林麝电刺激采精、精液品质及精子特性分析

通过鹿眠宁麻醉保定,采用电刺激采精法对重庆市药物种植研究所的3头林麝每头采精2次,然后对电刺激采精效果进行分析,检测精液品质,并观察精子外部形态.结果表明:鹿眠宁麻醉剂量(0.041±0.006)mL/kg在林麝上取得较好效果,但存在较大个体差异;电刺激法采精效果较好,平均电压为(5.4±1.4)V,电刺激至排精所用时间为(24.7±6.4)min,获得精液品质较高且稳定;林麝每次精液量为(0.240±0.056)mL,颜色为乳白色或灰白色,pH值为(7.30±0.24),渗透压为(912.84±71.2)kPa,精子平均密度为(1.79±0.38)亿个/mL,精子平均活率为(81±4)%,精子畸形率为(13.48±4.90)%,精子顶体完整率为(91.20±2.00)%,原生质滴附着率为(21.58±7.11)%;倒置显微镜观察精子形态,精子平均总长为(69.45±3.38)μm,头长为(9.54±0.42)μm,尾部主段为(16.02±0.97)μm,尾部中后段为(42.45±2.25)μm.     

应用计算机辅助精子分析系统调查湛江地区正常人精液参数

目的:用计算机辅助精子分析(CA SA)调查湛江地区正常人精液参数。方法:用CA SA对随机选取的500份正常生育力健康人精液标本进行分析。结果:精子密度(145.31±77.41)×106/mL,活率(66.55±13.65)%,精子形态畸形率(15.50±4.79)%,平均曲线运动速度(45.47±11.10)μm/s,平均直线运动速度(30.08±4.76)μm/s,平均路径运动速度(31.92±5.80)μm/s,A级(31.39±12.62)%,B级(14.72±5.84)%,C级(20.45±10.58)%,D级(33.44±13.63)%,运动的直线性(66.15±8.24)%,运动的摆动性(70.20±8.08)%,运动的前向性(90.23±6.67)%,精子平均鞭打频率(7.38±1.02)H z,运动的侧摆幅度(1.08±0.31)μm,精子运动平均移动角度(82.30±4.73)度/秒。结论:用CA SA分析精液取得的正常人精液参数可为该地区的临床诊断和治疗提供有用的参考值。     

江鳕精子的形态及超微结构观察

为江鳕精子活力及人工繁殖受精率的提高提供参考,应用扫描电镜和透射电镜观察了江鳕精子的外部形态和超微结构。结果表明:江鳕精子由头部、颈部和尾部3部分构成,没有植入窝。头部呈椭球形,长(1.6±0.3)μm;颈部前宽后窄,长(0.6±0.2)μm;尾部细长,长(16.1±4.3)μm。江鳕精子头部有背腹之分,背部有少量细胞质;腹部主要是细胞核,其中染色质的电子密度呈均匀、致密分布,没有网络状间隙,细胞核前端无顶体。江鳕精子颈部由中心粒复合体和袖套构成。中心粒复合体分为近端中心粒和远端中心粒(基体),近端中心粒由9组三联微管组成,没有中央微管,近端中心粒的长轴与细胞核的长轴呈垂直关系。江鳕精子尾部的核心结构是轴丝,由9组外周二联微管和1对中央微管组成,是典型的"9+2"微管结构,尾部外表面有由质膜向两侧突出而成的侧鳍,左右侧鳍大小不同。     

纹缟虾虎鱼精子的主要生物学特性

选取健康成熟的纹缟虾虎鱼(Tridentiger trigonocephalus)进行人工采精,设定不同的盐度和温度梯度,观察其对精子活力及寿命的影响.测定了精子的大小、密度,并观察了精子的超微结构.结果表明,随着盐度和温度的上升,精子的活力和寿命都先增加后降低,在盐度5和温度19 ℃时,精子的活力和寿命分别达到最高.测得精子密度为(1.73×109±0.08×109)/mL,细胞核长径为(0.98±0.12)μm,短径为(0.81±0.08)μm,鞭毛的长度为(7.28±1.06) μm.电镜结果表明:纹缟虾虎鱼精子由头部和尾部(鞭毛)二部分组成,头部的细胞核近圆形,内有核空泡.精子细胞质膜与核膜间有较大间隙,两者之间分布有细胞质和线粒体.中心粒复合体位于植入窝中,由近端中心粒和基体两部分组成.袖套位于核后端,呈一筒状,两侧不对称,袖套腔较为狭窄,两侧分布有线粒体和少量囊泡.鞭毛的核心结构是轴丝,轴丝为典型的"9+2"结构,从轴丝的横切面观察到轴丝外面的质膜呈不规则分布.     

