A型和B型腐烂茎线虫的培养

为了筛选A型、B型腐烂茎线虫最优培养材料，将轮枝镰刀菌、尖孢镰刀菌、甘薯秦薯5号、甘薯烟薯25号作为培养材料，分别接种500条、1 000条、2 000条A型、B型腐烂茎线虫，于28℃黑暗培养35 d。结果表明：随着接种量增大，繁殖量呈增加趋势，即接种2 000条时，繁殖量最大；A型腐烂茎线虫在烟薯25号上繁殖能力最强，B型腐烂茎线虫在烟薯25号及轮枝镰刀菌上繁殖能力较强；不同基因型腐烂茎线虫在不同培养材料上繁殖力有差异，且雌雄比与繁殖量成正相关关系。     

A、B型腐烂茎线虫的培养

为了筛选A、B型腐烂茎线虫最优培养材料,利用轮枝镰刀菌、尖孢镰刀菌、秦薯5号、烟薯25号做为培养材料,分别接种500条、1000条、2000条A、B型茎线虫,28℃黑暗培养35d。结果表明:随着接种量增大,繁殖量呈增加趋势,即接种2000条时,繁殖量最大。 A型茎线虫在烟薯25号上繁殖能力最强,平均线虫数为95164 ,繁殖倍数为55,雌雄比为1.52, B型茎线虫在烟薯25号及轮枝镰刀菌上繁殖能力较强,平均线虫数为77157,65717条,繁殖倍数为39,33,雌雄比为1.49,1.36。不同生物型线虫在不同培养材料上繁殖力有差异,且雌雄比与繁殖量呈正相关关系。     

湖北省烟草赤星病菌生物学特性研究

对湖北省烟草赤星病细极链格孢(Alternaria tenuissima)、链格孢(Alternaria alternata)、长柄链格孢(Alternaria longipes)和鸭梨链格孢(Alternaria yaliinficiens)4种链格孢属致病菌的代表性菌株进行了生物学特性分析,并分析了不同温度和保湿时间对长柄链格孢菌致病力的影响。结果表明,4种链格孢菌最适宜的生长温度为25～30℃;长柄链格孢最适宜的pH为5～6,其他种的最适宜生长pH为6～8。在不同碳源中,以甘露醇和半乳糖作为碳源时鸭梨链格孢生长最快,乳糖、葡萄糖等5种碳源最适宜链格孢生长,长柄链格孢在各种碳源下均生长最慢。在不同氮源中,除长柄链格孢的最适氮源为氯化铵外,其他3种链格孢在蛋白胨作为氮源时生长最快。不同种的链格孢属致病菌的致病力存在差异,除鸭梨链格孢菌株表现为弱致病力外,其他3种链格孢均存在强致病力菌株。不同温度及保湿时间对长柄链格孢菌致病力具有显著影响,最适发病温度为25～30℃,保湿时间与病害严重度呈正相关。     

腐烂茎线虫单异活体繁殖方法研究

腐烂茎线虫（Ditylenchus destructor）系世界上一重要的植物病原线虫。试验通过用玉米培养基培养的灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea）对腐烂茎线虫进行的单异活体培养，系统地比较了20℃和25℃个不同的温度对培养的影响，建立了在室内快速和大量繁殖腐烂茎线虫的方法。该方法繁殖的线虫可用于线虫的生物学和遗传学等方面的研究。     

不同接种方式对甘薯腐烂茎线虫侵染量的影响

探讨盆栽条件下接种方式对甘薯腐烂茎线虫侵染量的影响,并对甘薯茎叶组织中腐烂茎线虫虫口分布及萌芽甘薯的生育期抗性进行了测定。结果表明,接种块植入甘薯中线虫侵染量最高,每g组织达408条,且症状最严重,茎组织中线虫分布最远到达距茎基部90 mm的茎组织。另外,与对照相比,萌芽甘薯对腐烂茎线虫的生育期抗性显著。本文首次报道甘薯腐烂茎线虫侵染甘薯茎叶组织的最远位置和萌芽甘薯的生育期抗性,不同接种方式对甘薯腐烂茎线虫侵染量影响的研究结果,为阐述通过病害传播途径防治该病害提供了理论依据。     

