海南地区油茶未成熟胚分生结节的植株再生

[目的]建立海南地区油茶未成熟胚再生体系,为油茶组培快繁和遗传转化研究提供技术支持.[方法]以海南本地油茶合子胚为外植体,对其进行初代诱导、分化和增殖培养,筛选出最适于诱导分化的外植体胚发育时期,明确植株再生途径,从而建立分生结节组织植株再生体系.[结果](1)盛花期后240~300 d的油茶幼胚在改良MS+激动素(KT)2.0 mg/L+萘乙酸(NAA)0.2 mg/L+玉米素(ZT)5.0 mg/L培养基上,初代诱导率在90.0%以上,以分生结节组织为主;(2)分生结节组织的适宜增殖培养基为改良MS+KT 1.0~2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,增殖系数约4.6;(3)未成熟胚分生结节组织的分化培养基为改良MS+6-苄氨基嘌呤(6-BA)2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+吲哚-3-乙酸(IAA)0.2 mg/L+ZT 5.0 mg/L+酸水解酪蛋白(CH)400.0 mg/L,平均每块分生结节组织诱导不定芽11.3个,不定芽以无糖暴露培养生根方式生根,移栽成活率为91.6%;(4)分生结节组织在改良MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+ZT 5.0 mg/L+CH 400.0 mg/L上以分化体细胞胚状体为主,每块分生结节分化6.5个体细胞胚状体,具双子叶的体细胞胚状体在改良MS+6-BA 0.2 mg/L+IAA 2.0 mg/L+赤霉酸(GA3)0.5 mg/L+CH 200.0 mg/L培养基上有效成熟和萌发,萌发率为72.1%,胚芽和胚根有效伸长形成体胚再生植株,移栽成活率为94.7%.[结论]以油茶未成熟合子胚为外植体,通过分生结节组织方式增殖,可经体细胞胚状体发生和不定芽发生两种途径成功建立海南油茶未成熟胚分生结节植株再生体系.     

番茄与茄子离体嫁接试验

以番笳和茄子为试验材料,采用离体嫁接的方法,研究了不同砧穗组合和激素配比对嫁接成活率的影响,并对嫁接接合部组织的分化和变异进行了探索.结果表明,以番茄作砧木,茄子作接穗的砧穗组合在MS 6-BA 0.1 mg/L KT0.1mg/L IBA 0.05mg/L培养基上的嫁接成活率最高,接穗生长量最大:嫁接接合部组织在不同培养基上分化变异不同,其中在MS 6-BA1.0 mg/L ZT 2.0 mg/L NAA 0.1 mg/L和MS 6-BA 2.0 mg/L IAA 0.2 mg/L NAA 0.1 mg/L培养基上嫁接接合部愈伤组织分化率最高,为60.0%;在MS 6-BA 1.0 mg/L ZT 0.5 mg/L IAA 0.2 mg/L和MS 6-BA 2.0 mg/L IAA 0.2 mg/L NAA 0.1 mg/L培养基上分化的芽出现变异,变异率为3.3%.     

不同品种红小豆的组织培养与快繁技术

以红小豆新品种保876-16和保红947的小真叶为外植体,进行组织培养与高效快繁技术研究,确定最适的愈伤诱导、继代增殖、生根培养的激素浓度,以及不同移栽基质对成活率的影响.结果表明:愈伤诱导率最高的培养基为MS+6-BA 0.2 mg/L+ NAA 0.1 mg/L,出愈率达75.9％,愈伤组织紧密且呈现暗绿色;丛生芽增殖的最适培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+ NAA 0.2 mg/L,芽分化率达94.4％,分化时间短,分化芽健康;生根培养的最适培养基为1/2MS+ NAA 0.2 mg/L+IBA 0.2 mg/L,生根率达80.4％,生根快,根粗壮;组培苗在腐殖质:河沙为1∶1的基质中成活率高.红小豆保876-16的愈伤诱导率、芽分化率、生根率总体高于红小豆保红947.     

