一株水华鱼腥藻溶藻菌的分离鉴定及菌藻关系初探

[目的]研究溶藻特性及菌藻关系,为进一步研究溶藻细菌对水华的治理作用提供帮助。[方法]从富营养化水体中分离得到一株有高效溶藻效果的菌株（S7）,研究了其对水华鱼腥藻（Anabaena flosaquae）的抑制效果、作用方式和不同环境因子对溶藻效果的影响,以及菌藻关系,并对菌株进行了菌体Poly-p染色、革兰氏染色和分子鉴定。[结果]菌株投加量为藻液量的30%时,7 d叶绿素a的去除率达到90%以上。pH为9、温度35℃下藻的去除率最高。S7菌株与水华鱼腥藻形成竞争共栖的生态关系,并通过分泌溶藻物质间接抑制水华鱼腥藻生长,且该物质具有一定的热稳定性。根据生理生化及16S rDNA序列分析鉴定,S7属于金黄杆菌属（Chryseobacteriumsp.）。[结论]该菌对水华鱼腥藻有较强的溶藻效果,且为聚磷菌。     

一株水华鱼腥藻溶藻细菌的分离鉴定和溶藻特性

从不同来源的水体和土样中，筛选出对水华鱼腥藻具有溶藻作用的溶藻菌株SLW6。对菌株SLW6进行形态特征分析和生理生化鉴定，及16S rDNA序列分析，并研究了溶藻菌在不同培养时期、不同pH条件下对菌株SLW6溶藻效果的影响，探究了该菌株对水华鱼腥藻的溶藻方式。结果表明：菌株SLW6呈革兰氏阴性，V-P试验、明胶液化试验、甲基红试验为阴性，过氧化氢试验、硝酸盐还原试验都为阳性，菌株SLW6与产碱杆菌属的Alcaligenes faecalis（NR113606.1）的同源性达到99.65%，结合形态学特征，生理生化鉴定和16S rDNA序列分析，初步判断溶藻菌株SLW6为产碱菌属（GenBank登录号为OP363821）。超声辅助热乙醇提取叶绿素a，分光光度法测定叶绿素a含量，用叶绿素a含量变化计算溶藻率，结果表明SLW6处于对数期时的溶藻效果最好，溶藻率达89.45%；在pH=7条件下，溶藻效果较好，溶藻率为47.03%；溶藻菌SLW6对水华鱼腥藻的作用方式是直接溶藻为主间接溶藻作用为辅。     

一株溶藻菌的分离及其溶藻特性分析

[目的]为微生物溶藻工程的实施提供较好的材料。[方法]以淮北水华严重地点作为取样点,筛选到溶藻效果明显的一菌株Q6,通过显微观察和叶绿素a下降率的测定等方法,研究其溶藻效果。[结果]该菌无菌滤液作用3 d,使藻培养液出现黄化,叶绿素a的下降率达70%;5 d时泛白,叶绿素a的下降率达85.6%;Q6菌株无菌滤液具有明显的溶藻效果,证实Q6是通过分泌胞外物质进行溶藻的。经高温、蛋白酶和乙醇处理后的上清液均能溶解水华鱼腥藻,溶藻物质应为具有热稳定性的非蛋白类、核酸和糖类等物质,推测为某种抗生素。[结论]该菌来源于池塘,菌体呈环形,革兰氏染色阴性,菌落有浅玫瑰红色,结合形态观察和生理生化特性分析,初步鉴定Q6为微环菌属。     

3株溶藻菌对水华鱼腥藻生长的效应

以分光光度法测定3株溶藻菌(AL-1、AL-6和AL-8)对水华鱼腥藻(Anabaena flos-aquae)生长效应和光合色素的影响.结果表明:3株溶藻菌均能显著抑制水华鱼腥藻的生长,对其生长速率、干重的抑制效应明显,并表现出一定的浓度相关性;且3株溶藻菌均能影响水华鱼腥藻的色素吸收光谱.3株溶藻菌溶藻方式略有不同,AL-1和AL-6可以通过分泌热稳定的物质和热不稳定的物质间接起到溶藻效果,而AL-8可同时通过直接和间接方式溶藻.     

