流式细胞光度术用于草莓倍性鉴定的研究

利用流式细胞光度术对草莓３个二倍体、１个五倍体、２个八倍体试管苗的细胞核ＤＮＡ的相对含量进行测定。结果表明,随着倍性水平的增加,细胞核ＤＮＡ相对含量随之成倍增加,说明可利用流式细胞光度术测定细胞核ＤＮＡ含量来进行倍性鉴定;利用这一技术对草莓几个杂交后代及诱变植株的倍性水平进行了鉴定,发现一诱变植株存在两群核ＤＮＡ相对含量相差近一倍的细胞,初步认为这一诱变植株为倍性嵌合体,该结果进一步证明这种方法的可靠性。     

大白菜小孢子植株群体染色体倍性鉴定方法

大白菜小孢子植株群体染色体倍性鉴定方法有直接法和间接法2种。直接法通常是以根尖、茎尖、愈伤组织、胚乳等为材料制备染色体标本,在显微镜下观察染色体数目的方法;间接法是利用流式细胞仪、细胞形态学、花粉、植株形态学等观察手段来鉴定植株的倍性。分析了各种方法的优缺点,并指出流式细胞仪鉴定是目前较好的鉴定方法。     

流式细胞光度术用于草莓倍性鉴定的研究

利用流式细胞光度术对草莓３个二倍体、１个五倍体、２个八倍体试管苗的细胞核ＤＮＡ的相对含量进行测定。结果表明,随着倍性水平的增加,细胞核ＤＮＡ相对含量随之成倍增加,说明可利用流式细胞光度术测定细胞核ＤＮＡ含量来进行倍性鉴定;利用这一技术对草莓几个杂交后代及诱变植株的倍性水平进行了鉴定,发现一诱变植株存在两群核ＤＮＡ相对含量相关近一倍的细胞,初步认为这一诱变植株为倍性嵌合体,该结果进一步证明这种方法的     

抱子甘蓝花培苗倍性的快速鉴定

采用花药培养获得加倍单倍体 (DH)是甘蓝类蔬菜自交不亲和系选育的主要方法之一 .然而 ,花药培养后代是倍性水平不同的混合群体 ,及早鉴定出真正的 DH具有重要的意义 .本文阐述 DNA流式细胞仪测定法和形态学鉴定法在花培苗倍性鉴定上的应用 ,并以抱子甘蓝的花培苗群体为材料 ,采用这两种方法鉴定其倍性组成 .结果表明 ,DNA流式细胞仪测定法可以鉴别群体的各种倍性水平 ,而形态学鉴别法可以把群体中的二倍体与单倍体、四倍体及其它倍体分开 .若以 DNA流式细胞仪测定法的鉴定结果为标准 ,苗期形态学鉴定的准确率可达 94.2 % .与 DNA流式细胞仪测定法相比 ,形态学鉴定方法具有更快速、简便和实用性强等特点     

一种快速的木本植物倍性检测方法

利用流式细胞仪对泡桐、悬铃木、刺槐三种木本植物进行了DNA含量测定和倍性分析，通过对3种木本植物的样本检测和分析结果．研究认为流式细胞仪在检测木本植物DNA含量和倍性分析上结果比较稳定一致，通过对大量样本的保存，处理方法及上样量对其检测结果影响的研究。得出流式细胞仪在木本植物DNA含量和倍性综合高效快速检测方法，从而为木本植物的遗传育种．倍性快速鉴定等方面提供理论依据。     

骨髓细胞DNA含量的分析在小儿急性白血病发生及其治疗方面的作用

流式细胞仪（ＦＣＭ）可以快速、准确地测定骨髓细胞ＤＮＡ含量,对骨髓细胞ＤＮＡ含量变化的分析,在研究小儿急性白血病发生及其治疗方面具有重要的临床意义。本文应用ＦＣＭ检测５４例常见血液病患儿骨髓单个核细胞（ＭＮＣ）的ＤＮＡ含量,以分析其倍体水平及细胞增殖周期,进一步探讨ＤＮＡ含量变化对小儿急性白血病的早期诊断、疗效评价、预后判断等方面的作用。１　对象与方法１．１　对象　（１）急性白血病组（ＡＬ）,初诊为急性白血病患儿４２例,其中急性淋巴细胞性白血病（ＡＬＬ）２２例,急性非淋巴细胞性白血病（ＡＮＬＬ…     

