翠绿1号假俭草种子愈伤诱导和植株再生

本研究以优良品系翠绿1号假俭草的种子为外植体,成功地建立了再生体系.基本培养基为MS,在添加了2,4-D 1.5 mg/L的培养基上最适于种子愈伤诱导,愈伤诱导率为99%,黄色颗粒愈伤诱导率为4.8%,愈伤最佳继代培养基为MS+2,4-D 1.5 mg/L;在最佳分化培养基MS+ KT 2.5 mg/L上,黄色愈伤分化率为99%,芽最佳生长培养基为MS+ BA2.0 mg/L+NAA0.7 mg/L;试管苗最佳生根培养基为MS+NAA0.6 mg/L,生根率达到99%;生根的试管苗移栽到装有田园土的土盆中,其存活率达到88%.     

兰州百合花丝组培诱导完整植株的研究

采用组织培养技术对兰州百合花丝愈伤组织的诱导、分化、继代和增殖培养及再生苗的生根进行的研究结果表明，在不同激素组合的培养基上兰州百合花合丝均能诱导出愈伤组织，但一次性成苗能力不同。在诱导愈伤组织的形成及分化中以MS＋BA1．0mg/L NAA0.5mg/L培养基的效果最佳，其发化率达41．67％，分化苗色绿、生长健壮；继代和增殖培养基以MS＋BA1．5mg/L＋NAA0．3－0．5mg/L为好，试管苗月增殖率5倍左右，再生植株生根的理想培养基为B5＋IAA0．2mg/L，生根率达90．5％。     

草地早熟禾植株再生体系建立的初步研究

为培育优良抗性品种,选取新歌来德(Nuglade)、自由Ⅲ(Freedom Ⅲ)和优异(Merit)3个草地早熟禾品种的不同外植体,在不同浓度的6-BA,KT和NAA的培养基上进行植株培养,研究其对愈伤组织诱导率、绿苗分化率及生根的影响。结果表明:在不同培养基上,不同外植体愈伤组织的诱导率有较大的差异。草地早熟禾种子的愈伤组织诱导和继代培养基以MS(有机)+B5(无机)+2 mg/L 2,4-D+0.4 mg/L 6-BA为最佳;分化培养基以MS(有机)+B5(无机)+1.0 mg/L KT或MS(有机)+B5(无机)+1.0 mg/L 6-BA为最佳;生根培养基以1/2(MS(有机)+B5(无机))+0.8 mg/L NAA最佳。初步建立起草地早熟禾的植株再生体系。     

玉米骨干自交系幼胚再生体系的建立

以玉米骨干自交系‘87-1’、‘综3’、‘137’和‘K12’的幼胚为外植体,研究了影响玉米幼胚再生体系建立的相关因素.结果表明:87-1幼胚在附加500 mg.L-1L-Pro5、00 mg.L-1L-Asn和2.5 mg.L-12,4-D的N6B5基本培养基上愈伤组织诱导率最高,平均可高达98.1%;初级愈伤组织在附加500 mg.L-1L-Pro5、00 mg.L-1L-Asn和1.25 mg.L-12,4-D的N6B5继代培养基上胚性愈伤组织诱导率最高,平均可高达65.6%.在相同诱导、继代培养基和相同培养条件下,4个不同基因型玉米骨干自交系的愈伤组织诱导率无显著性差异,而其胚性愈伤组织诱导率具有显著性差异.继代培养次数对绿苗分化率也产生重要影响,具有显著性差异,其中,1次继代分化率最高;1/2MS培养基附加0.2 mg.L-1KT更有利于分化苗生根.     

小叶女贞愈伤组织培养技术研究

探讨小叶女贞愈伤组织最佳培养条件,为进一步建立悬浮培养体系奠定基础。通过选取小叶女贞幼嫩外植体接种于不同植物生长调节剂的MS培养基中,进行愈伤组织诱导与增殖研究,以纯化的愈伤组织建立悬浮细胞系。结果表明,小叶女贞愈伤组织最适诱导培养基为MS+2,4-D 0.3 mg/L+6-BA 1.5 mg/L,初期增殖培养基为MS+2,4-D 0.3 mg/L+6-BA 1.5 mg/L,长期继代培养基为MS+2,4-D 1.5 mg/L+6-BA0.3 mg/L,可获得疏松的愈伤组织。结果表明,小叶女贞通过外植体诱导与增殖愈伤组织,可建立悬浮细胞系。     

