大孔吸附树脂纯化辣木叶总皂苷工艺研究

研究大孔吸附树脂纯化辣木叶总皂苷的工艺条件和参数.以洗脱率、精制度等为指标,考察大孔吸附树脂对辣木叶总皂苷的吸附性能和洗脱参数.25mL辣木叶总皂苷样品液上大孔吸附树脂,用蒸馏水,30%、50%乙醇各200mL依次洗脱,辣木叶总皂苷富集于50%乙醇洗脱部位.采用大孔吸附树脂技术富集、纯化辣木叶总皂苷,其洗脱率为(76.3±0.3)%,精制度为124.9%,该法可较好地纯化辣木叶总皂苷.     

白扁豆总皂苷的含量测定与成分分析

[目的]对白扁豆进行提取分离纯化以及含量测定与成分分析.[方法]用石油醚对粉碎的白扁豆脱脂,80％乙醇进行回流提取,正丁醇萃取,浓缩正丁醇得白扁豆总皂苷.白扁豆总皂苷粗提物通过硅胶柱、中压C18色谱柱进行进一步纯化,用薄层监测收集富集皂苷类成分的洗脱液,得到需要成分.采用紫外可见分光光度计(UV)测定,以0.5％香草酸-冰醋酸溶液和高氯酸为显色剂,测定波长为540 nm,并采用四极杆-静电场轨道肼高分辨质谱仪(UHPLC-Q-Exactive Orbitrap MS)在负离子模式下对总皂苷进行成分分析.[结果]白扁豆总皂苷通过硅胶柱、中压C18色谱柱纯化得到较纯的总皂苷.总皂苷UV测定的线性范围为0.0096～0.0192 mg/mL(R2=0.9981);平均回收率为98.15％.白扁豆总皂苷共鉴定出18个化合物.[结论]采用硅胶柱干法上样及中压C18色谱柱分离纯化,该方法纯化度高.UHPLC-Q-Exactive Orbitrap MS技术与UV法可用于白扁豆总皂苷的定性与定量分析,为后续白扁豆总皂苷生物活性研究提供数据支撑.     

不同提取方法对海燕皂苷抗氧化活性的影响

采用微波辅助萃取法、超声波辅助萃取法和索氏萃取法分别提取海燕Asterina pectinifera总皂苷,用大孔树脂柱层析法对总皂苷进行分离提纯,并将分离提纯后得到的海燕皂苷样品与分离前的总皂苷样品的抗氧化活性进行了测定。结果表明：用不同提取方法所得的海燕皂苷在分离前后抗氧化活性不同,分离纯化后的皂苷样品抗氧化活性较好;3种提取法中用微波辅助萃取法所得海燕皂苷样品的抗氧化活性最好。     

大孔树脂分离纯化苜蓿皂苷工艺研究

研究D101大孔吸附树脂提取苜蓿皂苷的工艺条件及参数。优化工艺条件包括树脂载样量、稀醇洗脱浓度和体积,有效部位洗脱液醇浓度和体积等参数考察。纯化前固形物苜蓿皂苷含量为0.37%,纯化后固形物中苜蓿皂苷含量为5.8%。     

阳离子树脂纯化大豆皂苷研究

以大孔吸附树脂提取的大豆皂苷粗提物为研究对象,利用阳离子交换树脂进行纯化。以HPLC分析方法,苷元显色法等多种分析手段,检测树脂纯化的除杂和脱色能力,验证此方法的可行性。通过实验研究,确定了最佳纯化条件:选用50%甲醇水溶液,最佳pH为6.0。本法除杂率达33.01%,脱色率达52.36%。此法不仅有效地去除了样品中的色素等杂质,还可以去除部分大豆异黄酮类物质。     