西葫芦未受精子房离体培养的影响因素

【目的】探究西葫芦未受精子房离体培养的主要影响因素,以提高其胚状体诱导率和生根品质,增加再生植株数量,丰富西葫芦育种材料。【方法】以西葫芦"春玉一号"未受精子房为材料,分析MS、B5、N6和White 4种基本培养基的诱胚效果;在MS培养基中添加不同质量浓度的6-BA(0,0.5,1.0,2.0mg/L)和NAA(0,0.2,0.5,1.0mg/L),筛选2种激素的最佳组合;之后添加不同质量浓度的2,4-D(0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0mg/L),筛选2,4-D的适宜质量浓度;在MS培养基中添加不同质量浓度的NAA(0,0.05,0.1,0.2,0.5,1.0mg/L),分析其对胚状体芽生根效果的影响。【结果】西葫芦未受精子房以MS为基本培养基时胚状体诱导率最高,为16.67%;在MS培养基中添加1.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA时的诱导效果最好,诱导率为19.76%;在MS+30g/L蔗糖+8g/L琼脂+1.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA培养基中添加1.0mg/L 2,4-D可以加快胚珠膨大的速度,增加胚珠转绿的数量,但对出胚的提高效果不显著。MS+30g/L蔗糖+8g/L琼脂+0.1mg/L NAA有利于提高胚状体芽的生根品质,且根系生长健壮。【结论】MS+30g/L蔗糖+8g/L琼脂+1.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+1.0mg/L 2,4-D是西葫芦未受精子房离体培养中胚状体诱导的最佳培养基,MS+30g/L蔗糖+8g/L琼脂+0.1mg/L NAA是诱导其胚状体芽生根的较适宜培养基。     

利用花序轴组培快繁青花菜萝卜胞质雄性不育系的研究*

 以萝卜胞质不育型青花菜的幼嫩花序轴为外植体进行组织培养,可成功诱导出苗。将幼嫩花序轴接种到不同激素配比的诱导培养基上,均有愈伤组织产生,其中在MS + 6-BA 1.0mg/L + NAA 0.2mg/L培养基培养效果最好,诱导率高达100%;用MS + NAA 0.01mg/L +KT 0.2mg/L + 6-BA 0.5mg/L分化不定芽时,不定芽分化效果最好,芽分化率可达6.16;用1/2 MS + NAA 0.2mg/L进行生根培养,生根率高达86.7%,平均根数13.5条,在一定的温度和湿度条件下培养,移栽成活率可达85%以上。     

丽格海棠叶片优化培养高效再生体系的研究

以丽格海棠叶片为外植体,进行不定芽的诱导和植株再生试验研究,结果表明:叶切块可直接分化不定芽,以MS+6-BA2.0 mg/L+TDZ0.1 mg/L+NAA0.5 mg/L是较适合的分化培养基,分化率达100%,平均芽数8.1;不定芽增殖以MS+6-BA 1.0 mg/L+KT0.5 mg/L+NAA0.2 mg/L效果较好,平均增殖倍数为12.2左右,生根培养基以1/2MS+NAA0.1 mg/L+IBA0.3 mg/L效果较好,平均生根数为4.4条左右,生根率为100%;瓶苗移栽于森林土∶草碳=(1∶1)的基质中生长良好,成活率达98%以上.     