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为江鳕精子活力及人工繁殖受精率的提高提供参考,应用扫描电镜和透射电镜观察了江鳕精子的外部形态和超微结构.结果表明:江鳕精子由头部、颈部和尾部3部分构成,没有植入窝.头部呈椭球形,长(1.6±0.3)μm;颈部前宽后窄,长(0.6士0.2)μm;尾部细长,长(16.1±4.3)μm.江鳕精子头部有背腹之分,背部有少量细胞质;腹部主要是细胞核,其中染色质的电子密度呈均匀、致密分布,没有网络状间隙,细胞核前端无顶体.江鳕精子颈部由中心粒复合体和袖套构成.中心粒复合体分为近端中心粒和远端中心粒(基体),近端中心粒由9组三联微管组成,没有中央微管,近端中心粒的长轴与细胞核的长轴呈垂直关系.江鳕精子尾部的核心结构是轴丝,由9组外周二联微管和1对中央微管组成,是典型的“9+2”微管结构,尾部外表面有由质膜向两侧突出而成的侧鳍,左右侧鳍大小不同.     

胭脂鱼精子结构研究

用光学显微镜和透射电子显微镜对胭脂鱼精子的结构进行研究,并在光学显微镜下对精子各部分的长度进行测定.结果表明,胭脂鱼的精子主要分为头部、中段和尾部(鞭毛);头部在光学显微镜下近圆形,透射电镜下头部纵切似马蹄形;头部无顶体,主要由细胞核组成,核内染色质致密,核内有核空泡;核外可见清晰的核膜,头部几乎无细胞质存在;头部后端中央处有一较深的植入窝,深度占细胞核总长约2/3,植入窝内有中心粒复合体.精子的中片紧连在核的后端,由中心粒复合体和袖套组成;袖套两边接近对称;中心粒复合体由近端中心粒和远端中心粒组成;近端中心粒与远端中心粒之间的角度近直角,呈"T"字形;精子尾部轴丝与细胞膜之间有较大的空间,轴丝与细胞膜之间还有囊泡等细胞器;精子尾部有侧鳍;尾部可分为主段和末段,尾部主段具有典型的"9+2"的轴丝结构.光学显微镜测定结果表明,精子头长约(2.56±0.14)μm,尾部约(52.69±5.59)μm,全长约(55.51±5.67)μm.     

应用计算机辅助精液分析系统对梅山猪公猪精子运动特征的研究

为定量检测梅山猪公猪精子动态学参数,丰富梅山猪种质特性研究基础。采用计算机辅助精液分析系统对国家级梅山猪保种场6头成年种公猪精液进行实时检测。结果显示:梅山猪公猪精液中快速精子占74. 69%,前向性运动精子占61. 45%,a级精子占47. 30%;根据精子前向性运动分级标准,梅山猪公猪精子曲线速度(VCL)、直线运动速度(VSL)、平均路径速度(VAP)、线性指数(LIN)、直线指数(STR)、头部侧向运动平均振幅(ALH)、鞭打频率(BCF)分别为(63. 23±0. 26)μm/s、(18. 88±0. 13)μm/s、(33. 89±0. 15)μm/s、29. 86%、55. 71%、(3. 16±0. 013)μm、(6. 13±0. 028) Hz;在运动速度分级标准、世界卫生组织(WHO)分级标准、前向运动判断标准这3种分类标准中,除LIN、STR和振动指数(WOB),上述其他指标均呈极显著差异(P 0. 01)。研究首次及时准确地定量分析了梅山猪公猪精子的动态学参数,丰富了梅山猪的研究素材。     

鲇精子超微结构及pH、温度对其精子活力的影响

为了解鲇Silurus asotus精子的结构特征,应用扫描电镜和透射电镜技术,对体质量为320~550 g的鲇成熟精子结构进行了观察。结果表明:鲇精子由头和尾两部分组成,无明显颈部;精子头部近球形,直径为1.85~2.51μm,头部无顶体,头部内有高度密集的细胞核染色质,头部后方凹陷形成植入窝,植入窝内有近端中心粒和远端中心粒,细胞核后方与质膜的间隙较大(称袖套),其内富含细胞质、线粒体和囊泡等细胞器;尾部细长,无主段和尾段之分,长为44.3~50.7μm,横切面呈圆形,直径为0.269~0.308μm,透过横断面可见,鲇精子尾部由轴丝和附属纤维构成,外有一层质膜包裹,轴丝与远端中心粒形成"9+2"微管结构。研究表明,精子活力的适宜pH为7.0~8.5,适宜温度为25~29℃,当pH为8.0、温度为28℃时,精子活力最强。     