易县栽培西陵知母菝葜皂苷元含量的研究

[目的]考察易县栽培知母药材中菝葜皂苷元含量,了解其质量状况。[方法]采用高效液相蒸发光检测技术,内标法定量测定菝葜皂苷元含量。采用KromasilC18柱为固定相;流动相为甲醇,流速1ml/min。蒸发光散射检测器漂移管温度50℃,蒸发温度70℃,以N2为雾化气,压力1.03×105Pa。[结果]菝葜皂苷元在0.0249～0.4980mg/ml内,进样量的对数值与对照品峰和内标峰面积比值的对数成良好线性关系（r=0.9995）。平均回收率为96.3%,RSD为2.1%。测定结果表明,易县栽培知母的菝葜皂苷元含量均超过1%,最高者接近2%,平均值为1.46%。[结论]易县栽培知母有效成分含量较高,与野生知母没有明显差异,质量普遍较好。     

利用大孔树脂吸附法分离纯化三七总皂苷的工艺研究

研究了大孔树脂吸附法分离纯化三七总皂苷的工艺,利用3种不同类型的树脂对三七总皂苷的静态吸附．洗脱性能的效果进行了试验,确定选用洗脱率高达89．5％的D101型树脂。再根据选用的D101型树脂对洗脱溶媒的选择、吸附容量的确定、洗脱溶媒的用量等纯化工艺条件参数进行了研究和验证试验,最后确定了最佳工艺条件。     

抗菌消炎胶囊中知母薄层鉴别方法的改进

[目的]改进抗菌消炎胶囊中知母的薄层鉴别方法。[方法]以知母阴性、菝葜皂苷元为对照品,采用不同展开溶剂系统进行薄层色谱鉴别。[结果]改进后方法薄层色谱斑点清晰,重现性好,专属性好,阴性对照无干扰。[结论]改进后的方法快捷简便、重复性好、毒性小,可作为抗菌消炎胶囊中知母的鉴别方法。     

大孔树脂对黄芪总皂苷的分离纯化研究

[目的]筛选分离纯化黄芪总皂苷的最佳工艺。[方法]利用动态吸附-解析方法,以紫外分光光度法测定黄芪总皂苷的含量,研究最适大孔树脂分离纯化黄芪总皂苷的条件。[结果]AB-8型大孔树脂富集纯化黄芪总皂苷的最优条件为：采用黄芪提取液浓度为0.1g/ml上柱,上样量为3 BV,流速为1.0 ml/min,解吸时先用4 BV蒸馏水淋洗,再用4 BV50%乙醇解吸,收集50%乙醇洗脱液,得黄芪总皂苷提取物浸膏,黄芪皂苷收率可达52.1%。[结论]该工艺简单可行,能满足大生产的要求。     

人参总皂苷提取分离工艺的优选

为研究D-101型大孔吸附树脂富集纯化人参总皂苷的工艺条件，以人参总皂苷得率为考察指标。确定了D-101型大孔吸附树脂富集纯化人参总皂苷的性能和洗脱参数。结果表明；以50%乙醇为洗脱剂效果最佳。人参总皂苷洗脱率在85%以上。纯度约为60%。此工艺简便，无污染，成本低，利于推广。     

安徽省知母药材质量研究

[目的]研究安徽产知母药材中知母皂苷BⅡ和芒果苷的含量.[方法]知母皂苷BⅡ采用Diamonsil C18柱（250 mm ×4.6 mm,5μm）、乙腈-水等度洗脱（25∶75）,流速1.0 ml/min、ELSD检测器漂移管温度60℃、载气流速3.0 ml/min、柱温为室温（25℃）;芒果苷采用Diamonsil C18柱（150 mm×4.6 mm,5μm）、乙腈-0.2％冰醋酸水溶液（15∶85）等度洗脱,流速1.0 ml/min.[结果]知母皂苷BⅡ在1.036～10.360 μg范围内（r=0.999 6）进样量的对数值与峰面积的对数值呈良好的线性关系,芒果苷在0.05 ～1.00 μg范围内（r=0.9994）进样量与峰面积呈良好的线性;知母皂苷BⅡ平均回收率为99.7％,RSD=1.19％;芒果苷平均回收率为100.3％,RSD=1.42％.[结论]安徽省知母药材中知母皂苷BⅡ与芒果苷含量均符合2010版药典含量标准.     