两种杏的幼胚培养

胚挽救技术是目前克服果树杂种胚早期败育的有效途径,为了探明‘黄河’‘金太阳’两个杏品种幼胚培养成苗的基本方法,以两种杏不同发育期的幼胚为试验材料,利用组织培养的方法研究了胚龄、基本培养基、植物生长调节剂等因素对幼胚萌发、成苗的影响.结果表明:基因型、胚发育指数(PF)、培养基均显著影响幼胚萌发与成苗.不同品种均随PF值的增大幼胚萌发率上升;‘黄河’杏在PF值为0.92时,萌发率最高,达61.90%;‘金太阳’杏在PF值为0.95时,萌发率最高,达71.00%.不同品种幼胚萌发的最佳培养基不同,‘黄河’杏胚萌发的最佳培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+IAA 0.1mg/L+GA 2.0mg/L,萌发率达55.67%;‘金太阳’杏胚萌发的最佳培养基为1/2MS+6-BA 0.5mg/L+IAA 0.1mg/L,萌发率达88.67%;‘黄河’杏继代培养在MS+6-BA 0.2 mg/L+IAA 0.5mg/L培养基上长势好,成苗率达75.00%;‘金太阳’杏继代培养在MS+6-BA 0.25 mg/L+IAA 0.1mg/L培养基上长势好,成苗率达44.44%;二种杏胚继代培养形成的嫩梢在1/3MS培养基上的生根率比MS及1/2 MS培养基上的生根率高.     

宽叶武竹的组培快繁技术研究

以宽叶武竹新发嫩枝上茎尖、茎段为材料,研究了不同的激素配比对其芽诱导、增殖和生根的影响。结果表明:芽诱导适宜培养基为MS+6-BA 0.5mg/L+KT 0.1mg/L,芽增殖适宜培养基为MS+6-BA0.3mg/L+KT 0.1mg/L,生根适宜培养基为1/2MS+IBA 1.0mg/L+NAA 0.2mg/L。在生根培养中采用5mm长的茎尖进行生根培养,生根率最高可达91.0%,生根苗的炼苗成活率达90.0%以上。     

红掌组培快繁技术优化研究

[目的]对红掌组培快繁技术体系进行优化。[方法]以红掌红粉佳人品种为材料,通过设置不同的基本培养基和激素配比,研究红掌的不定芽诱导、增殖和生根等情况,以筛选出最佳的培养配方和方法。[结果]最佳愈伤组织诱导和不定芽分化培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L+NAA 0.1 mg/L,其愈伤组织诱导率为73.3%,不定芽分化率为90.9%;在增殖培养基MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L上诱导出的芽数量与大小最适宜;生根培养以1/2MS+NAA 0.2 mg/L+活性炭1.0 g/L培养基表现最好;移栽基质以珍珠岩+草炭土(1∶1)混合栽培基质成活率最高,达95.6%。[结论]为红掌种苗的工厂化生产提供了参考。     

番茄与茄子嫁接接合部愈伤组织分化与植株再生

以番茄为砧木,茄子为接穗进行嫁接,通过外力去除接穗,使嫁接接合部愈伤组织分化出不定芽,分化率为54.55%,从形态上观察,部分不定芽产生了变异,变异率为9.09%;将嫁接接合部愈伤组织接种在MS 1.0mg/L6-BA 2.0 mg/L ZT 0.1 mg/L NAA和MS 2.0 mg/L6-BA 0.2 mg/L IAA 0.1 mg/L NAA的2种培养基上,愈伤组织分化率最高为60.00%,在MS 1.0 mg/L 6-BA 0.5 mg/L ZT 0.2 mg/L IAA和MS 2.0mg/L6-BA 0.2 mg/L IAA 0.1 mg/L NAA2种培养基上分化的芽出现变异,变异率为3.33%。     

金边瑞香的组培快繁技术研究

以金边瑞香的茎段为外植体,在MS基本培养基中添加不同浓度的6-BA和NAA,采用侧芽诱导法快速繁殖,研究了金边瑞香的组培快繁技术。结果表明,最佳启动培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1~0.2 mg/L,最佳增殖培养基是MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA0.2 mg/L,最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/L,生根率100%,且根系发达。经过该试验的驯化移栽,试管苗成活率达85%以上。     