粳型超级稻胚性细胞悬浮系的建立及植株再生

以北方粳型超级稻沈农265成熟胚为材料,对其胚性悬浮细胞系建立与植株再生进行了研究.结果表明,弱光下培养20 d,有利于成熟胚诱导出质量较好的愈伤组织,这些愈伤组织在添加2,4-D(3.0 mg/L)和脯氨酸(500 mg/L)的N<,6>固体培养基上进行状态调整后,可获得适于悬浮培养的胚性愈伤组织.悬浮培养时适宜的2,4-D浓度为2～3 mg/L;起始接种量以20 mg/mL的效果较好;最佳继代时间是7 d.悬浮细胞团先经固体继代培养获得愈伤组织小块,再将愈伤小块干燥处理2 h后进行分化,可显著提高植株再生率,愈伤组织绿点分化率和成苗率分别达58.6%和27.2%.     

叶用芥菜细胞悬浮培养的初步研究

以叶用芥菜的子叶为外植体,对愈伤组织诱导和细胞悬浮培养的技术体系进行了研究。结果表明愈伤组织诱导的最适培养基为MS+0.3mg/LNAA+1.0mg/L6-BA+0.1mg/L2,4-D,愈伤组织最佳增殖培养基为MS+3.0mg/L6-BA+1.0mg/L2,4-D。悬浮培养过程中细胞生长曲线呈S型,培养2-10d达对数生长期。将小细胞团接种于MS+1.0mg/LNAA+3.0mg/L6-BA分化培养基上,继代两次后,分化出芽,分化芽在培养基MS+0.1mg/LNAA上诱导生根,形成小植株。     

马齿苋的组织培养和植株再生

用马齿苋的幼嫩叶片和茎段建立了马齿苋组织培养及植株再生系统。最适愈伤组织诱导培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L 2,4-D 0.5 mg/L或2,4-D 1.0 mg/L,愈伤组织诱导率均可达100%。将生长良好的愈伤组织块转入分化培养基中以诱导不定芽的分化,其最适分化培养基为MS 6-BA 4.0 mg/L NAA 0.2 mg/L,分化率达到87.5%。再生苗在1/2MS IBA 2.0 mg/L的培养基上诱导生根,经过15d培养,100%生根成苗。     

鸡骨草悬浮细胞系建立与植株再生研究

以鸡骨草（Abrus cantoniensis Hance）茎段为试材,进行了细胞悬浮培养及植株再生诱导的研究。结果表明：MS＋2.0mg/L 2,4-D＋1.5mg/L 6-BA培养基适合从茎段诱导生长迅速、质地疏松的愈伤组织;将获得的愈伤组织置于MS＋2.0mg/L 2,4-D＋0.1mg/L NAA＋1.5mg/L 6-BA液体培养基中振荡培养,建立细胞悬浮培养体系,随后继代4次,分化出芽;分化芽诱导生根后形成小植株。     

土人参愈伤组织诱导及细胞悬浮培养研究

[目的]建立土人参愈伤组织的诱导、增殖继代培养及其细胞悬浮培养的技术体系。[方法]研究不同植物激素组合对叶片、茎段愈伤组织诱导的影响;采用液体振荡培养法测定叶片愈伤组织细胞悬浮生长曲线。[结果]叶片最易诱导产生愈伤组织,最佳诱导、增殖培养基为MS＋2,4-D1.0 mg/L＋NAA0.5 mg/L＋6-BA0.5 mg/L（pH5.8）。由叶片愈伤组织建立的细胞系生长呈＂S＂型曲线,最适继代周期为15 d。[结论]以叶片为外植体经愈伤诱导、增殖培养可建立良好的细胞悬浮系。     

籼稻原生质体游离培养及再生植株

籼稻(Oryza sativa L.)推广品种“秋桂矮11”成熟种胚在N6+2,4-D培养基上诱导选择胚性愈伤组织,然后转入N6+2,4-D及高浓度脯氨酸的液体培养基悬浮培养。继代近6个月后建成胚性细胞悬浮系.悬浮细胞通过酶解游离产生大量原生质体,经合适渗透压的KpR琼脂糖培养基包埋,在无哺育培养条件下,分裂频率为11.36％,细胞克隆转至N6分化培养基再生出完整绿色小植株,分化频率为9.4％。     