溶藻细菌H5的分离、鉴定及溶藻特性研究

[目的]分离和鉴定溶藻细菌,研究其溶藻特性,为进一步研究溶藻细菌对水华的治理作用提供帮助。[方法]从香溪河春季水华集聚区水体中分离得到1株有高效溶藻效果的菌株(H5),采用16S rDNA序列相似性分析和Biolog微生物自动鉴定系统等对细菌进行鉴定。采用直接计数法,研究了其对汉斯冠盘藻(Stephanodiscus hantzschii)、倪氏拟多甲藻(Peridiniopsis niei)、具尾逗隐藻(Komma cau-data)的抑制效果,及对汉斯冠盘藻的溶藻作用方式。[结果]根据生理生化及16S rDNA序列分析鉴定,H5属于纺缍形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis)。该菌对汉斯冠盘藻、倪氏拟多甲藻、具尾逗隐藻的溶藻率最高为71.3%,最低为57.4%。培养滤液、热处理培养滤液对汉斯冠盘藻的生长具有明显抑制作用,而细菌无细胞提取物无溶藻能力。[结论]该菌对汉斯冠盘藻有较强的溶藻效果,且是通过分泌溶藻物质溶藻。     

海河流域溶藻菌Q1的溶藻效果分析及鉴定

从天津市海河富营养化的水域中分离到1株具有溶藻能力的细菌,将其命名为Q1,对该菌株进行生理生化鉴定及提取16SrRNA分子鉴定,将Q1以10%接种量接入铜绿微囊藻(Microcysis aeruginosa)、水华鱼腥藻(Anabaena flosaquae)和斜生栅藻(Scenedesmus obliquus)的纯培养藻液中,研究Q1对不同微藻的专一性及不同生长时期Q1的菌液对铜绿微囊藻生长的影响、作用方式。结果表明:菌株Q1属于苏云金芽孢杆菌属(Bacillus thuringiensis),该菌株稳定期的滤液溶藻效果最佳,菌株Q1能溶解水华鱼腥藻和铜绿微囊藻,对斜生栅藻也有促进作用。该菌株的无菌滤液经高温处理后,对铜绿微囊藻的溶藻效果没有影响,推断菌株Q1分泌的可耐高温的胞外物质。该菌株与藻体细胞相互抑制,存在竞争共栖的生态关系。     

一株溶藻真菌的初步分离鉴定及其溶藻作用研究

从水体中分离得到一株具有溶藻能力的真菌,命名为Am11.经形态学和18S rRNA序列对比分析,表明该菌株属于赤霉菌属(Gibberella).研究了该菌株对湖泊中优势藻的溶藻效果,初步探讨了其溶藻方式及溶藻物质.结果表明,该菌株对小球藻、惠氏微囊藻、栅藻和蛋白核小球藻具有一定的去除效果,对4种藻叶绿素a的去除率分别为82.5％、64.9％、63.5％和85.4％;该菌株对蛋白核小球藻是间接溶藻,且溶藻因子是菌体胞外分泌的具有热稳定性的非蛋白类物质.     

单嘧磺隆对水华鱼腥藻光合色素影响的初步研究

本文研究了单嘧磺隆对水华鱼腥藻(Auabaena flosaquae)光合色素的影响,结果表明:单嘧磺隆对水华鱼腥藻光合色素的影响表现为在低浓度(0.75mg.L-1以下)时,单嘧磺隆对水华鱼腥藻光合色素含量影响不大,仍能持续合成光合色素;而当浓度为7.5 mg.L-1以上时,则显著抑制水华鱼腥藻光合色素的合成,且96 h时单嘧磺隆对水华鱼腥藻叶绿素a、类胡萝卜素和藻胆素影响的IC50值分别为3.38、3.6和7.4 mg.L-1。     

溶藻细菌F8与藻毒素降解菌T1的原生质体融合研究

为制备出兼具溶藻及降解藻毒素(MC-LR)的双效工程菌,研究不同的亲本原生质体灭活方式、不同PEG浓度、pH以及作用的温度对原生质体融合的影响,探讨溶藻细菌F8与藻毒素降解菌T1菌株的原生质体融合的适宜条件。结果表明,对F8菌株的原生质体采用45℃热灭活、T1菌株的原生质体紫外灭活,采用pH为8.0的30%的PEG溶液,融合温度为30℃,原生质体融合率可达28.17%。     

单嘧磺隆对水华鱼腥藻生长的影响

研究单嘧磺隆对水华鱼腥藻(Anabaena flosaquae)生长的影响.结果表明,单嘧磺隆在低浓度(0.75 mg·L-1以下)时,对水华鱼腥藻细胞数、干重和生长速率的影响不大,仍能持续合成生长;而当单嘧磺隆浓度为7.5 mg·L-1以上时,则显著抑制水华鱼腥藻的生长,且高浓度时对水华鱼腥藻产生较强毒性,处理72 h时的EC50值为0.99 mg·L-1.可见选择对固氮蓝藻安全的除草剂单嘧磺隆,对维护稻田生态、促进农业可持续发展具有重要意义.     