云南省烟草赤星病(Tobacco brown spot)病原研究及其防治药剂的筛选

对云南省烟草赤星病１２个代表菌株进行培养性状、形态特征和致病力测定以及防治药剂筛选。结果表明：它们属于长柄链格孢菌和链格孢菌,以后者居多。两者的菌落形态相似,温度反应一致;最低,最适,最高生长温度分别为５℃,２４℃－２８℃和３６℃,大多数链格孢菌的致病力比长柄链格孢菌致病力强。保鲜剂西爱是一种高效无毒无残留的理想防治药剂。     

云南省烟草赤星病(Tobacco brown spot)病原研究及其防治药剂的筛选

对云南省烟草赤星病(Tobacco brown apot)12 个代表菌株进行了培养性状、形态特征和致病力测定以及防治药剂筛选.结果表明:它们属于长柄链格孢菌(Aitemaria iongipes(Elt net EV.) Fisd et wadk)和链格孢菌(Aiternaria alternata (Fr.)keissl.),以后者居多.两者的菌落形态相似,温度反应一致;最低、最适、最高生长温度分别为 5℃,24℃-28℃和36℃.大多数链格孢菌的致病力比长柄链格孢菌致病力强.保鲜剂西奇爱是一种高效无毒无残留的理想防治药剂.     

甘薯腐烂茎线虫重组酶聚合酶扩增方法的建立与应用

【目的】本文以甘薯腐烂茎线虫ITS序列基因片段为靶标,建立了一种针对该线虫的RPA检测方法。【方法】RPA检测反应使用TwistAmp~? Basic Kit,分别对甘薯腐烂茎线虫群体、单条线虫以及甘薯组织或土壤中的线虫进行特异性和灵敏度检测。【结果】RPA方法可特异性鉴定甘薯腐烂茎线虫群体、单条线虫以及甘薯组织或土壤中的线虫。甘薯腐烂茎线虫基因组DNA和单条线虫的检出限分别为10~(-2 )ng/μl和1/100条,与普通PCR检测灵敏度相当。【结论】RPA技术是一种耗时短、灵敏度高、稳定性强的甘薯腐烂茎线虫分子鉴定技术。     

长柄链格孢AlCyP1基因的克隆及其在渗透胁迫适应中的作用

为了阐明烟草赤星病(tobacco brown-spot disease)病原真菌长柄链格孢(Alternaria longipes)对二甲酰亚胺类杀菌剂抗性的分子机制,以不同抗性水平的长柄链格孢菌株为实验材料,通过基因钓鱼(Gene Fishing)技术进行基因差异表达分析;并利用基因敲除技术对已克隆到的AlCyP1基因进行功能分析.结果表明:一个亲环蛋白基因AlCyP1的表达量在不同抗性水平的长柄链格孢中存在明显差异;应用DNA步移(DNA walking)方法克隆得到AlCyP1基因的DNA序列,其开放阅读框中存在2个翻译起始密码子,可以编码产生2种不同长度的多肽,长、短多肽产物分别具有222和188个氨基酸,其中短多肽起始于长多肽的第35个密码子;另外,氨基酸序列同源性分析发现,AlCyP1和其他真菌的亲环蛋白具有很高的同源性,达50.0%～61.3%;利用基因敲除技术对AlCyP1基因进行功能分析发现,该基因通过表达水平的改变参与了长柄链格孢对渗透胁迫的适应调节过程.     