移栽密度对知母生长性状及药用活性成分含量的影响

为了指导知母合理移栽,采用不同移栽密度(行距为30 cm和宽窄行40/20 cm;株距为10 cm、20 cm、30 cm)进行知母栽培,旨在探索适合西陵知母移栽的密度,为知母的规范化栽培提供依据。结果表明,在行距为宽窄行40/20 cm,株距为30 cm时,知母分蘖最少,株高值最小,单株鲜重、根茎鲜重、根茎最大直径和根茎长度均达到最大值,根茎药用活性成分芒果苷和知母皂苷BⅡ的含量也符合2015版药典标准。综合不同移栽密度对知母生长性状和根茎中药用活性成分含量的影响说明,西陵知母最佳种植行距40/20 cm,株距30cm,移栽密度为10.5万株/hm~2。     

基肥对知母生长特性和活性成分含量影响的研究

为指导知母合理施肥,规范化栽培,在知母移栽时施用不同的基肥种类和施肥量,研究其对知母生长特性和活性成分含量的影响。结果表明:不同施肥处理与对照相比其株高、物质积累和活性成分含量均有不同程度的提高,但相互之间差异不显著;不同施肥量对知母根茎干重、鲜重,须根干重、鲜重,全株干物质积累和活性成分含量的影响总体呈现出B3B2B1的趋势,由于B3与B2之间差异不显著,考虑到成本问题,施肥量选择B2;不同施肥种类对知母各生长特性指标和活性成分含量的影响均不显著。从知母生长期间物质积累来讲,A2B3一直效果最好;但从不同施肥种类对知母中知母皂苷BⅡ和芒果苷含量的影响数据来看,施用有机肥效果较无机肥好。综合考虑基肥对知母生长特性和活性成分含量的影响,建议知母栽培时基肥的最佳使用种类和使用量为A1B2,该结果为知母的规范化栽培提供了施肥依据。     

聚合草根蛋白质氨基酸的测定与评价

采用反相高效液相色谱法测定了聚合草[Symp H ytum pezegrinum L.]根的氨基酸含量,用国际上通用的营养评价方法对聚合草根进行了蛋白质营养价值评价.结果为,聚合草根蛋白质含量11.81%,氨基酸含量3.45%,其中必需氨基酸占39.5%.第一限制氨基酸是蛋氨酸.聚合草根蛋白质的化学评分(CS)、氨基酸评价(AAS)、必需氨基酸指数(EAAI)、生物价(BV)、营养指数(NI)和氨基酸比值系数(SRCAA)分别为41.9,42.5,74.3,69.3,8.77和55.24.聚合草根蛋白质的营养价值高于淮山药,低于马铃薯.呈味氨基酸含量占总氨基酸的42.03%.有较好的适口性和较高的开发利用价值.     

川芎中阿魏酸类效应组分的提取纯化工艺研究

[目的]优化川芎中阿魏酸类效应组分的提取纯化工艺条件。[方法]以溶剂量、提取次数、乙醇浓度、提取时间为考察因素,以阿魏酸类组分为检测指标,采用正交试验优化川芎中阿魏酸类效应组分的提取工艺;以树脂类型、上样量、除杂溶剂、洗脱溶剂等为考察因素,以阿魏酸为测定指标,优化阿魏酸类组分的纯化工艺。[结果]确定川芎中阿魏酸类组分优化的提取工艺为：料液比1：8（g／m1）,乙醇浓度70％,提取3次,每次0．5h;阿魏酸类组分的纯化树脂为HP300大孔吸附树脂,上样量为5：1（川芎：树脂）,2Bv水除杂,2BV浓度50％乙醇洗脱,回收溶剂、真空干燥,纯化物中阿魏酸和总酚酸的含量分别为9．71％和18．69％。[结论]所优化的提取纯化条件为川芎效应组分的进一步研究开发奠定了理论基础。     

