葡萄风信子基因转化受体系统的建立

以葡萄风信子(Muscari botryoides Mill)品种"紫葡萄"(Cantat)的鳞茎和叶片为外植体,通过植物组织培养再生系统的建立和抗生素敏感性试验,建立了稳定的葡萄风信子基因转化受体系统。结果表明,葡萄风信子的鳞茎和叶片均可被诱导形成大量的愈伤组织;叶片诱导愈伤组织的最适培养基为MS+0.6 mg/L 2,4-D+0.1mg/L 6-BA,其诱导频率可达100%;鳞茎诱导愈伤组织的最适培养基为MS+3.0 mg/L 2,4-D+0.3 mg/L 6-BA,其诱导频率达91.2%;愈伤组织分化不定芽的最适培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,生根最适培养基为1/2 MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1%AC;筛选卡那霉素的临界质量浓度为60 mg/L,羧苄青霉素的适宜质量浓度为300 mg/L。     

抗生素对高粱愈伤组织诱导和生长的影响

用羧苄青霉素等抗生素进行抑菌试验,以羧苄青霉素和头孢霉素的抑菌效果较好.头孢霉素对高梁愈伤组织的毒性表现出比羧苄青霉素大.浓度低于500 mg/L羧苄青霉素对高梁愈伤组织的生长起促进作用;而分化率随着羧苄青霉素浓度的提高而下降.在农杆菌介导高梁遗传转化时,选用羧苄青霉素是合适的,浓度以250 mg/L为宜.高梁愈伤组织对潮霉素的反应比卡那霉素更敏感,高梁不同基因型愈伤组织对卡那霉素和潮霉素的反应在褐化(死亡)率上表现不同.在以潮霉素作为抗性筛选标记时,选择压以50～75 mg/L为宜.     

天台铁线莲愈伤组织诱导研究

以浙江省特有种天台铁线莲为材料,研究了不同培养基、不同外植体和不同激素配比对其愈伤组织诱导的影响.筛选结果表明:MS为诱导愈伤组织的最适培养基;嫩茎的出愈率高、愈伤组织体积大,为愈伤组织诱导的最佳外植体;诱导嫩茎产生愈伤组织的最佳培养基为MS+BAP(苄氨基嘌呤)1.0 mg/L+NAA(萘乙酸)0.3 mg/L.     

苏丹草农杆菌介导法基因转化条件

以苏丹草幼穗诱导产生的胚性愈伤组织为材料,比较了抗生素羧苄青霉素、头孢霉素及筛选剂卡那霉素对愈伤组织生长、绿芽分化和绿苗生长的影响.结果表明:500 mg/L的羧苄青霉素对愈伤组织生长的影响与对照差异不明显,可提高愈伤组织绿苗分化率;500 mg/L的头孢霉素明显抑制愈伤组织的生长,对分化影响不大;愈伤组织生长期筛选剂卡那霉素浓度为75 mg/L时,愈伤组织的褐化率达到100%;愈伤组织分化期,卡那霉素浓度为10 mg/L时,绿芽能分化成幼苗,所有幼苗的心叶白化、生长速度与对照无差异.培养基中添加500 mg/L的羧苄青霉素、经农杆菌侵染和15 mg/L卡那霉素筛选获得再生植株,经PCR检测,初步证明NPTⅡ选择标记基因已整合到部分转化植株的基因组中.     

贡菊再生体系建立及羧苄青霉素浓度筛选

以贡菊试管苗叶片为外植体,研究了影响不定芽分化和生根的因素,旨在建立贡菊高效的再生体系,同时探究了羧苄青霉素浓度对叶片不定芽分化的影响,为贡菊育种奠定基础。结果表明:在MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.6 mg/L的培养基中,贡菊试管苗叶龄为25 d的叶片中愈伤组织诱导和不定芽分化率达到最高(88.4%),每个叶盘平均分化4.6个不定芽。当MS培养基中的IBA浓度为0.25 mg/L时,最适合贡菊试管苗根的生长,根长为4.5 cm,根数达15条,同时地上部茎叶生长也较好。低于250 mg/L的羧苄青霉素不影响不定芽愈伤组织中的诱导,但浓度高于500 mg/L时,抑制不定芽的分化。     