银杏组培繁殖及黄酮糖苷的产生

以银杏(Ginkgobiloba)腋芽为外植体进行组织培养,筛选出了适宜银杏芽萌发、增殖和生根的培养基配方和培养条件,其根、芽诱导率都在89%以上,增殖倍数达8.1.在固体培养基上诱导银杏芽产生愈伤组织,将黄绿色、蓬松状、生长快的愈伤组织转入液体培养基中建立悬浮细胞培养系,在液体继代培养基中添加5ml·1-1蜂蜜可明显促进细胞分裂、生长及黄酮糖苷的累积,提高细胞产量.经过10次液体继代培养,悬浮细胞中黄酮糖苷含量接近成熟叶片含量水平,相对含量为叶片的92.4%.     

小麦（Triticum aestivum．L）单细胞培养与植株再生的研究

小麦单细胞培养研究于１９８５～１９９５年进行，以六倍体普通小麦８４—５３的幼穗为外植体．在诱导胚性愈伤组织基础上．经振荡悬浮培养获得单细胞再生植株，建立体细胞无性系，并系统研究再生植株后代体细胞无性系的变异规律和遗传稳定性、体细胞无性系有利变异的选择及其在小麦品种改良中应用的可能性．本文报道有关单细胞培养和再生植株的研究结果．     

橡胶树热研8—79原生质体培养再生植株

【目的】优化橡胶树热研8-79原生质体分离和培养条件,建立橡胶树原生质体培养植株高效再生体系,为橡胶树体细胞杂交育种奠定基础。【方法】以橡胶树热研8-79花药愈伤组织建立的胚性细胞悬浮系为试验材料,设计不同酶组合、酶解时间和悬浮细胞继代时间进行原生质体分离,采用不同培养基、看护细胞浓度和接种密度进行原生质体培养,对原生质体分裂发育的小愈伤组织进行体细胞胚诱导及植株再生培养,统计原生质体的产量、分裂频率、体胚数及体胚萌发率。【结果】酶组合为纤维素酶1.50%＋果胶酶0.15%＋离析酶0.50%、酶解时间为12 h时,继代培养第5 d的胚性悬浮细胞达最高产量（3.6 ×107个/mL PCV）;用酶解细胞和看护细胞继代培养基分别作为原生质体液体培养基和看护培养基,比使用KPR培养基更有利于原生质体的分裂,当看护细胞浓度为5%、接种密度为5 ×105个/mL时原生质体的分裂频率最高,达54%。原生质体持续分裂形成肉眼可见的小愈伤组织增殖后经体胚发生途径发育成完整的小植株。【结论】通过优化橡胶树热研8-79胚性悬浮细胞原生质体分离的酶组合、酶解时间、继代培养时间及看护培养过程中培养基组成、看护细胞浓度和接种密度等影响因素,可以建立橡胶树原生质体培养植株高效再生体系。     

木薯脆性胚性愈伤组织原生质体培养与植株再生

【目的】建立有效的木薯原生质体再生体系,为原生质体融合以及原生质体转化等研究奠定技术基础。【方法】酶解木薯品种TMS60444 的脆性胚性愈伤组织（FEC）的悬浮系,分离原生质体的产量最高达3.5×106个/g,FDA检测其活性约90%。用TM2G培养基以液体浅层法分别在5×105个/mL和2×105个/mL密度下培养,培养过程中前30 d用0.3 mol•L-1 TM2G新鲜培养基每10 d更换1次,此后每10 d用0.25 mol•L-1 TM2G新鲜培养基更换。原生质体培养45 d后即可挑出1-2 mm大小的愈伤组织分别在MSN培养基上分化胚、CMM上促胚成熟、CEM上茎伸长、MS上生根。【结果】在5×105个/mL的原生质体培养密度下,长出的都是致密型愈伤组织（能分化胚状体）,而在2×105个/mL的密度下培养长出的有致密型愈伤组织,也有空泡型愈伤组织（不能分化胚状体）。本试验共挑出1 479个致密细胞团,分化获得757个子叶胚,已再生完整植株186棵。【结论】本研究分离的原生质体产量和活性有较大提高,对前人所指出的瓶颈问题有所改进,原生质体再生植株效率有较大提高。     