葡萄水仙离体快繁技术研究

采用不同诱导、增殖和生根培养基进行葡萄水仙鳞片离体快繁技术研究,结果表明:鳞片不定芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA1.0~1.5 mg/L+NAA 0.2~0.4 mg/L;不定芽增殖培养的最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L;最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.3 mg/L;蛭石是葡萄水仙试管苗最佳的驯化移栽基质,在该基质中生根苗移栽成活率达90%。     

滁菊组织培养脱病毒技术研究

采用改良热处理结合茎尖分生组织培养的方法,建立滁菊组培脱毒快繁技术体系.研究结果表明,滁菊茎段诱导的最佳培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;茎尖增殖的最佳培养基为MS+1.0mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;壮苗生根的最佳培养基为1/2MS+0.1mg/L NAA.接种脱毒结果为,脱毒率＞83%,茎尖成活率＞42%.     

大花卷丹离体培养快速繁殖体系的建立

以大花卷丹为试材,以MS培养基为基础培养基,附加不同种类和质量浓度的植物生长调节剂(6-BA、NAA),研究大花卷丹离体培养快速繁殖技术。结果表明,鳞片组培快繁的最佳取材部位是中层鳞片。大花卷丹不定芽分化最佳培养基为MS+NAA 0.3mg/L+6-BA 1.5mg/L,其分化率可达76.7%。最佳增殖培养基为MS+NAA 0.2mg/L+6-BA 2.0mg/L,增殖系数达到4.91;最佳生根培养基为MS+IAA 0.2mg/L,生根率达到96.7%,平均每苗根数可达8.8条。移栽前期最佳的基质配比为河沙∶草炭土=1∶1,成活率达到76.0%。     

杂交相思组织培养研究初报

【目的】筛选杂交相思组织培养不同培养阶段的培养基配方,为实现杂交相思工厂化育苗提供技术参考。【方法】用杂交相思嫩茎为外植体,探究生长调节剂6-BA、NAA、IBA对其诱导出芽、继代增殖和诱导生根的效果。【结果】在不添加6-BA的情况下,添加0.2mg/LNAA时芽诱导率为60.0%,当添加0.2mg/L的6-BA后,诱导率为42.0%。当NAA为0~0.5mg/L时,随着6-BA的增加,增殖系数随之增加,6-BA为0.8mg/L时,增殖系数为4.2;当6-BA为1.0mg/L以上时,继代苗的增殖系数为1.0。以改良MS为基本培养基,在NAA1.0mg/L的条件下添加0.5、1.0mg/L的IBA生根诱导率分别为17.5%、24.0%;以改良1/2MS为基本培养基,在NAA1.0mg/L的条件下,添加0.5mg/L的IBA生根率为91.7%,当添加IBA为1.0mg/L时,生根率降到50.0%;生根苗移栽基质以黄心土与河沙或蛭石混合较好,移栽成活率在85.0%以上。【结论】改良MS＋NAA0.2mg/L培养基是较适宜芽诱导的培养基;改良MS＋6-BA0.8mg/L＋NAA0.5mg/L培养基较利于继代苗的生长;改良1/2MS＋NAA1.0mg/L＋IBA0.5mg/L培养基较改良MS培养基有利于诱导生根。     

紫心马铃薯品种黑美人组织培养技术

[目的]研究紫心马铃薯品种黑美人的组织培养技术,为其种薯工厂化生产提供技术支持.[方法]以紫色马铃薯品种黑美人的顶芽及不同部位腋芽为外植体,探讨0.1％ HgCl2对外植体灭菌、6-BA对初代培养、6-BA和PP333组合对增殖培养、NAA对生根、糖对结薯等过程的影响.[结果]在4.0～9.0min范围内,以0.1％升汞溶液对顶芽、第2段腋芽、第3段腋芽及以下芽分别处理5、6、8 min的灭菌效果最好.在MS培养基中添加0～3.0 mg/L 6-BA,顶芽、第2段腋芽、第3段腋芽及以下芽的适宜初代培养基分别为MS＋1.0 mg/L 6-BA、MS＋1.5 mg/L 6-BA、MS＋2.0 mg/L6-BA.在MS培养基中添加0～3.0mg/L 6-BA和0～0.4 mg/L PP333,较适宜的增殖培养基为MS＋3.0 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L PP333,最高增殖倍数为7.0.在0～0.6mg/L NAA内,较适宜的生根培养基为MS＋0.4 mg/L NAA,最高生根率达100.0％.MS培养基中添加30.0～80.0 mg/L糖,较适宜的结薯培养基为MS＋60.0 g/L糖,最高结薯率达93.3％.[结论]成功构建了紫色马铃薯黑美人的再生繁殖体系,获得无菌苗及试管薯,该繁殖技术可用于其种薯工厂化生产.     