我国腐烂茎线虫基因型及效应基因研究进展

腐烂茎线虫是一种检疫性有害生物,我国关于腐烂茎线虫的研究起步较晚,过去很长一段时间认为不会在我国发生,因此也缺少系统的调查和鉴定。现如今因腐烂茎线虫所引起的甘薯茎线虫病以及马铃薯腐烂茎线虫病已成为我国甘薯和马铃薯产区的重要病害。文章主要介绍腐烂茎线虫在我国基因型以及特殊效应基因的研究进展,为腐烂茎线虫与植物互作机理提供理论依据,以促进腐烂茎线虫研究的发展。     

腐烂茎线虫种内群体特异性检测研究

对腐烂茎线虫(Ditylenchus destructor Thorne)7个不同地理群体rDNA 中的ITS区进行PCR-RFLP和序列测定, 发现种内群体间无论在序列长度还是酶切图谱均存在一定的变异.根据其序列特征设计出种特异性引物, 对所供试的腐烂茎线虫群体及属间不同种群体样品的rDNA ITS区相应区段扩增以验证其特异性, 同时对分别由1～5条腐烂茎线虫成虫和幼虫提取的DNA进行特异性扩增以验证其灵敏度. 结果表明: 所有供试的腐烂茎线虫群体均可以特异性扩增一个346 bp的片段, 而所有供试的属外种均没有扩增片段;由1～5条腐烂茎线虫成虫和4～5条幼虫进行的特异性扩增也获得稳定的目的片段. 显示该特异性引物具有较高的稳定性、特异性和灵敏度, 能快速、准确地检测出腐烂茎线虫.     

大东山长柄双花木群落主要种更新生态位研究

在野外调查基础上,应用改进的更新生态位宽度和更新生态住重叠计算公式研究了南岭大东山潘家洞长柄双花木群落乔木层、灌木层主要种的更新生态位。结果表明,乔木层重要值以黄山松和马尾松的最大,灌木层以长柄双花木的最大。更新生态位宽度以长柄双花木的0．26最大。长柄双花木与其他树种的更新生态位重叠值为0．09～0．66,表明它们存在资源共用,其中与毛棉杜鹃和睫毛杨桐的更新重叠值较大,分别为0．66和0．53,与这2个物种可能存在竞争排斥作用。建议采用人工抚育措施以促进长柄双花木的幼苗更新,维持群落稳定。     

进出口检疫发现的茎线虫及其致病性的研究

检疫进口荷兰郁金香和我国山东牡丹出口时发现的茎线虫,经形态鉴定,分别为鳞球茎茎线虫和腐烂茎线虫。用截获的两种茎线虫对6种不同的寄主植物进行致病性测定表明,截获进口的鳞球茎茎线虫能使郁金香、水仙和风信子发病,但不能侵染洋葱、马铃薯和甘薯,初步诊断该线虫为郁金香小种;截获出口的腐烂茎线虫能使郁金香、甘薯和洋葱发病,但不侵染水仙、风信子和马铃薯。通过两种茎线虫的检疫和鉴定,提出了对茎线虫应实施的植物检疫对策。     

国家珍稀濒危植物长柄双花木的种群特征

长柄双花木（Disanthus cercidifolius var.longipes）是金缕梅科（Hamamelidaceae）植物的中国特有单种属植物,被列为国家二级珍稀濒危树种。在野外调查工作的基础上,对南岭4个样地30个样方（10m×10m）的资料进行分析,初步研究了长柄双花木种群的空间分布、密度、年龄结构等特征。结果表明：长柄双花木种群个体分布不均匀,呈集群分布格局;在自然条件或植被保护较好的林分中存活率高;长柄双花木种群在年龄级分布上显示增长型格局,具有明显的发展潜力。     

腐烂茎线虫种群分化现状研究

腐烂茎线虫是危害我国甘薯产区的重要病害之一,近年来,在腐烂茎线虫的研究报道中发现,我国腐烂茎线虫种群分化现象严重,在致病力、繁殖力、抗药性等生物学特性上存在明显差异,同时在不同来源的腐烂茎线虫种群中划分出2类基因型。综述了腐烂茎线虫种群分化的现象,旨在为深入地认识腐烂茎线虫的分化现象和分类地位提供参考。     