GUS基因转入烟草细胞通过科间细胞共培养在胡萝卜再生植株中的表达

用Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ菌株ＬＢＡ４４０４（含有质粒ｐＢＩ１２１和ｐＡＬ４４０４）介导转化普通烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａｔａｂａｃｕｍ）的悬浮细胞，获得卡那霉素抗性（ＫｍＲ）材料，其再生植株中表现ＧＵＳ活性。以这一继代半年以上的转基因烟草细胞系为材料，与胡萝卜（Ｄａｕｃｕｓｃａｒｏｔａ）细胞进行科间细胞共培养和低渗活化等处理，在含２００ｍｇ·ｌ－１卡那霉素（Ｋｍ）的培养基上筛选，得到具有ＫｍＲ的胡萝卜田胞系（ｃｅＲ），其再生的胡萝卜植株中也有一部分表现为ＫｍＲ，并在部分植株中检测到ＧＵＳ活性。这一结果表明Ｔ—ＤＮＡ可以通过科间细胞的共培养而从转基因烟草细胞中通过胞间通道转移到胡萝卜细胞中，并在胡萝卜细胞中表达。从这一结果来看，细胞共培养和有关处理的技术（ＡＣＨＴ）可能会成为植物基因转移的新技术。同时，发现共培养可以改进原来不亲和细胞之间的亲和性，这为植物细胞的识别和亲和性研究、亲和性的改善提供了方法和技术。     

大蒜胚性细胞悬浮系的建立

以中牟 5号大蒜根尖为外植体 ,在 1 1种固体培养基上诱导愈伤组织 ,筛选出最佳培养基MS + 2 ,4-D 0 .5mg/L和MS + 2 ,4-D 2 .0mg/L +KT 0 .5mg/L。愈伤组织形成后在上述1 1种培养基上继代 3～ 4次 ,获得胚性愈伤组织后再转至液体培养基中 ,经强化培养 3个月后获得胚性细胞悬浮系。试验结果表明 :缩短换液时间 (每隔 3～ 4天换液 1次 ) ,可加快胚性细胞悬浮系的建立     

章丘大葱再生体系的建立及组培外植体的选择

 为了建立适合章丘大葱遗传转化的再生体系,对其叶片、根和种子进行离体培养。结果表明:最佳外植体为切口处理的种子,愈伤诱导率最高为90.28%;最佳继代培养基为MS+1.0 mg/L 2,4-D+2.0 mg/L BA,继代培养的间隔时间以15 d为好;最佳分化培养基为MS+2.0 mg/L BA,最佳生根培养基为不添加任何激素的MS培养基。     

发根农杆菌Ri质粒转化康乃馨初步研究

利用具有Ri质粒的发根农杆菌（Agrobacterium rhizogenes）Pri15834对康乃馨组培苗的带叶茎节进行转化试验。转化后的外植体在K0附加500mg/L羧苄青霉素培养基上培养2～3周后，受感染的伤口部位长出无向地性的毛状根，频率为37.07%。将毛状根切碎分别在K0、K1、K2培养基上继续培养3周，毛状根在K0上表现为无限生长，在K1上主要表现为长愈伤组织，频率为51.42%，而在K2上则主要表现为长绿苗，频率为25%。这说明发根农杆菌的Ri质粒已整合到康乃馨细胞基因组中并得到表达。     

水稻香系103成熟胚培养及胚性悬浮细胞系的建立

[目的]为优质稻米种苗培育及种质资源保护提供参考。[方法]以曲阜香稻新品系103的成熟种子为材料,取其成熟胚接种在MS1培养基中诱导胚性愈伤组织,选取松脆性胚性愈伤组织建立悬浮细胞系。[结果]初始愈伤组织呈深黄色、瘤状、质地紧密、生长旺盛、易分化出芽,但难以进行细胞悬浮培养;在MS2培养基中继代培养120d后,愈伤组织呈浅黄色、颗粒状、松脆型胚性愈伤组织;松脆型胚性愈伤组织在悬浮培养基中继代培养2～3次后,不断释放出小细胞团和单细胞,用300目不锈钢网对培养液进行过滤,滤液培养120d可建立起浅黄色、澄清、均一的胚性悬浮细胞系。[结论]建立了分散性好、生长快的水稻胚性悬浮细胞系。