红叶李离体茎段培养与微体快繁的研究

[目的]为红叶李的商品化生产、遗传转化和品种定向改良奠定基础。[方法]以红叶李茎段为外植体,在MS、1/2MS基本培养基中添加不同浓度的6-BA和NAA,研究不同激素浓度对红叶李增殖和生根的影响,建立红叶李的离体繁殖体系。[结果]适量浓度的6-BA和NAA组合比单独使用6-BA诱导率高,处理⑤(6-BA、NAA的浓度分别为1.0、0.2mg/L)的诱导率达75.0%,且腋芽生长良好。处理⑥(6-BA、NAA的浓度分别为2.0、0.2mg/L)的增殖系数为7.67,芽苗高度大于2cm的芽数为4.76。适合红叶李生根的最佳IBA浓度为0.5mg/L,生根率达98.3%。试管苗移栽成活率达85%以上。[结论]红叶李离体培养的最佳启动培养基为MS+6-6-BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L,最佳增殖培养基为MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L,最佳生根培养基为1/2MS+IBA0.5mg/L。     

甘薯茎尖培养与脱毒技术研究

以红姑娘2号甘薯为材料,研究6-BA、NAA、GA,不同配组对茎尖培养的影响,并采用温水钝化法及适宜的茎尖大小来提高红薯病毒脱毒率,用指示植物法对再生植株无性系进行病毒检测。研究结果表明,培养基中的6-BA、NAA、GA,不同浓度配比对红姑娘2号甘薯茎尖培养不定芽、不定根的诱导有明显的影响。在诱导产生愈伤组织和丛芽阶段,培养基MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．01mg／L＋GA30．1mg／L效果较好。而1／2MS＋NAA0．2mg／L是红姑娘2号试管苗的适宜生根培养基。通过指示植物法检测90个无性系,平均脱毒率为96．7％。     

多倍体萱草的离体快繁技术

以多倍体萱草的嫩叶、生长点、腋芽、花蕾、花瓣和花茎作外植体进行离体快繁技术研究。结果表明:以幼嫩的花蕾和花瓣为外植体最为适宜;以MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+2,4-D 0.7 mg/L为最适诱导培养基,诱导分化率可达74%以上;以MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L为最适继代增殖培养基,增殖系数可达5.8;以MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+IBA 0.02 mg/L+马铃薯20 g/L为壮苗培养基。培养1~2周后转入MS+NAA0.04 mg/L的生根培养基中,其平均根长、根长势等最为理想,生根率达100%,且移栽后成活率高,生长健壮。     

红叶石楠离体快繁技术体系的建立与优化

以红叶石楠茎尖为外植体,探讨不同植物激素6-BA、IBA、NAA的浓度对试管苗增殖以及植株再生的影响,建立了一套红叶石楠离体培养技术体系。试验结果表明:红叶石楠初代培养采用MS+6-BA1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L培养基、茎尖继代培养采用MS+6-BA 2.0 mg/L和NAA 0.1 mg/L的培养基为宜,通过正交试验确定,植株增高选用MS+6-BA1.0+IBA 0.2 mg/L+NAA 0.2 mg/L的培养基效果较好,生根培养选用1/2MS+IBA1.0～1.5 mg/L培养基,生根率、移栽成活率可达100%。