非洲菊大孢子再生植株倍性的快速鉴定方法

以非洲菊大孢子再生植株群体为材料进行倍性鉴定,并以染色体计数法的鉴定结果为依据,研究利用DNA流式细胞仪测定法、气孔保卫细胞叶绿体计数法和形态学特征鉴定非洲菊大孢子再生植株倍性的可靠性。结果表明,非洲菊大孢子再生植株是倍性水平不同的混合群体,倍性分布为单倍体、二倍体和混倍体,但不同基因型各倍性植株所占比例不同;根尖染色体计数法直观、准确,但因非洲菊染色体小且数目较多而导致计数困难;DNA流式细胞仪鉴定法的准确率达95%以上,可用于再生植株群体倍性的快速鉴定;气孔保卫细胞叶绿体计数法的准确性还有待进一步探讨;植株形态鉴定法受培养条件及评定标准的影响较大,准确率偏低。     

流式细胞术检测乌克兰鳞鲤倍性

[目的]筛选测定乌克兰鳞鲤（Cyprinus carpio）倍性的合适的方法。[方法]建立3种流式细胞术样品制备方法：肾组织单细胞悬液法、红细胞甲醛固定法和红细胞乙醇固定法。采用BD FACS tar Puls型流式细胞仪测定倍性。[结果]3种制样方法均能得到结果,但红细胞甲醛固定法最佳。[结论]流式细胞术可精确、快速地检测乌克兰鳞鲤倍性,适应其多倍体产业化的需要。     

2种鉴定黄颡鱼三倍体个体方法的比较

采用流式细胞仪(Becton Dickinson FACs calilbur)测量DNA相对含量和染色体计数2种方法,对随机选出的黄颡鱼鱼苗样本进行三倍体个体的鉴定和筛选.第1种方法是采取黄颡鱼血样,经PI染色,用流式细胞仪测定其倍性,结果14尾中有8尾黄颡鱼的DNA相对含量约是对照样本(二倍体)的1.5倍,证明为三倍体个体.染色体计数采用体内注射PHA短期培养法,经鉴定,相同样本中有8尾是三倍体,此结果验证了用流式细胞仪所测定的结果.通过比较得出.在多倍体育种工作中,尤其是诱导率不高的情况下.采集血样用流式细胞仪测定鱼体倍性是一种准确、迅速的方法,同时能够避免杀死鱼体,可以用来批量筛选多倍体鱼苗.     

菊花染色体倍性鉴定研究

[目的]综述菊花染色体倍性鉴定的常用方法及其在育种中的应用。[方法]重点介绍了染色体计数法和流式细胞术法,简要介绍了染色体倍性鉴定在菊花品种鉴定和育种中的应用情况。[结果]染色体计数法一般分为取材、预处理、固定、解离、染色、制片、镜检和制作永久玻片等步骤。流式细胞术鉴定法目前已成为倍性鉴定的主要方法,尤其适合大量样品的染色体倍性分析。介绍了流式细胞仪的结构与工作原理、使用方法与操作步骤。染色体倍性鉴定方法在菊花品种鉴定和育种中的应用主要在品种鉴定、杂交组合的选配、杂交后代材料的提前筛选和亲缘关系的鉴定4个方面。[结论]染色体计数法和流式细胞术法2种方法的结合有利于提高染色体倍性鉴定的效率和准确性。     

流式细胞术进行倍性分析的原理和方法

 倍性鉴定在遗传育种中具有十分重要的作用,倍性鉴定的方法一直是育种研究的重要内容之一。由于细胞核G1期的DNA含量反应一个细胞的倍性,因此常常用DNA 含量来估计细胞的倍性。流式细胞术(Flow Cytometry)是一种快速准确鉴定倍性的方法,其最突出的特点是测量快速,可在短时间内完成测定,而且操作简单。该方法包括完整核DNA 的提取和荧光染色,然后根据它们的相对荧光强度来分析DNA的含量。综述了流式细胞分析法在DNA倍性分析中的应用原理和方法,并阐述了流式细胞技术的优缺点。     

