth. The strongest antagonistic effect (inhibition of fungal growth) was observed on a medium containing 80% of sterile filtrate obtained from 15‐day‐old bacterial cultures. The highest stimulating effect on mycelium growth was noted on medium containing 80% filtrate obtained from 7‐day‐old E. herbicola cultures.     

苏云金杆菌对松墨天牛幼虫的致死作用及其生物学特性

苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis),简称Bt,其在形成芽孢的同时会在菌体的1端或2端形成蛋白晶体,这种蛋白晶体被称为杀虫晶体蛋白(insecticidal crystalproteins,ICPs)或δ-内毒素(delta-endotoxin)。因ICPs具有杀虫高效、广谱、对