3种茎线虫rDNA区的PCR-RFLP分析

采用PCR-RFLP技术对来自国内外的10个茎线虫属群体进行了限制性片段长度多态性分析（RFLP），发现甘薯茎线虫（Ditylenchus destructor）不同群体间存在基因分化现象。来自山东的2个群体Dell和Dely的酶切图谱与来自其他地区的线虫群体相比明显不同。对甘薯茎线虫的近似种鳞球茎茎线虫（D．dipsaci）以及食菌茎线虫（D．myceliophagus）的分析结果显示，通过ITS-RFLP技术建立的酶切图谱可以很好地将3种茎线虫区分开来。     

Snf907真菌代谢物对甘薯茎线虫活性的影响

研究了Snf907真菌代谢物原液及不同稀释液对甘薯茎线虫活性及运动行为的影响。结果表明,在1,5,10,20,50倍稀释液浓度下二龄幼虫的校正死亡率分别是87.06%,78.73%,41.21%,24.37%,14.00%,均与无菌水对照差异显著;其不同浓度的代谢物对甘薯茎线虫的行为影响不同,随着浓度的增大和时间的延长,对甘薯茎线虫活动频率的抑制也增强。     

马铃薯腐烂线虫不同群体同工酶表型与致病力研究

    对国内不同地理来源的10个马铃薯腐烂线虫群体进行同工酶表型研究,同时在2个中抗甘薯茎线虫病品种(苏薯9号、宁薯9-9)上测定马铃薯腐烂线虫群体致病力、繁殖力、雌雄比(性比)、甘薯薯块鲜重损失量.结果表明:①10个群体苹果酸脱氢酶(MDH)酶谱分为2个酶型, 酶型Ⅰ的相对迁移率(Rf值)约为0.21、0.26;酶型Ⅱ的Rf值约为0.21、0.26、0.31,而酯酶染色不成形;②在P=0.05水平上,各群体间的致病力、繁殖力、性比差异显著,其中致病力最高的群体来自河北廊坊DeHB,对苏薯9号的致病力为75%;③在苏薯9号和宁薯9-9上,各线虫群体致病力与线虫繁殖力呈正相关;④偏相关分析显示,在苏薯9号上不同线虫群体繁殖力与性比呈负相关,相关系数为-0.213,而在宁薯9-9上不同群体繁殖力与性比呈显著正相关,相关系数为0.901,说明寄主品种的改变对线虫群体性别分化影响显著;⑤在抗甘薯茎线虫病和保鲜力方面,宁薯9-9分别比苏薯9号高33.48%和19.86%.     

分光光度法测圆果化香树的抗坏血酸含量

探讨圆果化香树中抗坏血酸含量的测定方法。将待测样加草酸处理成匀浆,过滤后于490 nm处作分光光度测定可测出圆果化香树中抗坏血酸的含量。此法可用于圆果化香树中的维生素C含量测定,较化学法简便。     

冬种马铃薯试管苗壮苗技术研究

【目的】建立冬种马铃薯试管苗高效生产技术体系。【方法】在不同植物生长调节剂、光强和昼夜温差、培养器皿和封口材料、固液体MS和1．5MS培养基条件下对马铃薯试管苗进行壮苗培养。【结果】在MS培养基中添加B9和CCC，均对马铃薯试管苗壮苗培养有促进作用，但以B9的效果最佳、最持久；当光照强度为3000lx、昼夜温差为8℃左右时，即培养温度在18～26℃时壮苗培养效果较佳。与固体培养基相比，1．5MS液体培养基对试管苗的壮苗效果更明显；与试管和250mL罐头瓶相比，透光、透气性好的150mL三角瓶带塑料封口膜更有利于马铃薯试管苗壮苗培养，且操作方便，试管苗生长较好。【结论】在光照强度3000lx、温差为8℃条件下，在带塑料封口膜的150mL三角瓶中采用添加既的1．5液体MS培养基对马铃薯试管苗进行壮苗培养，可获得较好的培养效果。