水华鱼腥藻超弱发光初探

首次用BPCL微弱发光测量仪测得蓝藻门中的水华鱼腥藻发射的自然超弱光,结果表明:水华鱼腥藻的光子计数率-时间曲线遵循双曲线衰减规律,这一点说明生物光子是具有一定相干性的;藻类浓度(个·mL-1)与超弱光光子计数率呈显著正相关(r=0.96)。     

无机盐诱导两种蓝藻异形胞的效果比较

蓝藻异型胞与生物固氮密切相关,同时也是蓝藻产氢的主要场所。采用17种无机盐,对两种蓝藻的异型胞分化进行诱导,实验结果表明：低渗水平浓度（0．05mol／L）的NaCl,MgCl2和MgSO4,既促进水华鱼腥藻（Anabaena flos—aquae）生长,又促进其异形胞的分化。其中,MgCl2对两者的促进作用最明显,分别比对照提高了1．5倍和1．2倍。17种无机盐中,只有MgSO4对念珠藻（Nostoc sp．）的生长和异形胞的分化都有促进作用,分别比对照提高了50％和56％。对两种藻的比较结果发现,无机盐对水华鱼腥藻的诱导作用明显大于念珠藻。     

氨基甲酸酯类农药对水华鱼腥藻的毒性效应

以水华鱼腥藻为材料研究了 6种氨基甲酸酯类农药对藻类的毒性效应。结果发现 ,6种氨基甲酸酯类农药对水华鱼腥藻都有不同程度的毒性作用。同时研究了氨基甲酸酯类农药对水华鱼腥藻的LOEC、NOEC和MATC值 ,发现不同农药的LOEC、NOEC和MATC值也不相同。     

DDT降解菌DH-7的分离鉴定与降解特性研究

[目的]研究DDT降解菌的生物学、降解特性及其发酵条件的优化。[方法]从化工厂采集土样,分离、筛选到1株能够在好氧条件下DDT降蟹率较高的菌株DH-7,并对其进行研究。[结果]通过16SrDNA序列分析结合传统分类学方法初步确定菌株DH-7为铜绿假单胞菌。对菌体降解DDT特性的研究表明,该菌株对DDT降解10d的降解率为73．6％。在优化培养条件后,该菌株10d的降解率达81．4％。[结论]该研究结果为DDT污染土壤的生物修复提供依据。     

低能N+离子注入对酿酒酵母乙醇发酵活性的影响

[目的]研究低能N^＋离子注入对酿酒酵母乙醇发酵活性的影响。[方法]选取scerevisiaeAS2．399作为受体菌,经过不同剂量的低能N^＋离子注入后,确定最佳的注入参数,并研究离子注入对S．cerevisiae AS2．399乙醇发酵效率以及对乙醇发酵关键酶表达的影响。[结果]酿酒酵母As2．399在N^＋注入剂量为10×10^15 ions／cm^2条件下的存活率约为25％,传代培养后菌株发酵乙醇的产率约为0．42g/g（达到理论产率的84％）,相比于原始菌株有微弱提升,而与乙醇发酵相关的丙酮酸脱羧酶和乙醇脱氢酶酶活值分别达到0．53和2．47μmol／ml·min,大于原始菌株的相应酶活。[结论]该研究结果可为采用低能离子注入技术对酿酒酵母改良,以拓宽其利用底物的广度和提高发酵乙醇的效率奠定基础。     

铜绿微囊藻·螺旋鱼腥藻和水华束丝藻竞争优势的研究

用铜绿微囊藻、螺旋鱼腥藻和水华束丝藻进行单独培养和共培养,研究其生长特性和培养液N、P含量变化,探讨其竞争优势.结果表明:单独培养时,水华束丝藻生长优势最显著,其次是螺旋鱼腥藻;共培养时,水华束丝藻完全被抑制,P含量较高时,螺旋鱼腥藻生长占优,P含量较低时,铜绿微囊藻占优.铜绿微囊藻和螺旋鱼腥藻均向水体中分泌或释放较多的含N化学物质,而水华束丝藻几乎不分泌或释放含N物质.铜绿微囊藻、螺旋鱼腥藻、水华束丝藻和混合藻吸收的N、P比值分别为12.1、14.8、12.5和15.2,推测此比值是它们生长最适N、P比.该研究为解释自然水体中蓝藻水华优势种演替的原因提供了新证据.