流式细胞术在蔬菜倍性鉴定中的应用

倍性鉴定一直是蔬菜育种研究的重要内容之一,而流式细胞术(FCM)是一种快速准确鉴定蔬菜倍性的方法。综述了流式细胞术倍性鉴定的原理、操作步骤、优缺点及其在蔬菜作物上的应用进展。     

利用流式细胞术检测甜菜染色体倍性和DNAC-值

【目的】研究流式细胞技术快速、准确、方便测定甜菜体内染色体倍性和DNAC-值,为甜菜染色体倍性、分子生物学领域的相关研究提供参考依据。【方法】以二倍体M39-8-4嫩叶为材料,以已知基因组的新疆野杏洛浦洪待克为外标,建立适合于甜菜染色体倍性和基因组的流式细胞术测定方法。【结果】经7种常用细胞解离液筛选, Marie's为甜菜作物的最佳选择。用Marie's解离液制备的甜菜细胞核悬浮液,测定4份甜菜材料和新疆野杏洛浦洪待克值的变异系数(CV)均小于5.0%,且上样速率超过 200 events/μL,可重复性好,结果清晰、可靠。M39-8-4超原、02343 刘福齐和7208 伊抗褐的DNA含量依次是821.88、891.9和1 759.59 Mb;待测材料LSR88-5-1为二倍体,DNA含量822.48 Mb。【结论】流式细胞术能准确区分不同倍性的甜菜材料;可作为鉴定甜菜倍性的方法。     

流式细胞仪在果树作物倍性鉴定上的应用

综述了流式细胞仪的发展历史、工作原理、使用方法及其在果树作物倍性鉴定上的应用进展,并对存在问题及今后的研究提出了建议。     

不同熟性大白菜小孢子植株倍性变异及倍性鉴定方法

对不同熟性的大白菜小孢子植株群体的倍性变异进行观察,研究利用DNA流式细胞仪测定、形态学特征鉴定大白菜小孢子植株群体的倍性变异.结果表明,小孢子植株是倍性水平不同的混合群体;不同熟性的大白菜小孢子植株群体的倍性分布不同,中晚熟大白菜小孢子植株双单倍体比例最高,春大白菜最低;单倍体植株在组培无性繁殖中部分会自然加倍;DNA流式细胞仪和形态学方法均可以鉴定群体的倍性水平.     

未名玫瑰葡萄秋水仙素诱导与鉴定

[目的]研究未名玫瑰葡萄秋水仙素处理的最适浓度和时间,及适宜的倍性鉴定方法。[方法]以秋水仙素为诱变剂,利用不同浓度的秋水仙素浸泡种子不同时间,对二倍体葡萄未名玫瑰品种进行加倍诱导,并采用流式分析仪对诱变植株的细胞DNA含量进行鉴定。[结果]从诱导成活率和四倍体诱变率综合考虑,诱变四倍体未名玫瑰种子的适宜条件:当种子胚根长1.0 cm时,用0.5%秋水仙素处理96 h,其成活率和四倍体率分别为11.33%和5.12%。[结论]用倍性分析仪测定细胞倍性是一条简便快捷的鉴定方法。处理时间是影响成活率、四倍体率和变异率的主要因素。     

利用流式细胞仪检测草莓倍性方法的优化

[目的]建立一套利用流式细胞仪快速鉴定草莓倍性的方法,为草莓新品种选育提供技术支持.[方法]以二倍体森林草莓、四倍体东方草莓、六倍体智利草莓和八倍体凤梨草莓为试材,通过改良提取液、增加离心和过滤次数等,应用流式细胞仪对大田生长的草莓植株根尖、茎尖和幼叶进行倍性检定.[结果]不同部位材料检测峰值有所不同,其中匍匐茎茎尖和根尖的细胞检测效果优于幼叶;在提取液中加入巯基乙醇,可使荧光通道值峰形更饱满;增加离心次数和上机前再过滤,可使峰值更清晰.[结论]利用流式细胞仪检测草莓倍性的优化条件为:采用匍匐茎茎尖或根尖的细胞为检测试材,在常规提取液中添加巯基乙醇来制备DNA悬浮液,DNA悬浮液离心漂洗3次后经300目尼龙网过滤再上机检测.