多糖的免疫调节作用及应用

多糖是生物体内普遍存在的一类生物大分子，具有广泛的生理功能，对免疫系统能诱生多种细胞因子，促进干扰素、白细胞介素等的生成；激活巨噬细胞、自然杀伤（NK）细胞和T、B淋巴细胞；激活补体系统；促进抗体产生等。多糖具有抗菌、抗病毒、抗寄生虫、抗肿瘤、抗辐射以及改善动物生产性能等一系列作用。     

硫酸化淫羊藿多糖对鸡外周血淋巴细胞IL-2和IFN-γ的mRNA表达的影响

促进淋巴细胞分泌抗病毒干扰素和白介素等细胞因子是生物活性多糖抗病毒和增强免疫的机制之一.为探明sEPS5和sEPS2抗病毒和增强免疫作用的机理,用Primer Premier软件设计了1对白介素-2(Interleukin-2,IL-2)引物和1对干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)引物,用荧光定量PCR方法测定sEPS2和sEPS5对鸡外周血T淋巴细胞IL-2、IFN-γ的mRNA表达的影响,以未修饰的EPS为对照.结果表明,在62.50 μg/ml和31.25 μg/ml时,sEPSs和sEPS2对2种细胞因子的诱生作用显著强于未修饰的EPS,其中sEPS5的作用最强,sEPS2次之,并与剂量呈正相关.这可能是硫酸化多糖抗病毒和增强免疫的分子机制之一.     

中药复方多糖对鸡淋巴细胞免疫信号分子表达的影响

探讨在体外环境下不同质量浓度中药复方多糖对鸡外周血淋巴细胞信号分子表达的影响。分别采用200、100、50、25、0μg/m L 5个中药复方多糖质量浓度梯度在体外条件下刺激鸡外周血淋巴细胞,采用ELISA法测定中药多糖作用1、2、4 h时细胞内环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(c GMP)的含量,以及作用24 h时钙离子(Ca2+)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合成酶(i NOS)的分泌水平。结果表明,与对照组相比,试验组能显著提高细胞培养上清中cAMP、c GMP的水平(P0.05)。当作用1 h时,100μg/m L多糖处理组与其他试验组的cAMP差异显著(P0.05);作用2、4 h时,200μg/m L多糖组的cAMP、c GMP分泌水平显著高于其他试验组。与对照组相比,100、200μg/m L多糖组能显著提高细胞培养上清液中Ca2+、NO的分泌水平(P0.05),25、50μg/m L多糖组对淋巴细胞中Ca2+、NO的分泌水平无显著影响(P0.05)。中药复方多糖能显著提高淋巴细胞分泌i NOS的水平(P0.05),而与其他多糖组相比,100μg/m L多糖组淋巴细胞分泌i NOS的水平显著提高(P0.05)。中药复方多糖可通过改变Ca2+、cAMP、c GMP、NO、i NOS等细胞内信号分子的活性或含量而启动细胞信号传导,从而调节细胞的活性和功能,促进相关基因的表达和释放,发挥免疫调节作用。     

魟鱼软骨多糖的免疫调节作用

[目的]观察魟鱼软骨多糖对小鼠免疫器官胸腺和脾脏重量的影响以及脾脏组织细胞IL-2、IL-6、IFN-γ细胞因子的表达水平。[方法]腹腔注射环磷酰胺（CY）造成小鼠免疫抑制模型,以香菇多糖为阳性对照,魟鱼软骨多糖（低、中、高剂量）,灌胃给药14 d,试验结束后称量胸腺和脾脏重量计算胸腺指数和脾指数,检测脾脏中细胞因子的表达情况：运用抗原对应抗体进行免疫组化SP法检测脾中IL-2、IL-6、IFN-γ细胞因子的表达水平。[结果]魟鱼软骨多糖能显著提高小鼠胸腺和脾脏重量,能拮抗环磷酰胺导致的免疫抑制,升高脾脏中细胞因子的表达水平从而提高机体的免疫功能。[结论]魟鱼软骨多糖对小鼠的免疫功能具有一定的调节作用,是一种良好的免疫调节剂。     

芦荟多糖的免疫调节作用及其在畜牧业上的应用研究进展

芦荟多糖(Aloe polysaccharide,AP)是芦荟属(Aloe)植物中所含有的一类生物大分子聚合物,具有广泛的生物学活性.文章从芦荟多糖对机体免疫器官、免疫细胞、细胞因子、免疫功能、生物信使、抗肿瘤免疫的影响,以及其在畜牧业上对促进免疫器官发育、改善生产性能、增强免疫力、抗病毒与抗细菌等方面的应用研究进展进行了综述.     