天府黑兔卵巢中卵泡发育的组织学研究

为了探索天府黑兔卵巢中不同发育阶段卵泡的组织定量结构,采用连续石蜡切片技术,对4只天府黑兔母兔的卵巢进行组织切片,在光学显微镜下观察,并利用组织形态测量软件测量不同发育阶段卵泡的直径、卵母细胞的直径和透明带厚度。结果表明:原始卵泡的直径为(40.23±0.27)μm,其卵母细胞的直径为(23.86±2.23)μm;初级卵泡的直径为(56.26±6.72)μm,其卵母细胞直径为(31.03±1.33)μm;次级卵泡的直径为(181.32±17.12)μm,其卵母细胞直径为(81.35±3.14)μm;三级卵泡的直径为(750.69±32.69)μm,其卵母细胞直径为(106.21±4.34)μm。卵泡直径(x)和卵母细胞直径(y)在发育过程中的回归关系是y=2.297x0.643(r2=0.88)。     

蛇鮈精子结构研究

通过光学显微镜和透射电子显微镜研究蛇鮈精子的形态学结构。结果表明,在光学显微镜下,蛇鮈精子主要分为头部和尾部,头长为(3.15 ± 0.44) μm,尾长为(37.34 ± 2.24) μm,尾长约为头长的12倍。在透射电子显微镜下可观察到蛇鮈精子由头部、中片和尾部3部分组成,头部无顶体,细胞核呈椭圆形,核内为致密物质,内有较大的核空隙。细胞膜与核膜之间几乎无空隙,后端具有较浅的植入窝,深度约占细胞核体积的1/6,植入窝内包含有中心粒复合体,其近端中心粒与远端中心粒呈“L”型。尾部可见轴丝为典型的“9+2”结构。尾部周围具有侧鳍,近核端具有囊泡鞘结构。研究认为,蛇鮈精子的结构符合体外受精鱼类对精子结构的要求,具有硬骨鱼类精子结构的普遍特点,但又具有一定的特异性。     

精子提取物对绵羊显微授精受精率及胚胎发育影响的研究

将绵羊精子可溶性撮物与上不运动绵羊精人同注射于体外成熟的绵羊卵母细胞并在体外培养，结果发现，共同注射的卵母细胞卵裂率、２￣１６细胞发育率，桑椹胚发率育，囊胚发育率均显著高于对照组，其中卵母细胞卵裂率和２￣１６细胞发育率还显著高于精子单独注射组；桑椹胚，囊胚发育率明显高于精子单独注射组。     

重金属铬对体外培养猪精子活力及蛋白磷酸化水平的影响

为探究铬元素在猪精子体外获能培养过程中,对猪精子活力、蛋白磷酸化信号通路的影响,研究采取八头杜洛克猪新鲜精液,分别在体外获能培养液中添加不同浓度的6价铬离子(0、0.1、0.5、1、2、10、100μmol/mL)以及双丁酰环腺苷酸(dbcAMP)、异丁基黄嘌呤(IBMX)、PKA抑制剂(H-89)等cAMP-PKAs信号通路调节因子进行调控培养2h。利用精子活力计算机检测(CASA)、蛋白质免疫印迹(WB)技术,分析测定猪精子体外铬暴露获能培养过程中精子活力、蛋白磷酸化水平,并用相应试剂盒检测细胞中甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)活性、腺苷-3′,5′-环化一磷酸(cAMP)及ATP水平。结果表明:铬离子对猪精子活力、蛋白磷酸化水平有抑制作用,且随铬离子浓度增加抑制作用增强。当铬浓度达到2μmol/mL时精子活力MOT(58.4%)显著低于获能培养组(73.6%)(P0.05);10μmol/mL铬处理明显抑制蛋白磷酸化水平,且细胞内GAPDH活性、cAMP及ATP水平显著降低(P0.05)。而10μmol/mL铬处理中分别添加葡萄糖(5.0μmol/mL)及dbcAMP(1.0 mmol/L)和IBMX(0.1 mmol/L),能缓解铬对蛋白酪氨酸磷酸化(PTP)、蛋白丝氨酸/苏氨酸磷酸化(P-PKAs)及GAPDH活性的抑制作用。结果提示铬可能是通过干扰糖代谢及cAMP/PKA信号通路影响猪精子活力及蛋白磷酸化水平。本研究首次探究了体外培养过程中铬离子对家畜精子活力的影响,并初步探究了其作用机理,为进一步研究铬离子引起繁殖毒性的分子机制及家畜繁育提供一定的理论基础。     