鹅热休克蛋白70的表达提纯与病毒复合物形成的研究

 【目的】为研究HSP70在热应激时的特异性表达、组织中HSP70的分离纯化及其结合抗原肽形成复合物的特性，设计此试验。【方法】选取6 w健康五龙鹅60只随机分为3组，对照组鹅不经热处理，试验1组鹅进行1次（42±1）℃、5 h的急性热处理后立即宰杀，试验2组鹅经热处理后在正常饲养条件下恢复12h后宰杀。取心脏，常规石蜡切片做免疫组化试验；肝脏用于提纯HSP70。比较处理组鹅心脏HSP70表达的差异，同时对肝脏中HSP70进行分离纯化、鉴定。纯化后的HSP70和人工合成的乙肝病毒前S1多肽相结合形成复合物，以双特异抗体夹心法检测其复合物的形成。【结果】热应激状态下心肌纤维中有广泛的HSP70阳性颗粒，试验1组HSP70表达部位重点在核膜及其周围，阳性细胞率为76.0%，试验2组HSP70表达部位转移到胞膜周围，阳性细胞率为88.4%。通过两套纯化方案纯化蛋白均可得到HSP70纯化物，蛋白纯度分别为85.0%和95.0%，蛋白得率分别为0.115mg•g-1和0.157 mg•g-1。一定条件下合成肽与HSP70纯化物形成复合物，双特异性抗体夹心法检测复合物为阳性，复合物效价为1﹕81，表明试验中有复合物的形成。【结论】热应激时HSP70的特异性表达部位，在不同时间有所转移，显示HSP70在细胞保护中可能具有一定的功能。在低压层析条件下可以得到高纯度的HSP70蛋白，相比较而言，分子筛初步分离、ConA琼脂糖层析和ADP琼脂糖层析这一流程的纯化效果更好。在一定条件下，人工合成肽可以与HSP70相结合形成复合物，这将为进一步证明复合物的免疫作用提供试验基础。     

川产道地药材川芎中重金属的来源途径研究

[目的]检测及分析都江堰市徐渡乡川芎（Rhizoma Ligustici Chuanxiong）药材及栽培土壤中重金属的含量,分析川芎药材中重金属的来源途径。[方法]用火焰原子吸收分光光度法对抽样药材及其栽培土壤中Cu、Pb、Cd的含量进行检测。[结果]采样区域内土壤中Cu、Pb含量均符合国家二级土壤环境质量标准,Cd含量超过全国土壤背景平均值;川芎药材中Cu的含量符合国家GAP药用植物标准,Pb含量略微超标,药材中Cu、Pb含量均低于土壤。药材中Cd的含量超过土壤,并严重超过国家标准要求。[结论]川芎高Cd含量与土壤中Cd含量较高有关,其对土壤中Cd有较强的富集作用。     

川产道地药材川芎中镉含量的影响因素初探

[目的]探讨影响川芎药材中镉元素含量的因素。[方法]在前期调查基础上,对川芎主产区中药农自主栽培的土壤和相应川芎药材进行抽样,研究土壤理化特性对相应川芎药材中镉元素含量的影响,并对典型土壤样品的活性态进行初步研究。[结果]鲜土壤与干土壤之间pH值无明显差异;川芎药材中镉元素含量较高的土壤pH值相对较低,镉元素含量较低的土壤pH值相对较高。pH值低的土壤中镉活性态比例高。[结论]川芎药材镉元素含量与土壤pH间呈明显的负相关关系。     

吡虫啉在桃果实中残留分析方法

通过比较研究不同提取溶剂、不同的净化方法及色谱条件等对桃果实中吡虫啉检测效果的影响,筛选出一种适合检测桃果实中吡虫啉残留浓度的方法。该方法经优化后的条件为：样品经乙腈超声提取,弗罗里硅土柱净化,DAD二极管阵列检测器,经高效液相色谱测定。该方法平均添加回收率为90.55%~95.554%,变异系数为2.86%~8.24%,最低检出量为1 ng。