中药复方多糖对不同MHC B-LβⅡ基因型鸡淋巴细胞IL-2、IL-4、IL-12 mRNA表达量的影响

【目的】中药复方多糖对不同MHC B-LβⅡ基因型鸡淋巴细胞IL-2、IL-4、IL-12 mRNA表达量的影响。【方法】采用PCR-SSCP方法将500羽京红1号蛋鸡按不同MHC B-LβⅡ基因型分组,采集不同MHC B-LβⅡ基因型鸡外周血淋巴细胞,分别加入终浓度为100、75、50、0μg/mL中药复方多糖共培养24 h,收集细胞,采用Real-time PCR方法检测不同MHC B-LβⅡ基因型鸡IL-2、IL-4、IL-12基因mRNA的表达量。【结果】(1)与对照组相比,不同剂量中药复方多糖均能显著增强不同MHC B-LβⅡ基因型鸡IL-2、IL-4、IL-12基因mRNA的表达量(P0.05)。(2)中药复方多糖剂量为50μg/mL时,AA、BC基因型鸡IL-2、IL-4、IL-12基因mRNA的表达量最高,中药复方多糖剂量为100μg/mL时,BB基因型鸡IL-2、IL-4、IL-12基因mRNA的表达量最高。【结论】中药复方多糖能不同程度的促进各MHC B-LβⅡ基因型鸡IL-2、IL-4、IL-12 mRNA的表达,且不同MHC B-LβⅡ基因型鸡淋巴细胞最适中药复方多糖免疫调节剂量不同。     

复方中药成分与IL-2的免疫协同作用及对鸡细胞因子表达的影响

以淫羊藿多糖加蜂胶黄酮（方1）、人参皂苷加黄芪多糖（方2）组成2个复方，各加IL-2配合新城疫苗免疫雏鸡，分别于免疫后第7、14、21和28d用微量法检测血清抗体效价的动态变化；同时将2个复方各分3种剂量加入到培养的鸡外周血T淋巴细胞中，分别培养7和24h后用半定量RT-PCR方法检测淋巴细胞IL-2和IFN-γ的mRNA表达的变化。结果表明，2个复方单用或与IL-2合用均能显著提高抗体效价，而复方与IL-2的免疫协同作用不明显；方1的3个剂量和方2的高剂量能显著促进IL-2的基因表达，而2个复方的3个剂量能显著促进IFN-γ的基因表达，解释了复方中药成分与IL-2免疫协同作用不明显的原因。     

北五味子多糖的分离纯化及其对鸡外周血淋巴细胞的影响

本研究在传统水提醇沉法基础上辅以酶消化法提取北五味子多糖,并用离子凝胶柱层析法对其进一步纯化,分离得到三种分子量的多糖组分(SCP-Ⅰ、SCP-Ⅱ和SCP-Ⅲ)。为分析多糖三种组分对鸡外周血淋巴细胞的作用,首先用高浓度(最高10 mg/mL)的三种多糖组分作用于淋巴细胞,结果显示≤1 mg/mL的多糖对细胞没有显著的毒性作用。以不同浓度的三种SCP组分(0、12.5、25.0、50.0、100.0、200.0、400.0、800.0、1 600.0μg/mL)作用于淋巴细胞,发现SCP-Ⅲ对细胞因子IL-2、IL-6和IFN-γ的分泌具有显著的增强作用,但最佳作用浓度不同,SCP-Ⅰ和SCP-Ⅱ对这三种细胞因子的作用效果不显著。本研究为北五味子多糖的精制和应用奠定了理论基础。     

灰树花菌丝体胞内多糖对于小鼠的免疫调节作用

为研究灰树花发酵产物提取出的胞内多糖的免疫活性,采用50只雄性昆明小鼠,随机分为5组,每组10只,设100、200和400mg/(kg·d)3个水平处理组,并设阳性对照组(黄芪多糖400mg/(kg·d))和阴性对照组(生理盐水),饲养30d后观察多糖对细胞免疫功能的影响。通过流式细胞仪检测脾细胞表面分子的CD4和CD8及对T淋巴细胞增殖的影响;用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测其细胞因子IL-6、IL-8、CRP和TNF-α的表达。结果表明:灰树花胞内多糖使小鼠脏器显著增大(P≤0.05);并显著增加了脾淋巴细胞的增殖能力(P≤0.05);对于T淋巴细胞亚群中免疫细胞CD4/CD8的比值随着用药量的增加而提升(P≤0.05);同时小鼠肠道中的细胞因子IL-6、IL-8和TNF-α的分子表达量起到了上调作用(P≤0.05);并且下调了炎症因子CRP的分子表达量(P≤0.05)。灰树花菌丝体胞内多糖能使小鼠体内免疫器官增大,免疫细胞分泌增多,相关免疫因子表达量增加。     

利用流式细胞术分析活化T淋巴细胞特性

用多克隆刺激剂PMA和离子霉素体外刺激小鼠脾脏细胞4 h后,检测T淋巴细胞膜表面CD 69分子的表达;用P I标记分析细胞内DNA含量的变化;阻断细胞因子分泌后,检测不同亚群T淋巴细胞内细胞因子的表达。利用CFSE标记细胞,刺激44 h后,检测T淋巴细胞的分裂情况。结果表明：刺激4 h后,绝大多数T淋巴细胞表面表达CD 69抗原。细胞周期分析结果也表明,S＋G2/M期细胞数量明显增多,G1期细胞数量减少。通过固定、破膜、标记等处理后,分别表达IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-12的T淋巴细胞均有不同程度的提高。另外,刺激44 h后,明显检测到T淋巴细胞的分裂。以上结果说明,利用流式细胞术可以从不同的角度检测活化T淋巴细胞的活性。