蟹类精子限制机制研究

为了确保雄蟹在被捕前至少有一次交配机会,在现代的渔业捕捞政策下商业性捕捞雄蟹通常设立最小捕捞规格,而雌蟹一般是被禁止的.最近调查表明,这种单一性捕捞政策的执行,降低了整个蟹类种群的规格,使可操作性率(OSR)向雌蟹偏移,可能造成精子限制.精子限制现象在自然界是存在的,渔业捕捞及蟹类固有的竞争机制加速了造成精子限制的可能.雄蟹的交配频率及规格是造成天然种群精子限制现象的主要原因,而蟹类独特的生殖系统及逐步改变的种群结构则加剧了这种现象.到目前为止,世界上关于经济蟹类精子限制现象机制的研究很多;不过还没有一套完整的理论或模型,无法直接给予和判定在某种捕捞压力下蟹类群体所受精子限制的程度.因此建立蟹类保护区或把捕捞季节放到蟹类交配季节之后可能是保护蟹类资源比较有效的方法.     

除精浆提高冷冻精液品质的实验研究

采用离心洗涤法去除精浆后,对精液进行冷冻处理。发现:1、除精浆精子冻后的活率、Ⅰ类顶体率和精子畸形率与未除精浆组存在显著差异(P<0．05);2、除精浆使稀释后精液精浆中GOT和LDH活性明显升高(P<0．05)。从平衡后到解冻后各组GOT和LDH活性都呈上升趋势。但除精浆试验组比未除精浆试验组上升缓慢;3、除精浆试验组精子的穿卵率、卵内平均精子数都显著高于未除精浆试验组(P<0．05);4除精浆离心洗涤液用生理盐水和脱脂乳-卵柠液．两者之间无显著差异(P>0．05)。     

不同浓度咖啡因对犬精液冷冻效果的影响

为提高犬冷冻精液的冷冻效果,试验向Tris-卵黄基础稀释液中添加不同浓度的咖啡因;结果表明:当所添加的咖啡因浓度为5.0mmoL/L时,精子活率为0.33±0.04(P0.01),显著对照组。添加浓度为12.5mmoL/L时,精子活率仅为0.23±0.04(P0.01),显著对照组。浓度为5.0mmoL/L时精子畸形率最低,为0.174±0.036(P0.01),显著对照组。但添加咖啡因的各组跟对照组在顶体完整率上并无显著差异。     

稀释液中添加不同浓度的维生素B12对牛细管冷冻精液精子形态的影响

为了阐明维生素B12（VB12）对牛细管冷冻精液形态的影响，在常规稀释液中分别添加0．00％、0．25％、0．50％、0．75％、1．00％的VB12进行试验，比较观察结果表明：0．50％组顶体完整率高于对照组，差异极显著（P〈0．01），0．75％组高于对照组差异显著（P〈0．05），1．00％组低于对照组，差异不显著（P〉0．05）。0．50％组的精子畸形率低于对照组，差异显著0．05），1．00％组高于对照组，差异不显著（P〉0．05）。显著（P〉0．05）。（P〈0．05），0．75％组低于对照组，差异不显著（P≥0．25％组的顶体完整率、畸形率与对照组相似，差异不     

牛精子核空泡观察方法的研究

利用Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ Ｉｎｔｅｒｆｅｒｅ Ｃｏｎｔｒａｓｔ Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ（ＤＩＣＭ法）、ＤＮＡ染色法、Ｅｌｅｃｔｒｏｎ Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ（ＥＭ法）３种方法检测精子核空泡，观察牛精子核空泡的大小及出现的多发部位。结果表明，应用ＤＮＡ染色法检测牛精子核空泡是最有效的方法，同是地发现牛精子核空泡多出现在精子头部赤道板区和核项区。     

大鳞大马哈鱼精子活力的观察

采集成熟的大鳞大马哈鱼精子,在不同的激活介质、人工精浆(ASP)、pH和温度条件下进行活力观察。结果表明:用生理盐水(BSS)激活的精子活力高于用水激活(P<0.05),单尾鱼的精子活力高于多尾混精(P<0.05);在ASP A,B和C液中,用ASP C液保存精子的效果最好(P<0.05);保持大鳞大马哈鱼精子活力较强的适宜pH值为8.19-8.40,而活力最强时pH值为8.40;在4℃下保存的大鳞大马哈鱼精子活力最高;大鳞大马哈鱼受精率最高时的温度和pH值分别为4℃和8.40,这与大鳞大马哈鱼精子活力最强时的温度和pH条件高度相关。