玉米湘农3号幼胚愈伤组织诱导及再生体系建立

以玉米品种湘农3号幼胚为外植体,以MS为基本培养基,研究2,4-D与NAA浓度配比对愈伤组织诱导、KT与IBA浓度配比对愈伤组织分化、NAA与6-BA浓度配比对试管苗生根的影响。结果表明:愈伤组织诱导的最适培养基为MS+2,4-D 2.0 mg/L+NAA 0.5mg/L;愈伤组织分化的最适培养基为MS+KT 1 mg/L+IBA 0.5 mg/L;生根的最适培养基为MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 0.6 mg/L。     

地被菊‘北林黄’再生体系的建立及其抗生素敏感性研究

采用地被菊‘北林黄’叶片为外植体进行愈伤组织的诱导和植株再生,并对25 d苗龄的幼嫩叶片进行抗生素敏感性实验,结果表明,不同的激素配比影响叶片的再生能力,其中以MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.6 mg/L诱导叶片再生率最高。幼苗的最佳增殖培养基为1/2MS+NAA 0.05 mg/L。叶片对G418十分敏感,G418的适宜使用浓度以10 mg/L为宜,羧苄青霉素的浓度以250 mg/L为宜。     

马铃薯地方主栽品种"春薯4号"遗传转化体系的建立

以吉林省马铃薯主栽品种"春薯4号"(Solanum tubberosum cv.Chunshu 4)无菌试管苗为材料,以茎段为外植体,采用L9(33)正交试验设计,研究植物激素对愈伤组织诱导和分化的影响;通过对遗传转化体系中的筛选剂浓度、抗生素种类及浓度等影响因素的优化,初步建立了马铃薯"春薯4号"的遗传转化体系.结果表明:最适合愈伤组织诱导的培养基配方为MS+2.0mg/L6苄氨基嘌呤(6-BA)+0.2 mg/L萘乙酸(NAA)+0.3 mg/L 2,4-二氯苯酚代乙酚(2,4-D),"春薯4号"茎段的愈伤组织诱导率最高,为98.57％,愈伤组织为淡绿色,呈致密的哑铃形;最适合愈伤组织分化的培养基为MS+3.0 mg/L 6-BA+1.5 mg/L吲哚乙酸(IAA)+1.0 mg/L玉米素(ZT),愈伤组织的分化出苗率最高,为54.1％,幼苗粗壮,畸形苗少;在遗传转化体系中,筛选剂双丙氨膦浓度为6.0 mg/L时,为愈伤组织最适筛选压,为4.5 mg/L时,为再生苗最适筛选压;农杆菌抑菌剂最适组合为500 mg/L头孢霉素+200 mg/L羧苄青霉素.     

红花玉兰快速繁殖的初步研究

以木兰科木兰属新种红花玉兰为材料,研究了不同培养基和激素配比对不同外植体愈伤组织诱导的影响。筛选结果表明:MS为诱导愈伤组织的最适培养基;休眠芽的成活率高,玻璃化率低,为愈伤组织的最佳外植体;诱导休眠芽产生愈伤组织的最佳培养基为MS+0.5 mg/L BAP(苄氨基嘌呤)+0.5 mg/L NAA(α-萘乙酸)。     

甘薯的组织培养

以甘薯的叶片为外植体进行组织培养,结果表明:适合甘薯愈伤组织诱导的培养基是MS+KT 2 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L和MS+KT 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L,适宜愈伤组织分化出根的分化培养基是MS+KT 0.5 mg/L或MS+KT 2 mg/L+NAA 0.5mg/L或MS+KT 2 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L,适宜根分化出试管苗的分化培养基为MS+KT 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L;增殖培养基为MS;生根的培养基为1/2 MS.